无毒性逆转的无细胞百日咳菌苗制备

将百日咳菌培养物上清液,经一段硫酸铵盐析提取百日咳主要保护性抗原 FHA 和 PT,用蔗糖密度梯度离心去除内毒素,以戊二醛解毒制成无细胞百日咳菌苗。该菌苗对家兔不产生热原反应,对小鼠毒性低,不引起明显的白细胞增多及组胺致敏活性,小鼠免疫后对百日咳毒菌脑腔攻击具有很好的保护作用,并可产生较高的抗体应答。菌苗经37℃保存3个月未出现毒性逆转现象,质量稳定,为大批量制造质量均一的无细胞百日咳菌苗提供了可能性。

提取百日咳保护性抗原的简易方法

用蓝色琼脂糖 CL—6B 做亲和吸附凝胶,仅用一步简单操作即可将1相百日咳菌在液体培养基中产生的 FHA 和 PT 抗原全部提纯出来。用 cs 菌株和 Tohama 菌株所得的提取物中,具有全部 FHA 和 PT 的生物学活性,共总抗原提取量二者没有区别,但 Tohama 菌株提取物的毒性略高于 cs 菌株。提取物中内毒素含量极微,未查出有凝集原存在。本方法为简化无细胞百日咳菌苗的研制过程提供了有利条件。

应用戊二醛对百日咳抗原进行解毒的研究

本文报道应用戊二醛对百日咳保护性抗原解毒,并研究解毒条件与毒性及免疫原性的关系。在百日咳保护性抗原或无细胞百日咳菌苗的制造中,应用0.05%戊二醛(GA)于20℃作用4～6小时,再加入0.15～0.2%赖氨酸继续作用2小时,可以得到最佳解毒效果。用于制造无细胞百日咳菌苗符合菌苗检定要求,经37℃存放1个月后未见毒性逆转现象发生。

无细胞百白破疫苗加强免疫的安全性和免疫原性研究

经无细胞百白破（APDT）或全细胞百白破疫苗（WPDT）基础免疫的儿童，一年后分三个组，进行加强免疫，观察其安全性和有效性。结果表明：APDT组和W．APDT组的局部和全身反应低于WPDT组，而且差异显著（P＜0．05）；抗-PT和抗-FHA的水平明显高于WPDT组（P＜0．01）。加强免疫后抗体增长的程度与基础免疫所用疫苗类型无关。三个试验组皆能产生高滴度的白喉和破伤风抗体。

用无细胞百日咳抗原配制的吸附精制百白破制剂的特性和人群反应及血清学效果

用50L发酵罐培养百日咳菌,经硫酸铵盐析法提取保护性抗原,戊二醛解毒后,与白喉、破伤风类毒素及Al(OH)_3配合制成的吸附精制百白破制剂(APDT),质量符合规程要求。给3～5月龄婴幼儿接种后全身和局部副反应很低,与现行吸附百白破制剂(WPDT)有非常显著性差异。免后血清中抗-PT和抗-FHA抗体均有显著增长,与WPDT制剂组相比,APDT的抗-PT和抗-FHA抗体增长更为显著。APDT免后抗白喉、抗破伤风抗体滴度均超过保护水平。本制剂的质量及免疫效果均达到了国外同类产品水平。

无细胞百白破疫苗加强免疫一年后的血清抗体水平

用无细胞百白破疫苗（DTPa）和全细胞百白破疫苗（DTPw）分别进行基础免疫，再用DTPa或DTPw加强免疫，一年后对免疫儿童进行了血清抗体检测。结果各类抗体均较加强免疫后一个月明显下降，3个组中抗—FHA虽有所下降，但均在保护水平以上（＞20EU／ml），抗—PT抗体只有DTPa组大于20EU／ml。3个组中的大多数儿童的百日咳凝集抗体均＜1：320，而抗白喉类毒素（抗—DT）、抗破伤风类毒素（抗—TT）抗体均在保护水平以上。

去除百日咳菌抗原溶液中内毒素的简易方法

本文通过层析条件的选择,建立了一种新的去除百日咳菌抗原溶液中内毒素(ET)的简易方法——DE_(62)离子交换柱层析。此法的ET去除率为99.9％,蛋白回收率>90％,DE_(62)的最大ET结合能力>6.5mg/ml膨胀胶。此外。DE_(62)具有交换容量大、流速快及再生效果好等优点。

