大肠杆菌SLT-IIvB基因的克隆和表达

采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从大肠杆菌O1 38基因组DNA中分别扩增出志贺菌样毒素II型变体B的结构序列和包括信号肽的全序列两段基因 ,定向克隆进表达载体质粒pYA3334(asd+)的EcoRI、BamHI位点之间 ,构建成重组表达质粒。在大肠杆菌X62 1 2(Δasd)筛选出重组质粒 pB0 和 pB1 后 ,经中间宿主X3730转化过渡 ,再导入ΔasdΔcyaΔcrp减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550 ,构建成宿主和载体之间具有平衡致死结构的SLT IIvB重组菌。SDS PAGE和Western blot分析重组菌X4550 ( pB0 )在 7 6kD左右处有一条特异性蛋白条带。动物免疫试验表明该重组菌能刺激机体产生针对SLT IIvB和沙门氏菌的特异性抗体。这为进一步研制相应的抗猪水肿病及相应沙门氏菌病的双价活疫苗奠定了重要基础。

鸡白痢沙门氏菌耐药性的监测研究

采用WHO推荐的Kirby Bauer法对我国部分地区 196 2～ 1999年间 34 6株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明 ,在近 40年时间里 ,鸡白痢沙门氏菌对氨苄青霉素、壮观霉素、复方磺胺、磺胺异恶唑、甲氧苄胺嘧啶、羧苄青霉素、四环素、链霉素、青霉素的耐药率显著增强 (P <0 0 1)。菌株的多重耐药率明显增加。 6 0年代以二耐菌株为主 (37 0 % ) ,70年代以四耐、五耐菌株居多 (6 0 5 % ) ,80年代五耐、六耐、七耐菌株占大多数(80 2 % ) ,90年代仅七耐以上菌株就达 83 7%。不同年代菌株显示出不尽相同的耐药谱 ,且呈现出不断增宽的趋势。通过流行病学调查发现 ,6 0年代至 90年代 ,鸡白痢沙门氏菌对青霉素、链霉素、磺胺类药物、四环素、卡那霉素、氯霉素、庆大霉素等药物的耐药性大多呈现出显著增强的变化趋势 ,这充分说明细菌耐药性的形成和发展与抗菌药物长期反复使用有着极为密切的关系。研究对于指导临诊合理用药及控制疾病流行具有重要的现实意义。

编码日本血吸虫抱雌沟蛋白及肌动蛋白的基因性别间的表达差异性

研究了所克隆的日本血吸虫两个基因的性别间的表达差异性。分别将所克隆到的编码日本血吸虫抱雌沟蛋白的cDNA (SjGCP1)和肌动蛋白的cDNA (SjAct)制成DNA探针 ,利用Southernblotting ,Northernblotting和斑点印迹法对其相应基因性别间的表达差异性进行了研究。结果显示 ,日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因在雄虫中转录而雌虫中不转录 ,血吸虫肌动蛋白基因在雄虫中转录量高于雌虫 ,表现出转录量的差异。证明这两个基因转录具有性别间的表达差异性。

肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因快速克隆和鉴定

以提纯的肠炎沙门氏菌染色体ＤＮＡ为材料，在一对含有ＣＵＡＣＵＡＣＵＡＣＵＡ的特殊引物引导下，应用ＰＣＲ扩增出鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ，ｍ，约１．８ｋｂ左右大小，然后以ＵＤＧ法快速克隆到质粒ｐＡＭＰ１０中，转化第１宿主大肠杆菌ＴＧ１或大肠杆菌ＤＨ５α，在氨苄青霉素平板上筛选转化子，小量制备重组质粒ＤＮＡ，再转入第２宿主大肠杆菌ＬＣ－２ａ（ｈａｇ－，ｒｅｃＡ－），所有转化子均出现动力。其中的一个克隆ｐＡＭＰ·ＧＭ经动力和动力抑制试验、血清学试验、鞭毛电镜观察及部分序列测定，均证实ｐＡＭＰ·ＧＭ中载有肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ，ｍ。ｆｉｌＣｇ，ｍ克隆成功为寻求肠炎沙门氏菌防制新方法奠定了基础，研究中建立的快速克隆策略为广泛、深入地开展ｆｌｉＣ研究提供了便捷的新途径。

