鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死模型大鼠:肠道菌群及血清激素变化

背景:股骨头坏死是一种常见的致残性疾病,主要表现为微循环障碍、骨细胞代谢紊乱。鹿仲健骨汤由山东省中医药研究院研制而成,在临床以汤剂形式使用,对股骨头坏死具有良好疗效,然而其作用机制尚未明确。目的:基于16S rDNA技术研究鹿仲健骨汤对股骨头坏死模型大鼠肠道菌群的影响,探究其治疗股骨头坏死的作用机制。方法:采用维甲酸灌胃的方式建立Wistar大鼠股骨头坏死模型,通过股骨头部位骨形态计量学、骨组织病理学和血清激素水平评价鹿仲健骨汤的治疗作用,采用16S rDNA测序技术对空白对照组、模型组及鹿仲健骨汤中剂量组大鼠肠道菌群进行分析,构建相应文库并进行OTU聚类以及微生物群落多样性、丰度等分析,明确肠道菌群的组成及各组间的菌群种类、多样性变化。结果与结论:(1)鹿仲健骨汤可以显著提高骨钙素、骨桥蛋白等成骨相关因子的表达,缓解骨小梁的破坏,增加骨密度,对股骨头坏死具有显著的治疗作用,鹿仲健骨汤中剂量组效果最为显著;(2)肠道菌群测序结果显示,鹿仲健骨汤在一定程度上改善了股骨头坏死大鼠菌群紊乱,共筛选出杆菌门、脱硫弧菌门、脱硫孤菌属、异杆菌属、双歧杆菌属等差异菌落;能上调双歧杆菌等有益菌丰度,下调脱硫弧菌等有害菌丰度,改善肠道菌群结构;(3)通过功能预测分析发现鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死可能主要影响氨基酸代谢、能量代谢等;(4)相关性分析显示,鹿仲健骨汤中剂量组的差异菌双歧杆菌属(Bifidobacterium)、肠单胞球菌(Intestinimonas)与维生素D3、雌二醇、降钙素呈正相关,与前列腺素E2呈负相关;模型组的差异菌大肠杆菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)、脱硫孤菌属(Desulfovibrio)、格鲁比卡氏菌属(Globicatella)、链球菌属(Streptococcus)与前列腺素E2呈正相关,与维生素D3、雌二醇、降钙素呈负相关。结果表明:鹿仲健骨汤可能通过调节肠道菌群结构,上调有益菌丰度,影响维生素D3、雌二醇、降钙素及前列腺素E2激素分泌,起到治疗股骨头坏死的作用。

基于代谢组学研究经典名方达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠模型的作用机制

目的 基于超高液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱法(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole electrostatic field orbital trap mass spectrometry, UHPLC-QE-MS)研究达原饮对模型小鼠的干预及肺组织代谢物的影响,以探究达原饮治疗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)寒湿郁肺证的作用机制。方法 采用寒湿刺激加RSV滴鼻感染的方法建立RSV寒湿郁肺证小鼠模型,综合小鼠活动状态、肺指数和肺组织病理,结合肺组织中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)炎症因子的含量,初步评价达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠的治疗效果。利用UHPLC-QE-MS技术检测正常组、模型组、达原饮中剂量组小鼠肺组织代谢物,以正交偏最小二判别分析进行多元统计分析模式识别,以P<0.05且VIP值>1为条件筛选差异代谢物,并借助MetaboAnalyst 5.0数据库富集代谢通路。结果 达原饮可以显著改善RSV寒湿郁肺证小鼠的一般状态,降低肺指数,改善肺组织病理,并降低肺组织中IL-6、IL-1β的含量。代谢组学结果显示,与达原饮调控相关的差异代谢物共有35个,主要涉及嘌呤代谢、花生四烯酸、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢通路。结论 从代谢组学角度分析了达原饮治疗RSV寒湿郁肺证的作用机制,为达原饮抗病毒研究及临床应用奠定了基础。

UPLC-MS/MS法同时测定达原饮中28种成分

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定达原饮中没食子酸、原儿茶酸、新芒果苷、儿茶素、咖啡酸、芒果苷、异芒果苷、芍药内酯苷、芍药苷、牡荆素、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、甘草素、知母皂苷BⅡ、槲皮素、汉黄芩苷、苯甲酰芍药苷、异甘草素、和厚朴酚、厚朴酚、去甲槟榔次碱、槟榔次碱、槟榔碱、表儿茶素、黄芩素、甘草酸铵、汉黄芩素的含量。方法分析采用Syncronis C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;选择反应监测模式。结果28种成分在各自范围内线性关系良好(R 2≥0.9910),平均加样回收率95.60%[WTBZ]~103.53%[WTBZ],RSD 0.60%[WTBZ]~5.45%[WTBZ]。结论该方法快速简便,选择性好,准确可靠,可用于达原饮的质量控制。

