HC可视喉镜在急诊科紧急气管插管患者中的应用

目的:探讨HC可视喉镜在急诊科紧急插管患者中的应用及特点。方法:选择需要紧急插管患者60例,分为普通光纤喉镜组30例及HC可视喉镜组30例,比较两组患者气管插管声门暴露时间、暴露声门成功率、插管1次成功率及气管插管总时间;并比较两组插管前与插管后血氧饱和度。结果:HC可视喉镜组暴露声门的时间为(4.16±1.11)s,与普通光纤喉镜组的时间(7.46±1.70)s,比较有统计学意义(P<0.05);HC可视喉镜暴露声门的成功率100%,与普通光纤喉镜相比(66.67%)有统计学差异﹙P<0.05﹚;普通光纤喉镜插管时间为(54.14±25.76)s,HC可视喉镜的插管时间为(32.14±23.10)s,两组相比有统计学差异(P<0.05),普通光纤喉镜插管的一次成功率为59.09%,HC可视喉镜的一次插管成功率为88.89%,两组比较有统计学差异(P<0.05)。HC可视喉镜组插管后3min血氧饱和度与普通喉镜组相比,有统计学差异(P<0.05)。结论:HC可视喉镜对急诊科需要紧急插管的患者,可有效缩短插管的时间,提高插管的成功率,迅速改善患者氧合,为临床抢救患者生命赢得宝贵时间。

重症急性胰腺炎继发感染性胰腺坏死患者细胞间黏附分子-1、降钙素原、血清C反应蛋白的表达及临床意义

目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、降钙素原(PCT)及血清C反应蛋白(CRP)在重症急性胰腺炎继发感染性胰腺坏死患者中的变化及意义。方法选择2015年3月—2017年3月西安交通大学第二附属医院接诊的98例重症急性胰腺炎为研究对象,根据患者是否发生感染性胰腺坏死分为感染组46例和非感染组52例。分析ICAM-1、PCT、CRP在继发感染性胰腺坏死中的变化及诊断价值。结果感染组ICAM-1、PCT、CRP及Ranson评分均明显高于非感染组(P<0.05)。经Pearson相关分析显示,ICAM-1、PCT、CRP与Ranson评分均呈正相关(r=0.251、0.223、0.270,P<0.05)。联合检测诊断效能高于ICAM-1、PCT、CRP单独检测(P<0.05),联合检测特异度、准确度显著高于ICAM-1、PCT、CRP单独检测(P<0.05)。结论 ICAM-1、PCT、CRP在继发感染性胰腺坏死患者中均升高,均与Ranson水平密切相关,且三者联合检测诊断准确度显著增高,可作为诊断继发感染性胰腺坏死的重要指标。

天然保鲜剂对猪肉微冻贮藏中生物胺含量的影响

为探讨壳聚糖、丁香精油、肉桂精油和大蒜精油4种天然保鲜剂对微冻(-3℃)猪肉品质的影响,筛选出最适宜抑制生物胺生成的保鲜剂,以猪背最长肌为研究对象,分别用4种天然保鲜剂作用之后真空包装,微冻贮藏((-3±1)℃),贮藏期间以猪肉的感官评定、菌落总数(total viable counts,TVC)、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)值和生物胺含量为测定指标,研究4种天然保鲜剂的保鲜效果。结果表明:壳聚糖可显著地抑制组胺、腐胺、酪胺和尸胺的生成,整个贮藏期,总生物胺生成量61.92 mg/kg(40 d)在安全范围之内,且远远低于限量标准。肉桂精油抑制生物胺的效果较好,贮藏第40天总生物胺的生成量为68.93 mg/kg。丁香精油对组胺和腐胺的抑制效果较好,而大蒜精油则对酪胺抑制作用较强。4种保鲜剂对生物胺生成的抑制效果依次为:壳聚糖>肉桂精油>丁香精油>大蒜精油。同时,壳聚糖和肉桂精油能较好地抑制TVC增长、TVB-N值的上升和感官品质的下降。保鲜剂良好的抑菌效果和抑制TVB-N生成能力导致生物胺含量的下降,结果为生物胺的抑制研究提供了依据。

阿德福韦在乙型肝炎中的应用现状

0引言 乙型肝炎病毒(HBV)不仅可形成急、慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化、肝细胞癌的发生、发展密切相关.目前对慢性乙型肝炎有两种基本的治疗方法,一种是免疫激活治疗如干扰素,另一种是抑制病毒复制如核苷类似物.阿德福韦作为一种新的抗HBV感染的核苷酸类似物已经于2002-09经FDA批准在美国上市,目前在我国正在进行3期临床实验.本文就阿德福韦的研究现状及临床观察作一综述.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活基因2的克隆化研究

