微量补体结合试验与试管凝集试验在诊断布鲁氏菌病上的应用比较

试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)是两种布鲁氏菌病血清学常用检验方法。我们在常规方法的基础上将原CFT改为微量法(MCFT)并与SAT进行了比较,取得了较为满意的结果,现报告如下。

建立双抗原夹心酶免疫试验对人畜布鲁氏菌抗体检测的研究

目的为人畜布鲁氏菌病(布病)的血清学诊断、监测及流行病学调查提供特异、敏感、快速的试验方法。方法在制备高滴度的布鲁氏菌(布氏菌)抗原及其抗原辣根过氧化物酶结合物基础上。建立了检测人畜布氏菌抗体的双抗原夹心酶免疫试验(DAgS-EIA),包括常规双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)、双抗原夹心酶免疫斑点试验(DAgS-DIEA)以及快速双抗原夹心ELISA(快速DAgS-ELISA),并对影响本试验的主要因素因素进行了试验。结果制备了高滴度的布氏菌抗原及其抗原酶结合物和冻干制品。并在此基础上,建立了常规DAgS-ELISA及DAgS-DIEA以及快速DAgS-ELISA检测人畜布氏菌抗体方法。经对115份布病患者血清检测结果,阳性率以DAgS-ELISA为最高(61.7%),其余依次为RBPT(58.1%)I、-ELISA(55.6%)、DAgS-DIEA(53.7%)、及SAT(44.2%)且用DAgS-EIA检测布氏菌感染羊、牛、猪及实验动物家兔、豚鼠和小鼠均为强阳性反应,而对正常人、羊、牛、猪及实验动物血清均为阴性反应。结论双抗原夹心酶免疫试验检测人畜血清布氏菌抗体,不仅特异、敏感、快速、简便而且仅需制备单一的布氏菌抗原酶结合物就可对人及各类动物血清布氏菌抗体进行检测。

Vero细胞狂犬病疫苗的免疫原性研究

目的研究Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗的安全性和免疫原性。方法对１１例暴露狂犬病病人进行常规５针注射Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗（ＰＶＲＶ），在注射后的不同时间抽取静脉血，用小鼠中和试验（ＭＮＴ）等方法检测病人体内的中和抗体水平。结果显示３种不同的方法在第０、７天时的体内中和抗体均未达到保护水平（＜０．５ＩＵ／ｍｌ）；１４天时病人的中和抗体全部阳转，ＧＭＴ为７．３２ＩＵ／ｍｌ；２８天时中和抗体达到最高值，ＧＭＴ为１４．５８ＩＵ／ｍｌ；９０天和１８０天的ＧＭＴ分别为８．４３和３．３８ＩＵ／ｍｌ，阳性率仍为１００％，抗体仍保持在较高水平。整个观察过程中无１例发性过敏反应。

被动物Ⅲ度咬伤者联合使用狂犬病疫苗和免疫球蛋白免疫实验研究

按ＷＨＯ标准选择１７１例被动物Ⅲ度咬伤者联合使用法国产ＰＶＲＶ和ＥＲＩＧ进行免疫，观察其免疫效果、全身及局部反应，评价其有效性和安全性。结果表明，全身反应发生率为７．６０％，ＰＶＲＶ和ＥＲＩＧ局部反应发生率分别为１．３０％和１０．５３％。应用ＲＦＦＩＴ动态检测５１例患者，第０、７、１４和２８天的阳性率分别为０％、４１．１８％、１００％和１００％，ＧＭＴ分别为０．０３、０．３８、１１８．８３和９６．２９ＩＵ。联合使用ＰＶＲＶ和ＥＲＩＧ进行免疫，异常反应少而轻，安全性好；

山东省莱姆病螺旋体的首次分离与鉴定

分离与鉴定莱姆病螺旋体.方法：1996年在山东省费县塔山林场，对莱姆病螺旋体的主要媒介蜱进行调查，用布旗法共采集蜱900只，均为长角血蜱。结果：对50只进行中肠带螺旋体检查，带螺旋体率为12％（6／50）。从86组（850余只）长角血蜱中分离到2株螺旋体（TSH1、TSH3）。该螺旋体对H5332和H9724单克隆抗体呈阳性反应，对H6831单克隆抗体呈阴性反应，证实为莱姆病螺旋体。结论：山东省从长角血蜱中分离到莱姆病螺旋体尚属首次，且首次从病原学上证实山东省林区存在莱姆病疫源地。

