志贺菌、沙门菌和霍乱弧菌多重PCR快速检测体系的建立

目的建立快速检测志贺菌、沙门菌和霍乱弧菌的多重PCR方法。方法根据志贺菌ipaH基因、沙门菌ipaB基因及霍乱弧菌EPSM基因设计特异性PCR引物,加热煮沸法制备DNA模板,进行PCR扩增及琼脂糖电泳检测。结果应用所建立的多重PCR方法能分别或同时快速、特异地检测出志贺菌606bp、沙门菌314bp和霍乱弧菌482bp的目的基因。结论初步建立了灵敏、特异的一步法检测志贺菌、沙门菌和霍乱弧菌的多重PCR体系,可用于高危腹泻致病菌的早期快速诊断。

血清胃蛋白酶原、促胃液素对胃癌的诊断价值

目的研究血清胃蛋白酶原Ⅰ(PG I)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及促胃液素(GS)与胃癌发生的关系,探讨检验血清PGⅠ,PGⅡ,GS对胃癌的诊断价值。方法采用免疫放射分析法(IRMA)和放射免疫分析法(R IMA)检测36例胃癌患者、23例胃良性病、11例萎缩性胃炎和34例正常人血清蛋白酶原、促胃液素水平并进行比较。结果胃癌患者血清PGⅠ,PGⅡ的水平显著低于胃良性病和正常人组(P<0.05),而血清GS水平显著高于胃良性病和正常人组(P<0.05),其中不同分化程度间差异不明显(P>0.05),术后血清PGⅠ,PGⅡ,GS水平显著低于术前水平(P<0.05),复发组的水平显著高于术后未复发组(P<0.05)。结论检测血清PGⅠ,PGⅡ,GS对胃癌的诊断及区别胃良性病具有较高的临床价值。

2006～2007年度中国西北地区十家临床教学医院嗜血杆菌耐药监测

目的分析中国西北地区十家教学医院2006～2007年度临床分离嗜血杆菌的耐药状况。方法常规方法培养分离医院内感染病原菌,并应用半自动或全自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行。采用WHONET5.4软件进行数据统计分析。结果2006～2007年度西北地区10家教学医院共分离出嗜血杆菌356株,其中流感嗜血杆菌112株,副流感嗜血杆菌134株,溶血性嗜血杆菌89株,副溶血性嗜血杆菌21株。药敏监测结果显示,流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌均对复方新诺明、氨苄西林、环丙沙星高度耐药,耐药率分别为72.4,42.6,34.6和51.1,32.1,35,对亚胺培南、美罗培南完全敏感;溶血性嗜血杆菌、副溶血性嗜血杆菌均对氨曲南、氨苄西林、头孢曲松高度耐药,对左氧氟沙星、头孢呋新、氨苄西林/舒巴坦较敏感。结论嗜血杆菌对多种抗生素的耐药呈现明显上升趋势,开展不间断的完整的耐药监测,合理使用抗菌药物,对于控制耐药菌株快速上升具有重要意义。

结核病实验室诊断方法新进展

实验室检查是结核病诊断、治疗及预防控制的重要依据。长期以来,结核病的实验室诊断主要依赖细菌学涂片和培养检查。近年来,以T-SPOT.TB、Xpert MTB/RIF、HAIN等为代表的结核病诊断新方法不断涌现,为结核病的诊治提供了新的手段,在很大程度上回答了感染存在与否及如何治疗的难题,具有广阔的应用前景。

瞬时转染和稳定转染对RNAi抑制乙型肝炎病毒S基因表达的影响

目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA表达载体pSUPERS1和pSUPERS2,观察瞬时转染及稳定转染对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.方法:设计并合成针对HBVS基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体分别瞬时转染和稳定转染表达HBV的2.2.15细胞,对所得细胞上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,RTPCR检测siRNA对靶基因mRNA的抑制效果,并比较两种转染方式对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.结果:在稳定转染并经潮霉素筛选所得的单克隆细胞株中,pSUPERS1和pSUPERS2均能明显抑制HBsAg及HBeAg的分泌(P<0.01),抑制率分别为83%和78%,RTPCR结果证实HBV的mRNA明显降低,而瞬时转染细胞在蛋白质水平上及mRNA水平上的结果则比稳定转染的结果逊色.结论:针对HBVS基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达,转染效率对于靶基因的RNA干涉作用有明显的影响.

