电子线路板粉末浸出液重金属含量分析及其饲养斑马鱼前后鱼体内镍铬水平的变化

目的通过分析电子线路板粉末中主要重金属成分的含量及其浸出液中重金属含量,分析其中可溶性重金属盐类所占的比重,同时通过动物实验初步探讨该废弃物溶出液饲养斑马鱼后镍镉在斑马鱼体内变化的情况。方法通过原子吸收分光光度法分析并对比电子线路板粉末和浸出液中铜、铅、锌、镉、镍、铬、铁、锰的含量,初步分析该粉末中重金属的溶出情况及对水体可能的影响。通过对不同剂量浸出液饲养的斑马鱼体内镍铬含量的分析,探讨其在斑马鱼体内变化的情况。结果电子线路板粉末中含量最高的前3位金属分别是铜、铅和铁,分别达64.1、55.6和25.8 mg/kg;金属铬未被检出。浸出液中含量最高的前3位金属分别是铜、锰和镉,其含量分别达1.440、0.322和0.088 mg/L。在实验室饲养斑马鱼中,虽然对照组、低剂量组和中剂量组检测结果有一些不同,但其差异无统计学意义。结论电子线路板拆解废弃物中铜、锰、镉溶出量较高,应在现场监测中重点关注。用一定浓度的浸出液饲养斑马鱼体,其体内的镍铬水平基本无变化。

饮水暴露六价铬对SD大鼠外周血DNA损伤和氧化应激的影响

[目的]研究饮水摄入六价铬对大鼠外周血DNA损伤和血浆氧化应激的影响。[方法]取雌、雄SD大鼠各40只随机分为4组,每组10只,每笼2只,4组分别自由摄入饮用水(对照)及30、100、300mg/L重铬酸钾(K2Cr2O7)水溶液4周,每周3次记录每笼饮水量并更换现配的K2Cr2O7溶液。实验结束时测定体重及心、肝、肾、肺、胃、脾组织重量,计算脏器系数和大鼠平均每日饮水量,并测定外周血DNA损伤及血浆中8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。[结果]雌鼠300mg/L组的体重增加量低于对照组(P<0.05);雌鼠300mg/L组、雄鼠100mg/L和300mg/L组的平均每日饮水量均低于对照组(P<0.05,P<0.01)。300mg/L组雌、雄大鼠DNA损伤均加重(P<0.05)。雌鼠100mg/L和300mg/L组血浆中8-OHdG含量及雌鼠3个剂量组和雄鼠100、300mg/L组血浆中MDA含量均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。[结论]饮水暴露Cr(VI)可致大鼠外周血DNA损伤加重,并使血浆中8-OHdG和MDA的含量升高。

钱塘江水有机提取物对斑马鱼的胚胎毒性

[目的]探究2010年丰、枯水期钱塘江水有机提取物的致突变性及枯水期水样有机提取物对斑马鱼早期胚胎发育的影响。[方法]分别采集丰、枯水期钱塘江18个位点水样各100L,用XAD-2树脂提取有机物,设置0.6、1.25、2.5和5 L/皿（即每皿含0.6、1.25、2.5和5 L原水样）剂量组,采用Ames试验检测并比较丰、枯水期水样的致突变性。采用显微注射的方法将受精后6 h的斑马鱼胚胎暴露于枯水期水样提取物（5 L/m L）,注射量为5 n L,每24 h在显微镜下观察一次,连续观察5d,记录死亡个数及畸形发生率。[结果]钱塘江枯水期水样有机提取物致突变性高于丰水期。位于上游的A江段除采样点3外其余水样提取物在丰、枯水期都具有较强的致突变性;丰水期B、D段致突变性较小,仅采样点9和14呈阳性,C、E段无致突变性;枯水期B、C、E段致突变性增加,D段仅采样点14呈阳性,致突变性相对较小。斑马鱼胚胎实验显示,枯水期水样提取物对斑马鱼胚胎各暴露组致死率均〈10%;具有致畸性,主要干扰胚胎心脏、脑、肝脏发育及鱼鳔充气、卵黄吸收等;A、B段水样提取物暴露组致畸率为30%-90%,C段致畸率为50%-100%,D、E段致畸性相对较小,致畸率分别为20%-50%和40%-60%。[结论]钱塘江水样有机提取物具有致突变性,且对斑马鱼胚胎具有致畸性。枯水期水样致突变性大于丰水期。

