跨膜4域亚家族成员6D基因敲除致雄性小鼠生育力降低实验研究

目的:探讨跨膜4域亚家族成员6D(Ms4a6d)基因敲除对雄性小鼠生育力的影响。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因型,将Ms4a6d^(-/-)雄鼠和野生型C57小鼠分别与同龄野生型雌鼠合笼交配,统计各组雌鼠怀孕产仔情况,收集睾丸组织,称重并计算器官指数,评估附睾尾精子数量、运动参数等变化情况,通过形态学分析和HE染色评估小鼠睾丸组织形态学变化,采用免疫荧光染色分析睾丸巨噬细胞变化。结果:Ms4a6d^(-/-)雄鼠子代数目显著低于WT雄鼠(P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸体积及质量均减少(均P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠附睾尾精子浓度下降(P<0.05),各项运动参数未见统计学差异(P>0.05);睾丸组织切片HE染色结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸曲细精管直径及管腔厚度均明显减少,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞及精子细胞均减少;免疫荧光结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸巨噬细胞受到影响。结论:Ms4a6d基因敲除干扰了雄性小鼠睾丸的发育,并造成生精小管直径减少、厚度变薄,附睾尾部精子数量显著下降,从而使成年雄鼠的生育力显著下降。

显微镜下睾丸切开取精术在非梗阻性无精子症助孕治疗中的应用

目的 评估显微镜下睾丸切开取精术(microdissection testicular sperm extraction, MD-TESE)在非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia, NOA)助孕治疗中的价值及其安全性。方法 回顾性分析2017年7月1日至2022年3月15日在我中心确诊为NOA的患者,共176例,根据选择取精方式的不同分为MD-TESE和睾丸穿刺取精术(testicular sperm aspiration, TESA)。比较两种取精方式的手术时间、术中出血量、血肿形成等并发症、精子获得率(sperm retrieval rate, SRR)以及体外受精的临床结局。结果 两组患者的年龄、体质量指数(body mass index, BMI)、睾丸体积、睾酮(testosterone, T)、促黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone, FSH)等无明显差异(P>0.05);MD-TESE组的手术时间明显长于TESA组(P<0.001);MD-TESE组术后睾丸血肿发生率为2.4%(1/42),略低于TESA组7.5%(10/134);两组均无术后感染。MD-TESE组的SRR为38.1%(16/42),显著高于TESA组的9.0%(12/134,P<0.001)。两组获得的精子用于卵胞浆内单精子显微注射技术(intracytoplasmic sperm infecting, ICSI)助孕治疗,MD-TESE组受精率、卵裂率、临床妊娠率分别为65.1%、93.9%和50.0%,TESA组受精率、卵裂率、临床妊娠率分别为58.3%、71.4%和50.0%,两组平均疗效无明显差别。结论 MD-TESE安全有效,尤其适合于隐睾、病毒性睾丸炎以及Y染色体AZFc缺失等有迫切希望生育自身遗传背景的子代的无精子症患者。