近红外光谱结合siPLS法用于深度水解蛋白奶粉掺伪的快速检测

目的:建立深度水解蛋白奶粉中掺伪普通蛋白粉的快速检测方法。方法:向深度水解蛋白奶粉掺伪一定比例的牛乳清蛋白粉和植物蛋白粉,共制备171个掺伪样品,并采集近红外光谱;对采集的样品光谱使用SPXY法按3∶1比例划分为校正集和预测集,应用联合区间偏最小二乘法(siPLS)建立掺伪检测模型,并比较不同预处理方法下的建模效果。结果:SG一阶导预处理下建立的siPLS模型效果最好,其组合区间光谱范围为[1135~1239.5,1660~1764.5,2080~2184.5 nm],校正集相关系数R^(2)为0.9948,RMSECV值为0.0101,预测集相关系数R^(2)为0.9945,RMSEP值为0.0110,RPD值为13.5。结论:通过siPLS法筛选光谱区间建模,可提高模型的稳定性和预测精度,本方法操作简便,可用于深度水解蛋白奶粉中的掺伪蛋白粉的快速无损检测。

生物催化肌醇生产葡萄糖醛酸转化体系的构建与优化

葡萄糖醛酸(D-glucuronic Acid),由于其良好的解毒性能,广泛应用于医药、保健、食品及医美领域。随着合成生物学的高速发展,利用工程菌生产葡醛酸的生物发酵法取代化学合成成为一种趋势。研究结果表明:最佳诱导条件为在OD_(600)为0.5时,培养基中加入0.2 mmol/L的IPTG,26℃诱导8 h,构建的重组菌株BL21/pETDuet-miox可以实现肌醇氧化酶(MIOX)的高效表达;然后将肌醇氧化酶载体质粒pETDuet-miox转化进不同的表达宿主中,根据转化产量最佳表达宿主为Escherichia coli Rosetta(DE3);以肌醇氧化酶作为催化剂催化肌醇生产葡萄糖醛酸的最佳催化形式为冷冻破壁后菌体;得出最佳催化条件为在pH值为7.5的MOPS缓冲体系中,催化温度30℃时,对菌体添加量选择100 g/L湿菌体,底物质量浓度选定2 g/L。在此条件下肌醇转化率80.3%,葡醛酸产量达到1.606 g/L。本项研究为葡萄糖醛酸生物合成提供新的方法,也为葡醛酸的低成本工业化生产奠定基础。

二维相关近红外光谱的牦牛奶粉掺伪判别分析

目的:建立二维相关近红外光谱结合偏最小二乘判别分析方法(PLS-DA)对牦牛奶粉掺伪进行快速判别分析。方法:通过将牦牛奶粉与普通牛奶粉以一定比例混合,共制备56个掺伪样品,并以KS法按3∶1比例划分校正集和预测集;再采集所有样品一维近红外光谱,构建出以浓度为外扰的二维相关谱,基于同步谱与自相关谱的分析,优选出26个特征变量,建立牦牛奶粉掺伪PLS-DA判别模型。结果:通过二维相关光谱分析,优选到的26个特征波长,集中在光谱差异比较明显的区域,均与奶粉中的蛋白质脂肪等营养成分密切相关;建立的牦牛奶粉掺伪判别模型,校正集与预测集的决定系数R^(2)均超过0.97,校正集与预测集的分类准确率均为100%。结论:结果表明,二维相关光谱结合化学计量学方法可以识别掺伪牦牛奶粉的微小差异特征,并进行快速的判别,本方法为乳制品掺伪检测提供了新的思路和方法。

高效液相色谱法测定橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量

橄榄苦苷（0leuropein）是一种苯酚类裂环环烯醚萜苷,广泛存在于木犀科的木犀榄属植物油橄榄（洋橄榄）（Olea europaea L.）和梣属植物日本白蜡树（Fraxinusjapanica Blune）等植物叶中以及女贞属植物女贞（Ligustrum lucidum Ait）和日本女贞（Ligustrum japanica Thumb）等植物果实中.

