中低压制备色谱制备新绿原酸对照品的研究

目的:建立从金银花中分离制备新绿原酸对照品的方法。方法:利用HPD200A大孔树脂对金银花水提液中的新绿原酸富集,经中低压制备色谱分离制备金银花中新绿原酸单体,运用HPLC对新绿原酸进行含量测定。采用现代波谱技术ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR进行结构鉴定。结果:新绿原酸的最佳纯化工艺为加5 BV水洗脱,收集水洗液,浓缩、干燥,得新绿原酸粗品;以乙腈-0.5%甲酸溶液(10:90)为流动相,流速20 m L?min-1,检测波长326 nm,进行分离纯化,分离制备的新绿原酸的纯度达98.86%,收率为89.1%。结论:该方法可有效制备高纯度的新绿原酸对照品,以用于中药新药中定性鉴别和含量测定。

荔枝草化学成分的研究

目的研究荔枝草Salvia plebeia R. Br.的化学成分。方法荔枝草水提液采用D101大孔树脂、硅胶柱、中压柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为反式咖啡酸(1)、苯甲酸(2)、没食子酸(3)、阿魏酸(4)、乌苏酸(5)咖啡酸(6)、胸腺嘧啶(7)、鸟嘌呤核苷(8)、芹菜素(9)、高车前苷(10)、泽兰黄酮(11)、香草醛(12)。结论化合物2、4、6~7、12为首次从该植物中分离得到。

分子印迹技术分离桂枝茯苓胶囊中芍药苷类活性组分成分

目的:芍药苷类化学成分是桂枝茯苓胶囊中主要活性成分,研究从桂枝茯苓胶囊中定向分离芍药苷及其结构类似物的方法。方法:应用溶胶-凝胶法制备芍药苷分子印迹聚合物,并考察其吸附性能,同时利用该分子印迹聚合物从桂枝茯苓胶囊甲醇溶液中直接分离得到芍药苷活性组分。结果:合成芍药苷分子印迹聚合物(MIP)最大表观结合位点数Qmax=52.28 mg·g-1,4 g桂枝茯苓胶囊甲醇溶液通过一步分离,共制得芍药苷及其结构类似物197 mg,芍药苷纯度89.3%。结论:芍药苷分子印迹聚合物能够从桂枝茯苓胶囊中定向分离得到芍药苷类成分。

Box-Behnken Design-响应面法优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺研究

利用Box-Behnken-响应面法优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺条件。在单因素实验基础上,采用Box-Behnken Design实验设计,考察反应温度、反应时间及p H值对新绿原酸产率的影响,优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺参数,得到模型预测公式。优化条件为:反应温度107℃,反应时间60 min,p H值为4.72时新绿原酸产率为64.20%,与模型预测值接近,方程拟合良好。采用优选工艺制备新绿原酸并精制纯化,分别运用HPLC、1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等方法对其进行含量测定和结构表征,结果表明纯化后纯度达98.78%,收率为87.37%。

动态轴向压缩色谱制备高纯度断氧化马钱子苷的研究

目的:本研究旨在建立动态轴向压缩色谱法分离制备高纯度断氧化马钱子苷的方法。方法:金银花70%乙醇提取液先经大孔吸附树脂除杂富集后,采用动态轴向压缩色谱柱分离,以正相硅胶为填料,二氯甲烷-甲醇系统为洗脱剂,对断氧化马钱子苷进行精制纯化,分别运用HPLC、1H-NMR、13C-NMR和HR-ESI-MS对断氧化马钱子苷进行含量测定和结构表征。结果:产品经分析确定为断氧化马钱子苷,质量分数达98.76%。结论:采用动态轴向压缩工业色谱法制备断氧化马钱子苷的方法操作简便、快速、高效,为制备高纯度的断氧化马钱子苷提供了一条新途径。

基于多成分含量测定的六味地黄浓缩丸溶出度考察

目的:本研究以没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷5个成分的含量为溶出指标,建立多成分指标评价六味地黄浓缩丸溶出度的方法。方法:测定条件为浆法,以900 m L 0.1 mol·L-1盐酸作为溶出介质,转速100 r·min-1,温度(37.0±0.5)℃。采用RP-HPLC外标法定量,Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02%三氟乙酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L·min-1;柱温为30℃;检测波长:238 nm。结果:该厂家10个批次的六味地黄浓缩丸中5个成分的溶出曲线相似因子?2大部分高于50,表明该厂家不同批次间六味地黄浓缩丸的溶出度差异性较小。结论:该方法简便,重复性良好,适用于六味地黄浓缩丸中5个成分的溶出度测定。

