基于指纹图谱和多成分含量测定的护肝解毒汤标准煎液量值传递研究

目的:建立护肝解毒汤标准煎液的指纹图谱及多指标成分含量测定方法,为其标准煎液及制剂的质量评价研究提供参考。方法:采用HPLC法结合中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对15批护肝解毒汤标准煎液进行指纹图谱、相似度分析及共有峰的指认,并建立煎液中5种指标性成分的同时检测方法,计算各成分的转移率。结果:15批标准煎液指纹图谱相似度>0.90,有22个共有峰,对照品比对出绿原酸、葛根素、芍药苷、甘草素、落新妇苷、黄藤苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲、黄柏酮、梣酮10个成分,15批标准煎液中绿原酸、葛根素、落新妇苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲的转移率分别为48.26%~63.80%、20.30%~31.50%、28.24%~39.11%、2.89%~5.60%、13.51%~21.85%。结论:采用指纹图谱、出膏率及指标性成分含量测定相结合的模式,对护肝解毒汤标准煎液的量值传递过程进行分析,可初步拟定护肝解毒汤标准煎液的质量标准,为其后续新药开发及相关制剂的质量控制提供依据。

雷公藤活性成分对大鼠体内P450酶活性的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究雷公藤片对大鼠肝CYP450的影响。方法分别以奥美拉唑和咪达唑仑作为CYP2C19和CYP3A4的探针药,将大鼠随机分为低剂量和高剂量两组,每日早晚灌胃雷公藤片,采用液质联用法测定连续使用雷公藤片前后大鼠血浆中相应的探针药物的浓度及其药代动力学参数。结果连续灌胃10 d后,与用药前比较,奥美拉唑、咪达唑仑的血药浓度及其药代动力学参数有明显改变;低剂量组和高剂量组中咪达唑仑的AUC明显增加,CL/F明显降低,T12增大,Vd/F和Tmax变化不明显,高剂量组中Cmax有所增大;低剂量组中奥美拉唑的T21和Vd/F有所增大,高剂量组中AUC增加(P<0.05)。结论连续灌胃雷公藤片10 d后,雷公藤片对大鼠体内CYP3A4酶具有抑制作用;对CYP2C19酶具有一定的抑制作用。

指纹图谱技术结合化学计量学方法鉴别制首乌产地的研究

目的建立一种指纹图谱技术结合化学计量学方法的制首乌产地快速鉴别方法。方法建立33批不同产地制首乌的指纹图谱并对其进行相似度评价,对色谱峰信息进行偏最小二乘判别法分析(PLS-DA)和线性判别分析。结果以对照指纹图谱为参照,不同批次药材间化学成分及含量差异较小,采用指纹图谱结合相似度的评价方法无法对其产地进行区分;选取PLS-DA分析法,基于变量权重重要性排序(VIP)值确定其中的差异标志物,由此建立不同产地制首乌的线性判别函数模型并对不同产地制首乌进行预测,模型对测试集的验证结果良好。结论指纹图谱技术结合化学计量学方法可作为一种有效鉴别不同产地制首乌的方法。

液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用法测定大鼠血浆中柴胡皂苷a浓度及其药代动力学

目的建立测定柴胡皂苷a血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用的分析方法(LC-ESI-MS),探讨其在大鼠体内的药代动力学研究中的应用。方法SD大鼠12只,随机分为2组,分别单剂量静注(5mg·kg-1)和灌胃(50mg·kg-1)柴胡皂苷a,用LC-MS法测定给药后大鼠血浆中药物浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数。结果柴胡皂苷a的血药浓度在0.025～5mg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为25μg.L-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于80%,日间和日内精密度小于10%,符合生物样品分析要求。大鼠单剂量静注柴胡皂苷a5mg·kg-1后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数Tmax,Cmax,AUC0-t,T12β,CL,Vd分别为:5min,1907μg.L-1,64370mg.h-1.L-1,100.6min,0.0867L·min-1.kg-1,21.89L.kg-1。结论该方法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于柴胡皂苷a的体内大批量样品定量分析及药代动力学研究。

