促黄体生成素在辅助生殖技术中的研究进展

促黄体生成素(LH)由垂体前叶嗜碱性细胞合成分泌,受下丘脑分泌的促性腺激素释放激素(GnRH)以及卵巢雌、孕激素共同调控。在辅助生殖技术中,血清LH一直是十分重要的检测指标。近年来,LH的作用机制以及在促排卵过程中LH调控的最佳水平已成为辅助生殖领域的研究热点。本文将从LH在促排卵过程中对卵泡发育、触发排卵、卵母细胞和胚胎发育的作用及其对子宫内膜容受性、黄体功能维持影响的研究进展进行综述,以期为临床工作中对LH合理的调控提供思路和启示。

水凝胶负载Erastin诱导子宫内膜癌细胞铁死亡的作用研究

目的:利用温敏性水凝胶泊洛沙姆407(P407)负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞(Ishikawa)铁死亡。方法:构建并评估负载Erastin水凝胶复合物(P407^(Era))的物理表征、相变时间和缓释性能。实验分为对照(control,Ctrl)组、水凝胶(P407)组、Erastin处理(Erastin)组和水凝胶负载Erastin(P407^(Era))组。CCK-8检测细胞增殖情况,ROS试剂盒检测细胞内活性氧含量,TUNEL原位细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Mito-Tracker Red CMXRos检测细胞线粒体膜电位,Mito-FerroGreen检测线粒体内Fe2+含量,免疫荧光和RT-qPCR检测铁死亡相关分子的表达水平。结果:P407水凝胶的相变时间与浓度呈负相关,18%浓度的P407水凝胶复合物药物缓释性能较优。与对照组相比,P407组、Erastin组和P407^(Era)组的Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭均受明显抑制,且P407^(Era)组比Erastin组抑制增殖、迁移和侵袭作用更加明显;Erastin组及P407^(Era)组细胞活性氧水平、细胞凋亡相对数量显著升高;细胞线粒体膜电位和线粒体Fe^(2+)结果显示,Erastin组和P407^(Era)组细胞线粒体膜电位显著下降,且线粒体Fe2+含量显著升高;免疫荧光结果显示Erastin组及P407^(Era)组GPX4含量显著降低,NRF2含量无明显变化;Erastin组及P407^(Era)组TFR1、NCOA4和P53的mRNA表达水平显著升高。结论:温敏性水凝胶泊洛沙姆407负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞发生铁死亡。

妊娠期间子宫内免疫细胞的分布及其功能

在雌性生殖过程中 ,子宫内的免疫细胞在受精、着床、妊娠等过程中起着非常关键的作用。本文主要总结妊娠期间免疫细胞在子宫中的分布规律 ,并且阐述了子宫免疫细胞在妊娠期间所起的作用。各期的子宫中主要存在T细胞、自然杀伤细胞 (NK细胞 )、大颗粒淋巴细胞 (NK样细胞 )。

细胞周期蛋白和哺乳动物生殖

细胞周期蛋白是真核细胞周期循环中主要的调节因子,它们参与细胞周期的精密调控,维持细胞正常生长及发育平衡。近年来发现,细胞周期蛋白与哺乳动物生殖有着密切的关系,本文简要论述了细胞周期蛋白与配子发生、早期胚胎发育、胚胎着床、蜕膜化等的关系,以及细胞周期蛋白在生殖系统中的表达与调控。

钙粘素与哺乳动物生殖

钙粘素(cadherin)是细胞表面的糖蛋白,为细胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs)超家族中的一员。钙粘素通过连接蛋白影响生物学过程,充当细胞内信使,从质膜向细胞核内传导信号,由此影响基因的转录来执行其功能。在配子发生、月经周期的组织修复、早期胚胎发育、着床、细胞凋亡等生殖过程中起着重要的作用。本文主要对其在生殖中的作用以及其表达的调控作一综述。

gp130介导的信号转导通路在哺乳动物着床中的作用

IL-6相关细胞因子家族成员包括LIF、IL-6、IL-11以及它们的共同受体gp130,在哺乳动物的着床过程中起着重要的作用。LIF敲除的小鼠不能着床。IL-11Rα敲除的小鼠不能完全发生蜕膜化,从而导致妊娠的失败。IL-6敲除的小鼠着床数和着床胚胎的存活率均降低。这些细胞因子通过与受体结合,激活下游信号分子STAT,从而形成了 gp130/Jak/STAT信号转导通路,并且STAT3基因敲除的小鼠也不能着床。这些细胞因 子通过gp130/Jak/STAT信号转导通路在着床过程中起着重要的作用。了解此信号通路在着床中的作用对解决一些不明原因的不孕症,以及开发着床相关的避孕药物等具有重要意义。

