八肽胆囊收缩素抗内毒素休克的实验研究

本实验观察了八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对大鼠注入内毒素（８ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．ｉｖ）后血压、血液有形成分和脏器病理形态的影响，以及对醋酸铅致敏大鼠注入内毒素（１μｇ／１００ｇｂ．ｗ．ｉｖ）后２４ｈ死亡率的影响。结果表明，ＣＣＫ－８可使内毒素休克大鼠的血压明显回升（Ｐ＜０．０５），减轻血液浓缩和血小板、白细胞增多等血液有形成分的变化及主要脏器的损伤，降低２４ｈ死亡率。上述结果提示：ＣＣＫ－８确有逆转内毒素休克的作用，内毒素休克时内源性ＣＣＫ－８的释放，可能具有重要的保护作用。

过氧亚硝基阴离子的细胞代谢及病理损伤作用

过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）是ＮＯ和Ｏ２－·结合或进一步反应生成的。新近研究发现ＯＮＯＯ－是ＮＯ产生病理损伤作用的主要环节。ＯＮＯＯ－可使酶氧化失活，可导致脂质过氧化，与核酸作用引起ＤＮＡ裂解，作用于线粒体使能量生成障碍。ＯＮＯＯ－是某些疾病情况下导致细胞损伤、能量耗竭和细胞死亡的重要因素。有关ＯＮＯＯ－生成和代谢及其病理损伤作用的研究，已引起广泛关注。

胆囊收缩素对内毒素性休克大鼠SOD、MDA及吞噬细胞发光的影响

以ＳＤ大鼠ＥＳ（内毒素休克，内毒素０．８ｍｇ／１００ｇｂ．ｗ．ｉｖ）为模型，观察了ＣＣＫ－８抗ＥＳ过程中平均动脉血压（ＭＡＰ），血液超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）及吞噬细胞化学发光（ＰＣＬ）的变化。实验结果：ＣＣＫ－８可使ＥＳ大鼠ＭＡＰ回升，血浆ＳＯＤ活性升高（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量减少（Ｐ＜０．０５）；吞噬细胞本底发光增强、峰值增高、峰时缩短（Ｐ＜０．０５）。结果表明ＣＣＫ在抗ＥＳ过程中可提高ＳＯＤ的活性，降低ＭＤＡ含量和增强吞噬细胞的吞噬功能。提示ＥＳ时ＣＣＫ对机体具有重要的保护作用。

肠缺血-再灌流损伤时自由基对肺损伤作用的探讨

动态观测了家兔肠缺血—再灌流时入肺血和出肺血超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)以及脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量。正常时出肺血SOD的含量高于入肺血,P<0.05;入肺血的MDA含量高于出肺血,P<0.05。再灌流初期入肺血SOD含量增加,而出肺血SOD变化不明显。后期入肺血SOD含量高于出肺血,P<0.05;肺组织的SOD含量比正常时的减少,P<0.05;入肺血及出肺血的MDA含量均明显升高。结果提示正常时肺组织的SOD活性较高对清除氧自由基有重要的生理意义;肠缺血—再灌流损伤初期肺对SOD相关的代谢具有一定的调整作用,后期自由基的增多可致肺组织的损伤。

重视内源性抗休克物质在休克中的作用研究

内毒素休克是临床常见的危重病症,在休克状态下,机体可产生许多内源性抗休克物质。我们在深入研究休克发病机制的同时,应该重视内源性抗休克物质的作用,这将为休克的防治提供新的思路和对策。

内源性一氧化碳减轻大鼠双侧后肢缺血再灌注所致的肺损伤(英文)

通过观察血红素氧化酶 (HO)阻断剂锌原卟啉 (ZnPP)对肺组织、肺泡间质多形核白细胞数目、肺组织丙二醛含量和湿重干重之比的影响 ,并对肺组织HO活性和血内碳氧血红蛋白水平 (COHb)进行检测 ,以探讨内源性HO/一氧化碳 (CO)在肢体缺血再灌注 (I/R)所致肺损伤中的作用。结果发现 ,大鼠双侧后肢I/R可导致急性肺损伤 ,同时使肺组织中HO活性和血内COHb水平显著升高 ;应用ZnPP预处理可使HO活性和COHb水平显著降低 ,但肺损伤却进一步加重。上述实验结果表明 ,肢体I/R致肺损伤时 ,肺组织中HO活性和内源性CO生成增多可减轻大鼠肢体I/R所致的肺损伤。

