整合分析中国献血者人细小病毒B19 DNA的流行特征

目的:评估我国献血者B19 DNA的阳性率,并明确我国献血者B19分子流行特征,为国内各地区核酸筛查提供初步参考依据。方法:计算机检索PubMed、CNKI和万方数据库,两名研究者独立检索,时限为2000年1月至2022年12月,以中国献血者“人细小病毒B19 DNA”为检索词,使用Stata14.0软件进行Meta分析。结果:共纳入了16个研究,包括了32622名献血者,B19 DNA合并阳性率为1.4%(95%CI[0.8%~2.2%])。西南地区献血者B19 DNA合并阳性率最低,为0.4%(95%CI[0~1.3%]),华东地区和中南地区献血者B19 DNA阳性率最高,分别为2.4%(95%CI[0.3%~6.6%])和2.3%(95%CI[0.9%~4.3%]),东北地区献血者B19 DNA阳性率尚无相关调查研究文献。系统进化树分析显示,中国内地献血者的B19主要是基因型1。结论:中国献血者B19 DNA的合并阳性率>1%,存在输血传染B19的风险,建议重点对中国华东和中南地区献血者的血液进行筛查,并明确这两个地区基因型,以降低B19经输血传播的风险。

2016—2022年我国17家血液中心献血者HBV感染相关标记物检测情况分析

目的探讨我国17家省会城市血液中心(简称血液中心)献血者HBV的感染情况,为安全献血者管理提供参考。方法选取17家血液中心,收集2016—2022年献血者HBsAg和乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)检测结果,比较初次献血者和重复献血者HBsAg不合格率及年度变化趋势、初次献血者和重复献血者HBsAg不合格率差异、HBsAg合格献血者HBV DNA单独不合格(HBsAg-/HBV DNA+)情况和献血者总体HBV不合格率,比较不同地区血液中心献血者总体HBV不合格率。结果2016—2022年17家血液中心初次献血者HBsAg不合格率为59.60‱(1.60‱~142.85‱),重复献血者HBsAg不合格率为16.67‱(0.60‱~48.68‱),HBsAg合格献血者中HBV DNA单独不合格率为6.69‱(1.30‱~17.57‱),献血者总体HBV不合格率为47.06‱(3.46‱~103.78‱),上述4项不合格率的比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。东部地区献血者HBV总体不合格率(34.04‱)低于中部地区(50.42‱)和西部地区(52.07‱),3个地区献血者间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论17个省会城市初次献血者和重复献血者的HBsAg不合格率随时间整体呈下降趋势,重复献血者是相对安全的献血人群,HBV DNA检测可进一步降低HBV经血传播的风险。献血人群HBV感染分布具有地域性,东部地区献血者HBV不合格率明显低于中西部地区,与一般人群HBV流行分布情况一致。

2018-2022年我国18家省级血液中心献血者HCV检测结果分析

目的分析我国省级血液中心服务区域献血人群丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)检测数据。方法对我国东中西部不同地区的18家省级血液中心,2018—2022年初次献血和重复献血者抗-HCV和HCV RNA检测数据收集整理,分析献血者中抗-HCV ELISA和抗-HCV ELISA阴性中HCV RNA检测不合格率与年度、血液中心以及初次献血和重复献血者之间的关系。结果2018年—2022年HCV总不合格率从24.61/万逐年减少至15.17/万(χ^(2)=717.71,P<0.01),西部地区为25.72/万最高,东部11.96/万最低(χ^(2)=2382.54,P<0.01);初次献血者抗-HCV ELISA不合格率(30.50/万)比重复献血者(7.42/万)高(χ^(2)=9694.63,P<0.01);各血液中心抗-HCV ELISA阴性中HCV-RNA单独不合格率范围为0~7.54/万。结论我国18家血液中心服务区域献血者的HCV检测不合格率呈逐年降低趋势;HCV检测不合格率存在明显的地域分布差异;与初次献血者相比,重复献血者为HCV检测不合格低危人群;HCV-RNA检测在血液安全方面发挥重要作用。