SMYD2在反复自然流产患者子宫内膜蜕膜化中的作用及机制

目的探讨SMYD2在反复自然流产(RSA)患者子宫内膜基质细胞和蜕膜化细胞中的表达及其对P53、LIF的调节作用。方法将正常人和RSA患者子宫内膜基质细胞进行体外诱导蜕膜化处理,并分为空白组、蜕膜化组、蜕膜化+抑制剂组,采用real-time PCR检测LIF、SMYD2、TRP53 mRNA,细胞免疫化学法检测SMYD2、P53、P-P53蛋白在子宫内膜蜕膜化细胞的表达及SMYD2特异性抑制剂AZ505对其表达的影响。结果在正常人和RSA患者蜕膜化组中,SMYD2、TRP53 mRNA表达均较空白组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在正常人和RSA患者蜕膜化+抑制剂组中,LIF mRNA的表达比蜕膜化组增加,TRP53 mRNA的表达比蜕膜化组降低,且差异均有统计学意义(P<0.05),而SMYD2 mRNA与蜕膜化组差异无统计学意义。细胞免疫化学结果可见,正常人和RSA患者蜕膜化组细胞中SMYD2、P53和P-P53蛋白信号均较空白组减弱,SMYD2抑制剂AZ505组正常人和RSA患者细胞中SMYD2、P53和P-P53蛋白信号均较蜕膜化组减弱。结论 SMYD2通过对P53和LIF的调节作用而参与反复自然流产患者子宫内膜蜕膜化过程。

组蛋白甲基酶的研究新进展

组蛋白甲基酶（SMYD）是组蛋白赖氨酸甲基转移酶的一个亚家族,至今已发现SMYD家族有5个成员,即SMYD1~5。SMYD可以甲基化组蛋白,也可以甲基化非组蛋白如p53蛋白、视网膜母细胞瘤肿瘤抑制基因（Rb）蛋白等,其通过甲基化作用可以在转录水平影响靶基因的表达,调控细胞增殖与分化。在哺乳动物,SMYD与多个系统的形成和发育密切相关,同时在肿瘤的发生和演进过程中发挥重要生物学功能。对其进一步的研究将为多种疾病的诊治提供新的思路。

性别相关的母血中游离胎儿DNA的Y染色体微缺失筛查的探索研究

目的：利用孕妇血浆中游离胎儿DNA进行Y染色体微缺失筛查，在孕早期排查出AZF缺失的男性胎儿。方法：留取16～20孕周进行唐氏筛查的孕妇血标本，提取出全血基因组DNA后利用AZF基因特异性引物进行多重PCR，跑胶检测实验结果。结果：妊娠女性胎儿的孕妇血浆DNA用AZF基因特异性引物没有扩增出特异性条带，而妊娠男性胎儿的孕妇血浆DNA用AZF基因特异性引物能够扩增出特异性条带。结论：通过提取孕妇血浆中的DNA能够检测到游离胎儿DNA，并能通过多重PCR鉴定出胎儿是否为AZF基因缺失，从而提前预测胎儿今后罹惠无精子症的风险。

姜黄素抑制小鼠生殖器官氧化产物生成的研究

目的:探讨姜黄素对氧化应激小鼠子宫、卵巢组织脂质过氧化水平的影响。方法:昆明种雌性成年小鼠40只,随机分成正常对照组,0 mg/kg Cur组,100 mg/kg Cur组,200 mg/kg Cur组,连续用药21天,实验结束后测定小鼠子宫、卵巢组织以及血清中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量。结果:100 mg/kg Cur组,200 mg/kg Cur组血清、子宫以及卵巢氧化应激产物ROS、MDA与砷暴露组相比均有降低,具有明显统计学差异(P<0.05)。结论 :姜黄素可降低小鼠子宫、卵巢组织以及血清中氧化产物MDA、ROS的含量,对小鼠卵巢氧化应激引起的生殖器官损伤有保护作用。