高山红景天化学成分研究

目的研究高山红景天Rhodiola sachalinensis干燥根及根茎的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱、中压柱色谱及半制备液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果分离得到18个化合物,分别鉴定为没食子酸(1)、对羟基苯甲酸(2)、红景天苷(3)、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、苯乙醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、苯丙烯醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(2E,4R)-4,7-二羟基-3,7-二甲基-2-烯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(高山红景天醇,7)、槲皮素(8)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、山柰酚(10)、山柰酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(11)、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(13)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(14)、小麦黄素(15)、3,5,7,5′-四羟基-4′-甲氧基黄酮(柽柳亭,16)、草质素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(17)、草质素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(18)。结论化合物9、12、16为首次从红景天属植物中分离得到,化合物2、7、8、14、18为首次从本植物中分离得到。

金银花中抗补体活性酚酸类成分的研究

目的：研究金银花Lonicerajaponica中的抗补体活性酚酸类成分。方法：通过溶血试验方法进行抗补体活性成分的导向分离，对所得化合物进行抗补体活性测定，采用现代波谱技术ESI-MS，^1H-NMR，^13C-NMR进行结构鉴定。结果：从金银花乙酸乙酯部位分离得到了14个化合物，其中有8个酚酸类、3个环烯醚萜类和3个黄酮类成分，包括新绿原酸（1）、绿原酸（2）、隐绿原酸（3）、3，5-O-二咖啡酰奎宁酸（4）、4，5-O-二咖啡酰奎宁酸（5）、3，4-D-二咖啡酰奎宁酸（6）、咖啡酸（7）、咖啡酸甲酯（8）、裂环马钱苷（9）、獐芽菜苷（10）、断氧化马钱子苷（11）、木犀草素（12）、槲皮素（13）、山柰酚（14）。抗补体实验表明化合物1～9，11～14对经典的补体激活具有不同程度的抑制作用，以3，5-O-二咖啡酰奎宁酸活性最强。结论：化合物14首次从金银花中分离得到，酚酸类化合物是金银花中的主要抗补体活性成分，3，5-O-二咖啡酰奎宁酸活性最强，值得深入研究。

茯苓非多糖类化学成分的抗补体活性

目的研究茯苓Poriacocos非多糖类化学成分的抗补体活性。方法通过溶血实验方法进行抗补体活性成分的导向分离,对所得化合物进行经典途径的体外抗补体活性测定,采用现代波谱技术ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR进行结构鉴定。结果从茯苓醋酸乙酯部位分离得到11个化合物,分别鉴定为豆甾醇(1)、羽扇豆醇(2)、齐墩果酸(3)、乌苏酸(4)、猪苓酸C(5)、土莫酸(6)、去氢土莫酸(7)、3-表-去氢土莫酸(8)、茯苓酸(9)、去氢茯苓酸(10)、松苓新酸(11)。化合物1~4为首次从茯苓中分离得到。抗补体实验表明化合物3~11对经典的补体激活具有不同程度的抑制作用。结论三萜酸类化合物是茯苓非多糖类化学成分中主要的抗补体活性成分[CH50为(0.10~0.27)g/L]。

金银花化学成分研究

目的研究金银花(忍冬Lonicera japonica干燥花蕾)的化学成分。方法反复利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、中压柱色谱及制备液相色谱等方法分离纯化;通过MS、1H-NMR及13C-NMR等技术鉴定化合物结构。结果从金银花醋酸乙酯部位分离得到12个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲酸(1)、香草酸(2)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(3)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、3′,4′,7-三羟基-3,5-二甲氧基黄酮(5)、异鼠李素(6)、金丝桃苷(7)、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、环裂马钱子酸(9)、断氧马钱子苷半缩醛内酯(10)、5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(11)、豆甾醇(12)。结论化合物5首次从忍冬属植物中分离得到;化合物1~4、6、11、12首次从金银花中分离得到。