山东省恙虫病调查

目的 了解山东省恙虫病流行特点。方法 采用PCR技术及血清学等方法对山东地区人间和鼠间恙虫病感染情况进行流行病学调查。结果 首次在黄河以北地区检出恙虫病感染鼠 ,感染率高达 15 6 3% (PCR结果 ) ;从褐家鼠中检出恙虫病立克次体 ,血清学显示其感染率达 10 % ;通过血清学检查还从大仓鼠中检出恙虫病立克次体抗体 ,其感染率达 15 6 3%。除已证实的疫区外 ,还证实山东省潍坊、东营和菏泽 3市存在恙虫病人间或鼠间感染。结论 山东省广泛存在恙虫病疫区 ,黑线姬鼠为主要传染源 ,其血清学阳性率达 19 4 6 % ,褐家鼠以及大仓鼠也有可能是本病的重要传染源。

双抗原夹心酶联免疫试验检测急性布鲁杆菌病患者抗体真实性观察

目的 观察双抗原夹心酶联免疫试验（DAgS—ELISA）检测急性布鲁杆菌病（布病）患者的真实性，即灵敏度和特异度。方法 以试管凝集试验（SAT）法为金标准，用DAgS—ELISA与虎红平板凝集试验（RBPT）、补体结合试验（CFT）以及间接酶联免疫试验（I-ELISA）对同一布病患者人群和对照组人群血清标本进行检测比较。结果 真实性比较，与金标准SAT的符合率分别为：DAgS—ELISA 96．49％，RBPT 94．74％，I-ELISA 85．09％，CFT 72．81％；诊断效能比较，阳性和阴性预测值DAgS—ELISA分别为93．48％、98．53％，RBPT分别为88．00％、100％，CFT分别为100％、69．30％，I-ELISA分别为78．72％、89．55％。结论DAgS—ELISA检测急性布病患者的敏感性和特异性优于其他方法。

1994年山东省布氏菌病流行状况及病例分析

对山东省１９９４年布氏菌病的流行情况进行了分析。表明疫区主要在鲁中地区，并有继续扩大蔓延之势。通过对１２４例病人的个案调查发现，临床表现较为典型，具有诊断意义的游走性关节炎和单侧睾丸炎出现频率较高。

山东省恙虫病血清流行病学调查研究

目的 对山东省不同地区人间和鼠间恙虫病感染情况进行较为全面的了解。方法 采用IFAT、M -CFT等血清学方法在全省 10个市开展不同人群间和鼠间调查。结果 首次在我省黄河以北地区检出恙虫病感染鼠 ;在我省褐家鼠中检出恙虫病立克次体抗体 ,血清学显示其感染率达 10 % ;通过血清学检查还从大仓鼠中检出恙虫病立克次体抗体 ,其感染率达 15 .6 3 %。通过血清学方法证实我省潍坊、菏泽存在恙虫病人间感染。结论 我省广泛存在恙虫病疫区 ,黑线姬鼠为主要传染源 ,其血清学阳性率达 19.46 % ,但褐家鼠甚至包括大仓鼠也有可能是本病的重要传染源 ;山东省恙虫病的流行极有可能存在多样性。

纯化布氏菌素人体安全性研究

应用纯化布氏菌素（Ｐ．Ｂ）对布病病人、菌苗接种者和健康人做皮肤变态反应，并以法国参考标准品和我国目前应用的菌素做对照，对纯化布氏菌素进行了安全性观察和标化。结果表明，ＰＢ对人体安全，敏感性好，特异性高；最适用量为０．３μｇ／０．１ｍｌ／人；最佳观察时间为注射后４８ｈ；阳性反应判定标准为局部红肿浸润反应均径≥１０ｍｍ。

山东省1964～2006年钩端螺旋体病流行病学分析

目的了解山东省1964～2006年钩端螺旋体病流行趋势,探讨钩体病流行规律。方法采取回顾性研究方法对山东省1964～2006年钩体病流行病学调查和监测点资料进行分析。结果1964～2006年钩体病共报告133 594例,死亡81例。除鲁北地区滨洲,其余16市均发生过钩体病,分布在89个县,占全省的66.92%（89/133）。发病时间为7,8,9月份,流行形式主要为雨水型,其次是洪水型,临床类型以流感伤寒型为主,主要流行菌群为波摩那群。带菌猪是山东钩体病的主要传染源,猪带菌率与雨水型、洪水型钩体病流行密切相关。结论20世纪80年代前钩体病在山东省流行较严重,年均发病率在13.50/10万,20世纪90年代后钩体病基本得到了控制,年均发病率在0.071/10万。

山东省90年代布鲁氏菌病流行特点调查分析

山东省1954年报告首例病人,60年代末至70年代初,布病在山东省曾出现较大规模的流行;80年代,布病已基本控制,其中1985～1989年连续4年无新发病人;进入90年代以来,布病疫情在山东省呈逐年上升趋势,疫区范围不断扩大,局部地区出现流行或暴发,现将90年代布病流行特点分析如下。

