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镉致肾脏损伤与锌代谢及其功能的关系 被引量:2
1
作者 王智 胡斌丽 +2 位作者 张豆豆 罗果 凌锌 《遵义医学院学报》 2008年第5期468-469,473,共3页
目的探讨锌代谢的变化与镉肾损伤之间的关系。方法将12只清洁级大鼠随机分成染镉组和对照组,分别测定各组大鼠血、尿和肾组织中镉和锌含量,测定尿液中NAG活性、β2微球蛋白含量,测定肌酐以校正尿量。结果染镉组血、尿、肝组织和肾组织... 目的探讨锌代谢的变化与镉肾损伤之间的关系。方法将12只清洁级大鼠随机分成染镉组和对照组,分别测定各组大鼠血、尿和肾组织中镉和锌含量,测定尿液中NAG活性、β2微球蛋白含量,测定肌酐以校正尿量。结果染镉组血、尿、肝组织和肾组织中镉含量升高;肾组织和血清锌含量有下降趋势,肝组织锌含量有升高趋势;尿液中NAG活性和β2微球蛋白含量升高;且染镉组血、尿、肝肾组织中镉含量均与尿液中NAG活性和β2微球蛋白含量呈正相关关系;而与肾组织锌含量呈负相关关系;肾组织锌含量与尿液中NAG活性、β2微球蛋白含量呈负相关关系;结论镉能影响大鼠体内锌分布改变,而锌分布改变与镉引起的肾脏损伤有关。 展开更多
关键词 肾脏 N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 β_2微球蛋白
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高校改革对实验室技术人员自身素质的要求 被引量:3
2
作者 凌锌 莫宁萍 《遵义师范学院学报》 2002年第2期72-88,共2页
高校实验室技术人员是教学、科研队伍的一个重要组成部分。提高实验技术人员的自身素质 。
关键词 高校 实验室 技术人员 素质
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姜黄煎剂对小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用 被引量:4
3
作者 凌锌 邓宏宇 《遵义医学院学报》 2002年第2期112-113,共2页
目的 研究姜黄对免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用。方法 制备荷S180移植肿瘤模型和环磷酰胺制备免疫低下模型 ,用阳性对照药云芝肝泰和姜黄煎剂灌胃进行免疫治疗。采用LDH释放法检测小鼠NK细胞杀伤活性。结果 不同浓度姜黄煎... 目的 研究姜黄对免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用。方法 制备荷S180移植肿瘤模型和环磷酰胺制备免疫低下模型 ,用阳性对照药云芝肝泰和姜黄煎剂灌胃进行免疫治疗。采用LDH释放法检测小鼠NK细胞杀伤活性。结果 不同浓度姜黄煎剂治疗荷瘤小鼠后 ,其NK活性分别为 2 3.5 3%± 4 .15 %和 2 0 .6 6 %± 4 .32 % ,接近于阳性对照组的 2 3.98%± 4 .0 2 % ,显著高于荷瘤对照组的 16 .32 %± 5 .1%。高浓度姜黄煎剂治疗免疫低下小鼠后 ,其NK活性为 2 5 .0 9%± 6 .4 3% ,接近阳性对照组的 2 5 .94 %± 4 .89% ,显著高于免疫低下对照组17.6 0 %± 6 .6 1% ,并均达到正常小鼠水平。 展开更多
关键词 姜黄煎剂 小鼠 NK细胞 杀伤活性 调节作用
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结直肠癌相关基因k-ras表达定量分析
4
作者 凌锌 岳昌武 +1 位作者 曾霓 莫宁萍 《遵义医学院学报》 2008年第5期474-476,共3页
目的研究直肠癌相关基因表达变化情况,寻找与直肠癌发生相关的分子标记物。方法收集30例直肠癌病人的基础资料及直肠癌切除组织和癌旁正常组织,分别提取总RNA,以GAPDH为内参,利用实时定量PCR技术分析k-ras基因表达水平。结果与癌旁正常... 目的研究直肠癌相关基因表达变化情况,寻找与直肠癌发生相关的分子标记物。方法收集30例直肠癌病人的基础资料及直肠癌切除组织和癌旁正常组织,分别提取总RNA,以GAPDH为内参,利用实时定量PCR技术分析k-ras基因表达水平。结果与癌旁正常组织相比,k-ras的mRNA表达水平分别升高1.87倍~4.29倍。结论与癌旁正常组织相比,直肠癌组织k-ras表达水平升高,直肠癌发展不同时期该基因的表达量不一致。 展开更多
关键词 K-RAS 实时定量PCR 直肠癌
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如何作好PCR技术实验课的准备工作
5
作者 凌锌 莫宁萍 《遵义医学院学报》 2001年第6期576-577,共2页
关键词 实验室诊断 PCR技术 实验课 聚合酶链反应 医学教育
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抗菌肽的结构特点·作用机理及其应用前景 被引量:28
6