地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应

目的探究地表水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA的损伤效应。方法于2010年6—8月,采集某江流域18个采样点水样并提取有机物。将处于对数生长期的人B淋巴母细胞悬液分别暴露于0（对照）、250、500、1 000 ml/ml水样有机提取物培养24 h;采用CCK-8活细胞计数试剂盒和彗星试验分别研究水样有机提取物对细胞存活率的影响及其DNA损伤效应,并检测细胞内活性氧自由基（ROS）含量的变化,以评价水样有机提取物的氧化损伤效应。结果与对照组比较,除250 ml/ml采样点5、11、12水样外,各采样点水样有机提取物在各暴露剂量下对人B淋巴母细胞的存活率均较低,差异有统计学意义（P〈0.01）;且随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞的存活率呈下降趋势。与对照组相比,采样点4、5、6水样有机提取物在250、500、1 000 ml/ml剂量下对人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量无明显影响,采样点9、11、12和15水样有机提取物仅在1 000 ml/ml剂量下导致人B淋巴母细胞尾部DNA含量增加,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;其余各采样点水样有机提取物在500、1 000 ml/ml剂量下均可导致人B淋巴母细胞彗星尾部DNA含量增加,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与对照组相比,采样点16水样有机提取物在500 ml/ml剂量下对人B淋巴细胞内ROS含量无显著影响（P〉0.05）,其余各采样点水样有机提取物在250～1 000 ml/ml剂量范围内均可显著诱导人B淋巴细胞内ROS的产生,差异有统计学意义（P〈0.01）;除采样点15外,随着各采样点水样有机提取物暴露剂量的升高,人B淋巴细胞中ROS的含量均呈上升趋势。结论该流域江水中有机提取物对人B淋巴细胞DNA有显著的损伤效应,可能与细胞内ROS含量增加有关。

职业性锰接触对工人尿锌水平的影响

目的预防工人职业性锰中毒,寻找锰中毒早期预警指标。方法对148名职业性锰接触工人和100名对照人员进行了尿锰、尿锌水平的检测。结果锰暴露组人群与对照组尿锰差异无统计学意义(t=0.195,P>0.05;尿锌暴露组显著低于对照组,分别为(2.08±0.48)和(3.21±0.64)μmol/L,差异有统计学意义(t=15.15,P<0.01);而尿锌浓度随尿锰浓度升高而降低,呈负相关(P<0.01)。结论过量锰可能影响人体内锌的正常代谢,尿锌浓度的检测对于锰中毒的早期诊断具有参考意义。

PCB153对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响

目的研究2,2’,4,4’,5,5’-六氯联苯(2,2’,4,4’,5,5’-hexachlorobiphenyl,PCB153)对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响。方法采用0(对照)和25、100、200μmol/L的PCB153分别处理人B淋巴母细胞2、24、48 h,收集细胞后提取总RNA。PCB153处理24 h的RNA样本用Illumina人HT-12 v4全基因组表达谱芯片筛测差异表达基因,并对差异基因进行基因本体论(gene ontology,GO)分类分析。在PCB153处理2、24、48 h样本中用实时定量PCR对候选差异基因进行验证。结果芯片结果显示,各剂量PCB153处理样本中分别发现161、191、1 006个差异基因,三个剂量组重叠差异基因数为15个,其中,上调基因4个、下调基因11个。选取6个差异基因用定量PCR进行验证,发现2个上调基因(CCDC92和TMEM175)及3个下调基因(CCL22、STK38L和GZMK)的表达改变与芯片结果一致。基因CCDC92、CCL22、GZMK和TMEM175等可影响多种淋巴细胞功能,基因STK38L可作用于细胞周期和细胞凋亡等,基因CCL22和MTDH的异常表达则与多种癌症密切相关。结论体外急性染毒PCB153干扰了人B淋巴母细胞某些重要功能基因的表达,为多氯联苯毒性的分子作用机制提供了依据。