MK-801降低炎性痛大鼠脊髓NOS表达和NO含量

用NADPH d组织化学法 ,观察鞘内注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1对大鼠右后掌皮下注射甲醛诱发的炎症性痛及痛过敏过程中脊髓后角一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响 ,同时测定一氧化氮 (NO)代谢终产物NO-·3 及NO-·2 含量来观察这一过程中NO含量的变化。结果表明 ,皮下注射甲醛 2 4h时 ,双侧脊髓后角NOS的表达及腰膨大部位NO的含量明显增加 ;而注射甲醛前 15min及注射后 12h两次鞘内注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1,则明显抑制NOS的表达及NO含量的增加。以上结果表明 :在大鼠后掌注射甲醛所引起的痛及痛过敏过程中 。

内源性一氧化氮在内毒素引起的肺动脉高压和肺损伤中的作用

本实验观察了家兔静脉内注入内毒素的主要成分脂多糖（ＬＰＳ）后平均动脉血压（ＭＡＰ）、肺动脉压（ＰＡＰ）及入、出肺血ＮＯ含量的变化，并观察了静脉内预注入ＮＯ生成抑制剂Ｎω硝基Ｌ精氨酸（ＬＮＮＡ）及诱生型ＮＯ生成抑制剂氨基胍（ＡＧ）后ＰＡＰ和肺损伤的变化。结果观察到：家兔ＬＰＳ注入后，ＭＡＰ均明显下降，ＬＰＳ注入后０５、１、１５、２ｈＰＡＰ明显增高（Ｐ＜００５）。ＬＰＳ注入后ＰＡＰ的高峰期（１ｈ）入肺血ＮＯ含量明显降低，出肺血ＮＯ无明显变化。与对照组相比，ＬＰＳ注入后３ｈ出肺血ＮＯ含量和５ｈ入、出肺血ＮＯ含量均明显增多。相关分析表明，兔ＬＰＳ注入前和ＬＰＳ注入后１ｈＰＡＰ与入肺血ＮＯ含量呈明显的负相关，而ＬＰＳ注入后３ｈ和５ｈ两者相关不明显。静脉预注入ＬＮＮＡ后，ＬＰＳ处理组的动物ＰＡＰ明显增高，入、出肺血丙二醛（ＭＤＡ）含量也明显增高，动物生存率明显降低。肺组织光镜下可见肺萎陷和小血管淤血加重，白细胞明显增加。静脉预注入ＡＧ后，ＬＰＳ处理组的动物ＭＡＰ在３～５ｈ明显增高，此时ＰＡＰ无明显改变，但５ｈ时血中ＭＤＡ含量明显减低，５ｈ时与ＬＰＳ组相比肺萎陷和小血管淤血减轻，白细胞也明显减少。以上结果?

八肽胆囊收缩素抑制脂多糖诱导的大鼠肺间质巨噬细胞CD14的表达

目的 :初步探讨八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)对体外脂多糖 (LPS)激活大鼠肺间质巨噬细胞 (IM)的调节作用。方法 :分离大鼠肺IM ,经LPS、CCK - 8、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或共同孵育后 ,测定细胞CD14的表达及上清中TNF -α含量。结果 :LPS(1mg/L)孵育 12h ,肺IMmCD14表达上调 ,上清中sCD14及TNF -α含量均明显增加 ;CCK - 8(10 -7- 10 -6mol/L)抑制了LPS的上述效应 ,且可被丙谷胺所拮抗。结论 :CCK - 8对LPS激活的肺IM的部分功能具有抑制性调节作用 ,该作用是由其受体介导的 ,可能是CCK - 8减轻内毒素血症时肺组织炎性变化的重要机制之一。

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导离体兔肺动脉反应性变化的影响

目的与方法：为探讨胆囊收缩素（ＣＣＫ）缓解内毒素休克时肺动脉压增高的作用机制，应用离体血管环技术观察ＣＣＫ对内毒素主要成分脂多糖（ＬＰＳ）诱导兔肺动脉反应性变化的影响。结果：ＬＰＳ（４μｇ／ｍＬ，２ｈ）引起离体肺动脉对α受体激动剂苯肾上腺素（ＰＥ）的收缩反应增强，降低对乙酰胆碱（ＡＣｈ）介导的内皮依赖性舒张反应；ＣＣＫ－８（０１μｇ／ｍＬ和０５μｇ／ｍＬ）逆转了ＬＰＳ的上述作用；ＣＣＫ－８（０５μｇ／ｍＬ，２ｈ）本身对正常肺动脉舒缩反应无明显影响。结论：ＣＣＫ通过保护肺内皮细胞、增强肺动脉内皮依赖性舒张反应而拮抗收缩反应，可能是发挥抗肺动脉压增高的机制之一。

