淡水渔业研究中心水产遗传育种研究室主任傅洪拓:青虾产业的现状与发展

一、青虾产业的现状目前青虾养殖面积约500万亩，包括单养和套养。范围扩展至18个省（市），主产地是长三角地区。据2011年《中国渔业年鉴》公布，年养殖产量约22．56万吨，2万吨以上的省市有：江苏10．5万吨、安徽4．2万吨、浙江2．1万吨、湖北2．1万吨、江西2．0万吨。

长江不同江段青虾的遗传多样性

利用20个微卫星分子标记对长江不同江段共6个青虾群体进行了遗传多样性分析,采样点包括重庆、万州、宜昌、武汉、九江和江阴。结果表明,6个青虾群体平均等位基因数(A)为5.25,平均有效等位基因数(Ne)为3.4622;20个位点平均多态信息含量(PIC)为0.5894;期望杂合度(He)由高到低依次为江阴群体(0.6308)、九江群体(0.6096)、宜昌群体(0.5945)、武汉群体(0.5934)、万州群体(0.5844)、重庆群体(0.5821),平均值为0.6296。分子方差分析(AMOVA)结果表明长江青虾6群体间遗传变异6.92%来自群体间,93.08%来自群体内部,两两群体间FST值在0.0253～0.0838(P<0.05)之间,表明群体间已明显出现分化,但分化程度中等,与湖泊青虾群体相比,长江各群体间遗传分化程度较弱,可能是由于流动的江水增加了群体间的交流。Hardy-Weinberg遗传平衡分析表明,6群体均出现杂合子缺失现象,可能是由于稀有等位基因缺失或无效等位基因造成;6群体间遗传距离为0.0620～0.1809,UPGMA聚类分析表明,江阴群体单独聚为一类,其余5个群体聚为另一类,其中九江和武汉群体最先聚到一起,其次万州、宜昌和重庆群体聚为一类。

青虾生长性状相关的微卫星标记筛选

青虾,学名日本沼虾（Macrobrachium nipponense）,又称河虾。属于甲壳纲（Crustacea）,十足目（Decapoda）,长臂虾科（Palaemonidae）,沼虾属（Macrobrachium）。

青虾无公害养殖技术(二)

二、青虾无公害繁殖技术 （一）青虾的繁殖生物学特性 1．雌雄区分青虾为雌雄异体，区分雌雄青虾的简便方法为：①第二步足（即“大钳子”）：体长3厘米以下的青虾，雌雄青虾第二步足无明显区别；体长3厘米以上，雄虾的第二步足开始比雌虾长，个体越大，雌雄青虾第二步足的差距越大；②第四、五对步足间距：雌虾腹面第四、五步足基部之间的距离较宽阔，成“八”字形排列；而雄虾则较狭窄，第五步足基部靠在一起（雌雄青虾鉴别图见彩中插2）。

青虾无公害养殖技术(三)

三、青虾成虾池塘养殖技术 （一）环境条件 1．水质要求应符合《GB11607渔业水质标准》和《NY5051无公害食品淡水养殖用水水质》两项标准规定，其中溶解氧应在5毫克／升以上，pH值为7．0～8．5，透明度25~50厘米，硝酸氮、硫化氢不能检出；底泥总氨〈1％。

青虾无公害养殖技术(四)

（2）青虾和罗氏沼虾等品种轮养：青虾生长期短，与许多养殖品种存在季节差异，同一池塘在一年中可与罗氏沼虾、南美白对虾、淡水白鲳、罗非鱼等轮养。温水性鱼类或虾类一般都在5月初开始放种，4月底前池塘空闲，可以利用青虾的价格差，即每年秋冬季青虾价格低、存节前后至4月底前青虾价格高而获取利润，

青虾新品种池塘主养技术

青虾主养是以青虾为主的养殖模式,主要放养青虾,可搭养少量鲢鳙鱼等调控水质。长江流域青虾主养模式通常一年养殖两季,即春季主养和秋季主养。春季主养是指1月上旬至3月上旬放苗养殖,至6月底捕捞结束的整个过程;秋季主养是指6月底至8月上旬放苗养殖,至年底或次年春节成品虾捕捞上市结束的整个过程。

