circPVT1靶向调控miR-195-5p/SOX9轴影响结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化

目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)至对数期,将SW480细胞分为对照组(正常培养SW480细胞不进行转染)、空载质粒组(转染空载质粒)、circPVT1沉默组[转染circPVT1小干扰RNA(siRNA)质粒]、miR-195-5p过表达组[转染miR-195-5p模拟物(mimics)质粒]、SOX9沉默组(转染SOX9 siRNA质粒)、circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组(转染circPVT1 siRNA和miR-195-5p siRNA质粒)。各组转染相应质粒后培养48 h。荧光定量PCR法检测NCM-460细胞、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)和各组SW480细胞circPVT1、miR-195-5p、SOX9 mRNA的表达;噻唑蓝和流式细胞仪分别检测各组SW480细胞增殖和凋亡;蛋白印迹法检测各组SW480细胞SOX9、凋亡和EMT相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9的靶向关系。结果:与NCM-460细胞比较,SW480细胞、HCT116细胞、HCT29细胞、LOVO细胞、SW620细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达显著升高,miR-195-5p表达显著降低(P<0.05);其中,SW480细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达最高,miR-195-5p表达最低;故选择SW480细胞进行后续实验。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组circPVT1、SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低,miR-195-5p表达显著升高(P<0.05);miR-195-5p过表达组miR-195-5p表达显著升高,SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);SOX9沉默组SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组、miR-195-5p过表达组、SOX9沉默组细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与circPVT1沉默组比较,circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组miR-195-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低,SOX9 mRNA及蛋白、细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9存在靶向调控关系。结论:沉默circPVT1可以靶向上调miR-195-5p表达,抑制SOX9表达,进而抑制SW480细胞增殖和EMT进程,促进其凋亡。

miR29c下调S100A4蛋白表达参与人胃癌细胞增殖促进凋亡

目的探讨miR-29c对人胃腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其与转移相关蛋白S100A4的关系。方法采用细胞培养人胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901和人正常胃粘膜上皮GES-1细胞,应用qRT-PCR检测各株细胞miR29c的表达。用hsamiR29c-mimics类似物(miR29c组),hsa-miR29c-inhibitor(阴性对照组)分别转染BGC-823细胞,空白对照组加入转染液,用CCK8及MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测S100A4相关肿瘤相关蛋白的表达。结果与正常胃粘膜上皮细胞GES-1表达率(1.131±0.069)相比,MiR-29c在胃癌细胞BGC823(0.254±0.025),SGC-7901(0.466±0.057)(F=57.5,P<0.05)。BGC823细胞转染miR29c模拟物后MiR-29c的表达量为:4.126±0.231,0.405±0.174,0.557±0.102,差异具有统计学意义(F=850.1,P<0.05)。转染24h、48h、72h后,MiR-29c组细胞的OD450值分别为:1.074±0.127、1.609±0.178、2.008±0.104;阴性对照组为:0.419±0.169、0.477±0.092、0.738±0.153,空白对照组为:0.830±0.305。其中,转染48h、72h后,MiR-29c组明显高于对照组(F=59.46,P<0.05)。细胞转染24h后,miR29c组细胞凋亡率分别是(6.900±0.414)%、(4.490±0.316)%、(3.850±0.243)%,,阴性对照组凋亡率分别是(10.830±0.231)%、(11.940±0.279)%、(13.530±0.941)%,空白对照组凋亡率分别是:(10.190±0.188)%、(11.76±0.569)%、(13.260±0.987),(P<0.001).各组S100A4蛋白的表达分别为0.770±0.028、1.109±0.083、1.024±0.042,(P=0.0021)。结论miR29c在胃癌细胞系中表达降低,通过抑制S100A4抑制人胃癌细胞增殖并促进胃癌细胞凋亡。

医源性输尿管损伤10例报告

手术致输尿管损伤临床不少见，本院1985年5月～2001年10月收治手术致输尿管损伤10例，现报告如下。

DOPS形成性评价在外科住培中的应用分析

本研究旨在探讨DOPS形成性评价在外科住培中的应用。在研究期间,对参与住培的12名住院医师进行了DOPS培训,并对其进行了DOPS形成性评价。评价结果通过统计学方法进行了分析。发现DOPS形成性评价可以有效地评估住院医师的手术技能,并为其提供个性化的培训方案。同时,DOPS评估结果可以用于确定住培医师的合格性,为其获得相应的认证提供了重要的参考。DOPS形成性评价是一种有效的外科住培评估工具,对提高住院医师的手术技能和培养高水平的外科专家具有重要意义。

过表达CDX1蛋白对直肠癌细胞增殖及能量代谢的影响及机制研究

目的:探讨过表达尾侧同源盒转录因子1(CDX1)蛋白对直肠癌细胞增殖及能量代谢的影响。方法:以直肠癌细胞SW117为研究对象,细胞转染pIRES(空载体组)、pIRES-CDX1(过表达组),同时设置对照组(只加入转染试剂)。培养48 h后,Western blot检测细胞中CDX1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中三磷酸腺苷(ATP)含量、丙酮酸激酶活性、己糖激酶活性及培养液上清中乳酸含量。结果:空载体组细胞中CDX1、Cleaved Caspase-3、Akt、p-Akt表达水平及细胞存活率、凋亡率、ATP含量、丙酮酸激酶活性、己糖激酶活性及培养液上清中乳酸含量与对照组相比均没有明显差异。过表达组细胞存活率、p-Akt水平、ATP含量、丙酮酸激酶活性、己糖激酶活性及培养液上清中乳酸含量与对组相比均明显下降,凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3表达水平均明显高于对照组。结论:过表达CDX1蛋白能够促进直肠癌细胞凋亡,抑制直肠癌细胞增殖,影响直肠癌细胞能量代谢,作用机制可能与p-Akt水平有关。