重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及联合药敏分析

目的了解38株分离自重症监护室的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分布及联合药物体外抗菌活性,以指导临床合理选择抗菌药物。方法以常规方法培养分离细菌,用金黄色葡萄球菌乳胶试剂盒及VITEK-Ⅱ细菌分析仪鉴定到种;采用乳胶凝集试剂盒鉴定MRSA。以微量稀释法测定利余唑胺等5种抗菌药物对MRSA的体外抗菌活性,按美国临床实验室标准化研究所标准进行。结果 38株MRSA对利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁均敏感;对左氧氟沙星和利福平的耐药率分别为100.00%和78.95%。利福平分别与利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁联合,联合抑菌指数(FIC)<1者占13.16%～31.58%;左氧氟沙星分别与利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁联合,FIC<1者占2.63%～36.84%;各组联合药物间差异有统计学意义(P<0.01)。结论对ICU病区MRSA感染者治疗时,应参考药敏试验结果并结合患者个体情况合理选择抗菌药物,制定个体优化治疗方案。

旧采区复采过空巷群支承压力研究

以晋煤集团圣华煤业3101工作面为残煤复采背景,采用扩展SMP准则判断复采工作面煤柱的稳定性,并以RFPA软件数值模拟不同空巷跨度和不同煤柱宽度的空巷群情况下,对顶煤和煤柱应力分布进行研究。结果表明应力集中出现在靠近工作面的煤柱边缘,应力集中系数与空巷跨度和煤柱宽度比值成正比关系。

结直肠癌药物敏感基因检测与治疗的研究进展

个体化治疗是指通过患者体内的有关药物作用靶点、路径、代谢等评估药物对患者可能的作用,提高治疗的针对性、避免反复尝试与不良反应,提高用药的安全性和有效性。通过药物敏感性基因检测,实现对结直肠癌化疗药物敏感性和疗效预测,进而优化治疗方案,提高疗效、减少无效治疗。结直肠癌患者选择化疗方案或靶向治疗之前进行药敏基因检测是实现个体化治疗的必经之路。

高水平应力巷道底鼓特性及其控制技术研究

针对常村煤矿高水平应力巷道底鼓问题,分析其破坏机理,提出无支护、底锚支护、切槽、底锚联合支护3种方案,并通过FLAC3D数值模拟对这3种方案进行了对比分析,得出切槽、底锚联合支护对控制底鼓效果最好。结合现场工程实际,验证切槽、底锚联合支护的可行性,为同类工程问题治理提供了相关依据。

RNAi-dsRNA介导的基因沉默

RNA干涉(RNA interference,RNAi)是双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)介导的、序列特异的转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)现象,广泛存在于线虫、果蝇、植物、真菌及哺乳动物等多种生物体中。作为生物体中存在的一种普遍现象,RNAi是基因组水平的免疫现象,代表了进化过程中原始的基因组对抗来自外来基因表达的保护机制,它介导生物体对内源寄生性核酸及外源性病原核酸的防御,并调控蛋白编码基因的表达,具有十分诱人的应用前景。本文介绍了RNAi的特征、作用机制、生物学功能及其应用等方面的研究进展。