沙门氏菌Ⅱ相鞭毛蛋白基因在减毒株中的表达

应用转化转导法把含有沙门氏菌 相鞭毛蛋白基因 Flj Benx的重组质粒 p H 1 0 4导入无鞭毛的减毒株 SL592 8(Δaro,Fli Cgp∶∶ Tn1 0 )中获得表达 ;经电镜观察、玻板凝集试验及动力抑制试验证实重组菌表达了相应的外源鞭毛蛋白 ,SDS PAGE测得表达产物分子量为 52 kd;Western blot试验中表达产物可与 H 2 enx单因子血清发生特异性反应 ;体内外试验表明重组菌很稳定 ,口服免疫小鼠能诱导产生针对表达产物的特异性抗体 .

鸡白痢沙门氏菌耐药性的变化趋势

对１９６２ ～１９９８ 年间分离保存的３２５ 株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明， 随着时间的推移， 菌株对１６ 种抗菌药物的耐药性呈现不同程度的上升趋势， 其中对氨苄青霉素， 复方磺胺， 甲氧苄胺嘧啶，链霉素， 四环素， 壮观霉素的耐药率明显上升。菌株多重耐药性的上升趋势显著， ６０ 年代菌株几乎没有多重耐药性， ７０ 年代以四耐、五耐菌株居多， ８０ 年代则以五耐、六耐、七耐菌株占绝大多数， 而９０ 年代七耐以上菌株的比率却近９０ ％ 。菌株耐药谱迅速增宽， 并对常用抗生素广谱耐药。因此， 建立鸡白痢沙门氏菌耐药性监测体系， 并积极寻求消除耐药质粒的方法， 是当前防治鸡白痢急待解决的课题之一。

减毒鸡沙门氏菌安全性和免疫效力初步研究

本研究将减毒鸡沙门氏菌９７Ａ、９７Ｂ分别经口服、皮下注射或滴鼻接种１日龄ＳＰＦ鸡和伊莎鸡，结果表明，９７Ａ株对１日龄雏鸡有良好的安全性，而９７Ｂ株仍有部分毒力。实验室免疫效力试验显示，９７Ａ能提供较强的免疫保护作用，表明９７Ａ是一株较理想的疫苗候选株。

丙型肝炎病毒CS,NS3 NS4区抗原融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

DNA fragments of Core(300bp)and NS4(400bp),encoding the nucleocapsid region(Core)protein CS and nonstructural region(NS4)protein NS4a of HCV,have been obtained from HCV genome by PCR,both of the two fragments were liked with C33c(700bp)and formed a chineric gene C33c-Core-NS4(HCV-CCN).The chimeric gene was recombined with expression vector pET24a(+)and was expressed in Escherichia coli.The expressed protein was purified by Ni(+)NTB affinity chromatography.Its molecular weight was about 58kD.Western blotting analysis showed that the chimerical antigen had good antigenicity,which could play an important role in anti-HCV assay.

新型PS76-80飞锯机

PS76 - 80飞锯机是一种新型的焊管生产在线切割设备。其特点是 ,测长编码器安装在飞锯小车上 ;通过 PC程序控制器进行一次和二次定尺控制 ;二次定尺采用先进的一轴定位交流伺服系统 ;锯切部分由三个油马达分别驱动的 2 0 0 m m锯片沿钢管圆周方向作 12 0°均匀分布 ,锯片通过油缸和油马达作垂直进给和不大于 6 0°的旋转进给 ,切割力矩大而平稳。驱动同步简单 ,系统运行平稳可靠、噪音低、定尺精度高。

汾河畔走出来的共产主义战士——杨一木

年少志高 参加革命 杨一木，1911年6月8日出生于山西省临汾县界峪村一个贫苦农民家庭。他是临汾早期共产党人之一，是从汾河岸畔走出来的共产主义战士。