青虾新品种培育与推广

青虾(Macrobrachium nipponense),俗称河虾,全国年养殖产量超过27万吨,是我国重要的淡水养殖虾类。青虾肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富,是深受广大消费者喜爱的优质水产品。青虾具有生长快、养殖周期短、上市时间灵活、投资少、见效快、风险小、收益高等优势,青虾养殖已成为我国农业增效、农民增收的重要途径之一;同时青虾养殖过程绿色环保,具有良好的产业发展前景。

青虾无公害养殖技术(五)

四、无公害青虾的病害防治技术 （一）无公害青虾病害防治与安全用药原则 无公害青虾养殖过程中，坚持以防为主、防治结合和综合防治的原则。使用渔药必须符合《NY5071—2002无公害食品渔用药物使用准则》，严禁使用违禁药物；按照《水产养殖质量安全管理规定》做好用药记录；严格遵守休药期制度，停止用药时间必须超过休药期才能上市销售，以免药物残留危害人体健康。

青虾新品种池塘混养技术

青虾池塘混养技术包括青虾河蟹混养、青虾鱼类混养、青虾鱼种混养、青虾南美白对虾或罗氏沼虾混养等多种模式。青虾与河蟹生活习性、环境条件要求相近,为两者混养提供了条件,因此青虾河蟹混养取得了良好效果。经过多年的科学试验和生产实践,建立了以河蟹为主的青虾河蟹混养技术,在此基础上,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心又建立了以青虾为主的青虾河蟹混养模式,进一步推动了青虾河蟹混养技术的进步。

中华绒螯蟹微卫星标记与生长性状相关性的初步分析

研究采用30个微卫星标记分析同池养殖的长江水系中华绒螯蟹群体,以筛选生长性状(体重、体长和体宽)相关的分子标记。结果表明,位点ESIN33、ESC29和ESC57与体重、体宽和体高呈极显著相关(P<0.01);位点ESC65与体高、体宽呈极显著相关(P<0.01),与体重呈显著相关(P<0.05)。不同基因型间的多重比较表明,ESIN33位点的AC基因型、ESC29位点的DD基因型、ESC65位点的BB基因型的平均体重、体宽和体高均高于其他基因型,且差异显著,是生长性状的优势基因型。研究结果可为中华绒螯蟹的分子标记辅助选育提供参考。

应用SSR和SRAP标记构建青虾遗传连锁图谱

采用SSR和SRAP标记结合拟测交策略构建青虾（Macrobrachium nipponense）遗传连锁图谱。共有175个标记（含27个SSR、148个SRAP标记）分布在53个连锁群上。每个连锁群含2~8个标记,其中不少于3个标记的连锁群有35个,连锁对18个,平均每个连锁群的标记数为3.3个;连锁群长度在6.7~91.2 cM之间,相邻标记间最大间隔为49.0 cM,最小为1.4 cM,平均间隔为13.1 cM。青虾框架图谱长度为997.2 cM,图谱观察总长度为2 270.5cM,根据估算,青虾遗传连锁图谱预期长度为4 380.6 cM,图谱的覆盖率为51.83%。本研究构建了青虾遗传连锁图谱,该图谱也是淡水虾蟹类第一张遗传连锁图谱,可为青虾QTL定位、基因克隆、遗传选育等提供指导,并为进一步构建高密度的青虾遗传连锁图谱奠定了基础。

microRNA在水产动物中的研究进展

mi RNAs是一类在真核生物中广泛存在的非编码小分子RNA,通过与靶m RNA互补配对在转录水平上对基因的表达进行负调控,导致m RNA的翻译抑制或降解。大量研究表明,mi RNA在躯体发育、癌症、细胞分化、细胞增殖与凋亡、脂肪代谢等方面发挥作用。近来在水产动物中,有关mi RNA的研究取得了众多的科研成果,然而对其进行全面总结的报道较缺乏。本文综述了mi RNA在水产动物中的研究进展,结果显示mi RNA在水产动物中表现为多样化的生物学功能,本文也对其研究前景进行了展望,旨在为以后更好地研究水产动物mi RNA的功能提供参考。