D-101大孔树脂富集橄榄叶中橄榄苦苷的研究

目的:研究大孔树脂富集橄榄苦苷的条件及参数。方法:微波水提取所得橄榄苦苷水提液直接用D-101大孔吸附脂静态吸附,水洗脱糖类等杂质,以70%乙醇洗脱;采用HPLC法检测橄榄苦苷的含量。结果:D-101大孔树脂可以将固体中橄榄苦苷的质量分数从5%提高至21.6%,回收率为88.6%。结论:D-101型大孔树脂适合分离纯化水溶性的橄榄苦苷。本法操作简便,适用于工业化生产。

橄榄叶中橄榄苦苷不同提取方法的研究

研究超临界CO2萃取、微波和索氏提取法提取橄榄苦苷的最佳工艺。以HPLC检测橄榄苦苷的含量,采用正交实验,对橄榄叶粒度、提取剂用量、提取时间、超临界萃取压力和萃取温度5个因素进行了考察。结果显示,超临界CO2萃取最佳条件为A1B1C3,微波提取最佳条件为A2B2C1,索氏提取最佳条件为A1B3C1。微波提取3min与超临界CO2萃取2 h、索氏提取6h提取的效果相当,微波提取时间短,操作简便,适用于工业化生产。

富锗灵芝菌丝体中2种同工酶及脂肪酸、无机元素含量分析

目的 研究富锗灵芝菌丝体中超氧物歧化酶、酯酶 2种同工酶及脂肪酸、无机元素含量的变化。方法 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析同工酶谱 ,气相色谱 质谱联用 (GC MS)测定脂肪酸 ,电感耦合等离子体发射光谱分析 (ICP AES)测定无机元素。结果 富锗灵芝菌丝体与普通灵芝菌丝体比较 :①同工酶谱存在明显差异 ;②多不饱和脂肪酸相对含量提高 ;③除锗、钾含量提高外 ,其余 7种无机元素含量均降低。结论 锗能促进灵芝菌丝体超氧物歧化酶、酯酶的活性和提高其多不饱和脂肪酸含量。

富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定

目的:测定富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶(SOD)的含量,探讨培养基中GeO2的最适加量。方法:高效液相色谱仪分析氨基酸,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光化还原法测定SOD的含量。结果:培养基中添加400 mg.L-1的GeO2,灵芝菌丝体中氨基酸含量比对照提高54.34%,SOD提高16.73%。结论:为富锗灵芝菌丝体的应用奠定基础。

深圳高温高湿环境下29个月季品种适生性评价与筛选

以引进的29个月季品种为试验材料,测定其在深圳高温高湿环境下叶片中的可溶性蛋白含量、叶绿素a含量、叶绿素b含量、脯氨酸含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和相对电导率等7个与月季适生性相关的生理指标,通过主成分分析将7个指标转换成累计贡献达到85.336%的3个主成分,保留了5个载荷量高的指标,并对其进行隶属函数排序和聚类分析。结果显示29个月季品种在高温高湿环境下的适生性可分为适生性强、适生性较强、适生性中等和适生性较差4大类,初步筛选出月月红、眼睛、柠檬酒、美丝泰、朱丽叶、超感和粉扇等7个适生性强的月季品种,后续可结合花朵性状、生殖类指标、保护类指标等进行筛选评价。

SPE-UPLC测定制药企业污水中7种头孢抗生素

目的:建立SPE-UPLC法同时检测制药企业污水中头孢唑肟、头孢克肟、头孢硫米、头孢唑林等7种头孢类抗生素的方法。结果:头孢唑肟、头孢克肟、头孢硫米、头孢唑林、头孢地嗪、头孢呋辛、头孢西丁含量测定达到纳克痕量检测级别(检测限分别为50,160,40,100,20,60,120 ng·L^(-1))。七种抗生素的线性R^(2)>0.999),平均回收率大于82.2%,回收率变异系数在3.19~9.12的范围内。结论:七个组分完全分离,检测成本低,能够满足制药企业污水处理抗生素水质测定。

HPLC法测定头孢噻肟钠乙酸含量

目的:建立高效液相色谱法测定头孢噻肟钠原料乙酸含量。方法:采用Zorbox Edipse XDB C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以0.1%磷酸水溶液-甲醇(99∶1)为流动相,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长210 nm。结果:乙酸在0.02mg·mL^-1~0.20mg·mL^-1范围内线性关系良好(r^2>0.999)。6批头孢噻肟钠样品测定结果显示,乙酸含量小于0.5%。结论:经方法学验证,本法灵敏度高,专属性好,可用于头孢噻肟钠乙酸杂质的质量控制。

