术中冰冻切片制作技巧探讨

术中冰冻切片对及时明确病变性质,指导医生制定下一步的手术和治疗方案具有其它方法不可替代的作用。要在有限的时间内制作出一张质量稳定的冰冻切片,除了要求技术人员具有高度的责任心和严谨的工作态度外,还需要掌握规范、娴熟的制片技巧。现就制作冰冻切片的技巧及本人的应用体会和大家共同探讨。

p57^(KIP2)、cyclin D1和cyclin E在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨p57KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SP法检测100例宫颈鳞癌、60例宫颈上皮内瘤变和30例正常宫颈鳞状上皮组织中p57KIP2、cyc-lin D1和cyclin E蛋白的表达情况。结果cyclin D1、cyclin E蛋白在宫颈SCC与NE、CIN与NE组织中阳性表达率之间比较、cyclinE蛋白在宫颈SCC与CIN组织中阳性表达率之间比较,差异均有显著性(P<0.01);cyclin D1与cyclin E之间的表达呈正相关(P<0.01);三者表达均与组织学分级、淋巴结转移、患者年龄无关(P>0.05)。结论p57KIP2、cyclin D1及cyclinE蛋白共同参与了宫颈癌的发生发展。cyclin D1和cyclin E蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志,cyclin E异常表达是宫颈癌发生的早期事件。

动态研究地塞米松对哮喘小鼠肺IL-25mRNA和IL-25表达的影响

目的哮喘的作用机制中经典细胞因子研究得较多,但一些非经典的细胞因子同样发挥一定的作用,如白细胞介素(interleukin,IL)-25。本实验拟初步研究IL-25mRNA和IL-25在支气管哮喘中的变化趋势及地塞米松对两者的作用,以进一步了解糖皮质激素在哮喘病治疗的作用机制。方法清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组(分第1次致敏后、第2次致敏后、激发后),哮喘组(分第1次致敏后、第2次致敏后、激发后)和地塞米松组。以鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏激发法建立哮喘模型。地塞米松组在每次激发前1h予地塞米松腹腔注射。正常组予等渗盐水致敏和激发。用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中IL-25水平;用Real-time PCR法检测肺组织IL-25mRNA相对含量。结果第1次致敏后IL-25和IL-25mRNA表达正常组较哮喘组增加(P<0.05),第2次致敏后两者表达哮喘组较正常组增加(P<0.05),激发后两者表达哮喘组较正常组增加(P<0.05);两者表达地塞米松组较哮喘组激发后减少(P<0.05),但IL-25表达高于正常组激发后(P<0.05),而IL-25mRNA表达无差异。结论 IL-25参与了哮喘病炎症前及炎症免疫发病的整个过程。糖皮质激素治疗哮喘病的机制之一,可能是抑制了IL-25的表达。

糖皮质激素对哮喘小鼠肺部炎症和支气管肺泡灌洗液中白介素-25、干扰素-γ的影响

目的:通过观察各实验组小鼠肺部炎症情况和检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-25(IL-25或IL-17E)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平,探讨糖皮质激素对小鼠支气管哮喘的治疗作用机制。方法:清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和布地奈德组。以卵清蛋白致敏激发法建立哮喘小鼠模型。显微镜下观察肺组织病理切片;收集BALF,计算嗜酸性粒细胞(EOS)绝对计数百分比;用ELISA法测定BALF中IL-25和IFN-γ的水平,并做相关性分析。结果:哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、EOS数目和百分比分别与正常组、地塞米松组和布地奈德组相比均明显增加(P<0.01),在正常组、地塞米松组和布地奈德组之间对这3个指标进行两两比较差异均无显著性(P>0.05)。哮喘组小鼠BALF中IL-25和IFN-γ水平分别与正常组、地塞米松组和布地奈德组相比均减低(P<0.05),在正常组、地塞米松组和布地奈德组之间对这两个指标进行两两比较差异均无显著性(P>0.05)。各组小鼠BALF中IL-25和IFN-γ水平都呈正相关关系。结论:糖皮质激素可减轻肺部炎症,促进IL-25和IFN-γ的表达,抑制哮喘症状。

韦氏环原发弥漫性大B细胞淋巴瘤分子分型的研究

目的探讨韦氏环原发弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的分子分型及与临床病理的关系。方法采用EnVision免疫组化法标记16例韦氏环原发弥漫性大B细胞淋巴瘤中MUM1、bcl-6、CD10、bcl-2、Ki-67的表达。结果 16例韦氏环原发弥漫性大B细胞淋巴瘤中,10例发生于扁桃体(62.5%)。5例为生发中心细胞样型(GCB),11例为非生发中心细胞样型(非GCB)。非GCB型的增殖活性与GCB型相似;GCB型和非GCB型中bcl-2表达的阳性率分别为20.0%(1/5)和54.5%(6/11)。结论韦氏环原发弥漫性大B细胞淋巴瘤以扁桃体好发,分子分型以非GCB型多见,预后较差。

p57^(KIP2)、PCNA在宫颈癌中表达的研究

目的探讨p57KIP2、PCNA蛋白在宫颈癌发生、发展中作用。方法用免疫组织化学S-P法检测100例宫颈鳞癌(squamous cell carcinoma,SCC)、60例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和30例正常宫颈鳞状上皮(normal cervical squamous epithelium,NE)组织中p57KIP2、PCNA蛋白的表达情况。结果p57KIP2蛋白在宫颈SCC、CIN及NE中的阳性表达率分别为51.00%、56.67%和63.33%;PCNA蛋白在宫颈SCC、CIN及NE中的阳性表达率分别为85.00%、60.00%、26.67%。p57KIP2蛋白在宫颈SCC组织中阳性表达率与在CIN、NE中阳性表达率之间比较,以及在CIN、NE组织中阳性表达率之间比较,差异均无显著性(P>0.05);PCNA蛋白在宫颈SCC组织中阳性表达率与在CIN、NE中阳性表达率之间比较、在CIN中阳性表达率与在NE中阳性表达率之间比较,差异均有显著性(P<0.01)。结论p57KIP2、PCNA蛋白对宫颈癌的发生、发展有一定的意义,PCNA蛋白的异常表达是宫颈癌发生的早期事件。