促红细胞生成素预处理对视网膜神经元缺氧性损伤的保护作用

目的研究缺氧对培养大鼠视网膜神经元的影响及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理的保护作用。方法取体外原代培养3d的大鼠视网膜神经元,利用1mmol.L-1的连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖持续6h,导致神经元缺氧性损伤。采用免疫组化染色技术检测了EPO受体在原代培养视网膜神经元的表达,乳酸脱氢酶(LDH)释放率作为评价损伤的指标,TUNEL染色检测视网膜神经元的凋亡,并进行形态学观察。结果原代培养的大鼠视网膜神经元正常下可见EPOR的弱阳性表达,表达部位定位于神经元的胞体和突起,缺氧后EPOR的表达明显增加;神经元LDH释放率和凋亡百分率增加;在损伤前加入浓度2.5～40kU.L-1的rhEPO均可有效抑制LDH释放(P<0.05)。TUNEL结果显示rhEPO预处理能抑制神经元的凋亡,明显改善细胞缺氧性损伤的形态学变化。结论EPO预处理对神经元的缺氧损伤具有保护作用,且具有浓度和时间依赖性。

泪道激光成形联合新型泪道引流管留置术治疗泪道阻塞的临床观察

目的探讨泪道激光成形联合新型泪道引流管留置术治疗泪道阻塞的治疗效果。方法89例(95眼)泪道阻塞患者行Nd:YAG激光成形联合新型泪道引流管留置3个月,拔管后随访3～12个月,观察流泪和流脓情况、泪道功能恢复及并发症情况。结果末次随访时,经此方法治疗各种泪道阻塞的患者治愈72眼,占75.79%;有效15眼,占15.79%;无效8眼,占8.42%,总有效率91.58%。其中泪小管阻塞者有效率100.00%(23/23),泪总管阻塞者有效率100.00%(12/12),鼻泪管阻塞者有效率94.44%(34/36),泪小管合并鼻泪管阻塞者有效率85.71%(12/14),慢性泪囊炎者有效率60.00%(6/10)。3眼术后2周左右有轻微眼部刺激症状,4眼出现泪小管周围组织红肿不适,1眼出现泪小点撕裂,因假道形成致眼睑肿胀1眼,无一例患者出现泪道插管滑脱,余未见其他并发症发生。结论泪道激光成形联合新型泪道引流管留置术治疗泪道阻塞是一种有效的治疗方法。

泪道激光术后留置泪道引流管与药物灌注治疗泪道阻塞的疗效对比观察

目的:比较泪道激光术后药物灌注与留置泪道引流管两种方法治疗阻塞性泪道疾病的临床效果。方法:将Nd:YAG激光疏通泪道,A组38例40眼,激光疏通泪道后联合新型泪道引流管留置3mo。B组45例49眼,激光疏通泪道后注入典必殊药膏。术后随访3～6mo,对比分析两组的治疗效果。结果:泪道激光疏通术后留置泪道引流管与药物灌注,两种方法均有明显效果。治愈33眼,治愈率82.5%,好转4眼,好转率10.0%,总有效率92.5%;B组:治愈21眼,治愈率42.9%,好转13眼,好转率26.5%,总有效率69.4%。经统计学分析两组间差异有显著性意义(χ2=7.291,P<0.05)。结论:泪道激光治疗泪道阻塞性疾病安全有效,联合留置新型泪道引流管治疗泪道阻塞方法疗效明显提高。

新生大鼠视网膜神经元的原代培养与观察

目的：建立新生大鼠视网膜神经元体外培养的有效方法。方法：取出生后1～3d的Wistar大鼠视网膜，胰蛋白酶＋依地酸（EDTA）消化制成单细胞悬液，接种于置有包被多聚赖氨酸（poly-L-lysine）玻片的24孔培养板中培养，利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察；并以免疫细胞化学技术对视网膜神经元进行染色。结果：在多聚赖氨酸上培养的视网膜神经元生长良好，部分细胞伸出突起，且有些突起相互连接。免疫细胞化学染色显示，培养的细胞大多数抗神经丝蛋白（NF）抗体反应阳性。胰蛋白酶＋EDTA联合消化能使视网膜细胞很好得分离，获得视网膜单细胞悬液。结论：酶消化法原代培养视网膜神经元有较好的视网膜神经元生长率；胰蛋白酶＋EDTA联合消化较单独用胰蛋白酶消化效果好。