大采高软岩回采巷道底鼓分析及控制

基于对回采巷道底鼓机理的认识,通过3305工作面的工程试验得到大采高软岩回采巷道底鼓有效控制方案,并分析各个因素的影响程度,为此类巷道底鼓控制提供一定的依据。

人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达

目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染CHO细胞并筛选阳性克隆,免疫荧光法鉴定重组BPI的表达和免疫学活性。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,与文献报道的序列相比,有6个核苷酸差异。转染筛选的阳性CHO细胞克隆表达产物能够被抗BPI的单克隆抗体所识别。结论BPI活性片段表达载体的构建及真核表达成功,为BPI功能的研究奠定了基础。

参苓白术散防治伊立替康所致迟发性腹泻疗效及安全性的临床研究

目的探讨参苓白术散防治伊立替康(CPT-11)所致迟发性腹泻疗效及安全性。方法回顾性选取2019年1月~2021年8月江苏省中医院收治的中晚期结直肠癌患者60例,按是否口服中药分为观察组(30例)和对照组(30例)。观察组在化疗的前1天开始口服参苓白术散,2次/d,1袋/次(100 mL),连续服用2个化疗周期;对照组单纯应用化疗。比较两组CPT-11所致迟发性腹泻分级、体力状况评价(KPS评分)、机体免疫状态(CD4^(+)、CD8^(+)和CD3^(+)水平)和不良反应发生情况。结果与对照组迟发性腹泻发生率比较,观察组迟发性腹泻发生率稍降低,对比差异无统计学意义(P>0.05)。观察组KPS评分改善率稍高于对照组,对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组CD4^(+)、CD8^(+)和CD3^(+)水平均显著高于治疗前(P<0.05),且观察组CD4^(+)、CD8^(+)和CD3^(+)水平均显著高于对照组(P<0.05)。两组不良反应(骨髓抑制、肝肾功能损害、恶心呕吐、口腔溃疡和食欲减退)发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论参苓白术散防治伊立替康所致迟发性腹泻,可以轻微降低腹泻的发生率,改善体力状况和免疫状态,提高疗效,安全性良好。

沉默小兵显神通

长久以来，RNA分子一直被认为是不起眼的小角色，一度被认为只能存储和传递遗传信息。而现在，d,RNA被称为细胞内的“瑞士军刀”,可以执行多种任务。新近的发现表明，tbRNA控制着人类基斟组中大约三分之一负责蛋白质合成的基因，这些小分子RNA可通过与tuRNA互补序列的结合而关闭或调节蛋白质的翻译。因此，这一发现对RNA在细胞机制中所起的作用的认识远超出先前。而双链RNA介导的、序列特异的转录后基因沉默现象——RNA干扰（RNAi）备受关注。RNAi最核心的生物学功能在于它能监控异常的或外源的遗传物质在机体内的水平，调控基因的表达。因此，RNAi被认为是真核生物的遗传监视器（geneticwatchdog）和基因组水平的免疫系统。

杀菌/通透性增加蛋白的细胞定位

目的 确定人体内能产生杀菌 /通透性增加蛋白(bactericidal/ permeability- increasing protein,BPI)的细胞群体 ,为研究 BPI在细胞内的定位奠定基础 .方法 分离人外周血获得嗜中性多形核粒细胞 (polymorphonuclear neutrophils,PMN )和单个核细胞 ,PMN,HL - 6 0及单个核细胞分别进行RNA提取 ,逆转录 PCR反应扩增 BPI基因片段和免疫荧光法检测 .结果 逆转录 PCR在 PMN和 HL- 6 0细胞中扩增出BPI基因片段 ,活细胞免疫荧光染色观察到 PMN和 HL- 6 0能够与抗 BPI的单抗所结合而呈阳性 .结论

朊病毒的实验室检测

朊病毒是引起人与动物传染性神经系统退化性疾病的病原体，对朊病毒的分子生物学性质及实验检测的研究，有利于加深人们对这一“非常规”病毒本质的认识和改进朊病毒的实验检测方法。本文综述了朊病毒的生物学特性及其实验检测的研究进展。

