基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS整合网络药理学研究衢枳壳降糖的物质基础及作用机制

目的以入血成分为研究对象,基于网络药理学探究衢枳壳对糖尿病起效的物质基础及作用机制。方法采用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(high-performance liquid chromatography tandem quadrupole-electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,HPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS)对衢枳壳入血成分进行鉴定,在此基础上通过Swiss Target Prediction与SuperPred数据库预测入血成分作用靶点,同时在OMIM,GeneCards等数据库获取糖尿病靶点。采用Cytoscape 3.9.1绘制中药衢枳壳“活性成分-靶点-疾病”网络关系图,利用String数据分析平台进行蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析,筛选关键靶点。通过DAVID数据库对关键靶点进行基因本体功能(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。应用Autodock 1.5.7软件进行分子对接验证。结果共鉴定衢枳壳入血成分20个,筛选出潜在靶点170个,核心靶点32个。GO功能富集和KEGG信号通路分析结果显示缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1信号通路、晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)-晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)信号通路、表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路、癌症蛋白聚糖通路等为衢枳壳降糖的关键通路,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAC serine/threonine-protein kinase,AKT)1、白蛋白(albumin,ALB)、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigenp 53,TP53)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、EGFR为其中关键靶点,且衢枳壳中5个活性成分与核心靶点经分子对接后的结合活性较好。结论衢枳壳中的芦丁、新橙皮苷、橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素等可能为衢枳壳降糖的物质基础,可能是通过调控HIF-1、AGE-RAGE、EGFR等信号通路及AKT1、ALB、TP53等核心基因发挥降糖作用。

不同产地衢枳壳药材质量的熵权TOPSIS法综合评价

目的:综合评价不同产地衢枳壳药材的质量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定衢枳壳药材中圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、新橙皮苷的含量;采用紫外-可见分光光度法测定衢枳壳药材中总黄酮的含量;采用2020年版《中国药典》(四部)附录2204挥发油测定法甲法测定衢枳壳药材中挥发油的含量。以14批不同产地衢枳壳药材中上述6个黄酮类成分、总黄酮及挥发油的含量为指标,采用熵权TOPSIS法综合评价衢枳壳药材的整体质量。结果:14批不同产地衢枳壳药材中圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、新橙皮苷、总黄酮的含量分别为2.530 4~2.915 1、4.273 7~5.313 8、34.715 8~36.695 8、3.061 1~4.456 0、4.560 9~5.773 5、45.153 6~47.019 7、145.480 1~157.022 5 mg/g,挥发油的含量为0.034~0.040 mL/g。熵权TOPSIS法分析结果显示,上述各指标权重分别为0.109 0、0.140 7、0.148 3、0.125 5、0.067 0、0.139 0、0.124 2、0.146 3;14批不同产地衢枳壳药材的平均相对贴近度分别为0.809 0、0.711 9、0.807 0、0.681 5、0.447 0、0.363 1、0.439 8、0.349 6、0.449 6、0.376 5、0.486 6、0.458 7、0.282 0、0.167 0。质量排名前4位的衢枳壳药材分别为常山县大宝山、常山县太公山、常山县鹭山和常山县小翠山产样品。结论:采用熵权TOPSIS法可对衢枳壳药材质量进行综合评价;常山县所产衢枳壳药材质量较优。