作者 岳昌武 莫宁萍 +2 位作者 刘坤祥 凌锌 曾霓 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第5期1736-1739,共4页
抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子,是生物先天免疫的重要防御物质,不仅具有广谱抗菌活性和抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性,还具有随物种适应环境而产生的结构多样性以及区别于传统抗生素... 抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子,是生物先天免疫的重要防御物质,不仅具有广谱抗菌活性和抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性,还具有随物种适应环境而产生的结构多样性以及区别于传统抗生素杀菌机理的独特性,且不易产生耐药性,是一类极具潜力的肽类抗生素。抗菌肽对靶细胞表现出选择性,有助于设计出活性更高的新型肽类抗生素。从抗菌肽的作用机制、结构特点、新型抗菌肽分子设计、抗菌肽基因工程等方面阐述了抗菌肽研究的新进展。 展开更多
关键词 抗茵肽 作用机制 基因工程 分子设计 研究进展
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杜仲总黄酮对成骨细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响 被引量:34
7
作者 李三华 何志全 +2 位作者 陈全利 凌锌 刘坤祥 《西北药学杂志》 CAS 2011年第4期272-274,共3页
目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅骨体外培养成骨细胞的增殖及合成胶原蛋白的影响。方法杜仲总黄酮以质量浓度10,100,200和400μg·mL-1分别加入从2 d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响;采用激光共... 目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅骨体外培养成骨细胞的增殖及合成胶原蛋白的影响。方法杜仲总黄酮以质量浓度10,100,200和400μg·mL-1分别加入从2 d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响;采用激光共聚焦扫描显微镜检测Ⅰ型骨胶原蛋白的表达情况。结果与对照组比较,质量浓度10200μg·mL-1的杜仲总黄酮能明显促进成骨细胞的增殖(P〈0.05),但并不能显著地促进成骨细胞合成Ⅰ型胶原蛋白。 展开更多
关键词 杜仲 黄酮 成骨细胞
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杜仲总黄酮对大鼠成骨细胞护骨素表达的影响 被引量:13
8
作者 李三华 陈全利 +1 位作者 何志全 凌锌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第25期15279-15280,15282,共3页
[目的]研究杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞护骨素的mRNA及蛋白表达的影响。[方法]分别加入浓度为10、100、200μg/ml的杜仲黄酮到SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用Realtime-PCR法检测杜仲总黄酮对护骨素的mRNA表达的影响... [目的]研究杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞护骨素的mRNA及蛋白表达的影响。[方法]分别加入浓度为10、100、200μg/ml的杜仲黄酮到SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用Realtime-PCR法检测杜仲总黄酮对护骨素的mRNA表达的影响;采用细胞免疫荧光技术检测杜仲总黄酮对护骨素蛋白表达的影响。[结果]与对照组比较,杜仲总黄酮能明显促进成骨细胞护骨素的mRNA和蛋白质的表达。[结论]杜仲总黄酮成分能直接在RNA和蛋白质水平促进体外成骨细胞中护骨素的表达。 展开更多
关键词 杜仲(EUCOMMIAE CORTEX) 黄酮 护骨素 成骨细胞
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低温胁迫对甘薯s-腺苷甲硫氨酸合成酶mRNA表达水平的影响 被引量:13
9
作者 肖静 凌锌 +1 位作者 岳昌武 曾霓 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第16期6633-6634,6637,共3页
