珍珠花丛生芽的诱导及生根条件的研究

诱导珍珠花 (StaphyleabumaldaDC)丛生芽的最佳培养基为MS基本培养基附加NAA 0 .2mg·L-1和BA 5mg·L-1,无菌苗在 1 /2MS培养基中附加NAA 1mg·L-1、活性碳 0 .4 5g·L-1、硫胺素 1mg·L-1、蔗糖 2 0g·L-1能长根形成完整植株 .

珍珠花种子发芽条件的研究

试验表明去除种皮珍珠花种子很快萌发，但幼苗的培养和移植较麻烦；采用98％的硫酸处理种子3d，然后播于土壤中，萌发的速度稍慢一些，但方法简单，幼苗成活率高，是一种行之有效的萌发方法.种子萌发和幼苗生长的最适温度为15～20℃．种皮对珍珠花种子的萌发起着机械性限制作用，解剖结构显示由于种皮由多层石细胞组成防碍了种子胚乳和胚对水分的吸收而导致种子不能萌发．

连翘的组织培养和连翘苷形成的研究

目的 :研究影响连翘愈伤组织生长和连翘苷生物合成的培养条件。方法 :选用不同的培养基和不同的光照条件 ,测定愈伤组织生长干重和连翘苷含量。结果和结论 :连翘细胞生长周期为 2 8d ,采用MS基本培养基 ,附加激素为 1mg·L- 1 2 ,4 D ,0 .5mg·L- 1 KT ,0 .5mg·L- 1 6 BA ,在光照条件下可有效促进细胞生长和连翘苷的生物合成。

水稻籼粳杂种多倍体的研究

以秋水仙碱诱导的水稻籼粳杂种多倍体植株中 ,部分植株的体细胞呈现具有整倍体和非整倍体染色体数细胞嵌合现象 ,其中四倍体细胞最高可占 35 .3% ,其余均为染色体数低于 4 8条的各种细胞 .与二倍体植株相比 ,这些植株的叶表皮气孔增大 ,气孔数减少 ,花粉粒直径增大都是十分显著的 ,与多倍体植株无明显区别 .并对这类植株根尖体细胞中存在具各种染色体数目细胞嵌合现象可能的原因进行了分析 .

丝石竹花外植体诱导丛生芽的研究

研究了在不同外源激素条件下诱导丝石竹花朵恢复营养生长的过程 .结果表明单一生长素仅能诱导花产生愈伤组织 ,6-BA或 6-BA与生长素组合能在完全盛开的花中诱导花丝基部产生腋芽并发育成营养枝 ,在未开放花中能诱导花瓣回复到叶的状态 。

甘蓝型油菜胚柄多胚突变体(Brassica napus twn-119)的细胞胚胎学研究

多胚突变体B.napus twn-119是从甘蓝型油菜品种中油119中发现的.经过连续套袋自交选育,目前已使多胚频率提高到34%.所获得的多胚种子萌发后,92%的种子中萌发出各自独立的双苗,6%种子中萌发出独立三苗,2%的种子中得到3个以上独立苗.偶尔可观察到生长的幼苗具有三片、四片子叶、幼苗的茎发生部分结合及子叶上具轴状附属物等异常现象.对多胚突变体的胚胎学研究表明,由顶细胞发育而来的初生胚体正常发育成胚,部分胚柄细胞转变成为具有强烈分裂能力的细胞而不是进入程序性死亡.这些特殊的胚柄细胞具有胚胎发生能力,胚柄中可以观察到多个球形原胚形成,多个原胚由宿存的胚柄细胞连接成一串.如果两原胚之间连接的胚柄细胞很少或没有,两个胚体在发育过程中会发生部分融合.幼苗根尖染色体数目的检查也证明多胚幼苗都具有正常油菜的染色体数目(2n=38).

