miR-126过表达和ADAM9基因沉默对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响及其机制

目的:探讨微小RNA-126(miR-126)过表达和解整联蛋白金属蛋白酶9(ADAM9)基因沉默对胃癌细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人胃低分化腺癌SGC-7901细胞和人正常胃黏膜上皮NGEC细胞,提取细胞中总RNA,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2种细胞中miR-126和ADAM9 mRNA表达水平。将处于对数生长期的SGC-7901细胞分为miR-126过表达组(miR-126-OE组)和ADAM9基因沉默组(ADAM9 siRNA组),以LipofectamineTM 2000为载体分别转染miR-126模拟物(miR-126 mimics)和敲低ADAM9的RNA寡核苷酸,并设置相应的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞的迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。TargerScan网站预测miR-126的靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-126和ADAM9的靶向调控关系,采用RT-qPCR法和Western blotting法检测转染miR-126 mimics后SGC-7901细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法检测,与人正常胃黏膜上皮NGEC细胞比较,胃癌SGC-7901细胞中miR-126表达水平明显降低(P<0.05),而ADAM9mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。MTT法检测,SGC-7901细胞过表达miR-126或沉默ADAM9基因48和72 h后,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞增殖活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验检测,与相应阴性对照组比较,48 h后miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞迁移率明显降低(P<0.05)。Transwell小室实验检测,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01)。Western blotting法检测,与相应阴性对照组比较,miR-126-OE组和ADAM9 siRNA组细胞中E-钙黏蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),而N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。靶基因预测,ADAM9的3´-UTR含有与miR-126-3p互补的核苷酸序列。双荧光素酶报告基因实验,ADAM9是miR-126靶向负调控的下游基因。SGC-7901细胞转染miR-126 mimics 48 h后,与mimics NC组比较,miR-126 OE组细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:胃癌SGC-7901细胞中miR-126低表达而ADAM9基因高表达。miR-126过表达可抑制胃癌SGC-7901细胞增殖活性、迁移和侵袭能力,其机制可能与miR-126靶向负调控ADAM9并抑制胃癌细胞的上皮-间质转化(EMT)进程有关。

腹腔镜阑尾切除术中的常见困难与处理

目的探讨腹腔镜阑尾切除术(laparoscopic appendectomy,LA)的常见困难和处理办法。方法回顾性分析近3年来该院普外科采用腹腔镜治疗的112例阑尾炎患者的临床资料。结果109例在腹腔镜下顺利完成手术,其余3例中转开腹,阑尾显露困难14例,阑尾周围重度粘连7例,系膜出血5例,阑尾根部坏死6例。手术时间30～125min,住院时间3～8d,3例戳孔感染经对症治疗痊愈,无术后出血、肠粘连等并发症发生。结论LA治疗阑尾炎安全可行,符合微创观点,熟练的腹腔镜技术是保证手术成功、减少并发症的关键。

供磷型土壤调理剂在酸性土壤应用效果研究

我国南方酸性土壤常存在交换性铝含量极高和磷素供应不足的问题,如何有效改良南方酸化土壤,提高土壤活性磷含量是个重要的问题。本文以南方酸性红壤为供试土壤,通过土壤培养试验和玉米盆栽试验探究了基于磷尾矿、磷酸镁铵和石灰等为主要原料的供磷营养型土壤调理剂对酸性土壤的改良效果和对玉米磷素养分利用的影响。采用添加不同原料比例和数量的土壤调理剂进行土壤培养,结果表明施用量在4~8 g/kg时,可使土壤pH升高1.1~1.6个单位,显著降低土壤交换性铝和有效铁含量,增加土壤交换性钙、镁和有效磷含量;盆栽玉米试验结果表明,与空白对照相比,施用C3配方土壤调理剂明显改善玉米苗期生长和植株磷素营养,但是土壤调理剂中辅料(白云石/石灰+膨润土)对促进磷酸二铵的肥效要明显优于土壤调理剂的供磷主料(磷酸铵镁+磷尾矿),说明在供磷方面主料的作用效果优于与辅料相混,辅料在增加土壤酸性改良效果的同时也钝化了主料中的磷素,该调理剂的配方需要进一步调整。