[目的]为研究s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因在冷胁迫条件下的表达情况。[方法]分别提取4℃胁迫处理0、12、24、48和72 h后的甘薯叶、茎和块根组织总RNA,通过反转录和实时定量PCR技术分析了该基因的mRNA表达情况。[结果]叶、茎和块根组织中... [目的]为研究s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因在冷胁迫条件下的表达情况。[方法]分别提取4℃胁迫处理0、12、24、48和72 h后的甘薯叶、茎和块根组织总RNA,通过反转录和实时定量PCR技术分析了该基因的mRNA表达情况。[结果]叶、茎和块根组织中该基因表达量都明显升高,分别于胁迫后24、72和72 h达到表达高峰,其中块根组织表达量增加量最大。[结论]低温胁迫能够促进相关基因的mRNA表达水平升高。 展开更多
关键词 低温胁迫 甘薯 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 实时定量PCR
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Effect of Low Temperature Stress on Sweet Potato S-Adenosyl Methionine Synthetase Gene Expression 被引量:6
10
作者 岳昌武 肖静 +1 位作者 凌锌 曾霓 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第1期11-14,156,共5页
[Objective] The mRNA expression level changes of S-adenosylmethionine synthetase (SAMS) under low temperature stress was studied. [Method] Total RNA were extracted from leaves, stem and earthnut of sweet potato 0,12... [Objective] The mRNA expression level changes of S-adenosylmethionine synthetase (SAMS) under low temperature stress was studied. [Method] Total RNA were extracted from leaves, stem and earthnut of sweet potato 0,12,24,48 and 72 h after low temperature treatement, mRNA expression level was analyzed by reverse expression and Real-time PCR technique. [Result] The expression quality of the gene extracted from leaves, stem and earthnut increased and the expression quality reached the peak point 24,72 and 72 h after low temperature treatment respectively. The expression change of earthnut was the biggest. [Conclusion] Low temperature was good for increasing mRNA expression of relevart genes. 展开更多
关键词 Low temperature stress Ipomoea batats L S-adenosyl methionine synthetase Real-time PCR
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复方瑞康欣可逆转吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核和伏核突触形态结构的可塑性 被引量:2
11
作者 何继锋 钱刚 +3 位作者 凌锌 吴明松 郭萍 罗素元 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期300-306,共7页
目的观察复方瑞康欣(CR)对吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核和伏核突触形态结构可塑性的影响。方法雄性SD大鼠84只,随机分为生理盐水对照组、吗啡戒断焦虑模型组、CR高、中、低剂量组和丁螺环酮组。以剂量递增方式皮下注射吗啡,10 d后自然... 目的观察复方瑞康欣(CR)对吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核和伏核突触形态结构可塑性的影响。方法雄性SD大鼠84只,随机分为生理盐水对照组、吗啡戒断焦虑模型组、CR高、中、低剂量组和丁螺环酮组。以剂量递增方式皮下注射吗啡,10 d后自然戒断,于戒断1~3 d CR灌胃治疗后行高架十字迷宫实验。采用透射电镜技术比较各组(6只)突触体视学和界面结构各参数。结果在300 mg/kg和200 mg/kg CR组,大鼠进入开放臂次数的百分比和在开放臂停留时间的百分比明显增加(P<0.01或P<0.05);海马、杏仁核突触的数密度和面密度显著降低(P<0.01),突触连接带平均面积增加(P<0.01或P<0.05),伏核突触数密度降低(P<0.01);海马突触后致密物厚度、突触活性区长度、间隙宽度和界面曲率降低(P<0.01或P<0.05)。结论 CR能缓解吗啡依赖戒断所引起的焦虑,其细胞生物学机制可能是逆转吗啡戒断时海马、杏仁核和伏核突触形态结构的可塑性。 展开更多
