一株裂解性鸡白痢沙门氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析

为了分离一株裂解性鸡白痢沙门氏菌噬菌体,对抗多重耐药细菌,试验从健康鸡粪便中分离富集噬菌体,采用双层琼脂平板法纯化、增殖,超速离心法浓缩,利用透射电镜观察噬菌体形态,通过提取噬菌体基因组、酶切、电泳确定核酸类型,同时测定噬菌体的宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱及热稳定性等生物学特性。结果表明:从鸡粪中分离得到1株裂解性噬菌体,命名为PSP2-22。该噬菌体头部直径为(60±5)nm,尾部长为(130±5)nm,为长尾噬菌体科;核酸类型为双链DNA。该噬菌体不仅能裂解鸡白痢沙门氏菌,还可裂解鼠伤寒沙门氏菌和奇异变形杆菌;最佳感染复数为0.1;平均裂解量约为136 pfu/cell,效价最高可达9.83 lg pfu/mL;在pH值6~11时相对稳定,70℃作用60 min之后仍具有一定活性。说明噬菌体PSP2-22是一株对不同温度和pH值有较强适应能力的双链DNA噬菌体,宿主谱相对较宽,具有潜在的应用价值。

一株致病性临床型乳房炎源粪肠球菌SL22的分离与鉴定

为了解北疆某规模化奶牛场临床型乳房炎源粪肠球菌的耐药与毒力情况,采集了47份临床型乳房炎乳样进行细菌分离,通过生化鉴定及16S rRNA对粪肠球菌进行鉴定,进行了药敏试验及33种耐药基因检测,了解其耐药情况;通过小鼠LD50、病变观察及6种毒力基因检测,了解其致病性。分离鉴定出了1株粪肠球菌,命名为SL22;遗传进化树构建中,与粪肠球菌菌株MD48、MD60(GenBank登录号分别为MW5784.17.1、MW5784.16.1)同源性为92.00%;在哥伦比亚血平板上具有溶血现象,为α溶血;在耐药情况检测中,SL22对青霉素G、杆菌肽耐药,对万古霉素等药物敏感,含有4种耐药基因(qnrD、floR、aac(6’)-lb-cr、int I 1);在毒力测定中,SL22对小鼠的LD50约为1.6×10^(9)CFU/只,死亡小鼠肝脏、小肠出血明显,且含有4种毒力基因(gelE、cylA、ace、efaA)。本试验为奶牛乳房粪肠球菌感染的防治提供了参考。

奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌噬菌体P82的分离及特性研究

【目的】为开发噬菌体“鸡尾酒”制剂防治奶牛乳腺炎提供生物学材料。【方法】以实验室分离的奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌82为宿主菌,通过点滴法和双层平板法在奶牛场的污水、弃奶和粪便混合物中分离并纯化其噬菌体,通过噬菌斑及透射电子显微镜对该株噬菌体的形态特征进行观察。利用核酸酶处理分析该噬菌体核酸类型,并对其裂解谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性进行研究。【结果】分离筛选出金黄色葡萄球菌82的裂解性噬菌体P82,电镜下观察其头部为二十面体,大小约为120 nm×83 nm,有一条带可伸缩尾鞘的长尾,长约126 nm,属于有尾噬菌体目,肌尾噬菌体科。通过琼脂糖凝胶电泳鉴定其核酸类型为双链DNA(dsDNA)。噬菌体P82的最佳感染复数为0.001,对奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌裂解率为36.51%(23/63),宿主谱较广;其生长潜伏期约为25 min,爆发期约为45 min,裂解量约为74 PFU/cell;在pH 4.0~12.0时活性稳定,在pH 2.0和13.0时则完全失去活性。噬菌体P82热稳定性较高,在70℃作用60 min后仍有裂解能力,在80℃作用40 min时则失去裂解能力。【结论】本研究分离的噬菌体P82效价较高、裂解能力强、增殖速度快、噬菌谱广,对不同温度和pH均有较好的耐受度,能作为专一性裂解奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌的噬菌体候选株,可与其他噬菌体混合制成噬菌体“鸡尾酒”制剂用于防治奶牛乳腺炎,为奶牛乳腺炎的噬菌体疗法提供材料。