加味四君子汤对直肠癌术后脾胃气虚证患者化疗减毒增效的临床研究

目的研究直肠癌术后脾胃气虚证患者行FOLFOX-7化疗期间联合加味四君子汤治疗对化疗增效和毒副反应的影响。方法将70例直肠癌脾胃气虚证患者随机分为观察组和对照组,每组各35例,两组均接受全直肠系膜切除术(total mesorectal excision, TME),术后观察组行FOLFOX-7化疗联合加味四君子汤治疗,对照组单纯行FOLFOX-7化疗。比较两组临床疗效和免疫功能指标,记录毒副反应发生情况,采用酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、酸性成纤维细胞生长因子(acidity fibroblast growth factor, a FGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)肿瘤生物学指标。结果治疗后观察组腹胀、神疲、纳呆、便溏及中医证候总分均显著低于对照组(P<0.05);观察组和对照组肿瘤控制率分别为97.14%和88.57%,差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后CD3+、CD4+及CD3+/CD4+显著高于治疗前和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后VEGF、aFGF及bFGF水平显著低于治疗前和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组胃肠道反应、白细胞降低及中性粒细胞降低毒副反应的严重程度较对照组显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FOLFOX-7化疗期间联合加味四君子汤用于直肠癌脾胃气虚证TME术后治疗,能显著减轻毒副反应,提高治疗效果,这可能与加味四君子汤改善机体免疫功能有关。

基于分水岭变换的粘连颗粒图像分割方法

提出了一种基于分水岭变换的粘连颗粒图像分割方法.首先对图像进行预处理,进行二值化;然后通过距离变换和灰度形态重构得到每个目标的种子区域(目标标记);再根据目标标记使用强制最小技术修正距离变换图;最后,对修正后的距离变换图进行分水岭变换,得到分割结果.在Matlab环境下进行实验,结果表明该算法效果良好,能有效的抑制过分割.

艾迪注射液治疗老年恶性肿瘤的疗效分析

目的观察艾迪治疗老年晚期恶性肿瘤的疗效及副作用。方法将2009年1月-2012年3月收治的120例恶性肿瘤患者采用完全随机法分成两组:治疗组60例在放射治疗的基础上加用艾迪注射液静滴;对照组60例单纯采用放射治疗,1.8～2Gy/次,每周5次,总剂量60Gy,6周完成治疗。结果治疗组完全缓解16例,部分缓解33例,有效率为81.67%;对照组完全缓解11例,部分缓解20例,有效率为51.67%。治疗组疗效明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组KPS评分提高到20分以上35例,阳性率为58.33%,降低20分以上13例,阴性率21.67%,对照组KPS评分提高到20分以上14例,阳性率为23.33%,降低20分以上23例,阴性率38.33%;两组患者均无肝肾功能损害,无治疗相关性死亡。治疗组发生骨髓抑制13例(21.67%),对照组骨髓抑制41例(68.33%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);发生胃肠道反应治疗组3例(5%),对照组28例(46.67%),差异明显(P<0.05)。结论艾迪治疗老年晚期恶性肿瘤疗效肯定,副作用低,可以有效改善患者的生活质量。

Pim-3在非小细胞肺癌中的表达及临床意义探讨

目的探讨Pim-3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法选择非小细胞肺癌组织40例,同时选择肺脓肿及其他外伤肺切除的肺组织40例作为正常对照。采用免疫组化法检测肺癌组织和正常肺组织中的Pim-3阳性率,比较肺癌组织和正常肺组织中Pim-3的表达水平差异及不同病理特征肺癌组织中的Pim-3表达水平。流式细胞仪检测肺癌组织及正常肺组织中凋亡细胞的百分比。结果非小细胞肺癌组织中Pim-3的阳性率高达87.5%(35/40),明显高于正常肺组织中Pim-3的阳性率5%(2/40),P<0.05。非小细胞肺癌组织中细胞凋亡率明显低于正常肺组织(22%vs55.8%,P<0.05)。结论 Pim-3的表达与非小细胞肺癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理类型无关,与肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关。Pim-3高表达抑制非小细胞肺癌肿瘤细胞的凋亡,从而促进其发生与发展。