LC-MS/MS法研究辛伐他汀片在健康人体内的药代动力学及生物等效性

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC-MS/MS测定方法,研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药代动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:20名健康成年男性志愿者采用随机分组、自身两周期双交叉对照试验设计,单剂量口服参比制剂辛伐他汀片40 mg后,用LC-MS/MS联用法测定血浆中药物浓度。结果:试验制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:Tmax分别为1.8±1.3、2.10±1.00 h;Cmax分别为7.12±1.61、7.38±1.54μg.L-1;AUC(0-24)分别为30.50±11.25、30.17±10.21μg.L.h-1;t1/2分别为3.90±0.78、3.76±0.85 h。以AUC(0-24)计算的试验制剂的相对生物利用度为(101.2±7.8)%。结论:建立的分析方法准确灵敏,测得的数据可靠,统计学分析表明两种制剂生物等效。

IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子在痔疮患者中的表达

目的:以痔疮患者肠道内IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子为研究对象,检测其在痔疮患者中的表达,探讨细胞因子在痔疮发病机制中的作用。方法:采用免疫组化方法测定痔疮患者病变部位直肠黏膜和血管内皮细胞内IL-17、IL-6、TNF-α表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测痔疮患者(试验组)与对照组血清IL-17蛋白表达。结果:试验组与对照组血清IL-17表达无差异(P>0.05);试验组与对照组直肠血管内皮细胞IL-17、IL-6、TNF-α表达有显著差异(P<0.05);试验组直肠黏膜IL-17、IL-6、TNF-α表达与对照组相比也都具有显著性差异(P<0.05)。结论:据此推测局部阻断IL-17、IL-6、TNF-α等细胞因子的分泌可能成为治疗痔疮的一种方法。

左乙拉西坦注射液与左乙拉西坦片在健康受试者中的药代动力学比较

目的:比较在空腹条件下,国产左乙拉西坦注射液与原研药左乙拉西坦片给药时的药代动力学参数,并观察两者在健康受试者中的安全性与耐受性。方法:利用已经建立的高效液相色谱质谱(HPLC-MS/MS)分析法测定健康受试者两周期给药前后血浆样本中的左乙拉西坦药物浓度。结果:受试者分别静脉注射左乙拉西坦注射液和口服左乙拉西坦片后,左乙拉西坦的主要药代动力学参数如下:t1/2分别为(7.70±0.85)、(7.81±0.88)h;Tmax分别为(0.70±0.10)、(0.90±0.80)h;Cmax分别为(51.64±9.59)、(40.83±9.13)ng/m L;AUC0-t分别为(385.69±65.45)、(394.24±64.68)ng·m L-1·h;AUC0-∞分别为(390.85±66.40)、(400.13±65.89)ng·m L-1·h。以左乙拉西坦片的AUC0-t计算左乙拉西坦注射液平均相对生物利用度为(98.1±9.4)%。试验期间未发生严重程度为重度的不良事件。结论:左乙拉西坦注射液和左乙拉西坦片的药代动力学参数无统计学差异且两种制剂在健康受试者中的安全性较好。

秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收机制的研究

目的:研究秦皮甲素在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法:用Caco-2细胞单层模型研究秦皮甲素的双向转运,考察时间、药物浓度对秦皮甲素吸收的影响。采用高效液相色谱法检测秦皮甲素浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同;随着秦皮甲素质量浓度的增加,顶端到基底端方向的吸收量近似线性增加,基底端到顶端方向的分泌量近似线性增加。结论:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收主要是被动转运。

