刘永惠教授“保胃气”思想在肿瘤治疗中的应用研究

肿瘤病机是以正气虚弱为本,兼有有形之邪。在肿瘤的治疗中应扶正祛邪。因脾胃为后天之本,广义之胃气即人体之正气,所以"保胃气"在肿瘤治疗中有重要的意义。刘永惠教授在治疗肿瘤的过程中提倡"保胃气",以增强患者免疫力,提高生活质量,有其独到见解。

刘永惠教授补肾论治崩漏

崩漏是妇科临床常见的出血性月经病,刘永惠教授认为崩漏发病以肾之阴阳不足为本,肝脾之阴阳不足为标。治疗以"补肾为先",重在调节肾之阴阳平衡,分阶段运用补肾法,并重视疏肝健脾,临证需根据病情变化及时调整用药。

刘永惠教授临床辨治痹证经验

痹证是以肢体关节及肌肉痠痛、麻木、屈伸不利或关节肿大、变形等为主症的一类病证。刘永惠教授认为正虚邪实为痹证的基本病机,可从经络气血、脏腑角度辨证论治,并把痹证分为缓型和急型,临床根据病机变化遣方用药,并注重整体辨证论治。缓型风寒湿痹的治疗除祛风、燥湿、通络、止痛之外,必须兼以补气养血为要;急型热痹的治疗除甘寒清热、解肌佐以苦寒解毒、宣肺之外,更须注重活血通络为先。采用刘氏黄芪赤风汤加减治疗缓型风寒湿痹,白虎桂枝汤加减治疗急型热痹,临证变通,屡获良效。

基于数据挖掘探讨刘永惠教授诊治化疗中肿瘤的中医辨治经验

目的运用数据挖掘的方法探究刘永惠教授治疗化疗中肿瘤的用药规律及辨治经验。方法收集刘永惠教授治疗化疗中肿瘤的医案624例,借助中医传承辅助平台对用药频次、组方规律、药物归经、四气五味等进行数据挖掘及分析。结果肿瘤化疗中患者的常见症状为恶心、呕吐、不思饮食、乏力、大便溏稀、脘闷不适,头晕、口淡不渴、小便不利;刘永惠教授治疗化疗中肿瘤患者常用药物以温性为主,平性次之,甘味药物使用最多,辛味次之,脾、胃、肾三经用药频率最高;组方核心药物有黄芪、白术、茯苓、女贞子、菟丝子、覆盆子、车前子、丹参等13味。结论刘永惠教授认为化疗中肿瘤以脾胃肾虚为本,痰湿瘀为标,治疗上以补气扶正、和胃健脾、补肾益精为主。基于数据挖掘结果为进一步实现刘永惠教授诊治肿瘤经验的有效传承与总结提供理论依据。

刘永惠教授分阶段辨治乳腺癌经验

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤,刘永惠教授认为正气不足、肝气郁滞、乳络瘀滞是乳腺癌形成、发展的基本原因。乳腺癌手术、放化疗等治疗在达到祛邪目的同时,对机体气血、阴阳也造成不同程度的损害。刘教授分阶段,从“疏肝气、保胃气、扶正气”三方面来遣方用药,乳腺癌术前、化疗前以疏肝理气、化瘀通络为主,化疗中以保胃气、健脾和胃为主,术后、化疗后以扶正气、补肾养血为主,取得良好疗效。

花生干旱诱导型启动子Ah MYB44-11-Pro的克隆与功能分析

干旱是严重威胁我国花生产量与品质的主要环境因素之一。为阐明干旱胁迫响应基因AhMYB44-11的调控机制,揭示其启动子的功能,本研究从花生基因组中扩增获得该基因的启动子序列AhMYB44-11-Pro,分别构建全长及5'端部分缺失启动子的GUS融合表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化体系,分析启动子的活性和表达模式。结果显示,相比于同源基因AhMYB44-01的启动子,AhMYB44-11-Pro具有更多的MBS、Myb-bindingsit等响应干旱胁迫的顺式作用元件;同时其拟南芥转基因阳性植株经脱水处理后GUS染色加深,GUS酶活性显著增加;表明启动子的活性受干旱胁迫诱导表达,证实AhMYB44-11-Pro是一个干旱诱导型启动子。此外, AhMYB44-11-Pro含有种子胚乳特异表达元件和赤霉素响应元件, GUS染色显示在角果发育过程中其活性呈上调趋势,由此推测AhMYB44-11可能在种子发育尤其是干物质积累过程中发挥重要作用。本研究结果将为全面解析AhMYB44的生物学功能奠定基础,也为作物抗旱遗传改良提供参考依据。