无创产前检测技术检出5q15-21.3缺失1例

目的对1例无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)提示为del(5q15-21.3,13.43M)的孕妇进行产前诊断。方法对该孕妇进行羊膜腔穿刺抽取羊水,分别采用羊水细胞培养G显带核型分析技术和全基因组测序技术对胎儿无创检测结果进行验证。结果胎儿核型为46,XX,del(5)(q15q21.3),胎儿母亲核型为46,XX,父亲核型为46,XY;羊水细胞全基因组测序检测结果为46,XX,del(5q14.3q21.3).(90,871,585-106,715,288)×1;夫妻双方选择终止妊娠,引产胎儿表型未见明显异常。结论采用NIPT技术检出胎儿染色体的微缺失1例,并成功进行验证。

探讨夜针当日血清SHBG水平与取卵时间、胚胎质量及妊娠结局相关性分析

目的探讨控制性超排卵在夜针当天血清SHBG水平高低与取卵手术时间、胚胎质量及妊娠结局的相关性分析。方法予0.1Gn RHa长方案治疗需要行常规体外受精的不孕患者共1 080个周期的资料,按夜针SHBG浓度分四组比较实验室结果和临床结局。结果四组之间Gn用量、获卵数、E2、T、游离睾酮FAI指数、取卵时间、可利用胚胎数、优质胚胎数差异有统计学意义(P<0.05);SHBG与Gn用量、LH、游离睾酮FAI指数显著负相关,与获卵数、E2、T、取卵时间、可利用胚胎数、优质胚胎数显著正相关;妊娠组与未妊娠组HCG日SHBG和游离睾酮差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HCG日SHBG水平可加长取卵时间,减少Gn用量,增加可利用胚胎数及优质胚胎数,对妊娠结局及游离睾酮FAI指数影响不大。

PLCζ的结构和功能及其在人类辅助生殖中的作用

哺乳动物受精后卵子会经历一系列持续的低频率Ca^2＋振荡。这些Ca^2＋振荡是卵细胞激活的直接原因,对于胚胎发育是至关重要的。在小鼠卵中已经证明这些Ca^2＋振荡是由1,4,5-三磷酸肌醇（inositol-1,4,5-triphosphate,IP3）产量增加引起的。

甲基化转移酶抑制剂BIX01294促进小鼠子宫基质细胞迁移、抑制基质细胞蜕膜化

目的探讨甲基化转移酶抑制剂BIX01294(BIX)对小鼠子宫内膜基质细胞迁移和蜕膜化过程的作用和影响。方法取妊娠第3.5天小鼠子宫分离培养得小鼠子宫内膜基质细胞,采用细胞划痕运动分析、体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化模型及Real-time PCR方法分别从形态学和分子生物学角度观察BIX对小鼠子宫内膜基质细胞迁移及蜕膜化的影响。结果在一定浓度范围内(BIX≤15μmol/L),小鼠子宫内膜基质细胞的迁移距离随着BIX浓度的升高而增加,与对照组相比,BIX 15μmol/L处理组基质细胞的迁移距离增加最明显,差异具有统计学意义,当BIX浓度提高到20μmol/L时,细胞迁移距离增加不明显,且此时开始出现细胞的死亡;与对照组相比,BIX处理24 h组小鼠子宫内膜基质细胞Ehmt2 m RNA表达显著下调(P<0.01);并且15μmol/L BIX能够抑制小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化反应。结论一定浓度范围的BIX通过抑制Ehmt2m RNA在基质细胞中的表达促进小鼠子宫内膜基质细胞的迁移,并且对小鼠子宫基质细胞的蜕膜化过程有抑制作用。

