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红光和远红光对绿豆叶绿体Ca^(2+)-ATP酶活性的影响 被引量:3
1
作者 冯启理 潘战生 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 1991年第2期94-96,共3页
10分钟虹光照射抑制绿豆叶绿体Ca^(2+)-ATPase活性,远红光照射有逆转红光的作用。酶活性的高低取决于最终照射的光质。红光照射后2小时,叶绿体Ca^(2+)-ATPase活性增加。红光和远红光对离体的叶绿体Ca^(2+)-ATPase活性没有显著影响。
关键词 绿豆 叶绿体 红光 远红光 ATP酶
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NAA,GA_3和BA对离体花生子房结荚的影响 被引量:1
2
作者 冯启理 潘瑞炽 《植物生理学报(0257-4829)》 CAS CSCD 1989年第2期111-116,共6页
花生子房离体培养时,植物激素的种类和浓度对子房膨大、子房柄伸长、根和愈伤组织生长的影响都不同。L_16(43)试验结果表明,增加NAA浓度则促进子房膨大和根的生长,抑制子房柄伸长;增加GA_3浓度则促进子房柄伸长,抑制子房膨大,根和愈伤... 花生子房离体培养时,植物激素的种类和浓度对子房膨大、子房柄伸长、根和愈伤组织生长的影响都不同。L_16(43)试验结果表明,增加NAA浓度则促进子房膨大和根的生长,抑制子房柄伸长;增加GA_3浓度则促进子房柄伸长,抑制子房膨大,根和愈伤组织生长;增加BA浓度则促进愈伤组织生成,抑制子房膨大、子房柄伸长和根的形成。NAA 2mg L^(-1),NAA 2mg L^(-1)+GA_3 0.2mg L^(-1),NAA 2mg L^(-1)+BA 0.2mgL^(-1),和 NAA 2mg L^(-1)+GA_3 0.2mg L^(-1)+BA0.2mg L^(-1)四种处理均可诱导离体花生子房膨大,结荚级数达4.8~6.0级,结英率约80%。 展开更多
关键词 花生 子房 萘乙酸 赤霉酸
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昆虫固醇转运蛋白的结构与功能 被引量:5
3
作者 张丽丽 郭兴荣 +1 位作者 冯启理 郑思春 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期457-466,共10页
在昆虫中,胆固醇不仅是细胞膜的重要成分之一,也是昆虫蜕皮激素生物合成的前体。由于昆虫体内缺少两种合成胆固醇所必需的关键性酶,所以昆虫不能自主地从简单的前体化合物从头合成胆固醇,而必须通过吸收食物中的甾醇转化为胆固醇来满足... 在昆虫中,胆固醇不仅是细胞膜的重要成分之一,也是昆虫蜕皮激素生物合成的前体。由于昆虫体内缺少两种合成胆固醇所必需的关键性酶,所以昆虫不能自主地从简单的前体化合物从头合成胆固醇,而必须通过吸收食物中的甾醇转化为胆固醇来满足生长、发育和繁殖的需要。胆固醇在组织和细胞内的运输主要由固醇转运蛋白(sterolcarrier proteins,SCPs)执行。因此,对固醇转运蛋白结构与功能的研究对于阐明昆虫中固醇运输具有重要的意义。本文对固醇转运蛋白的基因和蛋白结构、细胞内表达和定位、翻译后修饰、蛋白三维结构、底物特异性和可能的运输途径等方面的研究进展进行了综述,并对其作为害虫防治分子靶标的可能性进行了初步的讨论。研究发现,不同物种的SCP蛋白的基因编码形式和蛋白剪切形式不同;双翅目昆虫埃及伊蚊Aedes aegypti和黑腹果蝇Drosophilamelanogaster除了SCP-x基因可编码SCP-x和SCP-2蛋白外,还有另外的SCP-2和类SCP-2(SCP-2L)基因编码SCP-2和类SCP-2蛋白;而鳞翅目昆虫棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、斜纹夜蛾Spodoptera litura和家蚕Bombyxmori中SCP-x基因的表达和转录方式与脊椎动物的SCP-x基因类似,通过转录和翻译后剪切形成SCP-2蛋白。SCP-x和SCP-2蛋白定位于过氧化物酶体。SCP-2蛋白由5个α-螺旋和5个β-折叠组成,其中α5-螺旋可影响蛋白与底物的结合。SCP-2蛋白以不同的亲和力与固醇、胆固醇衍生物、脂肪酸、脂酰辅酶A和磷脂等化合物结合。超表达斜纹夜蛾SlSCP-x和SlSCP-2基因可增加细胞对胆固醇的吸收;而利用RNAi技术抑制幼虫体内SlSCP-x表达,可导致血淋巴中的胆固醇含量降低,并导致幼虫生长缓慢,蜕皮化蛹延迟。 展开更多
关键词 昆虫 固醇转运蛋白 胆固醇 脂肪酸 蜕皮激素