地膜覆盖对夏直播垄作花生的温度效应和产量的影响

为探究地膜覆盖对夏直播垄作花生的温度效应,以及对花生生长发育和产量的影响,以露地为对照,研究了普通白膜、降解黑膜处理下土壤温度的动态变化以及对花生主要经济性状和产量的影响,并探讨温度效应与气温的关系。结果表明,普通白膜覆盖提高了土下10 cm的日最低温度和日平均温度,降低土下10 cm的日最高温度;降解黑膜覆盖降低土下10 cm的日最低温度,增加土下10 cm的日最高温度和日平均温度。不同气温区间普通白膜处理土下10 cm最低温度均值高于土表1.8~3.2℃,降解黑膜则低0.7~2.0℃;普通白膜处理土下10 cm最高温度均值低于土表1.6~6.0℃,降解黑膜则高3.1~6.3℃。土表和土下10 cm平均温度均值随气温升高而增加,不同气温区间对土表和土下10 cm平均温度均值的影响不同,普通白膜和降解黑膜间也有差异。地膜覆盖的增温效应促进了植株的生长发育,整体上有利于单株叶面积和植株干质量的增加,但生长后期有早衰现象。地膜覆盖对花生主要经济性状的影响不显著,普通白膜、降解黑膜和露地种植的花生产量分别为4286、4247和4028 kg/hm^(2),差异不显著。此外,地膜覆盖对花生根瘤数量也有影响。本研究对夏直播垄作花生高产栽培及地膜覆盖技术的应用具有指导意义。

莪术醇对乏氧微环境中人乳腺癌细胞株MCF-7生长转移机制的研究

目的以乳腺癌为研究对象,研究乏氧微环境下莪术醇对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖活性的影响,并进一步通过促肿瘤生长转移因子HIF-1α、CXCR4、CXCL12的mRNA及蛋白水平的表达,来研究莪术醇对乏氧微环境中MCF-7细胞的生长转移机制的影响。方法在常氧条件下,用含有不同浓度的莪术醇用MTT法检测各莪术醇浓度及时间条件下MCF-7细胞的增殖活性。RT-PCR的方法检测乏氧与常氧环境下莪术醇对人乳腺癌细胞株MCF-7中HIF-1α、CXCL12、CXCR4因子mRNA表达的影响。Westen blotting检测乏氧与常氧环境下莪术醇对MCF-7中HIF-1α、CXCL12、CXCR4因子蛋白表达的影响。免疫组化检测乏氧与常氧环境下莪术醇对MCF-7中HIF-1α、CXCL12、CXCR4因子蛋白表达的影响并检测其表达位置。结果莪术醇可明显抑制人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖,且药物作用时间越长、浓度越大,抑制率也越高(P<0.05)。HIF-1α的mRNA及蛋白的表达:常氧条件下HIF-1α几乎无表达,乏氧条件下HIF-1α表达明显;且莪术醇处理的乏氧加药组mRNA及蛋白的表达少于乏氧对照组(P<0.05)。免疫组化结果中可见HIF-1α主要表达在MCF-7的胞核中。乏氧条件下较常氧条件下CXCR4和CXCL12的mRNA及蛋白的表达明显增高(P<0.05),对比莪术醇作用后的乏氧加药组与常氧加药组,CXCR4和CXCL12的mRNA及蛋白在乏氧加药组的表达要明显低于常氧加药组(P<0.05)。CXCR4主要表达MCF-7细胞的胞膜及胞质中。CXCL12主要表达在MCF-7细胞的胞膜和胞质中。结论莪术醇对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖有抑制作用,且有浓度及时间梯度依赖关系。HIF-1α在乏氧条件诱导下表达增高,通过HIF-1α增高,可上调CXCR4、CXCL12因子的表达。莪术醇可明显抑制HIF-1α、CXCL12、CXCR4因子表达,且莪术醇在乏氧条件下的抑制能力更强。

等带宽间作模式下不同玉米花生行比对花生光合特性和系统产量的影响

【目的】明确相同带宽条件下不同玉米花生种植行比对花生光合特性和系统产量的影响,为构建适宜行比的玉米花生带状间作模式提供理论参考和技术支持。【方法】以玉米花生带状间作系统为对象,设置玉米单作,花生单作,玉米花生间作(3.6 m的总带宽,行比分别为2∶6、4∶4、6∶2),研究不同行比对间作花生干物质积累、叶面积指数、叶片光合参数、产量构成和玉米花生系统产量的影响。【结果】3种间作模式的干物质量和叶面积指数均小于单作,其中2∶6种植模式在花生生育后期的叶面积指数较4∶4和6∶2分别提高30.07%和44.19%,等带宽间作体系下相对较少的玉米行比可以增加间作花生的叶绿素含量和光合速率,保持花生叶片较高的光合能力,从而获得产量优势。间作显著降低了玉米的穗数、穗粒数和百粒重以及花生的单株饱果数和百果重,系统产量以2行玉米6行花生的种植模式最高,为13749.9 kg/hm^(2),3种间作模式的土地当量比均大于1,且综合产量均显著高于单作玉米和单作花生。【结论】在玉米花生等带宽间作模式下,花生行比的增加缓解了玉米的荫蔽效应,改善了花生的光合能力,同时提高土地利用率,实现稳粮增油、均衡生产。