眼睑基底细胞癌中p16、CD_(44V6)蛋白的表达及意义

目的 探讨眼睑基底细胞癌中肿瘤抑制基因p16和细胞黏附分子变异体 6(CD44V6 )表达及临床病理学意义。方法 应用SABC(链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)免疫组织化学法对 48例眼睑基底细胞癌中p16、CD44V6蛋白表达进行检测。 结果 48例眼睑基底细胞癌中p16、CD44V6蛋白阳性表达率分别为 66 7% (32 /48)和 39 6% (19 /48),分化型与未分化型p16、CD44V6蛋白阳性表达率差异有显著性 (P<0 05),CD44V6蛋白阳性表达率与肿瘤复发有关 (P<0 05)。结论 p16、CD44V6蛋白表达与眼睑基底细胞癌的分化程度有关,CD44V6分子可能与眼睑基底细胞癌的复发有关。

p21 ras和p53的表达与眼睑恶性肿瘤临床病理学的关系

目的 探讨 ras和 p5 3基因突变与眼睑恶性肿瘤发生的关系及临床病理学意义。方法 采用免疫组化 SABC法检测了 98例眼睑恶性肿瘤组织中 p2 1ras和 p5 3蛋白的表达。结果 眼睑正常及轻度不典型增生上皮中未见 p2 1ras和 p5 3蛋白表达 ;而中、重度不典型增生、原位癌、浸润癌 p2 1ras和 p5 3蛋白阳性表达率逐渐增高 ,随着肿瘤分化程度的降低 ,p2 1ras和 p5 3蛋白阳性表达率及阳性表达强度逐渐增高 ;SCC中 p2 1ras及 p5 3蛋白阳性表达强度与组织分化程度之间呈显著负相关 ,且差别有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 p2 1ras和 p5 3基因突变与眼睑恶性肿瘤发生、发展密切相关。

眼睑恶性肿瘤发病的分子机制

眼睑恶性肿瘤是眼科常见病,其中眼睑基底细胞癌、鳞状细胞癌及眼睑皮脂腺癌最多见,并称眼睑3大恶性肿瘤。随着分子生物学技术的发展,研究发现多种因素参与眼睑恶性肿瘤发病过程,与其发病有关的癌基因、抑癌基因、细胞凋亡相关基因、细胞增殖相关因子、粘附因子、基底膜蛋白、端粒酶等,这些基因和蛋白的变异与眼睑恶性肿瘤的发生发展、分化程度、浸润转移、预后等密切相关。

眼睑恶性肿瘤中P16蛋白的表达

1目的 探讨 P16蛋白在眼睑恶性肿瘤中的表达情况及其与眼睑恶性肿瘤发生、发展的关系。 2方法 应用免疫组化 SABC法检测 96例常见眼睑恶性肿瘤的 P16蛋白。 3结果 眼睑恶性肿瘤 P16蛋白阳性者均为细胞核染色。其中 2 8例基底细胞癌 (BCC) ,18例鳞状细胞癌 (SCC) ,13例睑板腺癌 P16蛋白呈阳性表达 ,阳性率分别为 70 .0 0 % ,5 4.5 5 % ,5 6 .5 2 % ,随肿瘤分化程度的降低 ,P16蛋白阳性表达率下降 ,高分化癌与低分化癌间差异有显著性 (P =0 .2 86 )。 4结论 P16蛋白的表达与眼睑恶性肿瘤的发生及分化程度有关。

转化生长因子-β与葡萄膜黑色素瘤

转化生长因子-β(TGF-β)是一种具有多种生物学功能的多肽类生长因子。TGF-β在肿瘤的发生过程中起着双向调节作用,同时TGF-β对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成及机体免疫系统均起着重要作用。近年研究TGF-β的异常过表达以及信号传导通路的异常与葡萄膜黑色素瘤生长和侵袭转移能力密切相关。就TGF-β的结构、功能以及它在葡萄膜黑色素瘤发生过程中的作用进行综述。