明光一带渐新世明光组的发现

明光城北地区出露不整合于定远组之上的碎屑岩,通过ESR年龄测定,认为属于渐新世的沉积。建立明光组填补了该区渐新世沉积的空白。

Mohnarin 2008年度报告:葡萄球菌和肠球菌耐药监测

目的总结我国89家医院2008年度临床分离葡萄球菌和肠球菌的耐药状况。方法常规方法培养分离临床感染标本中的葡萄球菌和肠球菌,应用半自动或全自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验按临床和实验室标准化委员会(CLSI)规定的标准进行。监测数据按卫生部全国细菌耐药监测(Mohnarin)中心设计方案上报,用WHONET5.4软件统计分析。结果从89家医院共分离获得葡萄球菌32378株,肠球菌12127株,分别占革兰阳性菌的63.6%和23.8%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为67.6%、79.9%;ICU病区MRSA发生率为51.2%;不同地区MRSA发生率在52.3%～76.9%之间;不同标本MRSA分离率分别为:痰液标本48.7%,血液标本42.0%,分泌物标本18.8%。MRSA对米诺环素、氯霉素、呋喃妥因和替考拉宁的敏感率分别为84.6%、86.5%、93.4%和97.7%;对氟喹诺酮类、氨基糖甙类、克林霉素和利福平的敏感率为4.9%～48.7%;未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。肠球菌对利奈唑胺均敏感;共发现205株耐万古霉素肠球菌(VRE),粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为1.3%和1.4%。结论我国VRE分离率虽然较低,但临床应严格监控其耐药性的扩散;利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对葡萄球菌和肠球菌体外抗菌活性均较好,但临床应根据患者自身具体的感染情况采取个体优化治疗方案;耐甲氧西林葡萄球菌分离率仍较高,临床应采取更加有效的防止交叉感染和消毒灭菌措施。

大黄多糖对TNBS诱导大鼠结肠炎的治疗作用

目的 :探讨大黄多糖 (TMP)对 2 ,4 ,6 三硝基苯磺酸 (TNBS)诱导大鼠结肠炎的治疗作用。方法 :采用大黄多糖组分 (TMP 1)治疗TNBS诱导的大鼠结肠炎 ,以地塞米松 (DX)为阳性药。每天 1次 ,共 5d ,给药结束后 ,尾静脉采血行白细胞计数并分类 ,在乙醚麻醉下腹主动脉采血 ,并处死动物取结肠 ,画取结肠的溃疡面积 ,结肠称重 ,分离肠黏膜以测定SOD ,MPO活性 ;胸腺、脾脏称重。结果 :TMP 1能明显降低结肠炎大鼠的死亡率 ,减轻结肠重量 ,缩小溃疡面积 ,对抗脾脏肿大和胸腺萎缩 ;降低MPO活性 ,升高SOD水平 ,与DX相比 ,其疗效无显著差异 ,也没有DX的免疫抑制副作用。结论 :TMP 1对TNBS诱导的大鼠结肠炎呈现出良好的治疗效果 ,其机制可能与抗炎和免疫调节有关 ;

安徽宁国地区岩-土系统元素迁移及其农业地质环境效应

通过多条基岩-土壤剖面和区域性土壤地球化学样品的微量元素丰度测试,分析了宁国地区不同基岩类型地球化 学元素在岩石和土壤中分布的基本特点,表明同一地层的岩-土系统在不同地点有基本相同的元素迁移规律,导致土壤中 的微量元素分布特征受控于其下地质单位的空间分布,植物生长必需的微量营养元素Fe、Mn、Cu、Mo、Zn、B6种元素表现 出在南华纪-寒武纪地层中向土壤强烈富集的趋势.岩-土系统元素迁移特点对宁国市天目山区重要名优特产品-山核 桃的生长环境产生重要影响,该区主导性名特优产品———山核桃,应该选择南沱组、兰田组、杨柳岗组、华严寺组、西阳山组 等地层出露的地段种植才能产生好的经济效益.