深共熔溶剂提取桑黄黄酮及体外降血糖、结合胆酸盐能力分析

从7种深共熔溶剂中筛选最适合用于桑黄黄酮化合物提取的溶剂体系,采用响应面优化深共熔溶剂提取桑黄黄酮的工艺,筛选最佳黄酮回收树脂,并分析其体外降血糖和结合胆酸盐能力。试验结果表明,乙二醇与氯化胆碱组成的深共熔溶剂体系最适合提取桑黄黄酮,最佳提取工艺为深共熔溶剂含水率30%,乙二醇与氯化胆碱的物质的量比为8.21∶1,料液比=50∶1(mg∶m L),提取温度64℃,提取时间43 min,在此条件下,桑黄黄酮得率为(8.85±0.34)%,较体积分数为60%乙醇提取的得率提高了2.02倍。9种大孔树脂中,AB-8型大孔树脂对桑黄黄酮的回收率最高,为85.25%;纯化后桑黄黄酮的纯度提高了6.12倍。桑黄黄酮抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的IC_(50)值分别为1.19 mg/m L和1.28 mg/m L,结合牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠的IC_(50)值分别为0.62 mg/m L和1.19 mg/m L,表明桑黄黄酮具有较强的调节血糖和血脂能力。实验表明,深共熔溶剂结合大孔吸附树脂富集回收可以绿色高效地从桑黄中提取黄酮类化合物。

羧基化柚子皮吸附Cd^(2+)的性能与机制

为探索利用食品加工废弃物柚子皮制备一种重金属离子吸附材料的可行性,通过NaOH将柚子皮中甲酯化的羧基水解成羧酸,再利用TEMPO/次氯酸钠/溴化钠体系将柚子皮中C-6位伯羟基氧化成羧酸,制备出一种羧基化柚子皮吸附材料,同时采用FTIR、SEM-EDS和XPS对柚子皮和吸附Cd^(2+)前后的羧基化柚子皮进行表征,研究其吸附机制。结果表明羧基化柚子皮中羧基含量为2.34 mmol/g,是改性前的10.64倍,且可以有效地去除水溶液中Cd^(2+)。羧基化柚子皮吸附Cd^(2+)更符合Langmuir和伪二阶动力学模型,属于单层化学吸附,对Cd^(2+)的最大吸附量为76.16 mg/g,是改性前的5.81倍。羧基化柚子皮中羧基(-COO^(-))是吸附Cd^(2+)的功能性基团,吸附后形成羧酸镉,其中镉以Cd^(2+)的形式存在,与-COO^(-)的配位方式主要是双齿桥式,该吸附过程是一个阳离子(Na^(+)和Cd^(2+))交换的过程。

羧基化吸附材料的制备及其对重金属离子的吸附

以玉米芯为原料,利用原子转移自由基聚合(atomic transfer radical polymerization,ATRP)技术在其表面引发丙烯酸甲酯发生聚合反应,再利用NaOH将嫁接在玉米芯表面的聚丙烯酸甲酯水解成聚丙烯酸钠,得到羧基化玉米芯吸附材料(C-C-A)。通过单因素试验和正交试验优化得到C-C-A最佳制备条件,同时采用FTIR、SEM-EDS和XPS对C-C-A进行表征,结果表明其表面凹凸不平,存在大量羧基。C-C-A对Pb^(2+)、Cd^(2+)、Cu^(2+)和Ni^(2+)的去除率均可达到98%以上,说明其可以有效去除重金属离子。C-C-A吸附重金属离子的过程既符合Pseudo-second-order动力学模型,又符合Langmuir等温线模型,属于单分子层化学吸附,且吸附较快。

