极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例基因突变分析

目的对1例极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)病儿进行可疑致病基因突变分析,并探讨基因突变与该疾病表型的关系。方法选择1例VLCADD病儿为实验组,200例健康者为对照组,采用串联质谱法检测VLCADD的酰基肉碱谱,全部外显子测序技术(WES)进行突变筛查,与gnomAD和1000Genomes数据库中的人类基因组序列进行比对,寻找可疑基因突变位点,并在病儿及其父母中进行Sanger测序验证。结果病儿串联质谱结果显示,VLCADD相关特征性指标十四烯酰基肉碱(C14∶1)升高,尤其是升高值>1.0μmol/L可明确诊断。WES发现病儿ACADVL基因存在复合杂合突变,第8外显子c.664G>A和第13外显子c.1276G>A。Sanger测序验证c.664G>A来源于母亲,c.1276G>A来源于父亲。200例正常对照者中未发现该突变。结论ACADVL基因c.664G>A和c.1276G>A复合杂合突变可能是VLCADD的致病突变,串联质谱检测结合高通量基因测序可为VLCADD的临床早期筛查和诊断提供重要依据。

特应性皮炎患儿外周血淋巴细胞亚群分布和血清总IgE水平变化

目的探讨特应性皮炎(AD)患儿外周血淋巴细胞亚群分布及血清总IgE水平变化。方法选取AD患儿127例(AD组)和健康对照儿童102例(对照组),采用流式细胞荧光发光法测定外周血淋巴细胞亚群分布,采用免疫比浊法测定血清总IgE;比较组间淋巴细胞亚群分布差异以及AD组血清IgE增高和正常患儿的病情严重程度。结果AD组Th细胞百分比和Th/Tc均高于对照组(P均<0.05);AD组IgE增高及正常患儿Th细胞百分比均高于对照组(P<0.05),且AD组IgE增高患儿Th/Tc高于对照组(P<0.05)。与AD组中重度患儿比较,轻度患儿年龄偏小、Th细胞百分比增加、Th/Tc升高、NK细胞百分比偏低(P均<0.05);血清总IgE水平和AD组疾病程度无关(P>0.05)。结论无论是否伴有IgE增高,AD患儿均存在外周血T淋巴细胞亚群紊乱(表现为CD4+T细胞增加)、NK细胞减少。

亨廷顿舞蹈病一家系5代病例报告并文献复习

目的加深对亨廷顿舞蹈病(HD)遗传方式和临床特征的认识。方法对1个5代家系中的13例病人进行调查,对每一代病人的临床特点进行回顾性分析,并对其中2代病人的基因进行分析。结果该家系患病男性明显多于女性,发病年龄随世代递减。主要临床症状为不自主运动、剪刀步态、智力低下和性格异常。结论该家系的遗传传递有助于加深对HD遗传方式和临床特征的认识。

DNM1L基因新变异致EMPF11例临床表型和遗传学分析

目的 探讨由DNM1L基因变异导致的线粒体和过氧化物酶体裂变缺陷型脑病1型(EMPF1)的临床表型和遗传学特点。方法 收集1例EMPF1病儿的临床资料和实验室检查结果。采用全外显子组测序(WES)检测EMPF1病儿及其父母的基因变异,并通过双脱氧测序法(Sanger法)测序对变异位点进行验证;使用生物信息学软件和氨基酸多序列对变异位点对比分析,以明确其致病性;利用蛋白三维结构模型模拟蛋白质结构和分子间作用力在变异前后的变化。结果 病儿主要表现为发育迟缓、肌张力减退和难治性癫痫。脑MRI显示双侧豆状核和背侧丘脑对称性异常信号,视频脑电图显示肌阵挛发作频繁呈持续状态。WES分析显示,病儿DNM1L基因存在c.1049G>C(p.G350A)新发杂合错义突变,而Sanger测序验证其父母均未检测到该变异;氨基酸多序列比对结果显示,Gly350在各种属间高度保守;蛋白三维结构建模分析显示,p.G350A蛋白构象变化导致蛋白结构稳定性降低,进而影响蛋白质的功能。该变异为疑似致病性变异(PS2+PM2+PP2+PP3)。结论 本文病儿的EMPF1是由DNM1L基因c.1049G>C(p.G350A)变异所致,EMPF1主要的临床表现为精神运动迟缓、肢体瘫痪、肌张力障碍和癫痫等,综合临床表型及基因检测结果有助于该病的早期诊断。