目的 应用抑制性消减杂交技术 (SSH)及生物信息学技术 (bioinformatics)筛选并克隆丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白3 (NS3 )反式激活新型靶基因 ,进一步阐明HCV感染相关疾病的发病机制。方法 以HCVNS3蛋白表达质粒pcDNA3 1(-) NS3转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 1(-)为平行对照 ,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。并应用分子生物学技术 ,结合生物信息学技术 ,克隆HCVNS3反式激活作用的新的靶基因。结果 对于所获基因片段序列分析表明 ,其中之一为新型基因片段 ,从HepG2细胞提取总RNA ,以逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列 ,并测序证实 ,因其可以被NS3蛋白反式激活 ,故命名为NS3TP2 ,在GenBank中注册 ,注册号为AY116970。NS3TP2基因的编码序列全长为 12 99个核苷酸 (nt) ,编码产物由43 2个氨基酸残基 (aa)组成。结论 HCVNS3是一种典型的病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白 ,而抑制性消减杂交 (SSH)是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术。通过这种技术 ,发现了HCVNS3反式激活作用的新的靶基因 ,这一发现 ,为进一步研究HCVNS3蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础。

不同贮藏温度下猪肉货架期预测模型建立

为探讨不同贮藏温度对猪肉中生物胺含量影响并建立货架期预测模型，将猪肉背最长肌分别贮藏于-3、4及10℃条件下，在0、4、8、12、16、20、24、32、40、48d测定样品中细菌总数（TVC）、挥发性盐基氮（TVB—N）及生物胺含量，利用阿伦尼乌斯（Arrhenius）方程，建立预测猪肉货架期动力学模型。结果表明，随贮藏时间延长，猪肉中TVC，TVB—N、腐胺、酪胺、总生物胺含量增加。利用Arrhenius方程构建生物胺总量与贮藏温度、贮藏时间之间动力学模型相对误差在10％以内。试验表明，该模型可在-3～10℃范围内对猪肉货架期准确预测，为猪肉包装贮藏及流通智能化预测提供理论依据。

NT-proBNP、血小板及胆固醇水平与脓毒症预后的相关性

目的探讨脓毒症患者血清N末端前体脑尿钠肽(NT-proBNP)、血小板及胆固醇水平变化及意义。方法选取脓毒症43例,其中轻度脓毒症23例纳入轻度脓毒症组,严重脓毒症20例纳入重度脓毒症组;另选择同期住院的非脓毒症22例作为对照组。于入院后1、3、5 d分别检测3组NT-proBNP、血小板及胆固醇水平。结果入院后1 d轻度及重度脓毒症组NT-proBNP分别为(1086±569)μg/L和(2707±745)μg/L,显著高于对照组(165±20)μg/L,差异有统计学意义(P<0.001);血小板分别为(112±10)×109/L和(65±13)×109/L,胆固醇分别为(3.55±0.50)mmol/L,(2.17±0.57)mmol/L,均低于对照组(125±26)×109/L及(3.88±0.52)mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。入院后1 d与轻度脓毒症组比较,重度脓毒症组NT-proBNP明显增高,血小板及胆固醇明显下降,差异均有统计学意义(P<0.001)。在各检测时间点,重度脓毒症组3项指标变化与预后明显相关,随病程延长,该组死亡患者NT-proBNP水平逐步升高,血小板、胆固醇水平逐步降低;而存活患者则NT-proBNP水平逐步减低,血小板、胆固醇水平逐步回升,且呈时间依赖性,与入院后1 d比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NT-proBNP、胆固醇及血小板可作为脓毒症严重程度评价及预后预测的因子。

重症肺炎患者血清降钙素原检测的临床价值

目的:探讨降钙素原(PCT)在重症肺炎诊断中的价值。方法:选择46例重症肺炎作为A组,同时选择46例轻型肺炎作为对照组B组,观察两组入院时的降钙素原水平,超敏C反应蛋白,白细胞数,中性粒细胞比例及重症肺炎组的30d病死率、机械通气率及住院天数。结果:A组较B组血清PCT明显增高,两组差异有统计学意义(P<0.05);且将PCT水平分为<0.5、≥0.5～2.0、≥2.0和≥10.0 4个级别,各个级别水平两组相比亦有统计学差异。将PCT<0.5作为阴性对照组,≥0.5～2.0、≥2.0和≥10.0 3个级别组与之相比,有统计学差异(P<0.05),而两组间超敏C反应蛋白,WBC计数、中性粒细胞百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。在重症肺炎患者中,PCT水平愈高,30d病死率愈高,机械通气比例增加,住院天数增加,与B组比较具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:血清PCT较超敏C反应蛋白、WBC计数、中性粒细胞百分比等炎症指标更有助于重症肺炎的诊断,PCT检测可为早期诊断、准确评价及时干预脓毒症患者提供依据。

应用抑制性消减杂交技术克隆HCV NS3蛋白反式激活基因2的上调基因

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消文库,克隆HCV NS3蛋白反式激活相关基因. 方法:以HCV NS3表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2 细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并合成cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析. 结果:成功构建人HCV NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到61个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到100-1000 bp插入片段.挑取30 个插入片段测序分析,得到30个已知功能基因序列. 结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了NS3TP2可能存在的调控机制的线索.