2020年新疆地区规模化猪场猪PCV2抗体检测与分析

为了解新疆地区2020年规模化猪场猪圆环病毒2型的免疫抗体水平,选择新疆地区6个规模化猪场,针对不同日龄段的猪采集血清样品333份,采用猪圆环病毒2型ELISA抗体检测方法进行抗体检测分析。结果发现,2020年新疆地区规模化猪场猪圆环病毒2型平均抗体阳性率为77.78%(259/333),平均抗体阳性率符合国家标准。但各猪场免疫效果参差不齐,抗体阳性率最高的为A场,阳性率达100.00%;阳性率最低的为C场,仅48.78%,低于(70%)的国家标准。不同日龄段的猪抗体水平也存在一定的差异,抗体阳性率最高为种公猪,达96.30%;而保育阶段猪抗体水平最低,仅有47.92%,低于国家标准。

北疆地区某规模化牛场奶牛子宫内膜炎发病规律调查分析

为了解北疆地区某规模化牛场奶牛子宫内膜炎发病规律,试验统计了该场2016—2020年各月份、胎次、产奶量、不同分娩情况、不同发病原因奶牛子宫内膜炎的发病率,同时对子宫内膜炎的发病率与胎次、产奶量、分娩情况和发病原因进行相关性分析。结果表明:7—9月份(夏季)和1—2月份(冬季)是奶牛子宫内膜炎高发月份;3胎奶牛子宫内膜炎的平均发病率最高,为49.86%;产奶量>7000 kg奶牛子宫内膜炎的平均发病率最高,为44.05%,产奶量越高,发病率越高;早产奶牛的子宫内膜炎平均发病率最高,为47.66%;病原微生物是引起奶牛子宫内膜炎的主要原因。不同产奶量、不同分娩情况与奶牛子宫内膜炎的发病率分别呈极强正相关、强正相关,而不同胎次、不同发病原因与奶牛子宫内膜炎的发病率均呈弱负相关,其中夏冬季、3胎、高产奶牛和病原微生物是引起奶牛发生子宫内膜炎的主要原因。说明在生产中应加强产犊时间调控、高产奶牛产后能量供应、早产奶牛产后护理及消毒,减少奶牛子宫内膜炎的发病率。

2018-2020年新疆地区保育猪主要病毒性传染病的抗体检测与分析

为了解2018—2020年新疆地区保育猪主要疫病的抗体水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的304份血清进行了圆环病毒2型(PCV2)、伪狂犬病gB蛋白(PRV-gB)、伪狂犬病gE蛋白(PRV-gE)、蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)抗体检测。结果显示,PCV2抗体阳性率为41.96%(60/143)、PRV-gB抗体阳性率为84.03%(100/119)、PRVgE抗体阳性率为28.21%(44/156)、PRRSV抗体阳性率为85.20%(259/304)、CSFV抗体阳性率为65.22%(135/207),其中PCV2和CSFV的抗体水平均低于国家规定的70%,可通过提高母源抗体水平或加强免疫次数进行提高抗体阳性率。试验结果可为该地区保育猪主要猪病流行病学调查提供参考,也可为免疫程序的调整提供帮助。

2019—2020年北疆部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗体检测与分析

为了解2019—2020年北疆部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗体水平,从北疆6个规模化养猪场采集了不同类别猪群的1 006份血清样品进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果显示,在1 006份样品中,PRRSV阳性率为86.88%(874/1 006),S/P平均值为1.63。在各猪场中,A猪场阳性率最高,为92.50%(148/160);B猪场阳性率最低,为76.60%(72/94)。A猪场的S/P平均值与B、C、D、E、F存在显著差异(P<0.05)。各类别猪群中种公猪阳性率最高,为96.10%(123/128);哺乳仔猪阳性率最低,为78.80%(145/184)。繁殖母猪的S/P平均值与哺乳仔猪、保育猪、后备猪、种公猪存在显著差异(P<0.05)。该结果可为该地区猪繁殖与呼吸综合征免疫程序的调整提供帮助。