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家蚕翅原基细胞的凋亡和自噬分析 被引量:4
4
作者 刘学术 胡启豪 +2 位作者 郑思春 冯启理 邓惠敏 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1317-1324,共8页
【目的】家蚕Bombyx mori翅原基在生长分化过程中伴随着造血器官和翅囊等组织的消失。本研究旨在分析家蚕翅原基生长分化过程中是否存在细胞凋亡和细胞自噬。【方法】制作蛹期0 d翅原基石蜡切片,利用TUNEL法检测细胞凋亡情况;提取5龄第... 【目的】家蚕Bombyx mori翅原基在生长分化过程中伴随着造血器官和翅囊等组织的消失。本研究旨在分析家蚕翅原基生长分化过程中是否存在细胞凋亡和细胞自噬。【方法】制作蛹期0 d翅原基石蜡切片,利用TUNEL法检测细胞凋亡情况;提取5龄第3天、5龄第6天、上簇第1天、预蛹期、蛹期0 d及蛹期第3天的翅原基总RNA,反转录成c DNA,利用定量PCR检测凋亡和自噬相关基因的表达水平;检测了细胞凋亡相关的Caspase 3和细胞自噬相关的酸性磷酸酶活性。【结果】TUNEL染色发现蛹期0 d的翅原基出现部分细胞凋亡现象;细胞凋亡相关基因Caspase 3和Nc主要在5龄幼虫期有高水平表达,细胞凋亡抑制因子IAP主要在幼虫末期有较高水平的表达;Caspase 3酶活性在上簇第1天出现峰值;细胞自噬相关基因Atg5,Atg6,Atg8和Atg12主要在幼虫末期有较高水平的表达;酸性磷酸酶活性也主要在幼虫末期较高。【结论】在幼虫期可能存在细胞凋亡,抑制了翅原基细胞的增殖,进而阻止了翅原基的生长分化;在幼虫末期可能同时存在细胞凋亡和自噬,促进翅囊等的退化,同时阻止了翅原基细胞的增殖,推动了翅原基向蛹翅的发育。 展开更多
关键词 家蚕 翅原基 凋亡 自噬 CASPASE 3 酸性磷酸酶
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鳞翅目昆虫精巢融合的研究 被引量:8
5
作者 刘琳 冯启理 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期1-7,共7页
昆虫精巢是产生精子并为精子发育提供营养和保护的重要器官.昆虫雄虫在幼虫期通常有左右对称的2个精巢.但是,部分昆虫如农业害虫斜纹夜蛾在从幼虫向蛹变态发育的过程中,2个精巢发生融合,合二为一,在蛹期最终完全融合成单个精巢;有些昆... 昆虫精巢是产生精子并为精子发育提供营养和保护的重要器官.昆虫雄虫在幼虫期通常有左右对称的2个精巢.但是,部分昆虫如农业害虫斜纹夜蛾在从幼虫向蛹变态发育的过程中,2个精巢发生融合,合二为一,在蛹期最终完全融合成单个精巢;有些昆虫如经济昆虫家蚕的2个精巢并不融合,在成虫期仍保持分离.精巢融合显然是昆虫长期自然演化过程中形成的一种繁殖方式,有利于种群的繁殖和扩大.本文结合课题组的研究,对鳞翅目昆虫精巢的类型和结构、精子产生的过程、精巢融合的现象及其生物学意义以及在农业害虫防治上的潜在应用意义进行了简述. 展开更多
关键词 精巢 精巢融合 鳞翅目 害虫 斜纹夜蛾
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RNA干扰对家蚕丝腺蜕皮激素相关基因表达的影响(英文) 被引量:1
6
作者 李庆荣 邓小娟 +3 位作者 杨婉莹 黄志君 冯启理 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1335-1340,共6页
昆虫变态发育过程中,蜕皮激素通过一系列的激素相关转录因子进行信号的转导和放大,从而完成对生长变态发育的调控,其中蜕皮激素受体(EcR)及转录因子BR-C和E74A可能作为早期因子发挥作用。为了研究这3个早期转录因子在鳞翅目昆虫中的功能... 昆虫变态发育过程中,蜕皮激素通过一系列的激素相关转录因子进行信号的转导和放大,从而完成对生长变态发育的调控,其中蜕皮激素受体(EcR)及转录因子BR-C和E74A可能作为早期因子发挥作用。为了研究这3个早期转录因子在鳞翅目昆虫中的功能,本研究采用体外合成dsRNA的方法,将合成的dsRNA分别注射熟蚕期的家蚕Bombyx mori,进行RNA干扰,并对这3个基因被RNA干扰后的形态变化和相关的转录因子基因BmHR3A,BmHR39,BmβFTZ-F1,BmE74B和BmE75B的表达进行了实时荧光定量PCR检测。形态学观察结果显示,这3个基因被RNAi后出现异常的蛹和蛾、小翅和死蛹等表型。qPCR检测结果表明:RNAi BmEcR后导致了BmE74A,BmE74B,BmHR3A和BmβFTZ-F1表达水平的显著降低(P<0.05),RNAi BmE74A后导致了BmEcR,BmBR-C,BmE74B,BmHR3A和BmβFTZ-F1表达水平的显著降低(P<0.01),而RNAi BmBR-C后则导致所有被检测的蜕皮激素受体及其相关转录因子的mRNA水平都显著降低(P<0.01)。据此推测,BmBR-C可能在蜕皮激素信号的早期发挥作用,并对其他相关转录因子和蜕皮激素受体有调控作用。 展开更多