Stomatin样蛋白2基因调控Wnt／β-连环蛋白信号通路对胃癌细胞增殖凋亡的机制

目的探讨人Stomatin样蛋白2（SLP-2）基因调控Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对胃癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法Western blot检测SLP-2基因在人胃癌组织中的表达；将NC-小干扰RNA（siRNA）、SLP-2-siRNAl、SLP-2-siRNA2转染人胃癌SGC-7901细胞，未转染任何siRNA的作为对照组，Western blot检测转染后各组细胞中SLP-2蛋白表达；细胞转染48h后，流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot检测活化的的Cleaved含半胱氨酰的天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）、B—catenin、c-Myc、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）蛋白表达。结果胃癌组织中SLP-2的蛋白表达（0．283±0．016）显著高于癌旁组织（0．082±0．016）（t=7．789，P=0．003）；SLP-2-siRNA2组的抑制效果更明显，选择作为后续研究；LP-2-siRNA组（16．62±1．32）％细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白表达（1．421±0．210）均显著高于对照组（1．56±0．56）％、（0．510±0．083），B—catenin（0．157±0．024）、c—Myc（0．039±0．016）、CyclinD1（0．052±0．012）蛋白表达显著低于对照组（0．311±0．036、0．137±0．026、0．183±0．021）（t凋亡率=9．324，P凋亡率=0．001；tβ-catenin=8．868，Pβ-catenin=0．003；tc-Myc=9．112，Pc-Myc=0．002；tcyclin D1=9．987，Pcvclin。D1=0．001）。结论SLP-2在胃癌中高表达，沉默SLP-2的表达能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖和促进细胞凋亡，其机制与Wnt/β—catenin信号通路的调控有关。

低位直肠癌腹腔镜治疗临床分析

目的探讨低位直肠癌腹腔镜规范化治疗效果。方法回顾性分析2013年6月到2015年9月行手术治疗的低位直肠癌患者134例,根据手术方式将患者分为腹腔镜组(75例)和开腹组(59例),用SPSS 16.0统计软件进行数据分析,术中术后恢复指标用(±s)表示,两组间差异比较采用t检验;并发症发生率和术后随访结果以(%)表示,卡方检验用于两组间差异比较;P<0.05有统计学差异意义。结果腹腔镜组的术中出血量、切口长度均低于开腹组(P<0.05);腹腔镜组的手术时间、手术切缘距齿状线距离高于开腹组(P<0.05);腹腔镜组术后肛门排气时间、术后进流食时间、术后自主下床时间、住院时间均低于开腹组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。腹腔镜组术后并发症发生率5.3%(4例)显著低于开腹组16.9%(10例),且差异具有统计学意义(χ2=4.762,P<0.05);腹腔镜组术后随访3年无瘤生存率(71例,93.3%)高于开腹组(49例,81.3%),且差异具有统计学意义(χ2=4.505,P<0.05)。结论腹腔镜下低位直肠癌根治术的近期和远期疗效均好于开腹手术。

腹腔热灌注化疗联合全身系统化疗对晚期胃癌腹膜转移患者细胞免疫功能、肿瘤标志物和肿瘤侵袭转移相关指标的影响

目的:探讨腹腔热灌注化疗(HIPEC)联合全身系统化疗(NIPS)对晚期胃癌腹膜转移患者细胞免疫功能、肿瘤标志物和肿瘤侵袭转移相关指标的影响。方法:选取2019年6月至2022年1月在新疆医科大学第一附属医院胃肠外科住院治疗的116例晚期胃癌腹膜转移患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各58例。对照组患者接受NIPS,观察组患者接受HIPEC联合NIPS。观察两组疗效、生存率和不良反应情况,对比两组细胞免疫功能、肿瘤标志物和肿瘤侵袭转移相关指标变化情况。结果:观察组的临床总有效率(68.97%)高于对照组(50.00%)(P<0.05)。两组治疗后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)下降,但观察组高于对照组(P<0.05)。CD8^(+)升高,但观察组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA199)、糖类抗原125(CA125)下降,但观察组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)下降,但观察组低于对照组(P<0.05)。观察组的6个月、9个月、12个月生存率均高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率对比无差异(P>0.05)。结论:HIPEC联合NIPS用于治疗晚期胃癌腹膜转移患者,可改善患者细胞免疫功能,调节肿瘤标志物和肿瘤侵袭转移相关指标水平,提高生存率。

达芬奇机器人手术系统辅助与腹腔镜辅助局部进展期胃癌根治术近期疗效分析

分析对于局部进展期胃癌根治术患者来说,达芬奇机器人手术系统辅助与腹腔镜辅助对其近期疗效的影响。方法:纳入对象:局部进展期胃癌根治术患者(60例);纳入时间(开始/结束):2020年1月13/2021年1月14;纳入分组:Control组30例(腹腔镜辅助干预),Observation3组30例(达芬奇机器人手术系统辅助干预)。比较干预后两组患者情况。结果:Control组(vs)Observation组手术时间无差异(P>0.05),但Observation组出血量更少(P<0.05)。Control组(vs)Observation组,术后1-3d内Observation组腹腔引流液淀粉酶水平与血清淀粉酶水平均< Control组(P<0.05)。结论:对于局限性进展期胃癌患者来说,达芬奇机器人手术系统辅助干预下,安全性更理想,优势优于腹腔镜方式。