异绿原酸A、B和C的制备工艺研究

目的建立从金银花Lonicera japonica中分离制备高质量分数异绿原酸A、B和C的方法。方法采用D-101大孔树脂、中低压制备色谱分离制备金银花中异绿原酸A、B和C单体,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果分离制备的异绿原酸A、B和C质量分数分别为98.7%、99.2%和97.6%。结论该方法经济、简单、快速,可用于制备高质量分数的异绿原酸A、B和C。

分子印迹技术定向分离桂枝茯苓胶囊中活性成分去氢土莫酸

目的建立利用分子印迹技术从桂枝茯苓胶囊提取物中定向分离制备去氢土莫酸的方法。方法以去氢土莫酸为分子模板,采用溶胶-凝胶法制备了去氢土莫酸分子印迹聚合物,并对其吸附性能进行研究。以此聚合物为填料,从桂枝茯苓胶囊提取物中一步分离制备得到去氢土莫酸,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果经Scatchard分析,去氢土莫酸分子印迹聚合物最大表观结合位点数(Qmax)为9.10 mg/g。经HPLC检测去氢土莫酸质量分数为90.76%。结论该方法可用于从桂枝茯苓胶囊提取物中靶向分离制备去氢土莫酸,有利于减少提取过程中有机溶剂的使用,操作简单,为其高效分离纯化提供新的方法。

大花红景天黄酮类化学成分研究

目的研究大花红景天Rhodiola crenulata干燥根及根茎的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱、中压柱色谱等方法分离纯化;采用ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等现代波谱技术进行结构鉴定。结果从大花红景天醋酸乙酯部位分离得到14个化合物,分别鉴定为3,5-二羟基-3′,4′,7-三甲氧基黄酮（1）、3,5,7,3′-四羟基黄酮（2）、5,4′-二羟基-7,3′-二甲氧基黄酮（3）、山柰酚（4）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（6）、小麦黄素（7）、小麦黄素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、槲皮素（9）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（11）、草质素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、草质素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（13）、草质素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（14）。结论化合物1-3为首次从红景天属植物中分离得到,5-6、8、10-13为首次从该植物中分离得到。

金银花中酚酸类成分及其抗炎活性研究

目的研究金银花Lonicerae Japonicae Flos中酚酸类成分及其抗炎活性。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定;采用脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型,考察金银花中酚酸类成分对巨噬细胞经LPS刺激后产生的炎症因子[NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）]的影响,评价其抗炎活性。结果从金银花醋酸乙酯部位中分离得到12个化合物,包括8个酚酸、3个环烯醚萜苷和1个黄酮类成分,分别鉴定为新绿原酸（1）、隐绿原酸（2）、3,5-二咖啡酰奎宁酸（3）、3,4-二咖啡酰奎宁酸（4）、4,5-二咖啡酰奎宁酸（5）、绿原酸（6）、咖啡酸（7）、咖啡酸甲酯（8）、断氧化马钱子苷（9）、裂环马钱苷（10）、獐芽菜苷（11）和木犀草素（12）。对其中的酚酸类化合物1~8进行了体外抗炎活性实验,结果表明,化合物1~8对LPS刺激的巨噬细胞炎症因子均具有不同程度的抑制作用。结论酚酸类成分是金银花的主要抗炎活性成分之一,其中化合物7活性最强。

金银花化学成分研究进展

金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica的干燥花蕾或初开的花,为常用中药。金银花的化学成分按结构主要包括黄酮类、环烯醚萜类、三萜及三萜皂苷类、有机酸类、挥发油等多种类型。对近20年来国内外金银花化学成分的研究进行总结,为其深入研究提供参考。

山银花化学成分研究

目的 研究华南忍冬Lonicera confusa干燥花蕾（山银花）的化学成分。方法 利用反复硅胶柱色谱,Sephadex LH-20、中压柱色谱及半制备液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果 分离得到10个化合物,分别鉴定为绿原酸（1）、槲皮素（2）、木犀草素（3）、木犀草素-3′-O-α-L-鼠李糖苷（4）、芹菜素-7-O-α-L-鼠李糖苷（5）、反式桂皮酸（6）、对羟基苯甲醛（7）、2,5-二羟基苯甲酸-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、脱落酸（10）。结论 化合物4-10首次从山银花中分离得到。