关键词 家蚕 RNA干扰 变态 蜕皮激素 转录因子
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昆虫变态发育过程中的细胞自噬和凋亡 被引量:6
7
作者 史艳霞 李庆荣 +7 位作者 黄志君 曾文年 胡占英 雷淑英 邓小娟 杨婉莹 曹阳 冯启理 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期84-94,共11页
在昆虫变态期,幼虫组织发生退化或消亡,原因在于蜕皮甾醇激素(ecdysteroid),即通常所说的蜕皮激素,诱导这些组织的细胞发生了自噬(autophagy)和凋亡(apoptosis)的程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)。一般情况下,自噬途径构成... 在昆虫变态期,幼虫组织发生退化或消亡,原因在于蜕皮甾醇激素(ecdysteroid),即通常所说的蜕皮激素,诱导这些组织的细胞发生了自噬(autophagy)和凋亡(apoptosis)的程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)。一般情况下,自噬途径构成一种饥饿应激适应性以避免细胞的死亡,表现为低水平Cvt泡(Cvt vesicle)和自噬体(autophagosome)对部分胞质溶胶、蛋白聚集体和细胞器的吞噬和降解。昆虫进入变态发育时,由于蜕皮激素的激活,由遗传级联系统调控的PCD机制被启动,低水平的常态自噬转入高水平的自噬并同时诱发凋亡,细胞进入不可逆的死亡,导致幼虫组织在变态期退化或消亡。对果蝇Drosophila变态期PCD机制中最重要的发现是:(1)在自噬发生的PI3KⅠ-Tor和PI3KⅢ的分子通路中,由自噬相关蛋白Atg1引发的高水平自噬能够诱导凋亡;(2)蜕皮激素诱导表达的βFTZ-F1,E93,BR-C,E74A等转录因子不但激活凋亡的Caspases通路,还能诱导自噬的发生。 展开更多
关键词 昆虫 变态 自噬 凋亡 程序性细胞死亡
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保幼激素和蜕皮激素对家蚕翅原基生长分化的影响 被引量:5
8
作者 胡启豪 刘学术 +2 位作者 马琼 冯启理 邓惠敏 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期62-67,共6页
文中以家蚕翅原基为材料,通过制做离体石蜡切片的方法观察了翅原基从五龄幼虫第3天至蛹期0天的形态变化,并通过注射外源蜕皮激素活性物质20E和保幼激素类似物Methoprene探究了昆虫激素对家蚕翅原基生长分化的影响.结果显示,翅原基在幼... 文中以家蚕翅原基为材料,通过制做离体石蜡切片的方法观察了翅原基从五龄幼虫第3天至蛹期0天的形态变化,并通过注射外源蜕皮激素活性物质20E和保幼激素类似物Methoprene探究了昆虫激素对家蚕翅原基生长分化的影响.结果显示,翅原基在幼虫阶段发育缓慢,从五龄幼虫第6天起生长分化逐渐加快,且翅原基的形态发生了显著变化,原本附着于翅原基腔口处且呈团状的造血器官逐渐分散至消失,而由气管组成的翅脉逐渐形成.外源激素处理结果显示,2μg的20E可促进翅原基的生长分化,而2μg的Methoprene抑制了翅原基的生长分化.上述结果说明蜕皮激素和保幼激素共同调控了翅原基的生长分化,并最终实现了翅原基的变态发育. 展开更多
关键词 家蚕 翅原基 生长分化 蜕皮激素 保幼激素
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果蝇翅原基发育分化的主要过程及分子机理 被引量:2
9
作者 欧俊 郑思春 +1 位作者 冯启理 刘琳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期917-924,共8页