太湖日本沼虾的遗传多样性分析

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对太湖湖区不同水域(无锡、宜兴、苏州及湖州水域)野生日本沼虾群体进行基因组DNA的遗传多样性分析。在事先优化的条件下,试验从选用的50个随机引物中筛选出16个有效引物,共检测到117个清晰稳定的位点,大小为200bp～2000bp,其中92个位点具有多态性。四个群体的多态位点比例分别为49.57%、60.68%、53.85%、57.26%,杂合度为0.2077～0.2163,Shannon信息指数为0.2967～0.3053,群体间遗传分化指数Gst值为0.1644～0..2002。AMOVA分析结果显示,群体的遗传变异有16.67%是由群体间遗传变异引起的,显著性检验表明群体间遗传变异对总遗传变异影响显著。遗传距离显示四个群体有一定遗传分化,其中苏州和宜兴群体间遗传距离最大(0.1481),无锡与宜兴群体间遗传距离最小(0.1141)。利用UPGMA进行聚类分析表明,无锡与宜兴群体首先聚在一起,湖州与苏州群体随后聚在一起,再与无锡、宜兴群体聚在一起。

青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析

本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone,CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达。青虾CHH基因cDNA全长1 017 bp,包括241 bp的5′UTR,408 bp的开放阅读框(ORF),355 bp的3′UTR,开放阅读框编码135个氨基酸。成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基。青虾CHH成熟肽C端为GK,确定为ES型CHH基因。蛋白相似度比对显示,所分离的青虾CHH被归为CHH家族I型肽。系统进化树分析表明,青虾CHH多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,CHH基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由高到依次为眼柄、精巢、腹神经节、脑、肠、肝、心脏、卵巢。以卵巢为参照其表达量设为1时,眼柄与精巢CHH基因表达量分别为卵巢的500倍和250倍,由此推测CHH基因可能与雄性生殖过程相关。

杂种优势预测研究进展

杂种优势预测对于杂种优势的利用具有重要意义,然而传统的杂种优势预测方法由于要花费大量的人力、物力和财力,限制了杂种优势的进一步利用。几十年来,育种工作者从亲缘关系、生态类型、生理生化和数量遗传等不同方面,进行了大量的研究,提出了许多预测杂种优势的方法。通过概述有关杂种优势预测,及数量性状、同工酶、分子标记亲本间遗传距离和杂种优势关系的研究现状,对杂种优势预测的发展方向进行了展望。

日本沼虾4个地理群体遗传变异的RAPD分析

采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对取自六安、龙感湖、淮南和高淳等4个地理群体的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)各30个个体进行遗传多样性分析。在事先优化的反应条件下,所使用的OPP、OPX2个系列40个随机引物中,有16个引物扩增出清晰稳定的片断,共产生173个位点,大小在250～2 000 bp,利用PopGen 1.32进行分析,日本沼虾多态位点为75个(多态性片断的比例为43.4%),Shannon信息指数为0.1771～0.2466。遗传距离显示日本沼虾群体间有一定遗传分化,其中高淳群体和龙感湖群体之间遗传距离最大(0.1712),六安群体和淮南群体之间最小(0.1146)。用UPGMA对4个地理群体进行聚类分析,六安和淮南群体首先聚在一起,高淳和龙感湖群体最后。

杂交青虾“太湖1号”肌肉营养成分分析

本试验以池塘养殖太湖青虾为对照,对杂交青虾"太湖1号"营养成分进行了分析。结果显示:杂交青虾"太湖1号"肌肉的水分、粗灰分、粗脂肪、粗蛋白含量与对照组差异不显著(P>0.05)。实验组与对照组氨基酸总量分别为79.5%和80.84%,差异不显著(P>0.05);必需氨基酸指数(EAAI)分别为66.32%和66.94%,构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准,差异不显著(P>0.05);脂肪酸中EPA和DHA总量分别为0.83%和1.74%,差异不显著(P>0.05);主要微量元素比例合理,与对照组差异不显著(P>0.05)。研究表明,杂交青虾"太湖1号"肌肉主要营养成分与太湖青虾基本一致,两者没有显著差异。