某地区无偿献血者ALT检测结果分析

目的分析兰州地区无偿献血者ALT检测结果，探讨ALT不合格率上升的原因，降低血液报废率。方法收集2009～2012年的献血者资料及其血液检测5项指标的结果，分析ALT不合格率与年龄、性别、季节等因素的关系。结果兰州地区无偿献血人群ALT不合格率逐年上升，有明显的年龄、性别和季节性差异。结论根据年龄、性别建立兰州地区献血人群的ALT活性参考范围．加强冬、夏季ALT的快速初筛，减少血液浪费。

基于熵权-TOPSIS法的14家血站实验室资源配置综合评价分析

目的通过调查甘肃省14家血站血液检测实验室资源配置现状,探讨基础条件差异对实验室综合检测能力的影响,促进甘肃地区血站实验室血液筛查能力同质化、规范化建设,提高血液的安全性和有效性。方法构建实验室资源配置评价指标体系并设计调查问卷,收集14家血站实验室人力资源、基础设施和关键设备的相关数据,应用熵权-TOPSIS法对14家实验室资源配置进行综合评价及排名。结果甘肃地区14家血站血液检测实验室资源配置综合评价排名前3位的是实验室A、B、I,排最后3位的是G、M、J。总体来看,主要问题一是人力资源结构不合理,年龄方面大多数实验室未建立职工老中青的年龄梯队;学历方面除A实验室,其他实验室均无研究生学历人员;职称方面大多数实验室未建立以中级职称人员为核心的检验队伍。二是基础设施不配套,7家实验室面积偏小,不能满足现代化实验室检测的需求;8家血站没有核酸备用实验室,也未与其他血站建立互为备用实验室关系。三是关键设备配置不足,5家实验室无全自动血型仪,5家实验室只有一套酶免检测系统,3家实验室的关键设备均无备用设备,如果发生设备故障不能及时修复,将影响结果的发布。结论甘肃地区14家血站血液检测实验室人力资源、基础设施和关键设备均存在明显差异,将对实验室检测能力及后续发展产生较大影响,建议各级政府和卫生行政部门依据不同血站的采血量按需优化实验室资源配置的投入,通过政策调整逐步缩小不同地区之间资源分布的差异,提高实验室自动化程度,优化人员结构,全面建设优质高效的血站血液检测实验室,保障临床用血安全。

血筛ALT临界值变更对血液安全影响的分析

目的分析兰州地区血液筛查ALT临界值变更前后检测结果的变化情况,探讨ALT临界值变更对血液安全的影响。方法收集2010-2013年无偿献血者的血液检测结果,分析ALT临界值变更前后不合格率的变化情况和ALT异常与肝炎标志物的相关性。结果 ALT临界值变更后,单项ALT不合格率明显下降;ALT数值介于(40-50)U/L的标本经核酸检测,HBV DNA和HCV RNA结果均为阴性;ALT合格组与不合格组中肝炎标志物阳性率的差异无统计学意义。结论 HBV/HCV的感染不是献血者ALT异常的主要原因;结合核酸检测结果,本次血筛ALT临界值的变更不会对血液安全造成影响,同时降低了血液的报废率。

兰州地区无偿献血人群HIV感染状况分析

目的了解兰州地区无偿献血者艾滋病病毒（HIV）感染情况，有针对性地采取措施，保障血液安全。方法采用2种不同厂家的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂，对献血者标本进行抗-HIV筛查，初筛阳性标本用免疫印迹法（WB）进行确证试验。结果兰州地区2009年1月至2012年12月抗-HIV确证阳性32例，平均感染率为0．15‰；男性高于女性；年龄以18～35岁为主；涉及多个行业；学生及高学历人群的感染率有升高趋势。抗-HTV初筛与确证试验的结果符合率较低；随着S／CO值的增高，与确证试验的阳性符合率也随之升高。结论兰州地区无偿献血者抗-HIV阳性率有逐年增高及年轻化的趋势，应加强献血者献血前咨询、筛查及艾滋病防治知识宣传。通过调整检测试剂及方法，提高抗-HIV初筛与确证试验的结果符合率。探讨献血者的召回及归队策略，在保证血液安全的前提下，减少因假阳性结果造成的献血员流失，稳定无偿献血者队伍。