翅原基发育分化与昆虫的个体发育紧密联系,对昆虫翅发育的研究有助于阐述昆虫的发育过程。另外,翅的形成是一些农林害虫泛滥的主要原因之一,研究翅发育分化有助于我们从翅发育的角度控制农林害虫。目前,翅发育分化在果蝇Drosophila中研... 翅原基发育分化与昆虫的个体发育紧密联系,对昆虫翅发育的研究有助于阐述昆虫的发育过程。另外,翅的形成是一些农林害虫泛滥的主要原因之一,研究翅发育分化有助于我们从翅发育的角度控制农林害虫。目前,翅发育分化在果蝇Drosophila中研究已较为深入详细。果蝇翅发育分化主要包括4个阶段:翅原基(wing disc)的确定,前-后(antero-posterior,A-P)和背-腹(dorso-ventral,D-V)组织中心(organizing center)的建立,翅区(wing region)的确定,以及翅区的进一步分化。具有homeobox序列的基因(homeobox基因)如Engrailed(En)、Apterous(Ap)和Ultrabithorax(Ubx),分泌蛋白如Wnt家族成员Wingless(Wg)及TGF-β超家族成员Decapentaplegic(Dpp)和Hedgehog(Hh),以及翅原基特有的核蛋白编码基因Vestigial(Vg),共同调控了翅原基的正常发育分化。本文综述了果蝇翅原基发育分化的过程及分子机理方面的研究发现,为翅原基的研究提供了参考。 展开更多
关键词 果蝇 翅原基 发育分化 分子调控 homeobox基因 分泌蛋白
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添食不同含氮物质对家蚕产丝量及丝素蛋白基因表达的影响 被引量:3
10
作者 朱巧莹 李敏杰 +2 位作者 陈燕冰 冯启理 邓惠敏 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期658-662,共5页
给家蚕5龄幼虫分别添食大豆蛋白、NH4Cl和尿素后,调查家蚕产丝量的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测蚕体丝腺组织中丝素重链基因(fib H)的表达变化,探究适合用于提高家蚕产丝量的含氮物质。5龄起蚕连续6 d按照0.45 mg/(头&#... 给家蚕5龄幼虫分别添食大豆蛋白、NH4Cl和尿素后,调查家蚕产丝量的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测蚕体丝腺组织中丝素重链基因(fib H)的表达变化,探究适合用于提高家蚕产丝量的含氮物质。5龄起蚕连续6 d按照0.45 mg/(头·d)的剂量添食尿素后,茧层率比对照组增加15.7%,且幼虫的体质量及丝腺体积都比对照组有所增加;5龄幼虫添食大豆蛋白和NH4Cl后茧层率无明显增加。qRT-PCR检测5龄起蚕按照上述剂量添食尿素120 h后,后部丝腺中fib H的表达量比对照组增加了1.5倍。上述结果再次证实了家蚕5龄幼虫添食尿素后可以增加产丝量,并且表明尿素可以促进蚕体后部丝腺中fib H基因的表达。 展开更多
关键词 家蚕 营养添食 尿素 产丝量 丝素重链基因 实时荧光定量PCR
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斜纹夜蛾中肠糖代谢相关基因的克隆及表达模式分析 被引量:1
11
作者 罗婉冰 何文婧 +3 位作者 黄玉秋 胡丹 黄立华 冯启理 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期965-973,共9页
斜纹夜蛾Spodoptera litura是一种世界性分布的重要农业害虫,在生长发育过程中要经历幼虫一蛹的变态发育过程。由于变态发育前后昆虫的食性发生了明显的改变,作为食物消化吸收的中肠也发生了解体和重建。与此相适应,昆虫中肠的各种物质... 斜纹夜蛾Spodoptera litura是一种世界性分布的重要农业害虫,在生长发育过程中要经历幼虫一蛹的变态发育过程。由于变态发育前后昆虫的食性发生了明显的改变,作为食物消化吸收的中肠也发生了解体和重建。与此相适应,昆虫中肠的各种物质和能量代谢也可能会相应地发生改变。为研究斜纹夜蛾中肠变态发育过程中糖代谢途径的变化情况,我们从斜纹夜蛾中肠EST文库中鉴定出了12个糖代谢相关基因,克隆了其中3个基因的全长cDNA,并应用半定量PCR和定量PCR的办法检测了其在幼虫-蛹变态发育期中肠组织的转录表达以及对激素和饥饿等因素的响应情况。结果表明:这3个基因(α-L-岩藻糖苷酶、N-乙酰葡萄糖胺-6-磷酸去乙酰酶和烯醇化酶基因)的开放阅读框分别为1 461,1 200和1 299 bp,预测的分子量分别为56.3,43.3和46.7 kDa。这12个糖代谢相关的基因在变态发育期的中肠组织中具有5种不同的mRNA表达模式:(Ⅰ)只在幼虫期高表达(唾液麦芽糖酶前体蛋白、糖基水解酶31家族成员蛋白、线粒体乙醛脱氢酶、β-1,3-葡聚糖酶基因);(Ⅱ)只在预蛹期高表达(β-葡萄糖醛酸酶、β-N-酰基氨基葡萄糖苷酶3基因);(Ⅲ)只在蛹期高表达(葡萄糖胺-6-磷酸异构酶基因);(Ⅳ)在预蛹期和蛹期高表达(α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、N-乙酰葡糖胺-6-磷酸脱乙酰酶和α-L-岩藻糖苷酶基因);(V)在变态发育期恒定表达(烯醇化酶基因)。