两种十字花科作物的施硫效应

在湖北棕红壤地区对十字花科作物油菜及小白菜施用不同硫肥的结果显示, 施用硫肥对作物的长势、生物量及产量有明显的促进作用, 其中澳大利亚含硫颗粒复合肥增产效应极显著, 增产达64 % 。

油菜施硫效应的研究

通过田间小区试验，比较了湖北红壤中施用硫磺、石膏和澳大利亚颗粒复合肥对油菜生物量、籽实产量和油菜籽品质的影响．试验结果表明，在正常施用氮、磷、钾的情况下，配合施用硫肥对油菜有明显的促进效应，其中澳大利亚颗粒复合肥和石膏的效果显著，有推荐使用的价值．

四川山矾的小孢子囊和雄配子体的发育

四川山矾(Symplocos setchunensis Brand)的孢原细胞由1～2列细胞组成,花药壁层的发育为双子叶植物型,初生造孢细胞分裂2～3次形成次生造孢细胞,同一花药室内小孢子母细胞的减数分裂是同步的,绒毡层属腺质绒毡层,直到花粉粒成熟时还可见到残留的绒毡层细胞。

枫杨(Pterocarya stenoptera)水浸液灭螺实验研究

采用枫杨的新鲜根皮、茎皮和叶的水浸液处理钉螺，并用五氯酚钠溶液处理和清水饲养钉螺实验作对照．结果表明，５％以上的枫杨各部水浸液对钉螺具有２０％～１００％的毒杀致死作用．处理时间在２４０ｈ左右时，其死螺率可达９３．５％～１００％，含２．５％的新鲜枫杨叶和２．５％的新鲜乌桕叶、池杉叶、樟叶、羊蹄全株、青蒿全株等的混浸液，处理钉螺２４０ｈ亦分别具有９６．７％、９３．３％、８０％、１００％、８６．

珍珠花胚性愈伤组织的诱导

对珍珠花体细胞胚的诱导条件进行了研究 ,在含 0 .5 m g· L- 1 2 ,4- D的 MS培养基中诱导出黄色胚性愈伤组织 ,这种愈伤组织继代在无激素 MS培养基中可分化出胚状体 。

甘蓝型油菜三种种子储藏蛋白和丙酮酸羧化酶基因片段的克隆及hpRNA表达载体的构建

利用PCR从甘蓝型油菜(Brassica napusL.)华双4号基因组DNA中扩增出种子储藏蛋白cruc iferin、nap-in、oleosin和丙酮酸羧化酶(PEPC)基因片段,再以扩增出的片段为模板设计引物从一端扩增出4个相应的小片段,然后将同一基因的大小两个片段反向连接,插入到种子特异表达载体2300-nap多克隆位点的nap in启动子和nos终止子之间,构建成可以在油菜种子中转录表达发夹RNA(Hairp in RNA,hpRNA)结构的植物表达载体。

Ogura CMS紫菜苔×萝卜×甘蓝型油菜杂种的获得及细胞遗传学研究

以OguraCMS紫菜苔×萝卜杂种F1(AR ,2n =19)为母本 ,以甘蓝型油菜 (AACC ,2n =38)为父本进行杂交 ,获得了 4棵杂种植株。其中 1株 (PRN 1)的花色为嵌合体 ,该植株上的花多为黄色 ,但是也有乳白色花 ,另外还有 1朵花甚至 1个花瓣上同时具有黄色和白色区域 ,其余 3株 (PRN 2、 3、 4 )都开白花。PRN 4的花药开花前退化 ,其余 3株都可以看到 3～ 6枚花药 ,能够产生部分花粉 ,但是PRN 2的花粉不能被I2 KI溶液染色。PRN 2具有 4个蜜腺 ,PRN 1和PRN 3具有 2个蜜腺 ,PRN 4无可见蜜腺。在低温下PRN 2叶色正常 ,其余 3株幼叶表现不同程度缺绿。PRN 1的染色体数目为 2n =38,染色体平均配对构型为 14 6 7Ⅰ +10 0 7Ⅱ +1 0 6Ⅲ ,其染色体组构成可能是AACR ;PRN 2的染色体数目为 2n =35 ,染色体平均配对构型为 13 89Ⅰ +8 33Ⅱ +1 33Ⅲ +0 11Ⅳ ,PRN 3的染色体数目为2n =33,染色体平均配对构型为 14 0 0Ⅰ +7 82Ⅱ +1 0 0Ⅲ +0 0 9Ⅳ。PRN 4的染色体数目未能确定。与甘蓝型油菜回交后PRN 1～ 3植株各自产生了一定数量的种子 ,而PRN 4则未产生种子。