鱼外周血彗星试验及其在多溴联苯醚污染水体中的运用

目的通过鱼外周血彗星试验方法的摸索,为地面水污染遗传毒性效应检测提供生物学试验手段。方法红鲫鱼环磷酰胺腹腔注射染毒,设1个对照组(磷酸盐缓冲液,PBS)和5个剂量组(环磷酰胺剂量分别为:12.50、25.00、50.00、100.00、200.00 mg/kg),分别在0、2、24、72 h尾静脉采血,彗星试验检测DNA损伤效应。分别于丰水期和枯水期,在轻污染区A、中污染区B、重污染区C采样,分别获取3尾该地鲫鱼,并以3尾实验室内驯养4周的鲫鱼作为阴性对照,进行鱼肉多溴联苯醚(PBDEs)定量分析及鱼外周血彗星试验。结果在给药后2 h时间点,即能在各剂量组引起DNA损伤效应,最大的DNA损伤效应(15.42±1.30)%出现在50.00 mg/kg剂量组、24 h时间点。重污染区C的鱼外周血细胞DNA损伤程度在丰水期和枯水期皆为最高,且显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。污染区B在丰水期与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。鱼肉中PBDEs含量与预判断的污染程度相关。结论鱼外周血彗星试验是较为方便、直观、敏感的DNA损伤试验,可用于对多种污染物污染的水体进行生物学评价。

电子线路板粉末的大鼠亚慢性经口毒性研究

目的探讨电子线路板粉末亚慢性经口暴露对SD大鼠的毒性损伤。方法将雌、雄SD大鼠分别随机分为A、B、C、D 4个组。A和D组16只,B和C组12只,A和D组各保留4只进行亚慢性试验后的45 d恢复试验。A组给予正常饲料作为对照,B、C、D 3组给予在每千克基础粉料中分别加入电子线路板粉末10、20和50 g混合均匀所制成的饲料,自由摄食饮水,自然光照。饲养90 d后,计算各组大鼠主要的脏器系数,检测血液生化指标,测定大鼠45、90 d和恢复45 d后血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)和睾酮(T)的含量。结果电子线路板粉末各剂量组与对照组的体重变化比较,差异无统计学意义;雌鼠高剂量组生化指标与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),中、高剂量组肝脏脏器系数显著升高(P<0.01);45和90 d各组大鼠血清T3、T4和T含量均显著高于对照组(P<0.05),其中低剂量组升高最为明显,恢复45 d后高剂量组血清T3、T4和T与对照组相比,差异无统计学意义。结论电子线路板粉末亚慢性经口暴露可引发大鼠肝脏损伤,升高血清T3、T4和T的含量。

多氯联苯高污染地区人群相关基因表达改变的研究

目的研究多氯联苯暴露人群外周血相关基因表达改变。方法采集32例电子垃圾拆解地居民和48例对照人群外周血样，分离提取总RNA，用实时荧光定量PCR检测CCDC92、CCL22、GZMK、MTDH、STK38L、TMEM175等6个基因的mRNA表达水平。结果根据双标准曲线法，拆解地居民CCL22基因的表达水平为（4．51±2．37）％，低于对照组的（6．764-4．82）％（t=2．451，P〈0．05）。根据2-△△ct法，两者的表达水平分别为（0．54±0．28）倍和（0．81±0．58）倍（t=2．480，P〈0．05）。根据双标准曲线法，GZMK和MTDH基因的表达水平高于对照组（t=-2．036、-2．228，P〈0．05）。根据。幽。法，两者的表达水平也高于对照组（t=-2．035、-2．223，P〈0．05）。两种定量方法存在较好的相关性（r=1．000，P〈0．01）。结论CCL22、GZMK和MTDH三个基因在多氯联苯暴露人群中表达异常，可用作多氯联苯暴露人群的效应标志物。