腹腔镜手术与传统开腹手术治疗急性胆囊炎的临床疗效比较

目的对比腹腔镜胆囊切除术(LC)与传统开腹术(OC)治疗急性胆囊炎的临床效果。方法我院2012年10月至2014年10月期间确诊的通过手术治疗的160例急性胆囊炎患者,采用随机对照方法将其分为腹腔镜组和开腹组各80例。比较两组患者手术成功率、术中出血量、手术时间、住院时间、术后排气时间、并发症率等。结果腹腔镜组手术成功率98.8%,1例患者中转开腹手术;开腹组手术成功率100%,略优于腹腔镜组,但差异无统计学意义(P>0.05);腹腔镜组手术时间、术中出血量、肠蠕动恢复时间、平均住院时间均明显少于开腹组,差异有统计学意义(P<0.05),腹腔镜组术后并发症发生率显著低于开腹组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜治疗急性胆囊炎患者具有创伤小、痛苦小、恢复快、并发症少等优点,值得临床推广应用。

奥沙利铂联合卡培他滨行新辅助化疗治疗进展期胃癌临床疗效观察

目的对奥沙利铂联合卡培他滨行新辅助化疗治疗进展期胃癌的疗效进行深入的探讨和仔细的分析。方法进展期的胃癌患者有30例,分为对照组和观察组,各组患者有15例,对照组通常会采用ECF化疗的方案对围手术期进行化疗,观察组通常会采用奥沙利铂联合卡培他滨对围手术期进行化疗。结果观察组总有效率明显的高于对照组,对照组均低于观察组。结论通过奥沙利铂联合卡培他滨对进展期胃癌行围手术期的化疗,毒副反应明显的低于ECF化疗方案。

中西医结合治疗急性胰腺炎36例临床观察

目的 观察中西医结合治疗急性胰腺炎的临床疗效。方法 将 5 8例患者随机分组 ,治疗组在常规治疗的基础上加用清胰汤Ⅰ号 ,7d为 1个疗程。结果 治疗组总有效率为 91.7% ,对照组总有效率为 6 3.6 % ,治疗组疗效优于对照组 (P <0 .0 1)。结论 中西医结合治疗急性胰腺炎疗效确切 ,是一种较理想的治疗方法。

戈舍瑞林联合比卡鲁胺片治疗前列腺癌的效果分析

目的：探析戈舍瑞林联合比卡鲁胺片治疗前列腺癌的临床效果。方法以2014年2月～2015年2月在我院接受治疗的66例前列腺癌患者作为研究对象，将其分为对照组和观察组，每组各33例患者，其中对照组患者给予戈舍瑞林治疗，观察组患者给予戈舍瑞林联合比卡鲁胺片治疗，对比两组患者的临床疗效以及不良反应情况。结果通过治疗对照组患者的不良反应发生率为12.12%，观察组患者不良反应发生率为9.09%，比较差异无统计学意义，P＞0.05；两组患者的前列腺特异性抗原值比较观察组要优于对照组，且P＜0.05，差异有统计学意义。结论临床上使用戈舍瑞林联合比卡鲁胺片治疗前列腺癌是一种有效的方法，取得比较良好的治疗效果，且使用的耐药性和安全性较高。

LINC00909靶向miR-365a-5p/FGFBP1分子轴调控结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的实验研究