HPLC法同时测定不同采集地衢枳壳中12种黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定衢枳壳中12种黄酮类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Extend C18,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为330 nm,进样量为10μL。测定不同采集地的10批衢枳壳样品中12种黄酮类成分(圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、新橙皮苷、水合橙皮内酯、木犀草素、橙皮内酯、川陈皮素、桔皮素、橙皮油内酯)的含量。结果:圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、新橙皮苷、水合橙皮内酯、木犀草素、橙皮内酯、川陈皮素、桔皮素、橙皮油内酯检测的质量浓度线性范围分别为1.65~16.51、4.50~45.02、35.41~354.12、4.11~41.12、2.29~22.86、34.96~349.56、1.42~14.15、1.50~15.04、1.83~18.28、1.51~15.08、1.61~16.12、1.28~12.84μg/mL(r均大于0.999 7);检测限分别为0.165 1、0.450 2、3.541 2、0.411 2、0.228 6、3.495 6、0.141 5、0.150 4、0.182 8、0.150 8、0.161 2、0.128 4μg/mL;定量限分别为0.547 8、1.487 4、11.663 3、1.360 3、0.758 3、11.594 9、0.466 3、0.497 1、0.601 2、0.499 9、0.532 3、0.424 6μg/mL;精密度(n=6)、重复性(n=6)、稳定性(24 h,n=7)试验的RSD均小于3%;平均加样回收率分别为99.50%、99.61%、98.18%、98.85%、98.48%、98.50%、98.25%、99.91%、103.13%、98.82%、98.44%、100.29%(RSD=1.49%~2.38%,n=6)。10批不同采集地衢枳壳样品中,上述12个成分的含量分别为1.995 5~2.648 8、4.317 7~5.005 1、33.215 5~34.054 6、3.140 4~3.471 5、3.221 2~3.748 8、42.746 6~44.026 6、0.202 7~0.239 4、0.191 2~0.208 8、0.080 3~0.097 9、0.291 9~0.307 1、0.119 9~0.149 1、0.082 7~0.089 8 mg/g。结论:建立的含量测定方法准确、可靠、简便、高效,可用于同时测定衢枳壳中12个黄酮类成分的含量,并为衢枳壳质量控制标准的建立提供了参考依据。

当归、川芎及其药对的超临界提取物的GC-MS成分分析

采用气相色谱-质谱(GC-MS)和NIST谱库分析,鉴定了当归、川芎及其药对的超临界CO2提取物中的主要挥发性成分,并做了相关比较。结果表明:当归、川芎的超临界提取物中最主要的挥发油成分均为内酯类化合物,但川芎中挥发油成分的种类和含量明显多于当归。混合的超临界提取物与分别提取物的成分无明显差异,但在成分的含量上有一定的提高。

基于SIECI-CDIO理念将PBL教学法应用于中药学专业实训教学的探索与实践

结合衢州职业技术学院中药学专业实训教学现状,基于SIECI-CDIO理念将PBL教学法应用于中药学专业实训教学,有助于提升学生实践能力,提高实践教学效果。

中草药及植物来源的黄酮类成分超临界流体萃取的研究进展

通过查阅国内外相关文献，本文总结了中草药及植物来源的黄酮类成分超临界流体萃取的研究进展。以便于为黄酮类化合物的研究、开发和利用提供参考，为超临界流体萃取在中药和天然产物中的应用提供更多的借鉴。

疫情背景下BOPPPS教学模式在中药鉴定技术线上教学中的应用

自2020年1月份以来,新冠肺炎疫情的蔓延,影响到我们学习、工作和生活的各个方面。1月27日,教育部发出通知,要求各地大中小学校推迟春季开学时间,具体开学时间等待各地教育行政部门的通知,并于1月29日发出倡议:利用网络平台开展教学,做到“停课不停学”[1-2]。而开展线上教学如何能吸引学生的注意力,提高教学效果呢?如何让疫情期间的在线教学更有效地发挥作用是急需解决的问题。有没有一种教学模式可以高效地组织起线上的课堂教学活动,并能让学生参与进来呢?本文立足于疫情背景下中药鉴定技术线上教学过程中采用BOPPPS教学模式的应用进行分析。

基于供应链思路的药品经营与管理专业“四位一体”校企合作人才培养模式的实证分析

校企合作是高职院校培养高素质、高技能人才的一种有效途径,是深化产学研合作教育的重要载体,是提高人才培养工作水平的重要内容。结合所在高职院校实行的校企合作人才培养情况,从实证研究的角度研究供应链思路下家庭、学校、企业、政府四方在校企合作中的角色与作用,可以采用"四位一体"的校企合作人才培养方案。家庭、学校、企业、政府四方在高职教育校企合作人才培养中缺一不可、相辅相成,其中企业顶岗安排情况和政府协调情况尤其值得关注,并最大地发挥其正能量。