近红外光谱法测定头孢曲松钠含量

建立近红外光谱法(NIR)用于测定头孢曲松钠含量的新方法。方法:采用偏最小二乘法(PLS)并结合波段筛选来建立含量检测模型。PLS法二阶导数光谱定量分析模型相关系数(Corr.Coeff.)为0.9999,预测残差平方和(PRESS),校正均方差(RMSEC)和预测均方差(RMSEP)分别为3.5291,0.2814和0.3215,高效液相色谱法外部验证,平均相对偏差0.87%。结论:近红外光谱法可用于头孢曲松钠含量测定。

《药品生物检定技术》一体化课程开发与实践

药品生物检定技术是应用生物技术专业和药物制剂专业的核心专业课程。为加强学生的综合分析能力和实际动手能力,培养出高质量的专业人才,我们在多年教学实践基础上,采用任务驱动一体化教学,突出课程的能力本位,优化教学内容和教材,更新教学方法和评价体系,进行了有益的探索与实践,取得较好的教学效果。

手持式拉曼光谱快速鉴别部分头孢菌素类原料

建立手持式拉曼快速鉴别部分头孢菌素类原料方法。方法:采用对照品建立拉曼光谱图库,用命中率指数(hit quality index,HQI)进行评价。结果:阳性样品HQI均大于0.98,阴性样品的HQI均小于0.90,420批样品验证鉴定正确率100%。结论:手持式拉曼光谱仪方法简便、准确,可以用于头孢菌素类企业生产快速鉴别。

基于拉曼光谱的葡萄籽油掺伪定量检测研究

目的:建立基于拉曼光谱的葡萄籽油掺伪快速定量检测方法。方法:分别将大豆油,玉米油,花生油,葵花籽油掺入葡萄籽油中,按照不同体积比配置224个掺伪油样,利用拉曼光谱仪采集拉曼光谱;对采集的光谱使用SPXY法按3∶1比例划分校正集和预测集,将划分的样品集运用原始光谱及Gap一阶导,Gap二阶导,Savitzky Golay(SG)一阶导,SG二阶导,标准正态变量变换和去趋势技术联用算法(SNV-DT),多元散射校正(MSC)算法预处理后,采用偏最小二乘回归(PLSR)建模分析。结果:葡萄籽油掺伪大豆油,玉米油,花生油,葵花籽油最优预处理方法分别是SG一阶导,MSC,SG一阶导,SNV-DT,其预测集相关系数(RP)分别是0.9870,0.9780,0.9755,0.9755,预测均方根误差(RMSEP)分别为0.0532,0.0343,0.0516,0.0381,相对分析误差(RPD)均大于4。结论:利用拉曼光谱结合化学计量学方法可快速定量检测葡萄籽油掺伪含量,具有较高的预测精度。

HPLC法对鱼腥草中马兜铃酸A的定性分析

目的:建立高效液相色谱法检测鱼腥草中马兜铃酸A的分析方法。方法先用索氏提取法对鱼腥草进行提取,再采用安捷伦Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm,美国),流动相:甲醇-3.3%冰醋酸(体积比70∶30),流速:1.0 mL/min,柱温:室温,检测波长:250 nm进行检测。结果:鱼腥草全株(湖北麻城)均未检出马兜铃酸A(检出限为5.7×10^(-5)μg)。结论:鱼腥草全株及其制剂不会引起马兜铃酸导致的安全性问题。

可见/近红外光谱联合CARS-PLS-LDA法的小磨香油掺伪鉴别

目的:建立基于近红外光谱技术的小磨香油掺伪快速鉴别方法。方法:将7个小磨香油样品两两间等体积混合,并与大豆油、玉米油、花生油按照不同体积比混合,共配置70个掺伪油样品。利用近红外光谱仪采集样品光谱后,采用竞争自适应重加权采样(CARS)法对变量进行了筛选,并应用偏最小二乘-线性判别分析(PLS-LDA)法建立小磨香油掺假的判别模型,最后比较了不同预处理方法下的建模效果。结果:各种预处理提升建模效果不明显,采用未经处理过的光谱建模效果最好,经过CARS筛选后的变量进行建模,其中校正集的灵敏度及特异性均为1,预测集的灵敏度为1,特异性为0.96,模型总错分率为0.05。结论:CARS方法可以有效减少波长变量,能简化判别模型及提高判别模型的稳定性和判别精度。可见/近红外光谱联合CARS-PLS-LDA可为小磨香油掺伪的快速鉴别提供参考。