电焊工血液重金属含量与外周血DNA损伤的相关性

目的研究电焊工血液中重金属含量及其与DNA损伤之间的关系。方法抽取22名来自医疗器械制造企业（A组）、25名来自船舶制造企业（B组）的电焊工以及22名管理人员（对照组）的外周静脉血，用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）检测血液中铬（Cr）、锌（Zn）、镉（Cd）、铅（Pb）、钻（Co）、镍（Ni）、锰（Mn）的含量，并用彗星试验检测外周血DNA损伤。用多元线性回归法及相关性分析法分析重金属含量与DNA损伤之间的关系。结果与对照组相比，A，B组电焊工血液中Pb和Mn含量均明显增高，差异有统计学意义（A组：Upb=136．0，tMn=-6．2；B组：Ueb=78．5，tMn=．7．6，P〈0．01），A组电焊工血液中Cr、Ni含量较高，差异有统计学意义（Ucr=64．0，tNi=-4．4，P〈0．01）；B组电焊工血液中Cd含量较高，差异有统计学意义（U=260．0，P〈0．01）。多元线性回归分析显示，控制B组与对照组饮酒史的差异因素后，B组电焊工外周血DNA损伤仍显著高于对照（β=3．9，SE=0．9，t=4．3，P〈0．01）。但相关性分析显示，两组电焊工血液中各重金属含量与外周血DNA损伤均无显著相关性（P〉0．05）。结论电焊工血液中的重金属负荷种类可能与电焊丝的材料有关，但本研究并未发现单一重金属负荷与外周血DNA损伤存在相关性。B企业外周血DNA损伤可能与其他未明因素有关。

顺式联苯菊酯对映体对H295R细胞肾上腺皮质激素分泌的选择性干扰效应

[背景]手性农药是指分子结构中含有手性中心的农药化合物,含有一对或多对呈镜像关系的对映异构体(简称对映体)。顺式联苯菊酯(cis-bifenthrin,cis-BF)是当前应用较为广泛的一种手性拟除虫菊酯农药,含有1S-cis-BF和1R-cis-BF两个对映体。cis-BF是一种潜在的内分泌干扰物,有研究发现,cis-BF对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴分泌的糖皮质激素和盐皮质激素受体具有明显的拮抗效应,但关于cis-BF对映体对HPA轴激素合成分泌的选择性干扰效应及其机制仍不甚明了。[目的]探讨手性农药cis-BF对映体对人肾上腺皮质癌(H295R)细胞肾上腺皮质激素(皮质醇和醛固酮)分泌水平的影响及其分子机制。[方法]利用高效液相色谱仪对cis-BF进行手性拆分,用圆二色谱仪对单个对映体(1S-cisBF/1R-cis-BF)构型进行鉴定,用气相色谱对单个对映体浓度进行分析。体外培养H295R细胞,以不同浓度(0、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5 mol/L)1S-cis-BF/1R-cis-BF染毒细胞,用单溶液噻唑兰(MTS)比色法检测细胞增殖活性,确定染毒浓度。以无细胞毒性浓度(0、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7 mol/L)1S-cis-BF/1R-cis-BF处理细胞24 h,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(real-time PCR)检测肾上腺皮质激素合成相关酶基因的表达水平,用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量和细胞上清液中皮质醇、醛固酮水平。[结果]利用高效液相色谱仪完成cis-BF对映体的拆分,两种对映体1S-cis-BF和1R-cis-BF纯度分别高达99.5%和99.2%。MTS实验结果显示,与对照组相比,1×10^-6和1×10^-5 mol/L浓度组细胞增殖活性升高(P<0.05),而1×10^-9、1×10^-8和1×10^-7 mol/L 1S-cis-BF/1R-cis-BF对H295R细胞增殖活性无明显影响。PCR结果显示,相对于对照组,1×10^-7 mol/L1S-cis-BF可下调类固醇合成急性调节蛋白(St AR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD2)和17α-羟化酶(CYP17)的mRNA水平(P<0.05);1×10^-8、1×10^-7 mol/L1R-cis-BF可下调3βHSD2 mRNA水平(P<0.05),且在1×10^-7 mol/L浓度组St AR、3βHSD2和CYP17 mRNA水平具有对映体差异,1S-cis-BF的抑制作用分别是1R-cis-BF的2.23、2.04和5.00倍(P<0.05)。cAMP测定结果显示,1×10^-7 mol/L 1S-cis-BF染毒致细胞内cAMP含量相对于对照组下降了8.10%(P<0.05),而1R-cis-BF与对照组差异无统计学意义;且1×10^-7 mol/L浓度组cAMP含量有明显的对映体差异,1S-cis-BF的抑制作用高于1R-cis-BF(P<0.05)。激素测定结果显示,与对照组相比,所有浓度组(1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7 mol/L)皮质醇分泌水平均明显降低(P<0.05),1×10^-9、1×10^-7 mol/L1S-cis-BF及1×10^-7 mol/L1R-cis-BF组醛固酮分泌水平明显降低(P<0.05);其中在1×10^-8 mol/L浓度组,S型对映体对皮质醇分泌水平的抑制作用是R型对映体的1.68倍,在1×10^-7 mol/L浓度组,S型对映体对醛固酮分泌水平的抑制作用是R型对映体的2.16倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]cis-BF对映体通过降低c AMP水平,下调c AMP依赖性类固醇激素合成酶mRNA的表达而抑制H295R细胞内皮质醇和醛固酮的分泌水平,且1S-cis-BF的干扰效应明显高于1R-cis-BF。