柚子皮不溶性膳食纤维的提取工艺优化及特性分析

为获得复合酶法制备柚子皮不溶性膳食纤维的制备工艺及其吸附特性,实验以柚子皮为原料,采用正交试验优化提取柚子皮不溶性膳食纤维(IDF),并对其特性进行研究。结果表明,料液比1:40 g/mL、淀粉酶的添加量0.6%、淀粉酶的酶解时间90 min、木瓜蛋白酶的添加量0.2%、木瓜蛋白酶的酶解时间30 min为最佳提取条件,该条件下柚子皮IDF得率为55.07%。柚子皮IDF的膨胀力、持水力、持油力和阳离子交换能力分别为2.84±0.09 mL/g、12.54±0.11 g/g、1.54±0.02 g/g和0.36±0.04 mmol/g。此外,体外吸附研究表明,柚子皮IDF对葡萄糖、胆固醇、胆酸钠的吸附能力分别为0.13±0.003 mmol/g、12.27±0.020 mg/g和53.25±0.100 mg/g。FT-IR分析表明,柚子皮IDF具有纤维素类多糖的特征吸收峰,符合膳食纤维的结构。综上,优化工艺后提取的柚子皮IDF具有较好的特性,这为进一步开发利用柚子皮IDF提供了理论依据。

应用型本科院校“食品分析与检测综合训练”课程教学改革

“食品分析与检测综合训练”是食品质量与安全专业学生重要的实践课程,要求学生在全面掌握食品样品的采样、前处理、分析等步骤,以及食品中营养、危害成分和添加剂的检测原理和方法的基础上,科学选用合适的分析检测仪器对样品进行检测,正确记录及处理数据并进行科学分析讨论,规范撰写报告,掌握质量控制手段。针对传统食品分析与检测实验存在的问题,探讨并实践了“食品分析与检测综合训练”的教学改革,有力提高了学生文献综述、实验设计、正确操作、数据处理、综合分析和科学思维的能力,并培养了学生的专业素养和工匠精神。

弹性蛋白酶诱导的小鼠腹主动脉瘤消退期组织学特征观察

目的确定猪胰弹性蛋白酶(PPE)诱导的腹主动脉瘤(AAA)到达消退期的时间点,观察AAA消退期的组织学特征。方法选用C57BL/6J小鼠,手术游离腹主动脉,进行血管腔内输注PPE诱导AAA。测量小鼠术前、术后14 d(AAA到达平台期的时间点)和术后56 d(AAA消退期时间点)腹主动脉直径,比较分析术后14 d和术后56 d动脉瘤病变部位组织学特征。结果与正常腹主动脉相比,PPE输注14 d组和56 d组,腹主动脉直径均显著增加(直径增长率分别为147%和155%)。PPE输注后14 d,动脉瘤病变部位显微镜镜下可见弹性纤维断裂、平滑肌耗竭和炎症细胞弥散浸润等典型的AAA特征。在PPE输注后56 d组,虽然动脉直径没有明显变化,但组织学可见弹力纤维部分修复,新生平滑肌细胞补充至损伤的中膜,浸润的炎症细胞明显消退,外膜新生血管减少,呈现出疾病消退期的显著特征。结论在PPE诱导的小鼠AAA模型中,术后56 d是观察动脉瘤消退的合适时间点,动脉瘤病变消退的组织学特征明显。

腹主动脉瘤动物模型的研究现状与转化应用

随着我国人口老龄化趋势加剧,腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)发病率逐渐升高。由于动脉瘤破裂后死亡率极高,该病已经成为危害我国人群健康的重要疾病之一。在组织病理学上,AAA表现为中膜平滑肌细胞耗竭、弹力纤维断裂和退化、细胞外基质降解和血管局部炎症反应等。目前,临床上AAA的治疗多以血管内介入治疗为主,缺乏药物治疗手段,这也与致病机制迄今未被完全阐明有关。目前AAA动物模型主要以啮齿类实验动物(小鼠、大鼠)为主,也有部分中、大型实验动物(如兔、豚鼠、犬和猪等)。在造模方法上,主要包含弹性蛋白酶动脉腔内灌注法、血管紧张素Ⅱ输注法、氯化钙涂抹法和血管组织移植法等。部分药物或手术AAA模型由于前期诱导刺激的停止,诱导后动脉瘤病变趋于稳定。开发允许AAA持续发展,甚至可以在人为刺激下诱导破裂的,更符合人动脉瘤发展规律的模型是今后的造模研究方向之一。实验动物模型是阐明AAA发病机制、开发治疗动脉瘤新药和评价相关治疗策略安全性的重要研究工具。因此,本文综述了目前常用的AAA造模方法和其在临床前转化研究中的应用。