目的探讨LINC00909对结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及可能机制。方法购买正常结肠上皮细胞NCM460,结肠癌细胞HCT8、Caco-2及DLD-1;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)检测NCM460细胞及结肠癌细胞中LINC00909、miR-365a-5p及成纤维细胞生长因子结合蛋白1(FGFBP1)表达水平。将LINC00909小干扰RNA、miR-365a-5p模拟物、FGFBP1小干扰RNA分别转染HCT8细胞,用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞活力,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验确定LINC00909与miR-365a-5p、miR-365a-5p与FGFBP1的靶向调控关系。结果与NCM460细胞比较,结肠癌细胞中LINC00909及FGFBP1表达显著升高,miR-365a-5p表达显著降低(P<0.05)。抑制LINC00909表达后,HCT8细胞活力、迁移及侵袭能力显著降低(P<0.05)。过表达miR-365a-5p后,HCT8细胞活力、迁移及侵袭能力显著降低(P<0.05)。抑制FGFBP1表达后,HCT8细胞活力、迁移及侵袭能力显著降低(P<0.05)。LINC00909靶向负调控miR-365a-5p表达,miR-365a-5p靶向负调控FGFBP1表达。抑制miR-365a-5p表达能够逆转抑制LINC00909对HCT8细胞增殖、迁移及侵袭的影响(P<0.05)。结论抑制LINC00909表达可降低结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,其机制与靶向调控miR-365a-5p/FGFBP1分子轴有关。

MMP-9反义寡核苷酸抑制胃癌细胞生长的实验研究

目的探讨MMP-9反义寡核苷酸作为靶基因对胃癌细胞的生长抑制效应,以进一步揭示MMP-9反义寡核苷酸治疗胃癌的可能性和可行性。方法以人胃癌细胞株MGC803为研究对象,应用ASODN技术,将MMP-9ASODN转染到MGC803细胞中,利用MTT法检测不同浓度不同时间MMP-9反义寡核苷酸对MGC803细胞的杀伤活性,流式细胞仪检测分析MMP-9反义寡核苷酸对MGC803细胞周期及凋亡的影响。结果MMP-9反义寡核苷酸在体外能够抑制MGC803肿瘤细胞增殖,且这种增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性;MMP-9反义寡核苷酸在体外能够诱导MGC803肿瘤细胞凋亡,作用与浓度和时间有关。结论MMP-9反义寡核苷酸可望成为一种人胃癌临床有效的治疗方法。

CA125联合中性粒细胞与淋巴细胞比值对卵巢癌诊断及预后判断的意义

目的:探讨CA125联合中性粒细胞和淋巴细胞比值对卵巢癌诊断及预后判断的临床意义。方法:检测152例卵巢癌患者外周血CA125及血细胞计数,对比CA125水平及中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)与健康体检者及卵巢良性疾病患者间的差异,评估二者及二者联合(联合标志物)在诊断卵巢癌方面的敏感性和特异性,并分析检测指标与卵巢癌患者临床特征的相关性。结果:卵巢癌患者的CA125水平及NLR值明显升高,与对照组及良性肿瘤组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);在敏感性上CA125最为显著,但在特异性上NLR及联合标记物要比CA125高;联合标志物与疾病的疗效及预后密切相关(r=0.683,P<0.01)。结论:CA125联合中性粒细胞和淋巴细胞比值测定是卵巢癌诊断的敏感指标,且具有更高的特异性,在对卵巢癌的诊断、病情评估及预后判断方面具有指导意义。

Ki-67、P53、LAT1在食管癌及癌前病变组织中的表达及其临床意义

目的:观察Ki-67、P53、LAT1在食管鳞癌及癌前病变组织中的表达情况并探讨其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测食管正常黏膜组织20例、癌前病变组织68例(轻度非典型增生21例,中度非典型增生22例,重度非典型增生25例)以及癌组织34例中Ki-67、P53及LAT1的阳性表达情况,分析三者在食管癌组织中表达的相关性。结果:食管正常黏膜组织、轻度非典型增生、中度非典型增生、重度非典型增生以及癌组织中,Ki-67阳性表达率分别为0%(0/20)、23.8%(5/21)、40.9%(9/22)、76.0%(19/25)、82.4%(28/34),P53阳性表达率分别为0%(0/20)、14.3%(3/21)、31.8%(7/22)、48.0%(12/25)、67.6%(23/34),LAT1阳性表达率分别为0%(0/20)、19.0%(4/21)、36.4%(8/22)、52.0%(13/25)、76.5%(26/34)。等级相关分析结果显示,Ki-67、P53、LAT1的阳性表达均与组织学分级显著相关(r=0.626,0.427,0.586,P<0.01);Ki-67与P53、LAT1在食管癌组织中的表达呈正相关(r=0.428,0.596,P<0.01)。结论:Ki-67、P53、LAT1蛋白的异常表达与食管癌的癌变过程显著相关,三者联合检测具有重要的临床意义。