中药外用制剂治疗糖尿病足研究进展

糖尿病足是糖尿病的慢性并发症之一,主要与周围神经病变、外周血管疾病、感染有关,因其发病率、截肢率及病死率显著,已成为全球重大公共卫生问题。中医药治疗糖尿病足具有多靶点、多途径、低毒副作用等独特的优势。中药外用制剂种类多样,包括软膏剂、洗剂、散剂、凝胶剂、酊剂、气雾剂、喷雾剂等,可使药物直接作用于糖尿病足创面,具有简、便、效、廉的特点,通过调节PI3K/Akt、JNK、TGF-β/Smad等信号通路,发挥抑制炎症反应、促进血管生成、胶原沉积、肉芽组织形成、再上皮化的作用,影响创面愈合的炎症阶段、增殖阶段、重塑阶段,加速糖尿病足创面愈合。本文探讨糖尿病足的主要病因,并基于剂型对近年来中药外用制剂对糖尿病足的研究进行综述,以期为中药外用制剂的开发以及糖尿病足的临床治疗提供参考。

荧光标记技术在药物成分示踪研究中的应用

荧光标记技术是研究药物有效成分在体内分布、代谢路径、作用靶点等特征的有效手段,由于其操作简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好、成本低等优势,被广泛应用于药物体内示踪研究中,对于阐明药物发挥作用的物质基础及其作用机制、改善药物的给药途径具有重要意义。本文综述了荧光示踪技术的原理及荧光染料与药物分子结合的方式,并讨论了该技术未来应用趋势,为药物成分体内示踪研究提供参考意义。

杜仲叶的研究进展及其质量标志物预测分析

杜仲叶主要含有环烯醚萜类、黄酮类、木脂素类、苯丙素类、多糖类等成分,具有抗氧化、降血压、降血糖、降血脂、调节免疫、抗骨质疏松等多种药理作用。从质量传递与溯源、植物亲缘学及特有性、传统药效、化学成分可测性等方面分析可作为其质量标志物的成分,预测芦丁、槲皮素、绿原酸、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷、车叶草苷等作为杜仲叶的质量标志物,此为今后进一步探索杜仲叶的药用价值及质量评价提供了参考。参考文献59篇。

达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠肺部损伤和肠道菌群的影响

目的探讨达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠肺部损伤和肠道菌群的影响。方法将36只BALB/c小鼠分为正常组(NC组)、模型组(MC组)、阳性对照组(LBM组,利巴韦林57.59 mg/kg)和达原饮低、中、高剂量组(LDYY、MDYY、HDYY组,达原饮按生药量计1.67、3.34、6.68 g/kg),每组6只。除NC组外,其余各组小鼠采用“寒湿造模+RSV感染”的方式建立RSV寒湿郁肺证小鼠模型;于第2次寒湿刺激结束后,鼻腔滴注50倍半数细胞培养物感染量的RSV液,每天1次,连续3 d;各药物组于每次滴鼻4 h后灌胃相应药液,每天1次,连续5 d。检测小鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)水平,肺组织上清液中白细胞介素6(IL-6)、IL-1β水平,外周血淋巴细胞百分比;观察肺组织病理形态变化并分析肠道菌群变化。结果与MC组比较,达原饮各组小鼠血清中MTL水平(HDYY组除外)和肺组织上清液中IL-6、IL-1β水平均显著降低,血清中GAS水平(HDYY组除外)均显著升高(P<0.05或P<0.01),肺组织病理状态均改善;LDYY组外周血中T淋巴细胞的百分比和MDYY组外周血中T、B淋巴细胞的百分比均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与NC组比较,MC组中拟杆菌门、放线菌门、拟杆菌属、另枝菌属、拟杆菌纲、产酸拟杆菌、拟普雷沃氏菌属等呈高丰度表达,厚壁菌门、变形菌门、毛螺菌属NK4A136组、丝状菌属、未分类的Clostridiales等呈低丰度表达;经中剂量达原饮干预后,各菌群相对丰度均有回调趋势,其差异物种包括Lachnospiraceae_UCG-006、瘤胃球菌属Ruminococcus等。结论达原饮能够减轻RSV寒湿郁肺证小鼠的肺部损伤,其机制可能与减轻炎症、调节胃肠激素水平和淋巴细胞百分比以及肠道有益菌和有害菌的相对丰度有关。

藕节炒炭鞣质的含量变化研究

目的:测定炒炭不同程度藕节中鞣质的含量变化。方法:采用磷钼钨酸法显色,并用紫外-可见分光光度法进行测定。结果:藕节炒制成标准炭其鞣质含量最高,生品及其余程度炭品鞣质含量均低于标准炭。结论:藕节炒成标准炭后鞣质含量明显增高,但鞣质是否为藕节炭止血的有效成分有待进一步研究。

