肿瘤的主动免疫治疗

由于分子生物学的发展,基因操作技术的进步,特别是肿瘤特异性抗原的确定,持续了近百年的肿瘤免疫治疗,特别是主动免疫治疗,近几年有了突破性进展。目前,肿瘤的主动免疫治疗,更确切地说应该是肿瘤的免疫基因治疗,已推进到III期临床实验,给患者带来了切实的好处,使患者有了新的希望。相信在不久的将来,肿瘤的主动免疫基因治疗的研究与应用,将在我国蓬勃发展起来。

肝癌单克隆抗体的制备与免疫组化定位

用新鲜人肝癌组织细胞悬液免疫,获得2株抗人肝癌细胞单克隆抗体(HAb-20,HAb-21),应用免疫组化方法对部分正常肝、肝硬变、原发性肝癌等组织进行定位。结果原发性肝癌阳性率分别为91.1％和63.1％,而在正常肝、肝硬化无相应抗原表达。2株抗体在胆管上皮、胃癌及结肠癌等组织存在不同程度的交叉,结果表明2株抗体对肝癌组织具有明显的相关性。

适应信息时代 发展信息病理学

病理学的发展与观察工具的发展密切相关． 计算机及其网络技术的应用，开创了一个信息的新时代；同时对病理学产生了深刻影响． 这个影响是把病理学实践推向信息高速公路，使病理学信息化，建立信息病理学． 以计算机作为主要教学工具，替代了大课及标本观察，发展学员自学及自学能力． 开展远程病理学是使一个边远落后的病理学单位的诊断水平迅速达到国际水平的唯一途径． 病理学家用很短时间可以从网络上摸清国内外文献中当前研究的现状，在知识上站在研究的前沿． 使病理学实践信息化，是跨世纪病理学家面临的挑战．

乙型肝炎、肝硬变中一种小多角细胞的观察

我们曾在２６例肝硬变标本中发现一种小多角细胞－－肝小多角细胞（ＳＰＬＣ），但其性质和来源仍不清。本研究在２６０例乙型肝炎、肝硬变组织中对ＳＰＬＣ的有无及其增生程度进行了观察，结果表明，急性肝炎中无ＳＰＬＣ，３７％的慢性迁延性肝炎、６４％的慢性活动性肝炎及６７％的肝硬变标本中均能见到ＳＰＬＣ，而且其数目随慢性肝脏病变的进展而逐渐增加。应用多种抗体进行的免疫组织化学染色表明，它们全为细胞角蛋白（ＣＫ）１８阳性，显示其上皮性质；界板附近的ＳＰＬＣ呈ＣＫ１９和Ｓ－１００蛋白阳性，提示它们具有增生胆小管上皮的某些表型；部分ＳＰＬＣＨＢｓＡＧ阳性，提示它们又有肝细胞的某些特点；多数ＳＰＬＣ表达胰岛素样生长因子（ＩＧＦⅡ）—一种癌胚性强致裂原，表明它们是一种幼稚细胞。我们认为，ＳＰＬＣ是一类兼有增生胆小管上皮和肝细胞性质的新型肝脏细胞，具有干细胞的性质，可能是上皮性于细胞向成熟肝细胞分化过程中的中间形态，其增生反映了非界板性肝细胞的大量损失。

流行性出血热患者真皮血管及肥大细胞变化

对29流行性出血热患者真皮的小血管及肥大细胞脱粒现象进行了光镜和电镜观察。发现①小血管有炎细胞浸润,内皮细胞基莫分层,甚至内皮细胞坏死。②真皮肥大细胞脱粒现象比正常人明显。既表现有细胞溶解性脱粒,又表现有非溶解性脱粒,有些肥大细胞呈环死象征。

胰岛素样生长因子Ⅱ在人肝硬变中的免疫细胞化学定位

用兔抗胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-2)抗体,以双PAP法对30例人类肝硬变组织进行了免疫细胞化学染色。15例患者血清学检查有乙型肝炎病毒感染(HBV),14例(47％)肝硬变组织中HBsAg阳性,结合一起计算20例阳性,总阳性率为67％。IGF-2在肝细胞及胆管上皮均呈弱阳性;双核、多倍体细胞、小叶及结节周围的肝细胞易呈明显阳性,一种小而核深染的多角细胞常呈强阳性。这种细胞可在小叶内及小叶外周散在分布,它们与所谓卵圆细胞不同。

流行性出血热尸检病例及实验乳鼠脑内脂褐素沉积

作者过去曾注意到流行性出血热尸检病例脑内脂褐素似有增多现象,本研究的目的是通过尸检典型病例以及乳鼠实验来观察流行性出血热时脑内脂褐素有无增加.从尸检病例脑组织各取10个组织块.切片经苏丹Ⅳ及苏丹黑染色,与对照组切片中脂褐素含量进行比较.将流行性出血热病毒感染BALB/c乳鼠与对照组脑组织脂褐素含量比较,证明流行性出血热感染时脑组织中脂褐素沉积确有明显增加.鉴于脂褐素增加可见于发热期,感染显然是促其形成的因素.但低血压及休克是否发挥作用,也不能排除。

让免疫组织化学在病理诊断中发挥重要作用

让免疫组织化学在病理诊断中发挥重要作用刘彦仿（第四军医大学病理教研室西安７１００３２）免疫组织化学技术在病理诊断中的应用，正在我国逐渐普及，它确使病理诊断工作提高到一个新的水平，在帮助诊断、鉴别诊断方面进入了一个传统病理学极少涉及的原位化学领域，但是...

乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBx、MHBs^t mRNA的表达及其意义

目的:检测乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中乙型肝炎病毒X基因(HBx)及截短型乙型肝炎病毒表面抗原(MHBst)mRNA的表达,探讨HBx、MHBst在HBVGN发生中的意义。方法:采用原位杂交的方法对40例HBVGN患者的肾组织进行HBx、MHBst mRNA检测。结果:HBVGN患者肾组织中存在HBx、MHBst mRNA,HBx、MHBst mRNA主要分布于肾小管上皮细胞的胞质内,少数肾小球上皮、内皮、系膜细胞的胞质内也有分布;肾小管上皮细胞内HBx、MHBst mRNA阳性率分别为82.5%(33/40)、80%(32/40),肾小球内HBx、MHBst mRNA阳性率分别为30%(12/40)、22.5%(9/40),HBx、MHBst mRNA在肾小管上皮细胞的表达明显高于肾小球(P<0.01)。结论:在HBVGN肾组织,特别是在肾小管上皮细胞的胞质存在HBx、MHBst mRNA的表达,提示HBV感染及其基因整合可能在HBVGN发生中有一定意义。

肾活检1542例临床病理资料分析

目的：回顾性分析1542例因肾脏疾病行经皮肾活检患者的病理类型和临床资料并探讨二者之间的联系．方法：参照WHO（1982年及改良的1995年）肾小球疾病组织学分型方案，结合临床资料、实验室检查结果、光镜、免疫病理及电镜的改变特点，提出初步诊断，最后与临床医师共同讨论确定诊断．结果：患者行肾活检时平均年龄32．5±15．3（6～63）岁，男女之比为1，55：1，原发性肾小球疾病占首位（69．39％），继发性肾小球疾病占26，85％，终末期肾病占2，59％，原发性肾小球疾病的病理类型中最多见为系膜增生性肾小球肾炎（45．05％），其次为局灶节段性肾小球硬化症（16．73％）和IgA肾病（8.32％）．继发性肾小球疾病以狼疮肾炎居首位（14．27％），其次为紫癜性肾炎（7．00％）和乙肝相关性肾炎（1．95％）．引起慢性肾功能不全的病理类型依次为IgA肾病（13．70％）、增生硬化性肾小球肾炎（10．40％）和局灶节段肾小球硬化症（9．10％）．结论：本地区肾脏疾病多见于青壮年，以原发性肾脏疾病最常见，其中系膜增生性肾小球肾炎是最多见的病理类型．继发性肾小球疾病以狼疮肾炎最常见．引起慢性肾功能不全最常见的病理类型为IgA肾病和增生硬化性肾小球肾炎．

人肝癌组织中p53与HSP70相互作用的初步研究

目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用SDS PAGE及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白的存在形式。结果 :用免疫组织化学法检测到 12例肝癌组织中有 3例为双阳性 ,用抗HSP70mAb免疫共沉淀的样品 ,可检测到 p5 3蛋白。用抗p5 3mAb免疫共沉淀的样品也可检测到HSP70蛋白。结论 :人肝癌中p5 3与HSP70以复合物的形式而存在 。

实验性慢性肾缺血模型肾小管-间质细胞a-平滑肌肌动蛋白的表达和意义

目的:观察单侧肾动脉狭窄(RAS)大鼠模型慢性肾缺血组织中肾小管-间质a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达和意义。 方法:建立Goldblatt单侧RAS大鼠模型,观察大鼠慢性缺血肾脏在90天内不同阶段的病理改变;应用免疫组化法检测肾小管-间质a-SMA及波形蛋白(vimentin)在不同时间点的表达;应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察细胞角蛋白(cytokeratin,CK)与a-SMA在肾小管上皮细胞中的共定位情况。 结果:RAS术后第5天首先出现肾小管vimentin阳性,术后第7天肾间质可见少量的a-SMA阳性细胞并随时间递增。通过连续切片观察到,vimentin阳性的肾小管周围肾间质细胞a-SMA表达增强,并与肾小管间质纤维化程度基本一致。当慢性缺血状态持续存在时,后期(术后第45天至90天)少数损伤的肾小管上皮细胞表达a-SMA。应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察发现,部分a-SMA阳性的肾小管上皮细胞同时表达CK,并且个别细胞还有向间质游走的趋势。 结论:在慢性肾缺血早期Vimentin阳性的肾小管上皮细胞本身可能诱导了肾间质固有细胞发生肌成纤维细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生和发展;在慢性肾缺血后期,肾小管上皮细胞转分化可能是导致肾纤维化进行性发展的关键环节。