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用

目的与方法 :为探讨八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机理 ,用电泳迁移率变动分析技术 (EMSA) ,观察CCK - 8对脂多糖 (LPS)诱导核转录因子κB(NF -κB)活性变化的影响 ,用光密度扫描电泳谱带峰面积积分值表示NF -κB活性 ,观察肺组织的病理学变化。结果 :LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF -κB活性 16 39 92± 198 6 3(P <0 0 1) ,显著高于对照组 (5 93 5 6± 89 34) ,此作用为预先静脉注入CCK - 8部分逆转 ,NF -κB活性低至 82 3 91± 97 32 (P <0 0 1) ,CCK - 8可减轻LPS引起的肺组织病理学变化。结论 :CCK -8对LPS激活肺组织NF

褪黑素改善内毒素血症大鼠血管反应性

观察褪黑素(melatonin,MT)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的体循环和肺循环血管反应性失调的影响,并探讨可能的作用机制.实验分为溶剂对照组、LPS组、LPS+MT组和MT组.制备离体胸主动脉环和肺动脉环,应用血管张力检测技术检测各组血管环对苯肾上腺素(phenylephrine,PE)和乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应性并绘制累积剂量反应曲线;制备各组血管组织匀浆,测定丙二醛(malondialhyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutes,SOD)含量变化.结果显示:与对照组相比,LPS 6 h后胸主动脉对PE的收缩反应减弱(P＜0.01),对PE(1×10-8～1×10-5mol/L)累积剂量反应曲线下移;而肺动脉对ACh的舒张反应显著下降(P＜0.01),对ACh(1×10-8～1×10-5mol/L)累积剂量反应曲线下移.加用MT可显著改善LPS诱导的胸主动脉对缩血管剂PE的低反应性,同时可逆转LPS对肺动脉舒张反应的抑制,LPS+MT组胸主动脉对PE的累积剂量反应曲线和肺动脉对ACh的累积剂量反应曲线位于对照组和LPS组之间;MT还可对抗LPS导致的脂质过氧化,使MDA含量减少,提高抗氧化酶SOD的活性.上述结果提示,MT可改善内毒素血症大鼠的血管反应性失调,抗氧化途径可能是其发挥保护作用的机制之一.

大鼠肢体缺血再灌注所致脑损伤及其机制探讨

目的 :观察肢体缺血 -再灌注对脑的损伤作用 ,并探讨其可能的机制。方法 :SD大鼠随机分为正常(N)、假手术 (S)、后肢单纯缺血 (I)及缺血 -再灌注 (I-R)各时间点组。通过夹闭腹主动脉末端 4h、开放 2 - 2 4h复制I、I-R组模型。光、电镜观察脑的病理变化 ;反转录多聚酶链反应及免疫组化染色法 ,观察脑组织iNOS表达的变化及过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)的硝基化产物硝基酪氨酸 (NT)的生成与分布 ;比色法测定脑组织MDA含量及SOD活性。结果 :①I-R组脑组织水肿 ,神经元受损较重 ,S、I组未见异常 ;②S、I、I-R组iNOS均有表达 ,I -R 6h表达量最大。I-R组大脑皮质、海马等区可见弥散分布的NT阳性神经元 ;③I -R 6h组MDA含量显著高于N、S、I组 ,SOD活性显著低于这些组 (P <0 0 5 ) ;而N、S、I组之间无显著差别。结论 :肢体I -R能引发脑损伤 ,脑内高表达的iNOS-NO

CCK-8抑制LPS诱导大鼠肺间质巨噬细胞TNF-α转录及NF-κB活性

目的 :观察硫酸化八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)对体外脂多糖 (LPS)诱导大鼠肺间质巨噬细胞 (PIMs)TNF -α基因表达的影响 ,探讨核因子κB(NF -κB)是否参与这一过程 ,以揭示CCK - 8抗炎作用的信号转导机制。方法 :分离大鼠肺PIMs ,经LPS、CCK - 8、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育 3h ,用RT -PCR技术检测细胞TNF -αmRNA的表达 ,孵育 1h ,用电泳迁移率改变分析方法检测NF -κB活性 ,孵育 30min ,用Westernblot技术检测胞浆IκBα蛋白表达情况。结果 :CCK - 8(10 -8- 10 -6mol·L-1)明显降低了LPS诱导的TNF -αmRNA表达及NF-κB活性 ,增加了胞浆中IκBα蛋白水平 ,呈剂量依赖性 ,并可被丙谷胺所拮抗。结论 :对LPS激活的肺PIMs ,CCK - 8通过抑制NF -κB活性而抑制其TNF -αmRNA表达 ,该作用由CCK受体介导 ,并与CCK - 8减少IκBα蛋白降解有关 ,此为CCK -

葛根素减轻部分由过氧亚硝基阴离子导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡(英文)