这说明,为适应变态发育斜纹夜蛾中肠糖代谢途径发生了明显的改变。保幼激素对这些基因的表达没有明显的影响,但蜕皮激素对Ⅰ类基因(如糖基水解酶31家族成员蛋白基因)具有一定的抑制作用,对Ⅲ类基因(如葡萄糖胺-6-磷酸异构酶基因)有显著的上调作用。此外,我们还发现饥饿对几乎所有这些基因的表达都有显著的抑制作用。这些结果表明,昆虫中肠变态发育过程中糖代谢相关基因的动态变化可能受到蜕皮激素以及饥饿相关因素的共同调控。这一研究对从代谢角度揭示昆虫变态发育的分子机理具有重要意义。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾 变态发育 糖代谢 保幼激素 饥饿 基因表达 中肠
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家蚕Met1基因的表达与组织定位分析 被引量:1
12
作者 易文瑾 马琼 +3 位作者 温众杰 刘琳 冯启理 邓惠敏 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期757-763,共7页
选择家蚕基因组中与果蝇Dm Met(Methoprene tolerant protein)同源的基因Bm Met1进行研究。预测Dm Met和Bm Met1的结构域均是一个b HLH-PAS(basic helix-loop-helix Per-ARNT-SIM)型转录因子,具有典型的DNA结合结构域。在原核系统表达... 选择家蚕基因组中与果蝇Dm Met(Methoprene tolerant protein)同源的基因Bm Met1进行研究。预测Dm Met和Bm Met1的结构域均是一个b HLH-PAS(basic helix-loop-helix Per-ARNT-SIM)型转录因子,具有典型的DNA结合结构域。在原核系统表达获得了Bm Met1蛋白并制备了抗体。qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,无论是Bm Met1基因mRNA的转录还是Bm Met1蛋白的表达,在家蚕5龄中后期和吐丝期的翅原基组织中都呈现较高水平,而在蛹期呈现较低的水平。通过免疫组织化学方法分析Bm Met1的组织定位,结果显示该蛋白质在5龄第6天和吐丝期家蚕胸节表皮、脂肪体及翅原基等组织中都有较高水平的表达,在蛹期上述部位和组织的表达水平较低。分别将蜕皮激素(20E)和保幼激素类似物(Methoprene)按照2μg/头的剂量注射到5龄第3天幼虫第2~3胸节间,qRT-PCR检测幼虫翅原基组织中的Bm Met1受到Methoprene的诱导上调表达,且在处理2 h后表达水平最高。上述结果暗示Bm Met1可能参与了保幼激素对家蚕翅原基生长分化的调控。 展开更多
关键词 家蚕 BmMet1基因 表达特征 翅原基 保幼激素类似物
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斜纹夜蛾视黄酸结合蛋白(Slcrabp)基因的克隆、表达及功能 被引量:1
13
作者 陈亚青 夏亭 +2 位作者 郑思春 冯启理 刘琳 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期493-504,共12页
视黄酸结合蛋白(Cellular retinoic acid binding protein,CRABP)属于胞内脂质结合蛋白超基因家族,参与了许多生理活动,如细胞分化、组织重建和信号转导等,但其在昆虫中肠的作用尚不明确。研究从斜纹夜蛾Spodoptera litura中肠基因表达... 视黄酸结合蛋白(Cellular retinoic acid binding protein,CRABP)属于胞内脂质结合蛋白超基因家族,参与了许多生理活动,如细胞分化、组织重建和信号转导等,但其在昆虫中肠的作用尚不明确。研究从斜纹夜蛾Spodoptera litura中肠基因表达序列标签(EST)文库中克隆获得一个编码Slcrabp的全长c DNA,该c DNA由396个核苷酸组成,编码132个氨基酸。预测CRABP蛋白质的空间结构与脂肪酸结合蛋白非常相似,含一个由10个反平行的β折叠和2个α螺旋形成的配体结合中心结构域。Sl CRABP基因具有4个外显子,与脊椎动物crabp基因类似。RT-PCR检测表明,在转录水平上,Slcrabp在6龄幼虫中肠的各个时期均有较高表达。