日本血吸虫循环抗原动态消长的实验研究

目的：了解日本血吸虫三类循环抗原（ＣＡｇ）在感染家兔的动态变化及治疗后的消长情况。方法：制备日本血吸虫的三株单抗，以辣根过氧化物酶标记，分别建立检测日本血吸虫肠相关抗原（ＧＡＡ）、膜相关抗原（ＭＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的斑点酶联免疫吸附试验（ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），观察感染日本血吸虫家兔血中三类抗原的动态变化情况。结果：家兔感染后第４ｗｋ，有３９％家兔血中ＧＡＡ呈阳性反应，而仅８．６％家兔ＭＡＡ、ＳＥＡ呈阳性反应，第８ｗｋ三类ＣＡｇ均呈阳性反应，并于第１０ｗｋ左右达高峰。未治疗组家兔直至感染后第２７ｗｋ，血中三类ＣＡｇ一直维持较高水平。感染后第９ｗｋ家兔接受吡喹酮治疗，治疗后第４ｗｋ，ＣＡｇ水平开始下降，治疗后第６ｗｋ有１０％家兔ＳＥＡ阴转，治疗后第８ｗｋ，ＧＡＡ阴转率为２０％，ＳＥＡ为７０％，ＭＡＡ为８０％，治疗后第１４ｗｋ除１例外，三类ＣＡｇ全部阴转。结论：ＧＡＡ早期诊断效果较好，而ＭＡＡ和ＳＥＡ在治疗后较ＧＡＡ消失快。

弓形虫感染家兔血液中虫体的动态观察

目的探明虫体在家兔血液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子105个/只的剂量腹腔感染雄性家兔16只。在家兔感染前后分别采集家兔血液,抗凝处理后,-40℃冻存备用,用实时定量PCR检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫DNA,依据对照计算虫体拷贝量,绘制感染后时间与血液中虫体含量的动态曲线图。结果雄兔弓形虫感染后4d血液中即可检测到虫体DNA,血液中虫体含量为217.887×103个/ml,血液中虫体含量在感染后8 d达到高峰期,血液中虫体含量为248.019×103个/ml,然后虫体含量逐渐下降,在感染后121 d雄兔血液中虫体密度为1.45×103/ml。结论弓形虫感染雄兔血液中虫体含量随感染后时间不同而变化。

Treacher Collins综合征1例基因突变分析

目的分析1例Treacher Collins综合征(TCS)病人的遗传学改变,探讨该病例基因型-表型的关系。方法提取先证者及其父母外周静脉血全基因组DNA和RNA,利用全外显子测序(WES)对先证者进行突变筛查,采用Sanger测序在先证者及其父母中进行验证。结果先证者符合TCS的典型临床症状。基因检测分析结果显示,该病例TCOF1基因第18外显子最后一个碱基发生c.3183G>A(p.Q1061=)突变,但表型正常的父母不存在此突变,因此该突变是一个de-novo遗传的突变。RNA验证显示,先证者与健康人的TCOF1 mRNA水平存在显著差异(t=-27.488,P<0.01)。结论TCOF1基因c.3183G>A突变很可能是TCS的致病突变位点。本研究结果有助于了解和完善中国TCS病人的遗传学基础。

弓形虫感染家兔精液中虫体含量的动态变化

目的检测弓形虫感染家兔精液中虫体DNA,观察虫体在精液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子105个/只的剂量腹腔感染雄性家兔16只。在家兔感染前后分别采集精液,-40℃冻存备用,采用两种方法提取精液中总DNA,用实时定量PCR(quantitativereal-timePCR,QRT-PCR)检测弓形虫感染家兔精液中弓形虫DNA,依据对照计算虫体拷贝量,绘制感染后时间与精液中虫体含量的动态曲线图。结果16只雄兔感染前其精液中均不能检测到弓形虫DNA,精液中虫体含量在感染后7wk左右达到高峰期,然后虫体含量逐渐下降。在感染9wk^15wk维持较低水平。结论弓形虫感染雄兔精液中虫体含量随感染后时间不同而变化。

家兔精液传播弓形虫的实验研究(英文)

目的了解弓形虫能否通过精液传播,并探讨雌兔阴道不同健康状态对精液传播弓形虫的影响。方法8只健康新西兰雄兔经腹腔分别感染1×105个RH株弓形虫速殖子,分别于感染前、后用假阴道采集雄兔精液,每周将采集到的精液混合液化后0.1ml/只,分别经宫腔内人工受精管感染4组阴道健康状态不同的成年新西兰雌兔(阴道正常组、阴道损伤组、滴虫性阴道炎组和霉菌性阴道炎组),共采集8周,将所得8份混合精液分别感染8次。每次受精后第2～3天耳缘静脉采血2ml,分别用ELISA和PCR检测血清抗弓形虫抗体和全血中弓形虫B1基因片段。结果ELISA结果显示,雌兔在初次受精后第16天可检测到抗弓形虫抗体,第1～4组抗体阳性家兔数分别有2、1、3和1只,ELISA阳性率为25.9%(7/27)。PCR检测最早在受精后3d和最晚51d可扩增出弓形虫B1基因片段200bp,第1～4组阳性家兔数分别有2、1、2和0只,PCR阳性率为18.5%(5/27)。其中两种检测结果均为阳性的3只。结论弓形虫可通过精液感染雌兔。雌兔的阴道健康状态对经精液感染弓形虫无影响。

日本血吸虫循环抗原检测的血清预处理方法比较

血吸虫循环抗原主要有三大类：ＭＡＡ、ＧＡＡ和ＳＥＡ。在检测过程中，常存在交叉反应。为排除血清中杂蛋白的干扰，采用ＴＣＡ沉淀法［１］、ＰＥＧ沉淀法［２］和热碱处理法［３］３种方法预处理，并对其效果进行比较。材料与方法血清样品２０条尾蚴感染兔第８ｗｋ血清...