大型仪器设备开放共享管理模式的实践与探索

大型仪器设备管理水平是衡量高校教学科研与社会服务能力的重要指标之一。如何提高设备利用率,更好地为教学科研和社会服务,是实验室开放共享管理研究的重要课题。针对目前高校大型仪器设备管理机制和开放共享模式等关键问题,结合食品工程学院大型仪器设备管理实践,对实验室开放共享模式、大型仪器设备共享平台、开放基金、效益评价与考核体系等进行了积极探索,重点研究了教学与科研融通的开放共享机制、信息化管理平台建设、有偿服务与开放基金管理模式及考核评价奖惩制度,提高了大型仪器设备的利用率和使用效益,对促进实验室仪器设备的开放共享具有一定参考和借鉴作用。

黑豆肽的抗氧化活性与缓解体力疲劳作用

通过超滤与大孔吸附树脂分离黑豆蛋白酶解产物,获得体外抗氧化活性较强的黑豆肽,测定其相对分子质量分布和氨基酸组成;将小鼠随机分为空白对照组、谷胱甘肽(GSH)阳性对照组和黑豆肽低、中、高剂量组5组,进行缓解体力疲劳动物实验。结果表明:相对分子质量<3000、以体积分数75%乙醇洗脱的黑豆肽具有相对最强的DPPH自由基清除率;黑豆肽中、高剂量组小鼠负重游泳时间、血乳酸和肝糖原含量与空白组差异极显著(P<0.01),但达到缓解体力疲劳同等效果的灌胃剂量约是GSH的5～10倍;抗氧化黑豆肽的相对分子质量约在450～920之间,具有Phe、Val、Pro、Met疏水性氨基酸和Thr、Cys、His等含量较高的氨基酸组成特点,可以延缓由自由基引发的疲劳。

黑豆肽的分离纯化及其辅助降血脂作用

采用DA201-C大孔树脂吸附和乙醇分级洗脱的方式,对黑豆蛋白酶解液进行分离纯化,通过体外模拟实验测定分析不同体积分数乙醇洗脱的黑豆肽分级组分对胆固醇胶束溶解度的抑制率,选择对胆固醇胶束溶解度抑制率最强的黑豆肽组分进行辅助降血脂动物实验。结果表明:黑豆肽分级组分的平均疏水性值随着洗脱乙醇体积分数的增大而递增,其中乙醇体积分数为75%时洗脱得到的组分对胆固醇胶束溶解度的抑制率最高,该组分添加量为5g/L时,其抑制率为62.1%;对小鼠灌胃剂量为1000mg/(kg.d)时,黑豆肽对高血脂小鼠血清中总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)+极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)浓度降低极为显著(P<0.01)。提示黑豆肽具有一定的辅助降血脂功效。