分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达

目的分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达。方法采用PCR方法在抗肝癌sFv的5端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下游连接人TNF-α基因,构建分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因,并将该基因克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体,用磷酸钙共沉淀法转染小鼠成纤维细胞NIH3T3进行瞬时表达。结果 DNA序列分析证实在sFv的5端引入正确的60bp引导肽序列,酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。结论成功构建并表达了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP基因,为肝癌免疫基因治疗的进一步研究奠定了基础。

肝癌“双弹头”组合单抗导向治疗的实验研究

以肝癌单抗ＨＡｂ１８、ＨＡｂ２５为载体，以１３１Ⅰ、阿霉素（ＡＤＭ）为弹头，应用间接交联及氯胺Ｔ法，制备出肝癌＂双弹头＂组合单抗免疫导向结合物１３１Ⅰ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ／１３１Ⅰ－ＨＡｂ２５－ＡＤＭ，其标记率４９.８％，比放射性６.８８×１０４Ｂｑ／ｕｇ，免疫结合率４２.５％。细胞毒实验结果显示“双单头”组合单抗结合物杀伤力显著强于单弹头单抗体结合物（Ｐ＜０.０５）。荷瘤鼠导向治疗实验，１６８小时ＳＰＥＣＴ扫描定位清晰，瘤／肝比值３.７３５±０.１２０，治疗效果显著强于其它各组（Ｐ＜０.０５）。上述结果表明，“双弹头”集中了化疗与放疗的优点，二者协同，提高了杀伤效应；组合单抗较好消除了肿瘤异质性对导向治疗的影响。

抗肝癌单链抗体融合TNFα导向作用的初步实验研究

目的获得有效果的抗肝癌基因工程单链免疫细胞因子（ＴＮＦα）。方法将抗肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）ＨＡｂ２５的单链抗体（ｓｃＦｖ２５）与人ＴＮＦα基因偶联，构建抗肝癌免疫细胞因子（ｓｃＦｖ２５－ＴＮＦα），亚克隆人原核ＧＳＴ融合表达载体ｐＧＥＸ ４Ｔ－１中，在大肠杆菌中进行表达。对肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１涂片进行间接免疫荧光染色，测定纯化后目的蛋白的活性。通过对荷肝癌（ＳＭＭＣ－７７２１）裸鼠进行的初步抑瘤实验，检测ｓｃＦｖ２５－ＴＮＦα的导向治疗效果。结果ｓｃＦｖ２５－ＴＮＦα具有与亲本抗体ＨＡｂ２５类似的抗原结合特异性。 ｓｃＦｖ２５－ＴＮＦα对荷肝癌裸鼠体内直径２ｍｍ左右的肿瘤具有明确的导向杀伤作用，达到３／３完全缓解，明显强于ＴＮＦα对照组，该组有效者只有２／３，且无完全缓解。结论ｓｃＦｖ２５－ＴＮＦα为具有一定效果的抗肝癌双功能抗体。

难治性肾病30例临床与病理的关系

目的 探讨难治性肾病的临床与病理特征之间的关系。方法 对 3 0例小儿难治性肾病的临床特点、病理特征及治疗结果进行分析。结果 小儿难治性肾病临床表现大多为蛋白尿 +血尿占 70 %。最常见病理类型为系膜增殖性肾小球肾炎 ,占 43 .3 % ;其次为局灶节段性肾小球硬化 ,占 2 0 % ;再次为膜增殖性肾小球肾炎占 13 .3 % ,而IgA肾病、微小病变等病理类型少见。临床表现为单纯蛋白尿组病理类型以系膜增殖性肾炎为主 ,临床表现多为对激素依赖、频复发 ;蛋白尿 +血尿组病理特征以局灶节段性肾小球硬化、膜增殖性肾炎最多 ,对激素治疗表现的反应为激素耐药。结论 临床表现为蛋白尿 +血尿的小儿肾病大部分为难治性肾病 ,病理改变多样 ,以系膜增殖性肾小球肾炎最多见。临床及病理分型。

抗角蛋白自身抗体对接触过敏性皮炎的影响

作者对家兔血清抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)滴度正常接触过敏性皮炎(NCD)组、滴度低下接触过敏性皮炎(LCD)组及对照组的耳叶背侧皮炎进行了对比观察,并对皮炎部位真皮炎细胞密度、表皮角朊细胞内AK auto Ab的含量进行定量检测。结果显示,NCD组炎症最著、角朊细胞内AK auto Ab含量最高,与LCD组、对照组和同一耳叶腹侧形成鲜明的对比(P<0.05)。表明AK auto Ab积极介入了皮肤接触过敏性反应,有可能有利于异物的排斥和自身的保护。

产黑色素类杆菌群在牙髓坏死和根尖周疾病中的意义

本文利用抗产黑色素类杆菌群共同抗原的单克隆抗体间接免疫荧光法，检测了１０１例牙髓坏死、根尖周病变感染根管中的产黑色素类杆菌群菌株。发现慢性根尖周炎急性发作时该菌群检出率明显上升。研究发现自发痛、叩痛、尖周区肿胀、极管臭味、根尖阴形、极管渗液的出现与产黑色素类杆菌群有一定关系。