基于启发性知识的研究生院课表构造

50年代末,课表编排问题国外就有人开始研究,并提出了很多的求解算法。但由于它涉及面广,影响因素多,至今仍没有找到一个通用有效的算法,它是作业调度类问题中最为困难的问题之一。1962年,Gotlieb曾提出一个课表问题的数学模型,此后人们对其算法、解的存在性等问题做了很多探索。

无细胞百日咳疫苗效力国家参考品的建立

采用罐培养百日咳CS菌株，培养物经硫酸铵两段盐析、浸提后，再经蔗糖密度梯度离心，收集以FHA．PT为主的百日咳菌保护性抗原，经福尔马林解毒，制备成原液。该原液按照中国和日本的生物制品规程检定合格后，加入保护剂，稀释至18μgPN／ml，分装冻干制备成无细胞百日咳疫苗效力参考品。以JNIH3和JNIH－6参考品为标准，按照日本规程的小鼠脑腔攻击法标定其效力单位。根据14次效力试验所得的结果和日本NIH标定的结果，该批疫苗效力国家参考品的效力单位定为15PIU／ml。

研究生教学质量分析与决策支持系统的研究

研究生教学质量分析与决策支持系统的研究邓贵仕，韩胜菊，刘德铮一、问题描述研究生教学质量包括诸多因素：培养目标的确定；必修课与选修课的安排；教学方式方法；人才培养的过程等。研究生教学与本科生教学相比有很多的特点：其一，就培养目标来说，研究生教学有着十分...

蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展

蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展张景迎，刘德铮（生物化学教研室北京卫生部生物制品研究所）细菌内毒素（ＥＴ）是Ｇ－菌细胞壁内的、性质非常稳定的：具有生物学活性的脂质－糖复合物（ＬＰＳ）。ＥＴ广泛存在于化学制剂、生物制剂和药物，甚至ＤＮＡ重组产物中...

无细胞百日咳菌苗的简易制备方法及其检定

报道一种简易制备无细胞百日咳菌苗(APV)的方法。SDS—PAGE证实抗原纯度高;免疫小鼠血清ELISA滴度高。此外,小鼠毒性、家兔热原及效力试验显示制得菌苗均符合规程要求。本方法是一种可行的候选方法。

基于启发性知识研究生院课表编排系统

60年代末,课表编排问题国外就有人开始研究。1962年,Gotlieb曾提出一个课表问题的数学模型,此后人们对其算法、解的存在性等问题做了很多探索,1975年Even等人证明了课表问题属于NP-完全问题。从此人们才将更多的精力放在如何实现计算机编排实际课表上。 国内对课表问题的研究始于80年代初,而且都是以大学本科课表编排为对象的,随着教育事业的不断发展,研究生院纷纷创建,尤其研究生人数不断增加和新学科新领域不断出现,使得以往的管理手段很难完全适应当前新形势的需要,教务管理人员愈发感到工作负担沉重,因此研究生院课表编排自动化便成为日益迫切的要求。 1.

乳腺癌保乳术后局部复发临床因素分析

目的:探讨乳腺癌保乳术后局部复发临床因素。方法:收治乳腺癌患者54例,均进行保乳术,其中肿瘤象限切除+腋窝淋巴结清扫术14例,肿瘤局部切除+腋窝淋巴结清扫术40例,术后进行全乳放疗和药物化疗,并进行长期随访。结果:本组所有患者随访21～54个月,平均38.6个月。本组再发乳腺癌4例,复发率7.4%。结论:淋巴结转移阳性和HER-2阳性患者的复发率高,病理分型中浸润性导管癌复发率最高,其次是乳腺浸润性小叶癌,再次是原位癌。