黑豆蛋白肽果汁复合饮料的研制

黑豆是种皮为黑色的大豆 ,其蛋白质含量高达 5 0 % ,是极具开发潜力的植物蛋白资源 ,但黑豆蛋白质分子高度压缩折叠、不易消化 ,使其加工利用受到了限制。该试验采用 2 70 9碱性蛋白酶对黑豆蛋白进行有控制的水解 ,制备酸溶性好、易消化吸收的黑豆蛋白肽 ,经水解度与酸溶性蛋白肽得率测定 ,确定了酶解工艺条件 :底物浓度为每 10 0 m L黑豆浆含 3.75g蛋白质 ,酶 -底物比为 80 0 0 u/ g,p H值 9.0 ,温度 5 0℃ ,酶解时间 2 .0 h,水解度为 10 % ,酸溶性蛋白肽得率达 85 %。 2 70 9蛋白酶对黑豆蛋白具有较好的水解效果 ,1kg黑豆经磨浆、酶解与离心去渣脱苦制得 2 0 L黑豆蛋白肽混合液 ,将其与天然澄清苹果汁按 80∶ 2 0 (V/ V)混合调配制备黑豆蛋白肽果汁复合饮料 ,产品色泽棕红清亮 ,具天然果汁与黑豆清香风味 ,蛋白质与肽类物质含量 (m/ V)≥ 1.5 % ,酸度 (以柠檬酸计 )≥ 0 .4 g/ 10 0 m L。

降胆固醇黑豆肽的分离纯化与结构鉴定

通过超滤与大孔树脂吸附分离黑豆蛋白酶解产物,获得降胆固醇活性较强的黑豆肽组分,采用凝胶过滤色谱(GFC)、反相高效液相色谱(RP-HPLC)与排阻色谱(SEC)对黑豆肽粗品进行纯化,得到高纯度的降胆固醇肽,经Edman降解、N端测序对降胆固醇黑豆肽一级结构进行分析鉴定,其氨基酸组成序列为Ala-Phe-Pro-Lys-Asp,相对分子质量为576,肽链中具有特定的疏水区域,且Pro位于N端之外的重要位点。

酶法制备大豆皮微晶纤维素及其理化特性

采用纤维素酶水解法制备大豆皮微晶纤维素,研究加酶量、酶解pH值、温度、时间、液料比等因素对大豆皮酶解产物中微晶纤维素(MCC)含量的影响,确定了大豆皮微晶纤维素制备的最佳工艺条件:料液比1:20(g/mL),加酶量1%,反应pH4.8,酶解温度47℃,酶解时间1h。通过理化特性和电镜扫描分析表明,制备的大豆皮MCC的平衡聚合度、持水性和表观黏度等理化特性与台湾明台商品MCC接近,且大豆皮MCC电镜扫描结构疏松,比表面积较大,从微观结构上解释了大豆皮MCC吸水后的溶胀体积较大,对肠道产生的容积作用较强,据此推断大豆皮MCC对加强肠蠕动、促进体内垃圾的排泄有更好的效果。

转基因家兔模型制作方法

作为生物医学研究重要的实验动物模型,转基因家兔已经被广泛应用在人类心脑血管疾病、艾滋病以及癌症等生物医学研究领域,特别是利用转基因家兔模型在人类动脉粥样硬化实验研究中已经取得了令人注目的成绩。本文结合我们自己制作转基因家兔的经验、研究成果以及文献资料,详细介绍了利用原核显微注射法、直接将外源基因注入受精卵雄原核中的转基因家兔制作技术,回顾了利用转基因家兔模型在生物医学研究中取得的重要进展。

黑豆蛋白质酶水解物体外抗氧化活性的研究

采用Alcalase、Neutrase和Flavourzyme蛋白酶水解2种不同类型的黑豆蛋白,在其最适水解条件下,通过单酶水解和分阶段多酶复合水解方式制备黑豆蛋白水解物,利用邻苯三酚自氧化法测定比较其体外抗氧化活性。结果表明:在水解度相近的情况下,早熟大粒黑豆蛋白的Alcalase单酶水解物的抗氧化活性高于晚熟小粒黑豆蛋白;在水解时间相同的情况下,黑豆蛋白的Alcalase单酶水解物的抗氧化活性高于Neutrase和Flavourzyme蛋白酶;Alcalase和Neutrase分阶段水解90 min高于Alcalase单酶水解4 h的黑豆蛋白水解物的抗氧化活性;试验获得的具有较高抗氧化性的质量分数为2%的黑豆蛋白酶水解物,对邻苯三酚自氧化的抑制率与0.01%的维生素C水溶液相近。