关键词 复方瑞康欣 吗啡 戒断 突触 海马 杏仁核 伏核 透射电镜 大鼠
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吗啡依赖戒断焦虑大鼠杏仁核突触结构的可塑性 被引量:3
12
作者 田艳 凌锌 +2 位作者 罗素元 高家林 何继锋 《解剖学研究》 CAS 2008年第5期329-332,共4页
目的通过对吗啡依赖戒断焦虑模型大鼠杏仁核突触形态结构可塑性的观察,探讨其焦虑情绪发生的机制。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡依赖戒断后焦虑模型。取脑杏仁核进行突触的透射电镜观察和体视学定量分析。结果焦虑模型组大鼠杏仁核... 目的通过对吗啡依赖戒断焦虑模型大鼠杏仁核突触形态结构可塑性的观察,探讨其焦虑情绪发生的机制。方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡依赖戒断后焦虑模型。取脑杏仁核进行突触的透射电镜观察和体视学定量分析。结果焦虑模型组大鼠杏仁核可见突触密集、数量多,但体积明显减小。与对照组比较,焦虑模型组大鼠杏仁核突触数密度、面密度均显著增高(P<0.01),突触连接带平均面积减小(P<0.05);而与丁螺环酮组比较,焦虑模型组大鼠杏仁核突触数密度、面密度也显著增高(P<0.01),而突触连接带平均面积减小(P<0.05)。结论杏仁核突触形态结构的可塑性变化可能参与了吗啡依赖戒断后焦虑情绪的发生。 展开更多
关键词 吗啡戒断 焦虑 杏仁核 突触可塑性
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Construction of Myostatin Gene Targeting Vector of Mouse 被引量:2
13
作者 李三华 何志全 +1 位作者 陈全利 凌锌 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第6期1164-1166,共3页
[Objective] This study aimed to construct Myostatin (MSTN) gene targeting vector of mouse. [Method] Total RNA was extracted from hindlimb muscle tissues of mouse to synthesize cDNA as the template to clone the codin... [Objective] This study aimed to construct Myostatin (MSTN) gene targeting vector of mouse. [Method] Total RNA was extracted from hindlimb muscle tissues of mouse to synthesize cDNA as the template to clone the coding region of MSTN. The CDS of MSTN gene including 3 kb 5’ homologous arm and 1.4 kb 3’ homologous arm were inserted into vector pBluescript_SK + to construct the targeting vector pLoxP-5N3T-M. The neo and HSV-tk gene were cloned into vector pBluescript_SK+ as positive and negative selective gene. [Result] Restriction enzyme digestion and sequencing results showed that mouse MSTN gene was cloned into the targeting vector pLoxP-5N3T-M. [Conclusion] The mouse MSTN gene targeting vector pLoxP5N3T-M was successfully constructed. 展开更多
关键词 MYOSTATIN Targeting vector Homologous recombination
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吗啡戒断性焦虑大鼠边缘系统CaMK Ⅱ含量及其磷酸化水平的改变 被引量:1
14