新疆部分地区临床型乳房炎源大肠杆菌的调查分析

为了研究新疆部分地区临床型乳房炎源大肠杆菌的感染率、耐药情况及致病情况,采集47份临床型乳房炎乳样进行大肠杆菌分离鉴定,并开展了药敏试验、毒力基因检测及小鼠攻毒试验。结果分离到14株大肠杆菌,分离率为29.79%(14/47)。11种抗生素药敏试验显示,对头孢哌酮+头孢曲松+红霉素+庆大霉素+强力霉素+恩诺沙星+氯霉素+万古霉素+复方新诺明+呋喃唑酮的多重耐药最为常见,高达50.00%(7/14),对阿米卡星的敏感率最高,为35.71%(5/14);14株大肠杆菌都具有多重耐药性,有71.43%(10/14)的菌株最少对9种药物具有耐药性。毒力基因检测出了Stx2、hlyA、K99、ETT2和eaeA5种毒力基因;具有多种毒力基因的菌株占28.57%(4/14)。动物毒力试验显示,试验组死亡小鼠表现为皮下充血、十二指肠菲薄、肝脏有出血点。本研究可为该地区的乳房炎源大肠杆菌的防控提供一定的帮助。

2018-2020年新疆地区肥育猪主要病毒性传染病的抗体检测与分析

为了解2018-2020年新疆地区肥育猪主要疫病的抗体水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的216份肥育猪血清进行了伪狂犬病gB蛋白(PRV-gB)、伪狂犬病gE蛋白(PRV-gE)、圆环病毒2型(PCV2)、蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)抗体检测。结果显示,PRV-gB抗体阳性率为90.68%(107/118)、PRV-gE抗体阳性率为17.80%(21/118)、PCV2抗体阳性率为90.22%(83/92)、PRRSV抗体阳性率为84.26%(182/216)、CSFV抗体阳性率为85.34%(99/116)。通过结果可知,该地区肥育猪对PRV、PCV2、PRRSV和CSFV的抗体阳性率均超过了国家规定的70%。试验结果可为新疆地区肥育猪主要猪病流行病学调查提供参考,也可为免疫程序的调整提供帮助。

2019-2020年新疆部分地区种猪群主要疫病的抗体检测与分析

为了解2019-2020年新疆部分地区种猪群主要疫病的抗体水平,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的654份猪血清进行了口蹄疫O型病毒(FMD-O)、蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、圆环病毒2型(PCV2)、伪狂犬病gB蛋白(PRV-gB)、伪狂犬病gE蛋白(PRV-gE)抗体检测。结果显示,FMDV-O抗体阳性率为84.92%(169/199)、PRRSV抗体阳性率为95.33%(531/557)、CSFV抗体阳性率为93.67%(577/616)、PCV2抗体阳性率为92.86%(273/294)、PRV-gB抗体阳性率为96.78%(451/466)、PRV-gE抗体阳性率为35.64%(170/477)。试验结果可为该地区主要猪病流行病学调查提供参考,也可为免疫程序的调整提供帮助。

新疆某规模化羊场羊支原体肺炎的分子流行病学调查

研究旨在了解新疆某规模化羊场羊支原体肺炎主要流行株的种型背景,摸清该规模化羊场支原体主要流行株的种型,为该场羊支原体性肺炎的免疫防治提供参考。试验采用绵羊肺炎支原体、丝状支原体丝状亚种、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、精氨酸支原体等特异性引物,运用PCR检测方法对支原体进行检测。结果显示,该场羊群整体处于亚健康的状态,常年有咳嗽等临床表现,发病月份多集中于12月至第二年3月。研究表明,该场羊群以感染绵羊肺炎支原体为主,少数羊群感染精氨酸支原体,其他支原体均未检出。

2019-2020年新疆部分地区猪PCV2的抗体水平检测及分析

为了解2019-2020年新疆地区猪圆环病毒病2型(PCV2)抗体水平及其消长规律,本试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对475份血清中PCV2免疫抗体水平进行检测和分析。结果显示,PCV2抗体平均阳性率为69.68%(331/475),未达到国家规定标准(70%)。S/P的平均值为1.56。不同类别猪群抗体平均阳性率在42.50%;6.67%之间,有一定的差异。在调查的5个规模化养殖场中,仅有2个场PCV2免疫抗体阳性率达到国家标准。各场应根据抗体检测结果,进一步对现有的免疫程序进行调整和完整,确保各猪群健康。

