菝葜总黄酮对慢性盆腔炎大鼠的保护作用研究

目的探讨菝葜总黄酮对慢性盆腔炎(CPID)模型大鼠的治疗作用。方法建立CPID大鼠模型(苯酚胶浆化学烧伤法),将造模成功的SD大鼠按随机数字表法分为模型对照组、菝葜总黄酮高[32.4 g/(kg·d)]、中[16.2 g/(kg·d)]、低[8.1 g/(kg·d)]剂量组,金刚藤胶囊组,地塞米松组,各10只。假手术处理大鼠按随机数字表法分为假手术组与本底对照组,各10只。另外设立空白对照组(10只)不作任何处理。给药14 d后检测各组大鼠血液流变学及血常规指标;观察大鼠左右侧子宫的形态变化,计算子宫肿胀率及肿胀抑制率,苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠子宫病理改变。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠子宫组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-4、IL-6和IL-10的表达。结果与模型对照组及金刚藤胶囊组比较,菝葜总黄酮各剂量组均能显著降低CPID模型大鼠血液中白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞数及各项血液流变学指标,降低大鼠子宫肿胀率,抑制大鼠子宫组织IL-1β及IL-6的表达,促进IL-4及IL-10的表达,并能显著减轻子宫充血、水肿症状,减少炎症细胞浸润,减轻腺体周围纤维结缔组织增生,改善子宫内膜增生及纤维化,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论菝葜总黄酮能综合改善CPID模型大鼠症状,增强其血液流动性,改善局部血液循环,并同时抑制CPID模型大鼠子宫炎症反应及子宫纤维化增生。

HPLC法测定菝葜药材中黄酮类成分的含量

目的:测定菝葜中黄酮类成分落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷和异黄杞苷的含量。方法:采用Hitachi High-Tech C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为303 nm;柱温为30℃;流速为1.0 mL/min。结果:落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷和异黄杞苷分别在3.0037~84.1036μg/mL(r=0.9999)、1.2458~34.8810μg/mL(r=0.9999)、11.7687~329.5242μg/mL(r=0.9999)、2.0188~56.5250μg/mL(r=0.9999)的范围内与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率分别为102.40%、98.90%、96.25%和99.16%,RSD分别为2.26%、3.52%、2.37%、2.39%。结论:本研究建立的黄酮类成分含量测定方法简单、准确,适用于菝葜中落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷和异黄杞苷的含量测定。

UFLC-Q-TOF-MS/MS结合指纹图谱定性评价菝葜(金刚藤)药材质量的研究

目的:构建菝葜(金刚藤)的指纹图谱,并对菝葜药材进行聚类分析。方法:采用Ultimate 3000 DGLC高效液相色谱仪,流动相:乙腈-0.1%磷酸,流速:1.0 ml/min,进样:10μL,柱温:30℃,检测波长:303 nm,色谱柱:Hitachi High-Tech C18(4.6 mm×250 mm,5μm)。结合超快速高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Triple TOF-MS/MS)对不同产地来源的菝葜药材共有峰进行指证。通过相似度评价和聚类分析对20批次菝葜药材指纹图谱进行分析。结果:建立了分离度、稳定性、重复性均良好的菝葜药材HPLC指纹图谱,指认了19个共有峰,确证了其中17个化学成分。菝葜药材化学成分主要是黄酮类、有机酸类和皂苷类。20批次菝葜药材相似度较小(<0.9),但所有样品样品可分为3类,其中黄酮类化合物成分含量较高的被聚为一类,为云南产地的药材。结论:该方法操作简单、重复性好、准确可靠,更有效地控制菝葜药材质量。