桃源啸傲 别存天地——论李渔剧作

清代著名的戏曲作家,理论家李渔,逝世至今已经三百年了。三百年来,由于他在戏剧理论方面的大量精到论述而闻名遐迩。他在戏剧理论方面的建树,被认为是他长期从事艺术创作的实践经验总结。由于他熟悉舞台艺术的特性,在学术上又不以依附古人成说为满足,勇于开拓;发表了不少“泄从前未泄之秘”的真知灼见,至今仍给剧坛以影响,所以是我国古典艺术理论宝库中不可多得的宝贵遗产,自不待说。引人注目的是对其剧作的评价,褒贬不一,存在着不同的认识。这里就此谈点个人的粗浅看法,向专家们请教。

杭州市两污水处理厂进水中微塑料污染水平及特征

[背景]污水是微塑料进入水生环境的途径之一,研究其中微塑料污染物特征有助于了解人类活动对微塑料产生的影响。[目的]本研究以杭州市两污水处理厂为例,对其进水中微塑料污染水平及特征进行研究。[方法]于2020年四个季度,在杭州两污水厂采集进水水样各一次。使用过氧化氢溶液在60℃恒温条件消化样品中杂质,待消化完成后使用不锈钢筛从样品中筛分出微塑料。将微塑料置于显微镜下,利用体视显微镜和傅立叶红外光谱显微镜对微塑料进行识别,并通过体视显微镜对样品进行计数和分类。[结果]两污水处理厂进水中微塑料数量浓度分别为(8.20±0.28)、(11.01±0.59)个·L^(-1),两厂内4个季度之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。微塑料尺寸分类结果显示:>0.5~1 mm占比最大,其在A、B两厂中占比分别为57.5%和54.0%;>1 mm次之,在两厂占比分别为25.0%和28.0%;而0.098~0.2 mm尺寸的微塑料比例最少,占比分别为4.5%和6.0%。形态均以纤维为主,碎片次之;纤维在A、B两厂中占比分别为47.5%和49.0%,碎片分别为30.5%和29.0%。颜色以黑色为主,在A、B两厂中占比平均分别为57.0%和54.0%。研究中所采取的消化、分级提取方法具有较好的量效关系,其散点图拟合曲线为y=211x+3.4083,R^(2)=0.9952(P<0.001)。[结论]该市污水处理厂污水中以日常生活产生的纤维形态微塑料为主,尚未发现季节因素与污水中微塑料特征组成有关联。研究中所采取的消化、分级提取方法切实可行。