本研究观察葛根素是否减轻部分由过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite，ONOO^-）导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞（lens epithelium cell，LEC）凋亡。采用大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）的方法建立糖尿病动物模型。36只大鼠作为对照组，腹腔注射生理盐水；其他72只大鼠腹腔注射STZ（45mg/kg）后分为STZ组和STZ＋葛根素组，每组36只。STZ注射3d后，STZ＋葛根素组大鼠每天腹腔注射葛根素（140mg／kg）。于实验开始后第20、40和60天用裂隙灯检查晶状体的形态学变化后处死动物。用流式细胞仪检测LEC凋亡，用免疫组化方法检测晶状体中ONOO^-的标志物——硝基酪氨酸（nitrotyrosine，NT）的表达，用基因芯片分析技术检测LEC凋亡相关基因iNOS等的表达。结果发现，对照组大鼠晶状体均透明，各项指标基本正常；STZ组大鼠第20天时即出现晶状体混浊，40-60d期间混浊不断加重；STZ＋葛根素组大鼠20-40d时晶状体混浊呈加重趋势，但40-60d以后明显减轻。对照组LEC轻度凋亡，而STZ组凋亡细胞呈持续性增长，STZ＋葛根素组大鼠20-40d时细胞凋亡呈增长趋势，但40-60d以后明显下降。对照组大鼠晶状体NT未见明显表达；STZ组大鼠NT表达明显加强；STZ＋葛根素组大鼠20-40d时NT表达呈增长趋势，但40-60d以后明显下降。对照组凋亡相关基因未见明显变化，STZ组凋亡相关基因iNOS表达明显上调。其他凋亡相关基因如BCL-2、SOD表达明显下调，但NF-κB和TNFR1-FADD-caspase信号转导途径明显上调；STZ＋葛根素组凋亡相关基因表达则呈相反改变。上述结果表明，在糖尿病大鼠晶状体中有ONOO^-的标志物NT表达，证明糖尿病大鼠LEC凋亡部分由ONOO^-诱导，这可能是氧化损伤导致白内障形成的新途径。葛根素能够部分逆转ONOO^-对LEC的致凋亡作用，提示葛根素可能是治疗糖尿病性白内障的有效药物，其治疗机制可能与葛根素直接抑制凋亡和对抗ONOO^-对糖尿病大鼠LEC的损伤有关。

IL-10抗内毒素气管内滴注致急性肺损伤作用的实验研究

目的：探讨中性粒细胞（ＰＭＮ）在急性肺损伤（ＡＬＩ）发生中的作用及ＩＬ－１０对ＡＬＩ的拮抗作用。方法：用 ＬＰＳ（１００ μｇ／只）或 ＬＰＳ＋ ＩＬ－１０（１μｇ／只）向ＳＤ大鼠气管内滴注复制ＡＬＩ模型，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＭＮ数目、蛋白质及丙二醛（ＭＤＡ）含量，并进行组织学观察。结果：ＬＰＳ气管内滴注可引起ＢＡＬＦ中ＰＭＮ数目明显增加，伴有蛋白质及 ＭＤＡ含量的增高，光镜观察显示肺组织间隙弥漫性炎细胞浸润。 ＬＰＳ＋ＩＬ－１０组则ＢＡＬＦ中ＰＭＮ数目、蛋白质及ＭＤＡ含量显著低于ＬＰＳ组，肺组织中ＰＭＮ浸润程度也明显轻。结论：ＰＭＮ在ＡＬＩ发病中具有重要作用。ＩＬ－１０能够拮抗ＬＰＳ所致ＡＬＩ的发生。

外源性一氧化碳抗大鼠肢体缺血再灌注所致肺损伤的实验研究

目的:观察外源性一氧化碳(CO)对大鼠肢体缺血再灌注(IR)所致肺损伤的作用及机制。方法:32只SD大鼠,随机分为4组(每组n=8):对照组(control)、control+CO、IR和IR+CO组。复制大鼠双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型。IR+CO和control+CO组在再灌注前1h或相应时点置含2·5×10-8CO的空气中,其余两组呼吸正常空气。观察大鼠肺组织学、肺组织中中性粒细胞(PMN)数目、丙二醛(MDA)含量、肺组织湿重和干重之比(W/D)以及动物生存情况等。应用一氧化碳血氧分析仪监测动脉血中碳氧血红蛋白(COHb)水平的变化;应用Western blot-ting检测肺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的变化。结果:IR组动物死亡率、肺组织中PMN数目、W/D、MDA含量和ICAM-1表达均显著高于control组;IR+CO组血内COHb水平显著高于IR组,而上述指标则均显著低于IR组、肺损伤减轻。结论:外源性CO可减轻肢体IR所致肺损伤,其机制可能与下调ICAM-1表达、抑制PMN在肺内聚集有关。