不同分子量牛蒡多糖的生物活性研究

采用水提醇沉法制备牛蒡多糖,脱蛋白后用超滤膜将其分成<5,5~8,8~30,30~50,50~300 k和>300 k这6个不同分子量段的牛蒡多糖,对其抗氧化、降血糖和结合胆酸盐能力进行研究。结果表明,牛蒡多糖主要由分子量大于30 k的多糖组成。不同分子量的牛蒡多糖都具有一定的生物活性,并表现出量效关系,其中分子量为5~8 k的牛蒡多糖清除DPPH·和·O_(2)^(-)、抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶、结合甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠的IC50值分别为0.82 mg/mL和1.31 mg/mL,0.26 mg/mL和0.25 mg/mL,3.83 mg/mL和3.23 mg/mL,均优于其他组分,表明5~8 k的牛蒡多糖具有良好的抗氧化、降血糖和降血脂活性。

抗氧化黑豆肽的分离纯化与结构鉴定

以氧自由基清除能力(ORAC)为评价指标,通过超滤与大孔树脂吸附、乙醇分级洗脱对黑豆蛋白酶解产物进行初步分离,采用Sephadex G-25凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)与排阻色谱(SEC)逐级纯化,最终得到RP-HPLC P2组分SEC P2肽段和RP-HPLC P4组分SEC P3肽段2个纯化多肽,质量浓度为1 mg/mL的2个纯化多肽的ORAC值(Trolox当量)分别为307.5和314.6μmol/L,其氧自由基清除能力分别是超滤分离抗氧化最强黑豆肽组分(Mr<1 000)的2.68和2.74倍,经Edman降解、N-端测序进行结构鉴定,纯化后的2个抗氧化肽段的氨基酸组成序列结构分别为Tyr-Asn-Ile和Trp-Asn-Pro,N-端分别为具有酚羟基结构的酪氨酸Tyr和疏水性很强的色氨酸Trp。

近交系小鼠RAPD标记的观察

采用随机扩增多态性DNA技术(RAPD),分析BALB/c、C57BL/6、DBA/2、C3H/He等4个近交系小鼠的基因多态性,探讨用RAPD作为遗传标记,对近交系小鼠进行遗传检测。结果表明,4种小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记,证明RAPD可作为近交系小鼠的分子标记,在DNA水平区别4种近交系小鼠。

生姜蛋白酶的大分子结合修饰

采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)和右旋糖苷对生姜蛋白酶进行大分子结合修饰。在酶液质量浓度为2.0mg/mL的硼酸缓冲液中,加入三聚氯氰活化的mPEG或高碘酸钠活化的右旋糖苷,于40℃修饰反应1h,对修饰剂与酶蛋白的质量比和pH值条件进行优化:mPEG与酶的质量比为17.5:1.0、pH9.0,mPEG修饰酶的修饰率为52.6%,相对酶活力(修饰酶活力/天然酶活力)为54.0%;右旋糖苷与酶的质量比为42:1、pH6.0,右旋糖苷修饰酶的修饰率为51.6%,其相对酶活力为原天然酶的3.3倍。两种修饰酶的热稳定性均比天然酶显著增强,且右旋糖苷修饰酶的热稳定性明显高于mPEG修饰酶。结果表明:右旋糖苷对生姜蛋白酶的修饰效果优于聚乙二醇,适用于酶蛋白的化学修饰与新型酶制剂的开发利用。

思维导图在医学实验动物学教学中的应用探索

探索将思维导图应用于医学实验动物学教学,提炼知识要点,整合零散内容,旨在培养学生构建全面系统的专业知识体系的能力,从而激发其学习兴趣,达到提高教学质量和学习效率的目的。