FABP7在小鼠胎盘组织及人滋养层细胞HTR-8/Svneo中的表达

目的探讨FABP7在正常妊娠小鼠胎盘组织及HTR-8/Svneo细胞中的表达。方法用Realtime-PCR及原位杂交的方法检测Fabp7 mRNA在妊娠小鼠7.5~10.5 d和14.5、18.5 d子宫和胎盘组织中的表达,用冰冻切片免疫荧光的方法检测FABP7蛋白的表达。培养HTR-8/Svneo细胞系,用细胞免疫荧光方法检测FABP7蛋白表达。17β-雌二醇(E2)、孕酮(P4)和E2+P4分别处理小鼠6 h和24 h后,用Realtime-PCR的方法检测小鼠子宫组织中Fabp7 mRNA的表达。结果 Fabp7 mRNA在妊娠小鼠7.5~10.5 d子宫及胎盘组织中均有表达,FABP7蛋白在妊娠小鼠子宫组织蜕膜化细胞及胎盘部位滋养层巨细胞核中有表达;在HTR-8/Svneo细胞中可以检测到mRNA和细胞核中蛋白的表达。P4和E2+P4联合处理6 h及24 h后,Fabp7mRNA在小鼠子宫组织中的表达上调(P<0.05),而E2处理6 h后Fabp7 mRNA表达变化不明显,但24 h后其表达上调(P<0.05)。结论 FABP7在妊娠小鼠子宫蜕膜化细胞、滋养层巨细胞及HTR-8/Svneo细胞中有表达,说明其参与胎盘发育过程,与妊娠的维持有关,且在子宫中的表达量受E2、P4激素的调节。

EZH2与哺乳动物生殖研究新进展

组蛋白甲基化转移酶同源序列增强子(enhancer of zeste homolog,EZH)是由EZH基因编码的一种组蛋白赖氨酸甲基化转移酶,有EZH1和EZH2两种亚型,属于多梳家族(Polycomb Group,PcG)蛋白成员。PcG家族的成员相互结合形成多聚蛋白复合物参与基因转录调控、DNA甲基化,促进异染色质的形成从而发挥沉默基因的功能、维持胚胎细胞的正常增殖与分化。本文主要介绍EZH2的基本功能及其在哺乳动物生殖和相关疾病中的研究新进展。

性激素结合球蛋白在辅助生殖领域的研究进展

性激素结合球蛋白(SHBG)又名睾酮-雌二醇结合球蛋白,与雌激素及睾酮结合的亲和力较高,可通过调节与性激素的结合力动态调控血液中的激素水平,进而作用于不同的靶器官产生不同的生物学效应。SHBG在性激素代谢障碍相关疾病、妇科肿瘤以及围生期代谢性疾病的发生发展中具有重要作用。在辅助生殖技术领域,SHBG通过全身或局部激素调节、信号通路等参与促排卵反应性、卵泡的生长发育、精子的发生以及子宫内膜的容受性等。因此,SHBG在辅助生殖技术相关疾病的发生发展中发挥重要作用,但具体作用机制还有待未来进一步研究验证。

中医治疗不孕不育疗效的Meta分析

目的:评价中医治疗不孕不育的临床疗效及安全性。方法:计算机检索中国知识期刊网、万方数据库、Wiley、Pub Med中关于不孕不育中医治疗的随机对照试验(RCT),同时筛检纳入文献的参考文献。文献检索起止时间均从建库至2014年1月。由2名研究者按纳入与排除标准选择文献、评价质量、提取资料并交叉核对,采用Review Manager 4.2软件进行Meta分析,采用优势比(比值比)作为效应合并指标。结果:共纳入10个RCT,972例病例。质量评价结果显示,10个研究中4-7分2个,1-3分8个,试验质量普遍偏低,未发现双盲试验。Meta分析结果显示,中医治疗不孕不育患者后妊娠率、As Ab转阴率、治愈率及有效率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Meta分析提示中医药方法对治疗不孕不育患者有效。受纳入研究质量与数量的限制,上述结果尚待更多高质量的研究来证实。

常染色质组蛋白甲基化转移酶与哺乳动物生殖

常染色质组蛋白甲基化转移酶(euchromatin histone lysine methyltransferases,EHMTs)能够使基因组常染色质区域的组蛋白3第9位赖氨酸二甲基化(histone 3 9th lysine demethylate,H3K9-di)。在哺乳动物中有两种EHMT基因编码蛋白,分别为EHMT1编码GLP和EHMT2编码G9a。EHMTs在不同组织和不同细胞分化的过程中扮演不同的角色并且参与到记忆、药物成瘾、免疫反应等成人特异性反应过程的形成。EHMTs及其蛋白在哺乳动物生殖过程中的配子发生、胚胎发育及子宫疾病等方面发挥重要的作用。