作者 田艳 钱刚 +2 位作者 罗素元 凌锌 何继锋 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2009年第2期103-106,共4页
目的:观察吗啡戒断大鼠焦虑产生时其边缘系统主要脑区/核团、海马、杏仁核、前额叶皮质神经细胞CaMK Ⅱ的含量和磷酸化水平的改变。方法:48只大鼠随机分为生理盐水对照组(n=18)、模型组(n=18)、丁螺环酮组(n=12)。模型组和丁螺环酮组用... 目的:观察吗啡戒断大鼠焦虑产生时其边缘系统主要脑区/核团、海马、杏仁核、前额叶皮质神经细胞CaMK Ⅱ的含量和磷酸化水平的改变。方法:48只大鼠随机分为生理盐水对照组(n=18)、模型组(n=18)、丁螺环酮组(n=12)。模型组和丁螺环酮组用剂量递增法建立大鼠吗啡依赖模型,停药后,丁螺环酮组给予丁螺环酮,模型组给予生理盐水。在吗啡自然戒断的72 h,用高架十字迷宫检测其焦虑行为,然后再用蛋白免疫印迹技术检测各组大鼠海马、杏仁核、前额叶皮质神经细胞CaMK Ⅱ的含量和磷酸化水平。结果:与生理盐水对照组和丁螺环酮组比较,模型组CaMK Ⅱ蛋白含量和β亚基磷酸化水平均显著升高(均P<0.01)。结论:吗啡戒断大鼠的边缘系统海马、杏仁核、前额叶皮质神经细胞CaMK Ⅱ含量、CaMK Ⅱβ亚基磷酸化水平的增高,这可能是吗啡依赖戒断焦虑行为产生的分子机制之一。 展开更多
关键词 吗啡戒断 焦虑 CAMK 边缘系统
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杜仲总黄酮对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响 被引量:41
15
作者 肖静 李三华 +2 位作者 莫宁萍 凌锌 罗素元 《遵义医学院学报》 2008年第3期238-240,共3页
目的通过观察杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞增殖的影响,筛选杜仲防治骨质疏松的药效成分。方法乙醇分段法提取杜仲皮中总黄酮,以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml浓度分别加入新生Wistar大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MT... 目的通过观察杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞增殖的影响,筛选杜仲防治骨质疏松的药效成分。方法乙醇分段法提取杜仲皮中总黄酮,以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml浓度分别加入新生Wistar大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响。结果50、100μg/ml杜仲总黄酮剂量组的OD570吸光值明显增高,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能直接促进体外成骨细胞的增殖。 展开更多
关键词 杜仲总黄酮 成骨细胞 骨质疏松
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RT-PCR法检测杜仲总黄酮对大鼠成骨细胞骨钙素表达的影响 被引量:20
16
作者 李三华 刘坤祥 +1 位作者 莫宁萍 凌锌 《遵义医学院学报》 2011年第3期223-225,共3页
目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞骨钙素的mRNA表达的影响。方法杜仲总黄酮以10 g.mL-1、100 g.mL-1、200 g.mL-1浓度分别加入2d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用Realtime-PCR法检测对骨钙素mRNA的表达。结果与... 目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞骨钙素的mRNA表达的影响。方法杜仲总黄酮以10 g.mL-1、100 g.mL-1、200 g.mL-1浓度分别加入2d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用Realtime-PCR法检测对骨钙素mRNA的表达。结果与对照组相比,各实验浓度的杜仲总黄酮均能促进骨钙素mRNA的合成。结论杜仲总黄酮成分能直接促进体外成骨细胞中骨钙素mRNA的表达。 展开更多
关键词 杜仲 黄酮 骨钙素 成骨细胞
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遵义医学院在校学生乙肝病毒感染与ABO血型及性别相关性的调查 被引量:2
17
作者 雷家琼 赵忠芬 +1 位作者 莫宁平 凌锌 《医学理论与实践》 2006年第7期862-863,共2页