Western blot分析结果显示,Sl CRABP蛋白分布广泛,在中肠、脂肪体、精巢等组织上大量表达。在中肠,其表达峰值出现在预蛹期。利用荧光标记物质8-苯胺基-1-萘磺酸(1,8-ANS)分析了重组Sl CRABP蛋白与不同底物的亲和力,发现Sl CRABP与不饱和长链脂肪酸有较高结合活性,如花生四烯酸钠、亚麻酸、油酸钠和油酸,但与视黄酸、视黄醇的结合力却很弱或几乎不结合,暗示斜纹夜蛾Sl CRABP功能与同家族脂肪酸结合蛋白(FABP)性质相似。对6龄幼虫进行饥饿处理,结果显示经过经24 h和48 h饥饿处理后,虫体中肠Sl CRABP蛋白质的表达量有显著上升,暗示Sl CRABP可能参与了斜纹夜蛾体内脂类的转运过程。 展开更多
关键词 视黄酸结合蛋白 中肠 脂肪酸 视黄酸 斜纹夜蛾
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家蚕保幼激素信号途径中转录因子BmKr-h1的基因克隆与表达分析 被引量:1
14
作者 胡启豪 朱子丹 +2 位作者 李婵丹 冯启理 邓惠敏 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期415-424,共10页
Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2锌指结构的转录因子,在昆虫变态发育中起重要作用。从家蚕5龄第3天幼虫的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,该基因全长c DNA为1 918 bp,其中开放阅读框1 047 bp,GC含量42.2%,编码348个氨基酸。氨基酸... Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2锌指结构的转录因子,在昆虫变态发育中起重要作用。从家蚕5龄第3天幼虫的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,该基因全长c DNA为1 918 bp,其中开放阅读框1 047 bp,GC含量42.2%,编码348个氨基酸。氨基酸序列比对分析发现大部分昆虫物种的Kr-h1都含有8个锌指结构,暗示该蛋白质的功能具有一定的保守性。通过生物信息学方法预测Bm Kr-h1不含信号肽和糖基化位点,但含有19个可能的磷酸化位点,暗示其活性可能受到磷酸化和去磷酸化修饰的影响。利用原核表达系统表达获得了可溶的Bm Kr-h1蛋白并制备了抗体。Western blot和半定量RT-PCR检测的结果显示,不论在mRNA水平还是蛋白质水平,Bm Kr-h1在家蚕幼虫5龄初期和吐丝期的翅原基都有较高水平表达,而在蛹期的表达量较低。用保幼激素(JH)类似物Methoprene和蜕皮激素(20E)分别注射家蚕5龄第3天幼虫,发现2种激素均能诱导蚕体内Bm Kr-h1的表达上调。免疫组织化学结果显示,Bm Kr-h1在5龄第3天幼虫各组织中的表达量很低,而在吐丝期的中肠、脂肪体和表皮中都有一定水平的表达,暗示其可能参与家蚕蜕皮变态的过程。上述结果表明Bm Kr-h1可以响应JH和20E的诱导,提示其在家蚕的变态发育中发挥作用。 展开更多
关键词 家蚕 保幼激素信号途径转录因子 基因克隆 序列结构 诱导表达
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家蚕翅原基表皮蛋白基因BmWCPs的生物信息学分析与激素诱导表达特征 被引量:1
15
作者 朱子丹 章佳玲 +1 位作者 冯启理 邓惠敏 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期805-813,共9页
翅原基表皮蛋白(WCPs)在昆虫翅的发育中起着非常重要的作用。为了研究家蚕翅原基表皮蛋白基因BmW CPs的表达是否与蜕皮激素(20E)的调节有关,用生物信息学方法分析BmW CPs基因的序列结构与系统进化特点,并通过半定量RT-PCR检测蜕皮... 翅原基表皮蛋白(WCPs)在昆虫翅的发育中起着非常重要的作用。为了研究家蚕翅原基表皮蛋白基因BmW CPs的表达是否与蜕皮激素(20E)的调节有关,用生物信息学方法分析BmW CPs基因的序列结构与系统进化特点,并通过半定量RT-PCR检测蜕皮激素对部分BmW CPs基因表达的诱导作用。11个BmW CPs基因成簇分布在家蚕基因组中,除BmW CP6和BmW CP10分别分布在第7号、第21号染色体外,其余的BmW CPs均分布在第22号染色体上;11个BmW CPs的核苷酸序列长度为588~2 670 bp,编码115~312个氨基酸,蛋白质分子质量12~35 kD,等电点4.30~7.45;11个BmW CPs基因的ORF内均有内含子插入,81.82%的基因含有2~3个内含子,内含子长度50~5 958 bp,在50~300 bp之间分布频率最高,占46%。将解剖获取的上蔟1 d蚕体的翅原基进行体外培养,并用浓度为2μmol/L的20E直接处理12 h后再常规培养18 h,提取翅原基总RNA并反转录合成cD NA,经半定量RT-PCR检测样品中BmW CPs的表达水平显著上调。依据上述研究结果初步认为,用蜕皮激素直接处理12 h后再常规培养18 h的脉冲作用,可诱导基因组中成簇分布的BmW CPs在翅原基组织中大量表达,以利于家蚕完成翅原基的变态发育。 展开更多