激光泪小点成形术/泪小点切开术联合泪道置管治疗泪小点狭窄

目的:分析我院激光泪小点成形术/泪小点切开术联合泪道插管治疗泪小点狭窄的可行性、适应证及疗效。方法:回顾性分析我院2009-01/2010-06门诊确诊并行手术的泪小点狭窄或膜闭病例37例41眼。其中20例22眼行Nd:YAG激光泪小点成形联合置管术,17例19眼行泪小点切开联合置管术。拔管后随访3～12mo,随访时观察、记录患者的溢泪情况、泪小点形态和功能恢复情况及手术并发症情况。结果:截至末次随访,两种术式的有效率均为100%,激光联合置管术的治愈率为82%;切开联合置管术的治愈率为79%,两种术式的治愈率未见明显差异。先天性泪小点闭锁的治愈率为100%。泪点周围组织红肿伴眼痒者2例;泪小点撕裂者1例;泪道肉芽增生者1例。无引流管自行滑脱病例。结论:激光泪小点成形术/泪小点切开术联合泪道置管治疗泪小点狭窄疗效肯定。激光联合置管术治疗泪小点狭窄或膜闭手术操作简便,可作为常规术式进行推广。先天性泪小点闭锁可视为切开联合置管术的手术适应证。

视网膜缺血再灌注损伤中Ref-1的表达及bFGF对其的影响

目的研究缺血再灌注损伤视网膜组织中无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1,Ref-1)表达的变化及玻璃体腔内注射碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其的影响。方法建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤动物模型,于再灌注开始即刻玻璃体腔内注射bFGF2μg,利用SABC免疫组织化学法检测不同时段Ref-1蛋白在视网膜组织表达的变化,分析Ref-1蛋白与细胞凋亡的关系以及bFGF对其表达的影响。结果Ref-1蛋白在视网膜组织中的表达随着缺血再灌注时间的延长明显减少。bFGF治疗组Ref-1蛋白表达规律与缺血组相同,但其阳性表达率较同一时段缺血再灌注组有所增加。结论大鼠玻璃腔注射bFGF,可以上调Ref-1的表达,对视网膜缺血再灌注损伤起到修复的作用。

低氧诱导因子-lα在Rb中的表达及与肿瘤血管形成的关系

目的探讨低氧诱导因子-lα(HIF-1α)在视网膜母细胞瘤(Rb)中的表达及其与血管生成的关系。方法利用免疫组织化学方法检测60例Rb、10例正常视网膜组织中HIF-1α的表达,并用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞,计数Rb中微血管密度(MVD)。结果HIF-1α在正常视网膜组织中未见表达,主要表达于Rb细胞浆及胞核。HIF-lα在Rb组中阳性表达率为56.7%(34/60),明显高于正常对照组(P<0.01);Rb组中MVD平均为33.59±1.15,正常对照组为7.42±0.95(t=17.499,P<0.01)。HIF-lα与MVD的表达呈显著正相关(r=0.439,P<0.01)。结论HIF-lα在视网膜母细胞瘤中的表达与肿瘤的新生血管形成有关。提示HIF-lα的表达水平可用于预测Rb的生物学行为,可作为Rb治疗的新靶点。

氨基胍对糖尿病大鼠视网膜神经细胞改变及caspase-3表达的影响

目的观察早期糖尿病大鼠视网膜神经细胞结构变化、caspase-3表达及氨基胍的治疗作用。方法健康成年Wistar大鼠50只,12只作为正常对照组,其他大鼠链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射建立糖尿病(DM)大鼠模型,并随机分为氨基胍治疗组及DM模型组,每组又按时间分为1、3、6个月组。透射电镜下观察视网膜超微结构改变,免疫组织化学法检测视网膜组织caspase-3蛋白的表达变化。结果电镜变化:模型1个月组内核层细胞胞质出现不均匀现象;3个月组内核层细胞核个别染色质出现浓缩现象,神经节细胞亦出现超微结构的变化;6个月组上述变化进一步加重,并可在内核层及神经节细胞层发现个别凋亡小体,氨基胍治疗组变化较糖尿病组轻微。免疫组织化学表达:模型3个月组caspase-3蛋白开始表达,主要见于神经节细胞层;模型6个月组阳性表达进一步增加,扩展到内核层。氨基胍组caspase-3表达变化规律与模型组基本一致,治疗组3个月、6个月阳性表达均分别低于未治疗组(P<0·05)。结论早期DM大鼠视网膜出现了电镜组织学改变,caspase-3参与了糖尿病视网膜病变的发病机制。氨基胍对糖尿病视网膜病变有一定的治疗作用。