基于调研优化药品经营与管理的专业基础课模块

结合所在高职院校实行的校企合作人才培养模式,基于已毕业学生及其就业企业、紧密型校企合作企业的调研、学校专业建设委员会的讨论和审核,以加权结合实证的研究角度简要分析了学生及其就业企业、紧密型校企合作企业所得的基础课程调研结果,充分参考学校专业建设委员会讨论和审核的意见,明确各门专业基础课程在企业工作中的作用,从而基于校企合作优化了药品经营与管理的专业基础课模块。

基于SIECI-CDIO模式及GMP理念的专业建设探索

衢州职业技术学院自2003年开设药品经营与管理专业以来,围绕高职教育的人才培养目标,结合CDIO理念构建专业实践能力培养体系,探索形成了基于“学校、行业、企业利益共同体”(School-Industry-Enterprise Community of Interests,简称SIECI)的SIECI-CDIO校企合作模式,并依据专业建设与药品生产和质量管理的GMP理念对专业建设进行系统推进,较好地满足了行业、企业、学生三方需求。

GSP软件模拟教学的探索与实践

GSP课程是药品经营与管理专业的职业能力核心课程,如何改变传统枯燥的理论教学,加强实践教学是专业老师一直致力研究的方向。实践教学是高职高专教育的特色,在GSP课程教学中以项目为导向,将教学软件应用于GSP模拟实训,解决了课程教学与企业实践脱节的问题。这种教学方式让不同性格,不同能力的学生通过分别担任自己喜欢的角色来模拟GSP流程,提高了学生的学习兴趣,节省了时间,增强了学习效果。从实训的过程和考核结果来看,以后实训过程的组织形式和评价体系仍需进一步完善。

“竞赛式实战实训”在高职教育FPPC模式中的应用研究

衢州职业技术学院医学院将"竞赛式实战实训"教学模式在高职教育"以职业岗位能力为主构建课程体系和进行课程开发的人才培养模式"(Focuson Professional Position Competence,FPPC)中进行探索应用。结果表明,"竞赛式实战实训"教学模式在学生职业岗位能力的培养和训练方面得到进一步加强,学生学习的自觉性、能动性和创造性及自学能力得到了提高,收到了较好的教学效果。"竞赛式实战实训"教学模式为高等职业教育FPPC模式的实践提供了一种行之有效的新型教学模式。

苏木水提物抗蛇毒磷脂酶A_2活性研究

中药苏木(Sappan Lignum)来源于植物苏木(Caesalpinia sappan L.)的干燥心材,具有止血抗炎等功效。采用琼脂糖平板法研究不同浓度的苏木水提物(0.03g/ml,0.06g/ml,0.09g/ml,0.12g/ml,0.15g/ml)对蛇毒sPLA_2水解活性的抑制作用,测量透明圈和孔的直径,根据酶活标准曲线计算其抑制率。结果表明0.15g/ml苏木水提物对五步蛇毒sPLA_2水解活性有抑制作用。

焦亚硫酸钠不同处理方式对白芍中SO_2残留及芍药苷含量的影响

目的:考察焦亚硫酸钠闷润和浸泡两种不同处理方式对白芍中SO2残留及芍药苷含量的影响。方法:采用不同量的焦亚硫酸钠分别对白芍饮片进行闷润或浸泡处理48h,按照2010版药典第一增补本的二氧化硫残留量测定法(附录IXU)测定SO2残留量,HPLC法测定芍药苷含量,分析焦亚硫酸钠不同处理方式对白芍中SO2残留及芍药苷含量的影响。结果:白芍经焦亚硫酸钠闷润或浸泡处理后,对SO2残留量及芍药苷含量均有较大的影响。结论:白芍经焦亚硫酸钠闷润或浸泡处理后,SO2残留量增加,芍药苷含量降低,需加强对焦亚硫酸钠处理的中药材的监管和检验。