关键词 家蚕 翅原基表皮蛋白基因 序列特征 诱导表达 蜕皮激素
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hnRNPA1基因在家蚕翅原基组织中的表达与定位分析 被引量:1
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作者 张康 冯启理 邓惠敏 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期343-351,共9页
核不均一蛋白A1(hnRNPA1)是一个重要的RNA结合蛋白。本研究旨在获得家蚕hnRNPA1基因的cDNA,并对其在家蚕翅原基组织进行表达和定位分析。以家蚕幼虫期翅原基mRNA为模板通过反转录克隆家蚕BmhnRNPA1基因的全长cDNA,并对其进行生物信息学... 核不均一蛋白A1(hnRNPA1)是一个重要的RNA结合蛋白。本研究旨在获得家蚕hnRNPA1基因的cDNA,并对其在家蚕翅原基组织进行表达和定位分析。以家蚕幼虫期翅原基mRNA为模板通过反转录克隆家蚕BmhnRNPA1基因的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析。构建pET32a-BmhnRNPA1蛋白表达载体,表达且纯化得到BmhnRNPA1重组蛋白,并制备该蛋白多克隆抗体,通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测BmhnRNPA1在家蚕幼虫和蛹翅原基组织中的表达与定位。克隆得到了家蚕hnRNPA1基因的全长cDNA片段,其开放阅读框(ORF)序列为951 bp,编码316个氨基酸,预测分子量为34.98 kDa,等电点为5.15。编码蛋白在第18~90个氨基酸和109~181个氨基酸处为保守的RRM结构域。系统进化分析显示,家蚕hnRNPA1与小菜蛾hnRNPA1的亲缘关系最近。QRT-PCR结果显示,BmhnRNPA1在家蚕幼虫和蛹期的翅原基组织中均有表达,且在蛹期第3天的表达量达到峰值。Western blot进一步证实了实验结果。免疫组化分析结果显示,该蛋白存在于翅原基组织中,并定位于细胞核内。家蚕BmhRNPA1具有两个RNA结合结构域,属于hnRNPs家族,定位于细胞核内,表明其可能参与mRNA的选择性剪接作用。本研究结果为进一步探索该基因的功能提供了基础。 展开更多
关键词 家蚕 hnRNPA1 基因表达 免疫组化 RNA剪接
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CfGST转基因拟南芥抗寒性和叶肉细胞超微结构研究
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作者 张碧玉 李玲 +1 位作者 郑思春 冯启理 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期246-249,共4页
CfGST基因克隆于加拿大森林害虫云杉蚜虫的幼虫基因组。研究CfGST转基因拟南芥表型特征,以及低温条件下叶肉细胞超微结构与存活率。结果表明,与野生型拟南芥相比,CfGST转基因拟南芥的茎粗、叶宽,植株高度、分枝数、荚果数皆降低,生长速... CfGST基因克隆于加拿大森林害虫云杉蚜虫的幼虫基因组。研究CfGST转基因拟南芥表型特征,以及低温条件下叶肉细胞超微结构与存活率。结果表明,与野生型拟南芥相比,CfGST转基因拟南芥的茎粗、叶宽,植株高度、分枝数、荚果数皆降低,生长速度减慢。低温(5±1)℃处理后,转基因拟南芥叶片的叶绿体和线粒体膜结构完整清晰,存活率提高25.14%。 展开更多
关键词 CfGST基因 拟南芥 表型 抗寒性
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家蚕BmFKBP45基因的表达和功能分析
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作者 陈郁蕙 黄金花 +1 位作者 冯启理 邓惠敏 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第6期1-12,共12页