基于液质联用技术的白头翁汤治疗溃疡性结肠炎小鼠血清代谢组学分析

目的研究白头翁汤给予溃疡性结肠炎小鼠前后内源性代谢物的变化,寻找与治疗溃疡性结肠炎有关的代谢生物标志物,探讨白头翁汤对溃疡性结肠炎模型的调节作用及其可能机制。方法采用DSS复制小鼠溃疡性结肠炎模型,借助超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,对各组小鼠血清样本进行测定,采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS DA)来筛选差异性代谢物。结果经分析,对照组、模型组和白头翁汤治疗组血清样本能够得到很好的区分,共鉴定出6种潜在生物标志物,白头翁汤给药后溃结小鼠的内源性代谢物水平发生不同程度的回调。结论白头翁汤可以使DSS诱导的溃结小鼠的异常代谢有所恢复,其治疗作用可能与机体内6个代谢物及3条相关代谢通路的调节有关。

格列齐特片在健康人体内的药代动力学及生物等效性研究

目的研究格列齐特片在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性。方法20名健康成年男性志愿者采用随机分组自身交叉对照试验设计,单剂量口服80mg格列齐特片后,用高效液相色谱法测定血浆中药物浓度。结果格列齐特在0.104～12.48μg/ml浓度范围内线性良好(r=0.99988),平均回收率90.125%～104.6%,日内和日间精密度(RSD)均<10.0%。试验制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:峰时(Tmax):(4.4±0.9)和(4.0±0.9)h;峰浓度(Cmax):(4.8±0.6)和(5.3±0.8)μg/ml;曲线下面积(AUC)0￣48h:(86±29)和(88±33)mg·L-1·h-1;AUC0￣∞:(99±45)和(103±58)mg·L-·1h-1;消除半衰期(T1/2):(13±4)和(14±5)h。以AUC0￣48h计算的受试制剂的相对生物利用度为(99±9)%。结论建立的分析方法准确灵敏,统计学分析表明两种制剂生物等效。

豆腐果苷研究进展

豆腐果苷（helicid，对甲醛苯O-β—D阿咯吡喃糖苷）又名昆明神衰果素，为云南野生植物山龙眼科萝卜树（Heliciaerratica Hook．f）的果实（俗称豆腐渣果）中提得的单体成分，其化学结构类与天麻素（gastrodin，对羟甲基苯-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）相似。药理和临床研究表明，豆腐果苷对中枢神经系统的作用与天麻素相似，但其镇静、止痛作用较天麻素强，对神经官能症引起的头痛、头昏、睡眠障碍的治疗作用显效快，

江苏省三级中医与中西医结合医疗机构中药饮片管理现状分析及质量控制指标优化建议

目的:收集整理分析2019年3月至2021年2月江苏省41所三级中医与中西医结合医疗机构中药饮片管理现状,为江苏省中药药事质控中心中药饮片管理质量控制指标的设计和优化提供依据和建议。方法:围绕中药饮片品种数和炮制品种数、采购验收和使用管理、特殊中药饮片管理、门诊和病区住院人次、中药饮片处方调配量和代煎率、处方点评数和药学专业技术人员配置,进行数据收集和统计分析。结果:在41所医疗机构中,35所(85.37%)使用中药饮片品种数有400~600种,36所(87.80%)炮制品品种数占比10%~50%。27所(65.85%)使用毒性中药饮片,6所(14.63%)有按麻醉药品管理的罂粟壳库存。19所(46.34%)医疗机构中药饮片平均月采购次数少于5次,23所(56.10%)平均月退货1~5个品种。40所(97.56%)医疗机构中药饮片平均月销售金额不超过1000万元。36所(87.80%)医疗机构月平均门诊人次分布在1万~10万人次,31所(75.61%)病区月平均住院人次分布在1000~3000人次。门诊中药饮片平均月代煎率为3.35%~4.38%,36所(87.80%)医疗机构门诊平均月代煎人次在5000人次以下;病区中药饮片平均月代煎率为50.77%~57.76%,36所(87.80%)医疗机构病区月平均代煎人次在3000人次以下。29所(70.73%)医疗机构门诊平均月调配处方量在10000张以下,38所(92.68%)病区月平均调配处方量小于5000张。40所(97.56%)门诊中药饮片处方点评张数≥100张,38所(92.68%)门诊中药饮片处方点评率大于0.5%;39所(95.12%)病区中药饮片处方点评数≥30张,23所(56.10%)病区中药饮片处方点评率大于5%。12所(29.27%)医疗机构药学专业技术人员占比≥8%;9所(21.95%)医疗机构的中药学专业技术人员在药学专业技术人员占比≥60%。运用K-均值聚类分析方法将41所医疗机构分成3类,总结主要问题是中药饮片临床应用仍较局限,采购验收、使用质量控制和中药处方点评工作不完善,中药专业技术人员构成比偏低。结论:建议质控指标增设门诊、住院中药饮片使用率和中药饮片处方比,定期抽查中药饮片采购和验收资料,加强中药饮片质量抽查和中药饮片处方点评力度,完善医疗机构中药药事管理质量评价体系,为推进全省中药药事质量控制工作,促进中医药持续发展提供有力保障。