目的:探讨遵义医学院在校学生乙肝病毒HbsAg、Anti-HBs与ABO血型及性别的相关性,加强乙型肝炎的预防。方法:随机抽取遵义医学院在校学生159人,采用玻片凝集法测ABO血型,ELISA测定HbsAg抗HBs。结果:感染者血型O>A>B>AB,易感者血... 目的:探讨遵义医学院在校学生乙肝病毒HbsAg、Anti-HBs与ABO血型及性别的相关性,加强乙型肝炎的预防。方法:随机抽取遵义医学院在校学生159人,采用玻片凝集法测ABO血型,ELISA测定HbsAg抗HBs。结果:感染者血型O>A>B>AB,易感者血型A>O>B>AB(均P<0.05),男性易感者>女性易感者(均P<0.05)。结论:说明HBV感染与ABO血型、性别有一定关系,应对易感者加强乙型肝炎的预防。 展开更多
关键词 HbsAg Anti—HBs 血型 性别 相关性
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西部医学研究生综合实验课程教学的几点体会 被引量:1
18
作者 岳昌武 吕玉红 +1 位作者 保玉心 凌锌 《基础医学教育》 2014年第7期535-537,共3页
探讨在现有的教学条件下西部医学院校医学研究生综合实验课程教学模式与考核方法改革,采取案例教学与个性辅导相结合的教学方法,培养学生科研资料收集、实验设计、动手操作及结果处理能力,采用实验操作评估、实验报告考核及实验设计方... 探讨在现有的教学条件下西部医学院校医学研究生综合实验课程教学模式与考核方法改革,采取案例教学与个性辅导相结合的教学方法,培养学生科研资料收集、实验设计、动手操作及结果处理能力,采用实验操作评估、实验报告考核及实验设计方案论证的综合型实验考核模式评估学生课业成绩,以达到短时间内促进科研技能的培养和提高、科研能力养成的教学目标。 展开更多
关键词 基础医学综合实验 研究生教育 课程教学
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新形势下西部民族地区医药研究生教育的困境及几点尝试 被引量:5
19
作者 岳昌武 吕玉红 +1 位作者 保玉心 凌锌 《西北医学教育》 2014年第3期475-476,511,共3页
探讨西部民族地区药学研究生培养模式,为培养具有较高质量的医药高级专门人才提供借鉴。从学校研究生管理部门、导师和研究生自身角度出发,充分利用现有条件,在发挥师生主观能动性的基础上,因地、因时制宜,因人而异创造尽可能好的培养条... 探讨西部民族地区药学研究生培养模式,为培养具有较高质量的医药高级专门人才提供借鉴。从学校研究生管理部门、导师和研究生自身角度出发,充分利用现有条件,在发挥师生主观能动性的基础上,因地、因时制宜,因人而异创造尽可能好的培养条件,总结西部欠发达民族地区药学硕士生培养历程,阐述其培养模式的探索与实践。利用国家西部大开发政策等有利时机,尽快夯实研究生培养平台,充分利用民族地区特色资源,以开发特色资源的科研项目为依托,培养较高水平的实用性高级专门人才。尽管西部民族地区研究生培养还存在很多主客观的不利因素,但只要模式得当,也能培养出具有较高水平的高级专门人才。 展开更多
关键词 西部民族地区 研究生教育 医药
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都柏林沙门氏菌metk基因克隆及原核表达 被引量:2
20
作者 岳昌武 吕玉红 +3 位作者 谢兰 凌锌 莫宁萍 刘坤祥 《遵义医学院学报》 2009年第4期332-334,共3页
目的获取都柏林沙门氏菌metk基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶His-tag融合蛋白,为基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件。方法利用都柏林沙门氏菌metk基因特异引物,以都柏林沙门氏菌临床分离株的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到该基因... 目的获取都柏林沙门氏菌metk基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶His-tag融合蛋白,为基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件。方法利用都柏林沙门氏菌metk基因特异引物,以都柏林沙门氏菌临床分离株的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到该基因编码区,并构建原核表达重组质粒载体pET30a-metk,经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达,Ni2+-NTA柱纯化重组蛋白。结果经IPTG24℃诱导6h后,12%SDS-PAGE电泳检测表明诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,重组蛋白分子量约为58.8kDa。结论成功构建His-METK融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化、复性,为进一步利用该蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 融合蛋白 原核表达 Ni2+-NTA柱纯化
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