甘蓝型油菜依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)基因片段克隆及hpRNAi载体构建

依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)是糖酵解途径的关键酶。本研究首先构建带有种子特异性napin启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-nap及带有组成型35S启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-35S;然后用PCR法从甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)中油119总基因组中扩增出依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)基因片段,再以扩增出的PFK基因片段作模板设计引物扩增出一个相应的小片段。将两个PFK基因片段反向连接,插入到植物表达载体2300-nap的napin启动子和nos终止子之间,植物表达载体2300-35S的35S启动子和nos终止子之间,分别构建成可转录表达出发夹RNA(hairpinRNA,hpRNA)结构的种子特异型和组成型油菜RNA干扰载体,为今后油菜利用RNA干扰(RNAi)提高含油量的基因工程研究奠定了基础。

籼粳杂种多倍体结实情况的初步研究

用 1 0个籼粳交组合的二倍体和四倍体为试材 ,研究了加倍对每穗总粒数、每穗实粒数和结实率的影响 .结果表明 :加倍对结实率等性状的影响因组合不同而不同 .四倍体籼粳杂种的结实率显著高于二倍体 .加倍对正反交的结实情况也有影响 .要提高籼粳交多倍体的结实率 ,应注重同时增加总粒数和实粒数 .

异源六倍体水稻AACCDD和三倍体水稻ACD生殖特性的细胞胚胎学研究

利用异源多倍体杂种优势是多倍体水稻研究的第三阶段,但异源多倍体杂种常常不育。为明确其不育特点,本文以本实验室通过远缘杂交获得的栽培稻(AA)品种DTS137和高秆野生稻O.alta(CCDD)的杂种三倍体ACD和加倍形成的六倍体AACCDD为材料,分别对其花粉和胚囊发育过程进行石蜡切片观察,发现3x与6x之间以及6x雌性和雄性生殖方式和前途具有明显的不同:(1)异源三倍体ACD水稻杂种花粉败育彻底,败育发生在小孢子母细胞时期,绒毡层细胞提前解体;大孢子母细胞不能进行减数分裂,与周围的珠心组织一起发生解体,雌性完全败育。(2)异源六倍体水稻杂种(AACCDD)的雄性败育发生在小孢子母细胞减数分裂的细线期,此期小孢子母细胞发育停滞,随后解体;而雌性器官的发育基本正常。推测异源六倍体杂种的不育性与不同基因组间存在着部分核质不亲和性有关。据此,为了克服六倍体水稻AACCDD的不育性和验证该杂种雌性可育的结论,以栽培稻(AA)的PM eS二倍体品系HN2026-2x为父本与之杂交,通过胚挽救成功获得回交杂种BC1F1植株,经根尖染色体鉴定为2n=4x=48,系由AACD组成。虽然该异源三基四倍体是不育的,但为随后的染色体加倍创造AAAACCDD同源异源八倍体,进而获得结实的同源异源多倍体杂种打下了良好的基础。

Ogura CMS紫菜苔与萝卜双二倍体的获得及细胞遗传学研究

以Ogura CMS紫菜苔(AA,2n=20)为母本,以不同萝卜品种(RR,2n=18)为父本进行杂交,获得了大量的属间杂种。从杂种F_1中发现了2株染色体自然加倍的双二倍体。在形态上双二倍体与未加倍的杂种F_1相似,都表现父本萝卜的白花性状,蜜腺正常,低温下子叶及真叶均不缺绿。在减数分裂中期Ⅰ双二倍体多数细胞形成19个二价体,后期Ⅰ时染色体以19:19的方式分配到两极,最后形成具有19条染色体的配子。通过对可染花粉比例、全株种子粒数及平均每个有效角果种子粒数的比较发现,虽然双二倍体的花药比未加倍的杂种F_1发育要好得多,但是双二倍体的育性还是低于未加倍的杂种F_1,尽管未加倍的杂种F_1在减数分裂时多数染色体以单价体的形式存在,同时也有二价体、三价体甚至四价体的形成,并且存在落后染色体和染色体桥。推测Ogura CMS紫菜苔×萝卜属间杂种F_1的育性除了减数分裂染色体的配对有关之外,与双亲染色体上基因的相互作用也有重要关系。对该杂种的遗传及育种意义进行了讨论。