眼睑肿瘤p53和ras p21的表达及与临床预后的关系

探讨ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１蛋白的表达与眼睑肿瘤临床预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法检测了９８例眼睑恶性肿瘤组织中ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１蛋白的表达。结果 在鳞状细胞癌旁正常及轻度不典型增生上皮中未见ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１蛋白表达；而中、重度不典型增生，原位癌，浸润癌ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１蛋白阳性表达率逐渐增高。其中基底细胞癌ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１阳性表达率分别为５０．０％，５２．５％；鳞状细胞癌分别为５４．３％，６２．９％；睑板腺癌分别为５６．５％，６５．２％。随着肿瘤分化程度的降低，ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１蛋白阳性表达率及阳性表达强度逐渐增高；ＳＣＣ中ｐ５３及ｒａｓ ｐ２１蛋白阳性表达与组织分化程度之间呈显著负相关，且与肿瘤淋巴转移有关。结论 ｐ５３和ｒａｓ ｐ２１的表达可作为判断眼睑肿瘤恶性程度、淋巴结转移的重要指标。

糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及氨基胍的作用

目的:观察糖尿病大鼠视网膜组织学变化、神经细胞凋亡现象以及氨基胍的治疗作用。方法:实验于2003-09/2004-06在青岛大学医学院附属医院眼科病理室进行。①取健康成年Wistar大鼠60只单纯随机分为正常对照组和糖尿病组各30只。糖尿病组30只大鼠一次性左下腹腔内注射60mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病模型,有24只大鼠模型建立成功并随机均分为糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组(造模后氨基胍按1g/L加入大鼠饮水中,给药量150mg/(kg·d))。②于饲养1,3,6个月时,随机选取糖尿病未治疗组、氨基胍治疗组各4只和对照组大鼠10只处死,光镜下观察视网膜厚度和神经节细胞数目变化。以TUNEL法荧光显微镜下观察进行视网膜神经细胞凋亡的原位检测。结果:54只大鼠进入结果分析。①视网膜厚度:饲养1个月时3组差异不显著(P>0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组视网膜变薄,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组(P<0.001)。②神经节细胞数目:饲养1个月时3组差异不显著(P>0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组细胞数目少,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组[3个月:(273.88±1.28),(261.83±1.34)个/mm2;6个月:(231.95±1.36),(207.40±1.57)个/mm2,P<0.001]。③TUNEL阳性细胞数:饲养1个月时3组未发现有凋亡细胞的阳性表达。饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组阳性细胞数增加,但氨基胍治疗组少于糖尿病未治疗组[3个月:(60.13±0.40),(67.95±0.50)个/mm2;6个月:(105.15±0.43),(125.08±0.27)个/mm2;P<0.001]。结论:早期糖尿病大鼠视网膜出现光镜组织学改变,细胞凋亡是糖尿病大鼠视网膜病变神经细胞丧失的主要方式,氨基胍可抑制神经细胞的凋亡。

两种止血材料用于鼻内镜下泪囊鼻腔吻合术效果比较

目的比较高分子止血膨胀材料膨胀海绵和主要成分为透明质酸的生物材料用于鼻内镜下泪囊鼻腔吻合术的效果。方法将69例(73眼)慢性泪囊炎病人随机分为两组,均在气管内插管全麻下或神经阻滞麻醉下进行鼻内镜下鼻腔泪囊吻合术,A组(35例)术后采用高分子止血膨胀材料膨胀海绵止血;B组(34例)采用主要成分为透明质酸的生物材料止血。观察两组止血效果、填塞期舒适度和治愈率及吻合口黏膜上皮化情况。结果两组止血效果比较差异无统计学意义(P>0.05);B组填塞期舒适度、治愈率及吻合口黏膜上皮化情况均优于A组,差异有显著性(χ2=5.533、7.490,t=8.270,P<0.05)。结论鼻内镜下泪囊鼻腔吻合术中应用透明质酸生物材料止血,可显著促进吻合口周围创面愈合及黏膜上皮化,从而提高吻合口开放率。