以家蚕(Bombyx mori)为研究对象,对果蝇DmFKBP39的同源蛋白BmFKBP45进行了表达和初步的功能分析.对DmFKBP39和BmFKBP45进行氨基酸序列比对分析发现,它们都含有酸性氨基酸区域、碱性氨基酸区域、核定位信号及FKBP结构域.将BmFKBP45的第2... 以家蚕(Bombyx mori)为研究对象,对果蝇DmFKBP39的同源蛋白BmFKBP45进行了表达和初步的功能分析.对DmFKBP39和BmFKBP45进行氨基酸序列比对分析发现,它们都含有酸性氨基酸区域、碱性氨基酸区域、核定位信号及FKBP结构域.将BmFKBP45的第2个碱性区域与核蛋白HMG2的DNA结合位点进行比对,相似性达到21%,推测BmFKBP45可通过其第2个碱性区域与DNA结合,但EMSA的结果显示重组BmFKBP45不与果蝇的JHRE1元件结合.RT—PCR和Western blot结果显示,BmFKBP45在各个发育时期的家蚕翅原基中都有表达,在蛹期的表达量逐渐下降.激素处理实验结果显示,BmFKBP45的表达并不受20E和JH的影响.利用Pull—down、Far—western blot和Co-IP实验鉴定出一个与BmFKBP45相互作用的蛋白Bm6GI.这些研究结果为进一步探究BmFK—BP45的功能提供了线索. 展开更多
关键词 家蚕 BmFKBP45 亲免蛋白 蜕皮激素 保幼激素 30K蛋白
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整联蛋白在家蚕翅发育中的作用研究
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作者 白珺 徐安英 +1 位作者 邓惠敏 冯启理 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期607-616,共10页
昆虫翅在昆虫生命活动中起着十分重要的作用,将昆虫的活动范围从平面扩大到立体,使其在躲避敌害、觅食和繁衍等方面增强了竞争优势。对家蚕翅突变表型的研究能够分析翅发育过程中基因调控的分子机制。本研究以家蚕泡状翅突变体w13为材料... 昆虫翅在昆虫生命活动中起着十分重要的作用,将昆虫的活动范围从平面扩大到立体,使其在躲避敌害、觅食和繁衍等方面增强了竞争优势。对家蚕翅突变表型的研究能够分析翅发育过程中基因调控的分子机制。本研究以家蚕泡状翅突变体w13为材料,分析了整联蛋白在翅原基中的表达和分布。qRT-PCR结果显示,整联蛋白基因家族在野生型和w13突变型翅原基中有着显著的差异表达。对其中差异表达的整联蛋白基因Bmintegrinβ3进行克隆、原核表达并制备了多克隆抗体。免疫组化分析结果显示,整联蛋白Bm INTEGRINβ3在w13突变型翅原基中的表达量极低。在c108野生型中Bm INTEGRINβ3呈微丝状,将翅的背腹侧表皮联系在一起,但在w13突变型中未检测到该蛋白。推测Bm INTEGRINβ3的下降或缺失可能是导致翅背腹表皮间的维系不紧密并形成泡状翅的原因之一。本研究为解释整联蛋白在昆虫翅发育中的功能作用提供了线索。 展开更多
关键词 家蚕 泡状翅 免疫组化 整联蛋白
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蜜蜂肠道微生物研究进展
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作者 李家豪 冯启理 韩日畴 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1369-1382,共14页
蜜蜂是全球范围内重要的授粉昆虫,具有很高的经济、生态效益,但是蜜蜂一生中可能会遇到许多挑战。肠道微生物与蜜蜂的健康息息相关,不仅在营养物质的消化吸收方面有重要作用,而且还能抵抗某些病原菌的侵袭以及增强机体免疫力。近年出现... 蜜蜂是全球范围内重要的授粉昆虫,具有很高的经济、生态效益,但是蜜蜂一生中可能会遇到许多挑战。肠道微生物与蜜蜂的健康息息相关,不仅在营养物质的消化吸收方面有重要作用,而且还能抵抗某些病原菌的侵袭以及增强机体免疫力。近年出现的蜜蜂大量死亡现象可能与肠道微生物失调有关。生物以及非生物的因素都可能密切影响蜜蜂肠道微生物的存活,导致宿主生理功能紊乱甚至死亡。本文综述了蜜蜂的肠道核心微生物组成、分布、变化、影响因素以及主要作用和研究方法,为肠道微生物的研究和利用提供参考。 展开更多
关键词 蜜蜂 肠道微生物 健康 研究方法
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