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因NS5ATP13的克隆化研究

目的 应用微矩阵 (microarray)技术 ,结合生物信息学 (bioinformatics)技术筛选并克隆丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白5A(NS5A)的反式激活基因 ,阐明慢性HCV感染、肝纤维化及肝细胞癌 (HCC)的等相关疾病的发病机制。方法 根据HCV H病毒株序列设计、合成序列特异性的引物。以含有全长HCV H株cDNA的pBRTM 3 0 11质粒DNA作为模板 ,进行多聚酶链反应 (PCR)扩增 ,获得的HCVNS5A编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定 ,构建真核表达载体pcDNA3 1(-) NS5A。以pcD NA3 1(-) NS5A转染肝母细胞瘤细胞系HepG2 ,提取总RNA ,逆转录为cDNA后进行表达谱基因芯片分析。应用分子生物学技术 ,结合生物信息学技术 ,克隆HCVNS5A反式激活作用的新的靶基因。结果 构建了真核表达载体pcDNA3 1(-) NS5A ,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误。以pcDNA3 1(-) NS5A转染HepG2后提取总RNA ,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析。应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆NS5A反式激活的新型靶基因 ,命名为NS5ATP13 ,在GenBank中登录 ,登录号为D2 12 62。NS5ATP13基因的编码序列全长为 2 10 3个核苷酸 (nt) ,编码产物由 70 0个氨基酸残基 (aa)组成。结论 丙型肝炎病毒NS5A基因产物具有显著的反?

多嘧啶序列结合蛋白与丙型肝炎病毒的关系

0 引言 多嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract bindingprotein,PTB),在大多数哺乳动物细胞及人类原始肝细胞的胞核及胞质中均可检测到,其分子量约为57kD,故也有人称之为p57.PTB在稳态时定位于核内[1],且可通过能量依赖机制快速穿梭于细胞的胞质及胞核.

散癖平胃方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移的影响

目的观察散癖平胃(SPPW)方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响。方法 SPPW方含药血清干预人胃癌细胞SGC-7901 48h后,应用黏附实验、侵袭实验及迁移实验,检测SPPW方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响。应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测SPPW对与侵袭转移有关的MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响。结果 SPPW方各组含药血清干预人胃癌细胞48h后,SGC-7901细胞黏附抑制率、侵袭抑制率及迁移抑制率均增加且呈剂量依赖关系,与阴性对照组比较有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。SPPW方三个剂量组对MMP-2mRNA的表达无统计学差异,对MMP-9mRNA的表达具有统计学差异(P<0.01)。结论 SPPW方可抑制人胃癌细胞SGC-7901黏附、侵袭和迁移能力,其抑制有明显的剂量依赖性,其抑制的机制可能与下调MMP-9的表达有关。

Nisin抑制凝固型酸奶后酸化的效果研究

试验研究不同Nisin添加量对凝固型酸奶后酸化的抑制效果。将5、10、15、20、25、30mg·kg-1的Nisin添加到牛奶中,接入发酵剂后经发酵、后熟后制得成品,（4±1）℃贮藏,分别在0、4、8、12、16、20d测定其感官品质、酸度、乳酸菌菌数、粘度的变化。结果表明：Nisin可抑制贮藏后期酸奶的后酸化,添加20~25 mg·kg-1 Nisin抑制效果明显,并使保质期达到16d,比空白组延长了8d,且酸度在整个贮藏期间差异不显著（P〉0.05）,感官品质良好。

抑制性消减杂交技术筛选NS5ATP13蛋白的上调基因

目的 应用抑制性消减杂交 (SSH)技术构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS5ATP13蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库 ,克隆HCVNS5ATP13蛋白反式激活靶基因。方法 以HCVNS5ATP13表达质粒pcDNA3 .1(-) NS5ATPl3转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 .1(-)为对照 ;制备转染后的细胞裂解液 ,从中提取mRNA并合成cDNA ,经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组 ,分别与两种不同的接头衔接 ,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR ,将产物与T/A载体连接 ,构建cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析。结果 成功构建人HCVNS5ATPl3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到 10 2个白色克隆 ,进行菌落PCR分析 ,其中 96个均得到 10 0～ 10 0 0bp插入片段。挑取 40个插入片段测序分析 ,其中 2个cDNA片段为未知序列 ,通过生物信息学分析获得其全长序列 ,已被GenBank收录 ,另有 3 4个为已知功能序列。结论 成功筛选出 2个新的cDNA序列 ,并获得其全长序列 。