人心肌特异性肌钙蛋白T单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备抗人心肌肌钙蛋白T的单克隆抗体。方法 利用纯化的人心肌肌钙蛋白T免疫BALB/C小鼠 ,常规方法制备抗人心肌肌钙蛋白的单克隆抗体 2株N15C和N16D。结果 利用普通ELISA方法检测 2株单抗 ,小鼠腹水N16D滴度可达 1/ 32 0 0 0 ,N15C滴度达 1/ 80 0 0 ;斑点酶联免疫吸附试验证明N16D对急性心肌梗塞患者血清中出现的肌钙蛋白T有较好的亲和性。

基于MEMS技术微型静电场传感器系统设计与研制

针对基于MEMS技术的微型静电场传感器的输出信号微弱、信噪比低等特点,采用高精度运算放大器和直接数字合成器芯片设计出了一种基于封装小但没有浮点运算器的单片机的微型静电场传感器系统,并通过一定的算法解决了单片机运算能力弱的问题,最终整个系统的测试精度能达到5%,分辨率能达到500 V/m,检测时间小于1 s.

日本血吸虫三类循环抗原和循环抗体对感染家兔疗效考核价值的研究

采用三株分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体A6，SJ31／32和SE9作为捕获抗体建立检测三类循环抗原的斑点酶联免疫吸附实验（DOT－ELISA）方法，并利用该方法和普通ELISA分别观察了日本血吸虫感染家兔血清中三类循环抗原和IgG抗体的动态变化情况。结果表明：感染日本血吸虫家免在经砒喹酮治疗之后的第8周，睦相关抗原，可溶性虫卵抗原和肠相关抗原的转阴率分别为80％，70％和20％，而减后第18周全部转阴；IgG抗体一直维持较高水平。因此，MAA和SEA具有改好的疗效考核价值，GAA的疗效考核效果较差，IgG抗体不具有疗效考核作用。

21例危重瓣膜病心内直视手术的体外循环管理

目的总结危重心脏瓣膜病的体外循环经验。方法常规建立体外循环、心肌保护,采用自行设计的心脏停搏灌注装置和高钾温一冷一温灌注模式,常规超滤,部分患者等容血液稀释,维护稳定的灌注压和酸碱水电解质的平衡。结果自动复跳率100%,围术期死亡2例,皆与体外循环无因果关系。结论危重心脏瓣膜病心内直视手术的体外循环关键是有效的心肌保护,其次是肝、肾。

新型心脏停搏液灌注器在心肌保护中的应用

目的报告新型心脏停搏液灌注器在心肌保护中的应用.方法 100例心脏病患者在心内直视术中采用自行设计制造的高钾温-冷-温血心脏停搏液灌注器和新的高钾氧合血配备方法进行心肌保护.结果体外循环时间31～163min,平均52.5min,主动脉阻断时间11～112 min,平均42.6min,心脏自动复跳率100%,均为窦性心律.结论自行设计的新型心脏停搏液灌注器和新的高钾氧合血配备方法在心内直视手术中的心肌保护效果确切、满意,有一定的临床应用价值.

日本血吸虫感染家兔血中循环抗原生理波动性研究

目的观察日本血吸虫。类循环抗原（ＣＡｇｓ）早晚间血中浓度变化情况。方法９只家兔分为感染组和对照组，于感染后的２１ｗｋｄ３早晚间分别果血，分高血清．并用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ—ＦＬＩＳＡ）分别检测三类ＣＡｇｓ．结果三类ＣＡｇｓ水平在一天内无显著性变化。结论ＣＡｇｓ的检测结果在一天之内不受采血时间的影响．

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。

建立素质教育运行机制的有益探索——对普通高中试行学分制的认识和思考

普通高中引入学分制 ,是一种教学管理手段和运行机制的改革 ,具有积极的探索意义。但也要认识其局限性 ,因地因校制宜 。

医学寄生虫实验教学中标本短缺解决办法的尝试

为改变目前寄生虫学实验教学标本短缺、试验内容及形式不能满足临床医学生未来从医需要的现状,近年来在寄生虫学实验教学中实施了标本、活虫体、寄生虫感染动物模型、现场调查相结合的寄生虫学实验教学新模式.