藕节炭中3-表白桦脂酸含量的测定

目的建立藕节炭中3-表白桦脂酸含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:LichrospherC18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%冰醋酸(75∶25),流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:207nm。结果3-表白桦脂酸的进样量在0.3654～3.654μg范围内线性关系良好,r=0.9996,平均回收率为98.83%,RSD=2.47%。不同地区市售藕节炭中3-表白桦脂酸的含量最高为0.5758%,最低为0.0483%。结论本法简便、准确、重复性好,可作为藕节炭中3-表白桦脂酸的含量测定方法。

HPLC法测定复方大黄利胆片中大黄素、大黄酚的含量

目的：建立复方大黄利胆片含量测定方法。方法：采用HPLC法测定方中大黄素、大黄酚的含量。结果：大黄素在（0.0412～0.2060）μg范围内线性关系良好,平均回收率为97.17%,RSD为1.03%,大黄酚在（0.08176～0.4088）μg范围内线性关系良好,平均回收率为97.37%,RSD为1.28%。结论：该方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂含量测定方法。

薄层扫描法测定凤乳通颗粒中黄芪甲苷的含量

应用薄层扫描法测定了凤乳通颗粒中黄芪甲苷的含量，加样回收率为95．6％，RSD为2.82％。该法可控制本制剂的质量。

HPLC法测定银仁颗粒中绿原酸的含量

目的建立银仁颗粒中绿原酸的含量测定方法。方法采用HPLC法测定绿原酸的含量,色谱柱:Shim-PackCLC-ODS柱(150×6.0mm,5μm);流动相:3%甲酸-甲醇(79∶21);流速:1.2mL/min;检测波长:327nm;进样量:10μL;柱温:室温。结果绿原酸在0.102～1.02μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9996;平均回收率为98.17%,RSD=1.31%。结论该方法简便、准确,可用于银仁颗粒的质量控制。

高效液相色谱法测定市售首乌藤中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的测定济南市售首乌藤中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量,同时进行比较。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:lichrospher C_(18)柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水(20:80),流速:1ml/min,检测波长320 nm。结果市售首乌藤中二苯乙烯苷含量为0.0179%～0.355%。结论市售首乌藤中二苯乙烯苷含量差距较大,其质量存在比较明显的差异。

HPLC测定济南市售首乌藤中大黄素含量

目的:测定济南市售首乌藤中大黄素含量。方法:采用HPLC,色谱柱:lichrospherC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(83∶17),流速:1mL·min-1,检测波长:288nm。结果:市售首乌藤中大黄素含量为0.0517%～0.187%。结论:市售首乌藤中大黄素含量差距较大,其质量存在比较明显的差异。

金礞石炮制历史及现代研究概况

对金礞石的炮制历史、化学成分、鉴别及炮制研究进行了文献综述,为进一步研究金礞石提供参考。

HPLC测定七花活血片中人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量

目的:建立七花活血片的含量测定方法。方法:采用HPLC梯度洗脱法测定七花活血片中人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量。色谱柱:lichrospherC_(18)柱(4．6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水(20:80～40:60)线性梯度洗脱;流速:0．8mL·min^(-1);柱温:30℃,检测波长:203nm。结果:人参皂苷Rg_1的进样量在1．025～10．25μg线性关系良好,r=0．999 4,平均回收率为96．61%,RSD=1．26%;人参皂苷Rb_1的进样量在0．545～5．45μg线性关系良好, r=0．999 3,平均回收率为96．51%,RSD=1．94%。结论:本法准确、专属性强、重现性好,可作为本制剂的含量测定方法。

三黄汤制炉甘石的鉴别及氧化锌定量测定

目的建立三黄汤制炉甘石的鉴别及定量测定方法。方法采用理化、薄层层析法对三黄汤制炉甘石进行鉴别;采用滴定法对三黄汤制炉甘石中氧化锌进行定量测定。结果采用理化及TLC可鉴别三黄汤制炉甘石,采用改进后的氧化锌定量测定方法可测定其氧化锌的量。结论本测定方法,可作为三黄汤制炉甘石的鉴别及氧化锌的定量测定方法。

HPLC法测定不同地区市售藕节中3-表白桦脂酸

目的：建立HPLC法测定藕节药材中3-表白桦脂酸的含量。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：Hy-persil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-0.2%冰醋酸（75∶25）,流速：1.0 mL/min,柱温：30℃,检测波长：207 nm。结果：3-表白桦脂酸的进样量在0.3654-3.654μg范围内线性关系良好,r=0.9996,平均回收率为99.93%,RSD为1.65%。不同地区市售藕节中3-表白桦脂酸的含量最高为0.583%,最低为0.0869%。结论：该法准确、灵敏、重现性好,可作为藕节药材3-表白桦脂酸的测定方法。

心得宁片的鉴别与含量测定方法研究

应用薄层层析法对心得宁片中的元胡、葛根进行了鉴别；