一测多评法在六味地黄软胶囊质量评价中的应用

目的建立六味地黄软胶囊中7种化合物一测多评方法学考察模式,检验该方法是否适用于六味地黄软胶囊的质量控制。方法以六味地黄软胶囊为研究对象,选择马钱苷作为内参物,采用2种校正方法(多点校正、斜率校正),建立马钱苷与没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、芍药苷、丹皮酚及熊果酸之间的相对校正因子(f);同时进行定量计算,实现一测多评。采用外标法测定22批六味地黄软胶囊样品7种成分的量,并将外标法测定值与2种校正因子计算所测值进行对比,检验所建立方法的准确性。结果在一定的线性范围内,以2种校正方式所得f计算值与实测值间无显著差异。结论一测多评的质量评价模式简单、精确且可行,适用于六味地黄软胶囊的质量评价和控制。

青蒿化学成分研究

目的:研究青蒿Artemisia annua L.干燥全草的化学成分。方法:利用反复硅胶色谱柱、中压柱色谱及半制备高压液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱、紫外等波谱数据分析及与文献报道数据对比确定化合物结构。结果:共分离得到15个化合物,分别鉴定为5-O-咖啡酰基奎宁酸(1)、1,3-O-双咖啡酰基奎宁酸(2)、4,5-O-双咖啡酰基奎宁酸(3)、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸(4)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸(5)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(6)、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(7)、3,6'-二阿魏酰蔗糖(8)5'-β-D-glucopyranosyloxyjasmonic acid(9)、东莨菪内酯(10)、滨蒿内酯(11)、4-O-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxy-6-methoxyacetophenone(12)、chrysosplenol D(13)、紫花牡荆素(14)和猫眼草黄素(15)。结论:化合物2,6,8,9为首次从蒿属中分离得到,化合物7,15首次从本植物中分离得到。

桂枝茯苓胶囊化学成分研究(Ⅶ)

目的对桂枝茯苓胶囊内容物正丁醇萃取部位进行化学成分研究和活性筛选。方法采用多种色谱方法进行分离纯化,应用波谱数据解析鉴定化合物结构;对分离得到化合物进行原代小鼠子宫平滑肌细胞的钙离子内流作用的活性筛选。结果从桂枝茯苓胶囊内容物正丁醇层分离得到5个没食子酰苷类化合物,分别鉴定为3′-O-没食子酰蔗糖苷(1)、4′-O-没食子酰蔗糖苷(2)、6′-O-没食子酰蔗糖苷(3)、1′-O-没食子酰蔗糖苷(4)、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(5)。结论化合物1~5为首次从该复方中分离得到,其中化合物1为新化合物;化合物1~5均有抑制原代小鼠子宫平滑肌细胞的钙离子内流作用。

热毒宁注射液组分抗CoxA16和EV71病毒活性研究

目的：明确热毒宁注射液组分抗柯萨奇病毒A16（coxsackievirus A16,Cox A16）和肠道病毒71（enterovirus 71,EV71）病毒的活性。方法：考察热毒宁注射液1~19号组分（RND1~19）对非洲绿猴肾细胞（Vero）的毒性,明确半数中毒浓度（TC50）;进一步利用病毒感染的Vero细胞模型研究各组分的抗病毒活性及量效关系。采用50倍半数组织培养感染量（TCID50）Cox A16和EV71病毒分别感染Vero细胞（1万个/孔）,热毒宁注射液组分（15.625~500 mg·L-1）给药3 d后,考察抗Cox A16和EV71病毒活性（n=3）。活性组分（最佳浓度）给药8 h后,检测病毒载量。结果：热毒宁注射液各组分的Vero细胞毒性,TC50从〉1 000 mg·L-1到221 mg·L-1不等;抗病毒活性及量效关系研究表明,RDN7和RDN18具有较好的抗Cox A16活性,半数有效浓度（EC50）分别为460,92 mg·L-1,治疗指数（TI）分别为1.44,2.40;RDN6和RDN17具有较好的抗EV71活性,EC50分别为395,378 mg·L-1,TI分别为2.22,1.10;病毒载量研究表明,RDN7极显著降低Vero细胞中Cox A16病毒载量（P〈0.01）,RDN6,RDN17极显著地降低Vero细胞中EV71病毒载量（P〈0.01）,而RDN18则没有上述活性。结论：明确了热毒宁注射液组分的抗Cox A16和EV71病毒活性。