基于PAC体系下高职药品经营与管理专业学生协同学习的研究

PAC教学体系下的协同学习模式,把团队协同学习融入课内外教学中,更能激发和培养学生学习的主观能动性、应用应变能力和创新能力,能更有效地提升学生的职业综合能力,使他们高效地完成课程任务、实训项目和竞赛项目。就高职药品经营与管理专业在协同学习学习体系和考核体系的构建方面进行了探讨和分析,为提升高职教育在协同学习模式的实践提供借鉴。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定胡柚中9种功能性成分

建立一种超高效液相色谱-串联质谱同时检测胡柚中9种功能性成分的快速检测方法。将胡柚样品分为果皮和果肉2部分,经甲醇-水充分提取处理后,采用Accucore XL C18柱(150 mm×4 mm,4.6μm)分离,以甲醇-0.15%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源正负离子切换多反应监测模式串联质谱下检测,外标法定量。结果表明:9种功能性成分在较宽的质量浓度范围内线性良好,决定系数均大于0.997,加标回收率在83.6%~116.2%,相对标准偏差在1.58%~8.33%(n=6),说明所建立的方法快速、灵敏、准确,适用于胡柚中9种功能性成分的定性和定量检测。

铁皮石斛的树栽技术要点及主要成分含量的研究

以铁皮石斛不同附生母树的树栽工艺入手,对其栽培技术要点展开深入的探究和分析,并对主要成分含量进行测定,旨在探讨铁皮石斛不同附生母树对主要成分含量影响,推动铁皮石斛仿野生栽培产业的发展。

三叶青中药材施肥对比试验初报

在衢州市衢江区开展三叶青中药材栽培管理施肥技术对比试验,采用7种处理方式,每个处理方式重复3次,共21个试验区,每个试验区为1组,随机排列,种植三叶青176袋,收获后考察三叶青块根竖径、横径、个数、鲜重、干重、烂根个数、藤蔓鲜重和须根鲜重等指标,并测算使用不同施肥方法的产量和经济效益。结果表明,种植袋配土时每袋加入1 kg草木灰作基肥,追肥使用1 kg草木灰这种新的施肥方法能提升三叶青的产量和品质,减少烂根,降低生产成本,提高经济效益,可小规模示范推广。

2008中国医疗界十大事件

1.手足口病事件；2.人工心脏移植事件；江西免疫球蛋白事件；刘翔的右脚与姚明的左脚；医疗器械天价索赔事件……

衢枳壳黄酮类成分调节胃肠动力的谱效关系研究

目的 研究衢枳壳甲醇提取物的 HPLC 指纹图谱及其调节胃肠动力的谱效关系。方法 采用小肠炭末推进模型和离体回肠收缩模型得到调节胃肠动力的药效结果,经 LC-MS 分析并指认衢枳壳甲醇提取物中的各色谱峰,运用多元回归分析(multiple regression analysis,MRA)和双变量相关分析(bivariate correlation analysis,BCA),将衢枳壳甲醇提取物的药效数据与指纹图谱共有峰的相对峰面积相关联,分析谱效相关性。结果 采用 LC-MS 指认出 12 个色谱峰,经 MRA 和BCA,得出谱效方程(Y_(1)=52.379–0.255X_(2)+0.335X_(3)–4.499X_(4)+4.308X_(5)+0.750X_(6),R~2=0.959;Y_(2)=0.250+0.013 5X_(2)+0.023 0X_(3)+0.076 9X_(6),R~2=0.921),其中 5 个是相关峰,2 个色谱峰呈现极显著的相关性。采用不同样品代入谱效方程做拟合验证后,该拟合方程的预测值与实测值的拟合误差均<3%。结论 衢枳壳甲醇提取物中芸香柚皮苷(峰 2)、柚皮苷(峰 3)、柚皮素(峰4)、橙皮苷(峰 5)、新橙皮苷(峰 6)可能是衢枳壳中调节胃肠动力的效应物质,其中柚皮苷(峰 3)和新橙皮苷(峰 6)呈现极显著的相关性,与调节胃肠动力密切相关。