2020年新疆规模化猪场猪O型口蹄疫病毒抗体检测与分析

为了解2020年新疆规模化猪场0型口蹄疫病毒抗体水平,本研究采用液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA)方法对采集的469份血清进行抗体检测。结果显示,猪0型口蹄疫病毒抗体平均阳性率为88.06% (413/469)。不同类别猪群抗体的阳性率均达到85.00%以上。结果表明,8个规模化猪场0型口蹄疫病毒抗体阳性率均达到国家标准(70%),但1个规模化猪场阳性率仅为56.70%,需要制定更加合理的免疫程序。

2020年新疆部分地区猪瘟病毒抗体检测及分析

为了解2020年新疆部分地区规模化猪场的猪瘟病毒(CSFV)抗体水平,本试验应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA),对采自18个规模化猪场的1085份血清样品进行猪瘟病毒抗体检测。结果显示,CSFV抗体平均合格率为83.59%(907/1085),高于国家规定标准(70%),平均阻断率为(66.99±25.09)%。A、B、C、D、E地区间猪瘟病毒抗体水平差异显著(P<0.05)。各规模猪场猪群抗体合格率在70%~87%之间,并且差异显著。此次检测结果表明,6个不同地区平均抗体合格率中,A、B、C、F地区抗体水平整齐度良好,E地区抗体水平偏低,变异系数偏大,抗体整体水平较差。大型规模养猪场猪瘟抗体合格率普遍高于中、小型规模养猪场,说明大型规模养猪场在猪瘟的防控方面具有一定优势。该结果可为新疆地区规模化猪场的猪瘟免疫防控提供参考。

2020年新疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测与分析

为了解2020年新疆地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)抗体水平及其消长规律,本试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法对1218份血清中PRRSV免疫抗体水平进行检测和分析。结果显示,PRRSV抗体平均阳性率为78.49%(956/1218),高于国家规定标准(70%)。S/P的平均值为1.22±0.84,变异系数为69.45%。不同类别猪群抗体平均阳性率在59.19%~91.50%之间,有一定的差异。在调查的10个规模化养殖场中,9个场PRRSV免疫抗体阳性率达到国家标准。不同类别猪群PRRSV变异系数较高,需进一步对现有的免疫程序进行调整和完善,确保各猪群健康。

新疆北疆地区某规模化猪场主要传染病抗体检测与分析

为了解新疆北疆地区某规模化猪场几种主要传染病的抗体水平,便于及时发现猪场潜在的疾病风险。本试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对某规模化猪场各阶段猪群进行猪瘟病毒(CSFV)抗体、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)抗体、猪圆环病毒2型(PCV2)抗体、猪0型口蹄疫病毒(FMDV-0)抗体,及猪伪狂犬病病毒(PRV)gB与gE蛋白抗体进行检测。试验结果表明,该场的CSFV、PRRSV、PCV-2、FMDV-0、PRV-gB蛋白、PRV-gE蛋白的平均抗体阳性率分别为83.57%、90.56%、90.29%、71.86%、82.84%、18.29%;不同类别猪群间抗体水平参差不齐,种猪群的PRRSV抗体阳性率仅为52.63%,保育猪群的CSFV抗体阳性率仅为44.12%,育肥猪群的PRV-gB抗体阳性率为30.00%,种公猪的PRV-gE抗体阳性率为30.00%,育肥猪群的FMDV-0抗体阳性率为6.25%,基于以上试验结果,为该场免疫程序的制定和优化提供参考依据,以期达到有效控制及逐渐净化疫病的目的。

新疆规模化养鸡场黄羽肉鸡新城疫、禽流感病毒母源抗体消长规律研究

研究黄羽肉鸡新城疫病毒(NDV)、H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的母源抗体消长规律,为规模化养鸡场制定科学合理的免疫程序提供依据。采用血凝试验和血凝抑制试验对1—38日龄的黄羽肉鸡进行NDV和H5、H7、H9亚型AIV母源抗体水平的检测。NDV、AIV母源抗体均在1日龄时达到峰值,随日龄的增加,母源抗体水平呈逐渐下降趋势。H9亚型AIV母源抗体水平最高,且维持在保护水平之上的时间最长,NDV、H5、H7亚型AIV母源抗体水平相对较低。推荐参试规模化鸡场黄麻鸡新城疫(ND)、H5N1亚型禽流感(AI)和H7N9亚型AI、H9亚型AI首次免疫时间分别为7日龄、14—17日龄、17—21日龄。