贝伐珠单抗联合紫杉醇治疗非小细胞肺癌过程中并发支气管胸膜瘘1例报告及文献复习

目的:探讨贝伐珠单抗联合紫杉醇(白蛋白结合型)治疗非小细胞肺癌(NSCLC)过程中并发支气管胸膜瘘(BPF)发生的可能机制、临床表现和预防策略,及时鉴别出具有潜在风险的个体患者,为BPF的预防提供参考。方法:收集1例贝伐珠单抗联合紫杉醇(白蛋白结合型)治疗NSCLC过程中并发BPF患者的临床资料,复习及归纳相关文献,总结出其发生的潜在风险。结果:患者,男性,62岁,局部晚期肺腺癌(驱动基因阴性),接受贝伐珠单抗和紫杉醇(白蛋白结合)后线化疗,经过2个周期的化疗后,患者的临床症状和功能状态均有所改善,但并发急性BPF及继发胸腔内感染,被迫停止抗血管生成治疗和化疗,虽经过胸腔闭式引流、积极抗感染治疗和最佳支持治疗等,临床症状未能得到缓解,患者最终于2019年9月17日死于呼吸衰竭。结论:当病变同时侵及胸膜、气管和胸壁,且贝伐珠单抗联合化疗治疗过程中出现肿瘤空化效应或治疗前病变已存在癌腔时,应警惕诱发急性BPF。由于急性BPF缺乏有效的预防和治疗措施,因此及时识别出具有潜在风险的个体患者对预后至关重要。

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗恶性肿瘤安全性分析

目的：观察细胞因子诱导的杀伤细胞（Cytokine-induced killer,CIK）在治疗恶性肿瘤中出现的不良反应,分析不良反应发生的可能机制,制定出具有针对性的防治措施,指导临床工作。方法：回顾性分析于2013年5月~2015年9月在我院接受CIK细胞治疗的1 240例恶性肿瘤患者的临床资料,包括治疗相关的各种不良反应、实验室检查、采取的相应防治措施及疗效等。结果：首次应用CIK细胞治疗后的不良反应包括：乏力（10%）、发热（7.25%）、寒战（4%）、关节疼痛（3%）、全身炎症反应综合征样反应（3%）、消化道不适（0.96%）、急性过敏样反应（0.08%）、皮疹（0.08%）、心绞痛（0.08%）、肿瘤溶解综合征（0%）、感染（0%）,随着治疗疗程增加,不良反应发生率增高,以发热为主要表现,于第4疗程后进入平台期,对于合并血压增高或下降、严重过敏样反应、类全身炎症反应综合征样反应、心绞痛者需对症处理,余无需特殊处理,在输注CIK细胞治疗前进行预处理可降低上述反应的发生率。结论：CIK细胞治疗恶性肿瘤方法总体上安全可靠,相关不良反应可控且可恢复,罕见不良反应可能存在潜在风险。

基于细观力学的混凝土有效弹性性能预测

假定混凝土材料为由骨料和砂浆组成的二相复合材料,建立了混凝土随机骨料模型;按骨料与砂浆基体的弹性性能比值生成骨料较硬和较软两类试件进行有限元数值试验,系统研究了混凝土有效弹性性能预测中多种细观力学方法的优劣及各细观力学方法的适用范围.将细观力学方法预测结果与有限元数值试验得到的结果进行比较,并对这些细观力学方法预测精度及其变化规律进行了讨论.数值试验结果表明,当骨料体积和骨料与砂浆弹性模量比较大时,细观力学方法预测的结果误差较大,需要研究新的方法预测混凝土的有效弹性性能.