UPLC-MS法测定大鼠血浆中积雪草苷的浓度及其药代动力学研究

目的建立测定积雪草苷血浆药物浓度的超高效液相色谱-电喷雾离子化-质谱(UPLC-ESI-MS)联用的分析方法,探讨其在大鼠体内的药动学。方法SD大鼠8只,单剂量静注(40mg·kg-1)积雪草苷,用UPLC-MS法测定给药后的血浆中药物浓度,并用DAS软件求算其药代动力学参数。结果积雪草苷的血药浓度在0.038～7.6mg·L-1范围内线性关系良好,最低检测限为38μg·L-1,提取回收率大于95%,日间、日内RSD均小于10%。大鼠单剂量静注积雪草苷40mg·kg-1后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数AUC(0-t)、T12β、CL、Vd分别为:(81443.67±57156.81)μg·L-1·min-1、(23.44±9.60)min、(0.19±0.07)L·min-1·kg-1、(8.92±6.68)L·kg-1。结论该方法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于积雪草苷的体内大批量样品定量分析及药代动力学研究。

Cocktail法研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的:研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法:14只大鼠随机均分成临床等效剂量组和高剂量组,连续2周静脉给予脉络宁注射液(临床等效剂量组,2 mL/kg;高剂量组,4 mL/kg)前后,均同时灌胃给予3个探针底物(茶碱,30 mg/kg;氯唑沙宗,50 mg/kg;氨苯砜,20 mg/kg),进行采血试验。用HPLC法同时测定大鼠体内各探针的血药浓度,DAS 1.0软件计算药动学参数,并以配对t检验对各组大鼠前后两轮主要药动学参数进行差异性比较。结果:在1个给药疗程(14 d)内,临床等效剂量组大鼠用药前后,3个探针的药动学参数均无显著性变化(P>0.05);高剂量组大鼠用药后,与用药前相比,茶碱的药动学参数没有显著变化(P>0.05);氨苯砜和氯唑沙宗的AUC0-24 h均有升高趋势(P<0.05),给药后分别是给药前的1.44倍和1.28倍,同时氯唑沙宗的CL显著降低(P<0.05)。结论:临床等效剂量脉络宁对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性均无显著影响,而高剂量脉络宁对大鼠CYP2E1和CYP3A4均有弱抑制作用。

基于HPLC指纹图谱的半夏及其伪品鉴别研究

目的建立高效液相色谱法(HPLC)对半夏及其伪品进行指纹图谱分析,以鉴定半夏的真伪。方法用SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.2%磷酸二氢铵溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,进样量20μL,流速0.8 mL/min,柱温30℃,采用双波长检测。结果生半夏共有10个共有峰,通过对照品比对指认了其中5个共有峰;伪品半夏中同时含有8种有效成分;随机选取部分生半夏与伪品半夏样品建立叠加指纹图谱得出:虎掌南星于34~38 min出现2个特征峰;姜水半夏在32~34 min出现2个特征峰;而水半夏出峰整体峰高较低,峰面积偏小。结论建立的指纹图谱特征性强,能明显区分半夏与其伪品水半夏及虎掌南星,可用于半夏的鉴别和质量控制。