天蚕素A-蛙皮素杂合肽突变体的构建、表达及其抗菌活性

目的构建天蚕素A(1～8)-蛙皮素(1～12)杂合基因抗菌肽(CA-MA杂合肽)突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行重组表达质粒pGEX-4T-1-CA-MA的PCR扩增,使CA-MA杂合肽第16位密码子由AGT突变为TGG。将扩增片段自身连接,构建CA-MA杂合肽突变重组表达质粒pGEX-4T-1-W16-CA-MA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达突变体蛋白W16-CA-MA,并对表达产物进行纯化。分离GST融合蛋白后,进行抗菌活性检测。结果重组突变表达质粒DNA测序结果表明,在预期位点发生了突变;突变蛋白在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的18%;纯化后蛋白纯度可达75%以上,并具有一定的抗菌活性。结论已成功获得了具有抗菌活性的杂合肽突变体W16-CA-MA。

兰州地区无偿献血人群分布调查

目的了解兰州地区近4年无偿献血人群的结构,为建立相应的献血招募对策、扩大无偿献血者队伍提供科学的参考依据。方法对2008～2011年无偿献血者213 667人次的人群资料进行统计分析。结果兰州地区无偿献血人群的主力是18～30岁的男性汉族大学生,医务人员、公务员、教师献血比例低。结论兰州地区无偿献血主力人群在性别、年龄、文化程度、职业和民族方面都有显著特点,在制定献血招募策略时,应根据不同的目标人群制定不同的招募对策。

兰州地区无偿献血人群HTLV感染情况分析

目的了解人T淋巴细胞病毒(HTLV-Ⅰ/Ⅱ)在兰州地区无偿献血人群中的感染情况状况,分析本地区流行趋势,为卫生行政部门制定输血相关政策和法规提供科学参考依据,防止经输血传播疾病。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)随机抽取2017年本地区无偿献血者14 686人进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ病毒抗体筛查,反应性标本送检至卫生部临检中心做补充实验鉴定。结果初筛检出6例HTLV-Ⅰ/Ⅱ反应性标本(0.041%),经确证1例阳性(0.007%),所有阳性者累计献血1次,献血方式5名个人自愿,1名团体献血。结论本地区献血人群中存在HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染者,对献血人群更大规模的HTLV-Ⅰ/Ⅱ筛查,实现献血者信息资源共享化,有效预防本地区输血传播HTLV。

血站型去白细胞悬浮红细胞保存效期的研究

目的观察血站型去白细胞悬浮红细胞(以下称"去白红细胞"),在不同的保存时间段内细胞活性和功能的变化,为确定去白红细胞的保存效期,提供数据和参考依据。方法用一次性去白细胞四联血袋采集全血,按标准操作规程离心、分浆后,红细胞悬浮于MAP液中,并通过去白细胞滤器,制成去白红细胞。提取400 mL全血制备的去白红细胞21袋,每袋各留取样品管6管,置4℃冰箱保存。用未过滤的悬浮红细胞做对照。于采血后d1、d7、d14、d21、d28、d35,测2组红细胞ATP和2,3-DPG值,并做统计学分析。结果去白红细胞与悬浮红细胞各对应天数的ATP含量相比,均无统计学差异。组内比较:2组细胞各自d1和d35比较,去白红检验值为2 454.17±217.98,1 275.52±126.86;悬浮红检验值为2 270.83±220.99,1 190.76±86.95(P<0.05)。2组红细胞2,3-DPG含量,除d21外,其余各时间段比较均无差异。组内d1和d35比较,2组均无统计学差异。结论去白红细胞在MAP液中保存至d35,其ATP含量(51.97%)与悬浮红细胞(52.44%)相似,均<70%。2,3-DPG含量优于悬浮红细胞。综合考虑其脆性、形态和游离血红蛋白变化等结果 ,我们推荐去白红细胞保存效期为28 d。

胶体金法、ELISA法检测HBsAg在献血者初筛中的作用

目的:评价胶体金免疫层析法、酶联免疫法在献血者初筛检测中HBsAg阳性的效果,指导采集安全的血液,减少血液资源的浪费。方法:将经过金标法初筛后献血的所有血液样本,用两种ELISA试剂(一种为进口试剂、一种为国产试剂)检测,对有反应性或在灰区(S/CO值≥0.5)的标本,确定为阳性样本共152份,再次用金标法检测。结果:再次经金标试纸条检测,阳性标本为35份,符合率为23%。结论:胶体金法与ELISA法在HBsAg的检测上有一定的符合性,说明ELISA的特异性较高,敏感性强,操作方便;在献血者检测HBsAg阳性确认中使用最为广泛和经典方法,胶体金法在献血者献血前的初筛中起到第一道屏障作用。

抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达

目的构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的蛋白。方法采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定。结果构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在。结论已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础。

悬浮红细胞保存效期的实验研究

目的观察用国产血站型去白细胞滤器过滤后的去白细胞悬浮红细胞(以下简称:去白红细胞),在不同的保存时间段内细胞活性和功能的变化;结合相关质量研究,确定本血液中心去白红细胞的保存效期,并为国家和行业制定标准提供参考依据。方法用一次性去白细胞塑料血袋(四联袋)采集全血,按标准操作规程离心、分浆、红细胞悬浮于MAP液中,并通过去白细胞滤器,制成去白红细胞。提取21袋去白红细胞,每袋分出6个样品,置4℃冰箱保存。用未过滤的悬浮红细胞做对照。

BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体诱导SGC-7901细胞凋亡

目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2构建成功。MTT法检测显示pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并呈时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡比例升高(P<0.01)。结论成功构建反义双靶区重组载体pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡。

血站实验室抗-HIV检测室内质控的回顾性分析

目前，我国艾滋病病毒（HIV）感染者已超过84万，HIV感染已进人快速增长期。规范的检测显得非常重要。输血是HIV传播的重要途径，防止HIV经血液传播是采供血机构面临的艰巨任务。为了使输血传播艾滋病的危险降到最低限度，有必要提高采供血机构对抗．HIV的检测能力。

基于血站实验室质量指标评价的抗-HCV检测分析

目的评价本实验室抗-HCV检测能力,探讨可能影响抗-HCV检测的因素,为评估实验室能力提供数据和依据。方法统计2019-2020年抗-HCV需进行重复检测标本数量(IR)、重复检测为反应性标本数量(RR)和试剂使用率等指标,与全国同组试剂比较分析。结果抗-HCV检测不合格率平均值为0.25%(最低为0.19%,33/17 774,最高为0.37%,44/11 940);试剂1与试剂2的复检率差异有统计学意义(P<0.05);试剂1与试剂2的复检符合率经过比较差异无统计学意义(P>0.05);试剂1与试剂2的复检符合率均呈现缓慢上升趋势;试剂1与试剂2的单试剂不合格率差异有统计学意义(P<0.05);试剂使用率与全国同组试剂的平均水平基本持平。结论本实验室的抗-HCV检测指标相对稳定,但人员培训、设备性能、环境等其他因素也会对实验室的检测情况产生影响,可推行各要素的精细化管理,利用血站血液检测实验室质量指标的室间质评回报报告,加强分析,持续改进,进一步提高本实验室的抗-HCV检测能力。

丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达

目的:克隆和表达Alloferon1基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Alloferon1全基因的基础上,将Alloferon1基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构建的Alloferon1基因2串联体经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同.Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1载体后,重组菌经37℃诱导4h,SDS-PAGE分析结果显示,该串联体得到较高水平的表达.结论:Alloferon1基因2串联体的构建与表达均获得了成功.

1例机采血小板重度献血反应的处理及预防措施

在多年的采血实践中，机采血小板采集过程中发生献血反应较常见。笔者就甘肃省红十字血液中心用Amicus血细胞分离机采集1例女性献血者发生重度献血反应的原因进行分析，并实施针对性处理，现报告如下。

兰州地区无偿献血者梅毒检测双阳性结果分析

目的对兰州地区近年来无偿献血者梅毒抗体检测的高值双阳性结果进行统计分析,从而为血源招募提供依据。方法对该地区2011—2014年6月无偿献血者梅毒检测结果进行统计分析,并对高值双阳性结果按照职业、学历、性别进行统计分析。结果 165 715位无偿献血者梅毒抗体阳性检出率为0.70%,梅毒检测双阳性各项目之间差异无显著性。梅毒高值双阳性主要以农民居多、低学历者居多,且男性高于女性。结论应加大梅毒防治知识宣传力度,关注经血传播疾病(TTD),降低合并感染风险,在招募献血者时应考虑该地区人群分布特点,保障临床输血安全。