布氏菌病新诊断技术的研究

我们在1995～1998年间对PCR诊断布病技术进行了多方面研究。其结果表明,该技术在诊断中有一定特异性和较高的敏感性(100fg)。对陕西、河北和山东省区的布病患者及健康对照人群的PCR检测,不同省区患者阳性率差别较大,各省区的对照人群也有一定的阳性。建议,进一步改进PCR诊断布病技术,并扩大试用范围,以便提高诊断水平。同时对DNA分子探针等技术也作了初步探索。

纯化布氏菌素现场应用的标准化

对纯化布氏菌素首次用同体双臂法在布病患者、免疫人群及流调人群中进行了现场标化及考核。确定了使用的适宜剂量单位为1．0U／0．1ml／人，观察时间为48h，阳性结果判定标准为局部红肿均径≥10mm。

山东省1985～2002年钩端螺旋体病监测概况分析

目的 探讨钩端螺旋体病的流行因素与防治策略。方法 对疫情监测资料、病人、家畜动物进行病原学、血清学研究。结果 18a中全省发病 150 3例 ,年均发病率为 0 10 /10万 ,年最高发病率为 1 14 /10万 ;此间有 5次钩体病局部爆发流行 ,病例主要分布在鲁南、鲁中地区 ,农民和农村学生发病较多 ,集中 7～ 9月份发病 ,8月为发病高峰 ,占 80 % ;临床病例以流感伤寒为主 ,流行形式为雨水型 ;猪是主要传染源 ;流行菌群多是波摩那群 ,在局部爆发点的猪肾、猪尿及疫水培养出病原体 3 5株 ,可确定菌群的 19株分属于波摩那型 18株 ,犬型 1株。局爆发点的病人、猪血清检测分属 5个血清群 ,优势血清群为波摩那群 ,占 76 16%。健康人群抗体水平GMT部为 11 2 7。结论 在 18a监测中鲁南、鲁中地区发病人数占全省发病人数的 89 91% ,几乎每年发病率都较高 ,是山东的重点防治区域。现症病人及流行疫点的猪感染血清菌群单纯 ,符合山东省主要流行菌型 ;发病率与传染源的数量和带菌率、人群免疫水平、降雨量密切相关。对历史老疫区特别是鲁南、鲁中局部爆发疫点应加强监测 ,积极采取管猪改圈 。

儿童钩体病后发脑动脉炎流行病学调查分析

本文对１５５例１２岁以下儿童钩端螺旋体病后发脑动脉炎病例进行调查分析，结果显示患儿临床出现偏瘫、失语等症状并以７～９岁年龄组患儿最多，发病时间以每年１１月至次年３月较多见，占７３５４％（１１４／１５５）。血清学试验（显凝试验）证实为钩体感染，共有黄疸出血、爪哇、犬、拜伦、秋季、澳洲、波摩那和七日热８个血清群的钩体可引起本病的发生，其中以波摩那群为多见，占７６１３％（１１８／１５５）。单纯用扩张血管药物治疗效果不好。经确诊后，用足量的青霉素治疗效果较好，患儿可基本痊愈。

鲁南地区首次 Q 热和斑点热抗体检测报告

在鲁南地区首次进行了Ｑ热和斑点热血清抗体的检测。结果表明，人间Ｑ热和斑点热的感染率分别为１．６９％和１６．３８％。畜间Ｑ热的感染率为山羊３７．５％，犬５．８９％，牛和驴均为０；斑点热的感染率则为牛５７．１４％，驴５３．５７％，山羊和犬为０。通过血清学证实了该地区人、畜间Ｑ热和斑点热的存在。

山东省陵县Q热和斑点热的血清流行病学调查

Q热和斑点热是两种重要的立克次体病,在世界上分布相当广泛,历史上曾出现过大流行,给人类造成过重大危害。为了解Q热和斑点热在山东省的感染情况,1995年在鲁北陵县首次进行了这两种疾病的血清流行病学调查,结果报告如下。

山东省1995～2002年钩端螺旋体病重点疫区部分猪和健康人血清学监测

[目的]了解山东省钩体病重点疫区主要传染源猪的感染情况和健康人群血清抗体水平,以便采取更有针对性的防治措施。[方法]采用显微镜凝集试验(MAT),选择鲁南新疫区(莒县、苍山县)、鲁西南老疫区(郓城县、菏泽市牡丹区、嘉祥县)、鲁东老疫区(栖霞市)部分猪和健康人进行血清学检测。[结果]检测猪血清1010份,MAT阳性124份,阳性率为12.28%。其中,鲁南新疫区阳性率为22.27%,鲁西南、鲁东的老疫区分别为4.93%、5.94%。检测健康人群血清1522份,MAT阳性159份,阳性率为10.45%,几何平均滴度(GMT)为11.24。[结论]山东省健康人群钩体免疫抗体水平较低,而猪的感染率仍较高,特别是鲁南新疫区。对钩体病重点疫区应采取综合防治措施。