LC/APCI/MS/MS测定Beagle犬口服雷公藤片后血浆中雷公藤甲素

目的建立LC／APCI／MS／MS法测定Beagle犬血浆中雷公藤甲素，研究Beagle犬单剂量口服雷公藤片后体内雷公藤甲素药动学。方法血浆样品经乙酸乙酯提取，色谱柱为AgilentZORBAXSBC18（3．0mm×100mm，3．5μm），运用甲醇～醋酸铵缓冲液梯度洗脱，多反应监测（MRM）雷公藤甲素（[M＋H]＋，m／z378．5／361．3）和内标泼尼松龙（[M＋H]＋，m／z361．3／147．0）。Beagle犬单剂量口服雷公藤片（1片／kg）后，采用该方法测定血浆中雷公藤甲素，DAS（1．0）软件对雷公藤甲素药-时曲线进行拟合，并计算药代动力学参数。结果在0．16—20．55μg·L^-1内，雷公藤甲素与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好，日内日间精密度小于6．15％，提取回收率大于79．14％。Beagle犬口服雷公藤片后，雷公藤甲素主要药动学参数为：Cmax／μg·L^-1：2．78±0．387；Tmax／h：1．75±0．76；T1/2／h：2．59±0．60；CL／L·kg^-1·h^-1：2．768±0．606；AUC（0～9）／μg．L^-1．h：11，539±1．491；AUC（0-∞）／μg·L^-1·h：13．185±1．686。结论建立的LC／APCI／MS／MS分析方法准确灵敏，适用于雷公藤片中雷公藤甲素在Beagle犬体内的药代动力学研究。

人参皂苷Rg3药理学及药代动力学研究进展

人参是我国传统中草药,其有效化学成分主要为人参皂苷,目前已从人参中分离出80多种人参皂苷单体成分,并根据化学结构分为4型：原人参二醇型、原人参三醇型、奥克梯隆醇型和齐墩果酸型[1]。人参皂苷Rg3是原人参二醇型皂苷单体,分子式为C42H72O13,相对分子质量为784。

阿司匹林对灯盏细辛注射液中咖啡酸的药代动力学影响

目的研究阿司匹林对灯盏细辛注射液(DI)中咖啡酸的药代动力学的影响。方法 LC-MS/MS测定大鼠血浆中咖啡酸浓度,实验动物分为对照组和实验组,对照组单独尾静脉给予DI,实验组尾静脉给予DI及灌胃给予阿司匹林。DAS 1.0药动学软件计算药动学参数。结果 DI单独给药、DI-阿司匹林联合给药,咖啡酸在体内代谢动力学模型均为二室开放模型,联合给药后,咖啡酸的T12β明显增大,CL有所减小。结论阿司匹林可减慢咖啡酸在体内的代谢过程。

HPLC同时测定何首乌中5种成分及指纹图谱的建立

目的建立HPLC同时测定不同产地何首乌中5种指标性成分含量的方法,并建立何首乌HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,测定何首乌样品中五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚含量,用SPSS19.0统计软件对数据进行聚类分析,建立何首乌HPLC指纹图谱并进行分析。结果何首乌中5种指标性成分的进样量在线性范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 4。安徽阜阳样品中五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素甲醚含量最高(分别为0.048 9%、0.036 1%、3.179 9%、0.551 2%),贵州安顺样品中大黄素含量最高(0.423 8%);安徽阜阳样品中指标成分平均总含量最高(3.966 6%),其次为安徽亳州(2.769 8%)、贵州(2.469 4%)及四川(2.306 3%)。云南何首乌样品与其他产地的指纹图谱差异较大,且二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚成分未检出。14批样品指纹图谱有18个共有峰,指认了2、4、7、17、18号峰分别为五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚。结论本试验建立的方法稳定可靠,重现性好,能有效用于何首乌的质量控制。