危重症抢救室在急诊医学临床教学中的作用

急诊科危重症抢救室是急诊医学教学的重要临床基地。抢救室病种丰富,需要通过鉴别诊断做出主诊断。学生通过实践可熟练掌握急救知识,并能掌握与危重患者家属的沟通技巧。要在抢救中培养学生的责任心及对患者的人文关怀,并且培养医学生细致的观察能力。因此在急诊临床教学中,抢救室对急诊医师的临床基本功要求高,在其临床诊断思维的培养,急危重症的紧急处置能力的培养等方面发挥重要的作用。

乙型和丙型肝炎病毒对c-jun基因表达调节的影响

乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)不仅可引起急慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化和肝细胞癌(HCC)的发生及发展密切相关，HCC是严重危害人民健康的疾病之一，在对HCC的致病机制的探索中，原癌基因也成为研究的的重点．研究发现，HBV和HCV均能调节原癌基因c-jun的激活与表达，从而导致肝细胞异常增生、分化，进而引起肝细胞癌变。通过对肝炎病毒和癌基因c-jun之间关系的阐述，有助于我们掌握肝细胞癌变的分子机制。

乙型肝炎病毒对c-fos基因表达调节的影响

癌基因(oncogene)是一类编码关键性调控蛋白的正常细胞基因，在正常情况下，不表达或只有有限表达，又称原癌基因(proto-oncogene)，当受到理化等因素刺激时，他们可以异常表达，导致细胞的增生、分化或癌变，众所周知，乙型肝炎病毒(HBV)不仅可引起急慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化和肝细胞癌(HCC)的发生及发展密切相关，许多实验已证实肝细胞癌变过程涉及多种原癌基因的激活和突变，其中HBV对原癌基因c-fos的激活及表达调节也越来越受到关注。通过对HBV与c-fos之间表达调节的阐述，有助于进一步了解HBV导致HCC的分子学机制。

应用抑制性消减杂交技术筛选NS5ATP5的上调基因

目的 通过抑制性消减杂交 (SSH)技术构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS5A反式激活蛋白 5 (NS5ATP5 )的反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库 ,筛选HCVNS5ATP5蛋白反式激活靶基因。方法 以HCVNS5ATP5表达质粒pcDNA3 .1(-) NS5ATP5转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 .1(-)为对照 ;制备转染后的细胞裂解液 ,从中提取mRNA并合成cDNA ,经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组 ,分别与两种不同的接头衔接 ,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR ,将产物与T/A载体连接 ,构建cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析。结果 成功构建人HCVNS5ATP5蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到 91个白色克隆 ,进行菌落PCR分析 ,其中 86个均得到 10 0～ 10 0 0bp插入片段。挑取 3 2个插入片段测序分析。其中包括结缔组织生长因子、纤维连接蛋白、胰岛素样生长因子结合蛋白l等重要的基因。

不同天然保鲜液对气调包装冰温贮藏鲶鱼片品质的影响

为延长鲶鱼片货架期,提高其食用安全性,该试验将新鲜鲶鱼片分别用3种天然保鲜液以及无菌蒸馏水(对照组)处理后,气调包装(60%CO2+40%N2),贮藏于–0.7℃的冰温库中,考察3种天然保鲜液对鲶鱼片感官品质、微生物指标、常规理化指标以及鱼肉蛋白氧化程度的影响。结果表明:1#保鲜液(由壳聚糖、蜂胶、溶菌酶和茶多酚等复配而成)与3#保鲜液(纯乳酸菌发酵液)降低了鲶鱼片中的菌落总数、p H值、总挥发性盐基氮(total volatile base-nitrogen,TVB-N)值和K值的上升;2#保鲜液(桂皮、丁香、生姜和大蒜)具有极好的抗氧化功能,使硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid resctive subastances,TBARS)值在整个贮藏期间维持在较低(0.09~0.14 mg/kg)水平;3种天然保鲜液均不同程度延缓了鲶鱼肉肌原纤维蛋白的氧化,抑制了羰基含量的增加和总巯基含量的减少。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结果显示,经3种保鲜液处理,鲶鱼片肌原纤维蛋白发生交联聚合和小片化的程度降低。由此可见3种保鲜液在不同程度上均可抑制鲶鱼片微生物生长、蛋白降解、脂肪和蛋白氧化,较好地保持鲶鱼肉的新鲜度,延缓腐败变质的发生,3组保鲜效果排序为3#>1#>2#,1#,2#,3#保鲜液组货架期分别达到40、30和40 d,而无菌蒸馏水处理组为20 d。研究结果为天然保鲜液在鲶鱼肉贮藏中的应用提供参考。