中国不同区域婴儿抗百日咳 白喉 破伤风母体抗体水平的调查

目的调查中国不同区域婴儿抗百日咳、白喉、破伤风母体抗体水平。方法在10年内分别在中国6个不同区域,对3月龄左右未接种过百白破联合疫苗(DPT)的健康婴儿体内抗百日咳、白喉、破伤风抗体水平进行了8次调查。分别检测了抗百日咳凝集原(Aggs)抗体1 602人,抗百日咳毒素(PT)和抗丝状血凝素(FHA)抗体790余人,白喉、破伤风抗体1 196人。结果未接种过DPT健康婴儿体内的抗百日咳Aggs抗体和抗PT、FHA抗体都分别<1∶320和<20EU/ml的保护水平;抗白喉、抗破伤风抗体水平都<0.01HAU/ml的保护水平,而且在婴儿群体中这种低抗体水平不随时间、不依城市或农村、发达地区或不发达地区而变化。结论DPT的初免月龄建议提前至2月龄,推广使用无细胞DPT,在低龄婴儿达到有效预防百日咳、白喉、破伤风的目的。

尿素酶疫苗在防治幽门螺杆菌感染的动物实验研究

目的利用人类幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染的小鼠模型研究Ｈｐ粗抗原及纯化尿素酶在预防与治疗Ｈｐ感染的作用。方法超声粉碎制备Ｈｐ全菌抗原，化学提纯制备Ｈｐ尿素酶，霍乱毒素（ＣＴ）为免疫佐剂。实验分为预防与治疗两部分。预防部分把实验动物无特定致病菌（Ｓ．Ｐ．Ｆ．）ＢＡＬＢ／ｃ小白鼠分成５组，分别通过灌胃方法给予尿素酶（２５０μｇ）加ＣＴ（２μｇ）、Ｈｐ粗抗原（１ｍｇ）加ＣＴ（２μｇ）、生理盐水、单纯尿素酶（２５０μｇ）、单纯ＣＴ（２μｇ），每周１次，共４次。２周后再用活Ｈｐ灌胃，再４周后处死动物。治疗部分把已感染Ｈｐ的小白鼠分成５组，分组与治疗方法同预防部分，治疗结束后４周处死动物，取胃粘膜行尿素酶试验与改良Ｇｉｅｍｓａ染色检查Ｈｐ情况。结果预防实验的保护率分别为，尿素酶加ＣＴ７０％（７／１０），Ｈｐ粗抗原＋ＣＴ８０％（８／１０），生理盐水、单纯尿素酶、单纯ＣＴ保护率均为０。治疗实验各组Ｈｐ根除率分别为：尿素酶加ＣＴ６３．６％（７／１１），Ｈｐ粗抗原加ＣＴ４４．４％（４／９），生理盐水组、单纯尿素酶、单纯ＣＴ组均无治疗作用。结论由尿素酶加免疫佐剂组成的口服疫苗，不仅有预防Ｈｐ感染的作用，同时也有根除已感染的Ｈｐ的作用。

百日咳毒素亚基基因的克隆与表达及其重组亚基的免疫学特性

目的从百日咳包特杆菌ＣＳ株中克隆百日咳毒素（ＰＴ）及其各亚基的基因，并探讨在昆虫细胞中表达百日咳毒素亚基基因片段的可能性及表达产物的生物学特性。方法采用ＰＣＲ技术进行克隆，并通过限制性内切酶和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ进行分析鉴定。利用重组杆状病毒技术，在昆虫细胞Ｓｆ９中表达各亚基基因，并通过免疫荧光实验进行分析鉴定，通过ＥＬＩＳＡ实验进行重组蛋白的免疫学特性评价。结果获得百日咳毒素及其各亚基的基因，并在昆虫细胞中表达了重组亚基。经体外聚合后的各重组亚基混合物与抗天然完整ＰＴ免疫血清的反应性和诱生特异性抗ＰＴ抗体的能力都明显高于各重组亚基单体混合物，含有Ｓ１重组亚基混合物诱生特异性抗ＰＴ抗体水平又明显高于不含Ｓ１重组亚基混合物的水平。说明百日咳毒素亚基单体仅具有很弱的诱生特异性抗ＰＴ抗体的能力，且抗完整ＰＴ的抗血清对百日咳毒素亚基单体也缺乏很好的识别作用。结论百日咳毒素诱导产生特异性抗体的能力依赖于聚合体的空间构型，而且其主要抗原决定簇位于聚合体的Ｓ１亚基上。