双眼IgG4相关性眼病1例

患者男性,49岁。因“双眼眼睑肿胀2年”于2019年3月19日入院,2年前患者无明显诱因出现双眼上睑肿胀,左眼明显,伴有轻度异物感,无眼红、眼痛,不伴视力下降,期间患者未予重视,未做特殊检查及治疗。肿物逐渐长大,患者曾于2019年2月27日于外院就诊,眼眶MRI检查提示双眼泪腺区及右眶内多发异常信号,双侧泪腺区肿大,左侧为显著,呈稍长T1信号,T2WI压脂呈稍高信号,增强扫描病灶呈轻度均匀强化。右侧眼眶肌锥内见梭形长T1信号,T2WI压脂呈高信号,大小约22 mm×11 mm×10 mm,部分包饶视神经,增强扫描病灶呈轻度均匀强化。给予口服泼尼松片8片/d,治疗15 d。患者自觉右眼肿物减小,左眼未见明显变化。既往无相关眼部病史,2004年因车祸致“鼻骨骨折”、“眶骨骨折”,2017年于当地医院因“鼻息肉”行“鼻息肉切除术”。

常见泪腺上皮性肿瘤中EGFL7的表达及其与血管生成和细胞增殖活性的相关性研究

目的:检测常见泪腺上皮性肿瘤中类表皮生长因子结构域7(EGFL7)、微血管密度(MVD)、Ki67的表达,探究EGFL7与MVD、Ki67之间的相互关系。方法:应用免疫组化法,对10例正常泪腺组织(取自因炎性假瘤、Mikulicz病等良性泪腺肿瘤切除后,标本中的部分正常泪腺组织)、20例泪腺多形性腺瘤、12例多形性腺癌、14例腺样囊性癌组织中的EGFL7蛋白、Ki67进行检测,并应用CD34标记计数MVD。结果:EGFL7主要在泪腺多形性腺癌、腺样囊性癌的肿瘤细胞的细胞浆中表达,免疫组化染色结果显示,在正常泪腺组织中EGFL7无阳性表达,泪腺多形性腺瘤组织中EGFL7的阳性率为5%(1/20),泪腺多形性腺癌中EGFL7的阳性表达率83%(10/12),泪腺腺样囊性癌中EGFL7的阳性表达率为86%(12/14),两种恶性肿瘤中的表达率明显高于多形性腺瘤和正常泪腺组织(P<0.001)。CD34可使肿瘤微血管染色呈棕黄色的单个或成簇细胞群。在泪腺多形性腺癌(32.58±14.46)及腺样囊性癌(43.43±4.60)中CD34的表达明显高于多形性腺瘤(4.20±1.19)(P<0.001);Ki67在具有增殖活性的细胞核呈棕褐色着色,在泪腺多形性腺癌(44.83±13.68)及腺样囊性癌(26.29±8.44)中Ki67的表达明显高于多形性腺瘤(2.80±3.14)及正常组织(0.40±0.70)(P<0.001)。在两种恶性肿瘤中EGFL7的表达分别与MVD、Ki67呈明显正相关(rs=0.897,P<0.001;rs=0.837,P<0.001)。结论:EGFL7在泪腺上皮性肿瘤中的表达与MVD、Ki67呈正相关性,提示EGFL7不仅在泪腺上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,而且参与泪腺上皮性肿瘤的增殖。

双侧眼眶霍奇金淋巴瘤一例

患者,女,33岁,2015年2月偶然发现双眼眶部肿物,如黄豆粒大小,质地中等,活动度差,无皮肤破溃和流脓.2016年2月外院诊断为Mikulicz病,于风湿免疫科接受治疗.患者自诉双侧下颂部扪及直径约1cm肿物,无压痛.