糖周通抑制氧化应激反应及细胞凋亡减轻高糖代谢记忆周围神经损伤机制

目的:通过观察糖周通对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠氧化应激及凋亡指标的影响,探讨糖周通干预高糖代谢记忆的分子机制。方法:随机选择3只5月龄雄性Wistar大鼠作为对照组,另选5月龄雄性SPF级自发性2型糖尿病Goto-Kakizaki大鼠12只,将其随机分为代谢记忆组、糖周通高剂量组、糖周通中剂量组、糖周通低剂量组,各3只。按照实验条件进行干预,给药12周后运用ELISA法检测各组大鼠尿液中8-OHDG含量;比色法检测GSH、MDA含量;采用PCR法检测Bcl-2、Bax表达水平;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:与对照组相比,代谢记忆组8-OHDG、MDA升高(P<0.05),GSH下调(P<0.05)。与代谢记忆组相比,糖周通高剂量组、糖周通中剂量组、糖周通低剂量组8-OHDG表达下调(P<0.05),糖周通高剂量组、糖周通中剂量组MDA表达下调(P<0.05)。与代谢记忆组相比糖周通高剂量组、糖周通中剂量组GSH上调(P<0.05),而与糖周通低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PCR结果提示代谢记忆组Bax表达水平较对照组显著上调(P<0.05),糖周通高剂量组Bax表达较代谢记忆组显著下调(P<0.05);糖周通中剂量组、糖周通低剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。代谢记忆组Bcl-2表达水平较对照组下调(P<0.05),糖周通高剂量组Bcl-2表达较代谢记忆组上调(P<0.05);糖周通中剂量组、糖周通低剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL结果显示,代谢记忆组平均细胞凋亡率较对照组上调,糖周通高剂量组、糖周通中剂量组细胞凋亡率较代谢记忆组下调,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:糖周通可能通过抑制氧化应激和细胞凋亡减轻高糖代谢记忆损伤。

不同花生品种(系)萌发期耐盐性的鉴定与评价

以相对发芽势、相对发芽率和相对发芽指数为指标对41个花生品种(系)萌发期的耐盐性进行鉴定。结果表明,盐胁迫对花生种子萌发有显著的抑制作用,这种抑制效应随着胁迫浓度的增加而增强,0.5%NaCl胁迫能较好反映品种萌发期的耐盐性差异,可用于花生品种资源的耐盐性鉴定。聚类分析表明,在欧氏距离D=15水平上可以细分为A、B、C、D、E共5个类群,其中A类群耐盐性较强,E类群表现为盐敏感。不同地区品种对不同NaCl浓度的耐性差异明显,河南品种的耐盐性较强;不同类型花生品种中以高世代品系的耐盐性较强。本研究筛选到3份耐盐品种和2份盐敏感品种。

肿瘤转移与血瘀证的临床研究

目的 :研究肺癌及其转移患者血小板聚集、黏附功能的变化 ,阐述肿瘤转移与血瘀证、微观血瘀证的关系。方法 :经中医辨证分型 ,采用TYXN 91智能血液聚集仪和玻珠柱法检测肺癌患者 4 7例 ,肺癌转移患者 2 0例 ,健康人 2 0例血小板凝集最大值 (MAR)和血小板黏附率 (PAD)。结果 :肺癌转移患者、肺癌患者与健康人MAR、PAD均有显著性差异 (P <0 0 0 1,P <0 0 1) ;且肺癌转移患者较肺癌患者MAR、PAD亦有显著性差异 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 :恶性肿瘤及其转移患者血小板聚集、黏附功能亢进与肿瘤从发病到转移呈正相关 ,揭示恶性肿瘤普遍存在着血瘀证 。

麝香酮对血瘀证乳腺癌生长及对VEGF表达的影响

目的观察麝香酮对血瘀证裸鼠乳腺癌进展的影响。方法构建血瘀证乳腺癌裸鼠模型,用麝香酮[2mg/(kg·d)]灌胃14d后,观察裸鼠的一般状况,计算肿瘤体积及麝香酮的抑瘤率,检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果麝香酮可抑制血瘀证裸鼠乳腺癌的生长,与对照组相比,具有统计学差异(P<0.05);麝香酮可有效抑制瘤体生长(抑瘤率为48.03%);麝香酮组VEGF的阳性细胞表达降低。结论在血瘀证裸鼠模型中,麝香酮可以显著抑制乳腺癌的生长,其机制可能是通过减少VEGF的表达,达到抑制血管生成、阻断肿瘤营养供应,从而影响肿瘤生长。

不同花生品种(系)萌发期抗旱性鉴定评价

以发芽势、发芽率、发芽指数、胚根长、胚轴长、幼芽长、幼苗鲜/干重的相对值为指标,通过PEG6000模拟干旱处理,对15份花生品种(系)进行萌发期抗旱性鉴定。结果显示,胁迫处理初期,低浓度处理对种子萌发有促进作用,随着胁迫处理时间的延长及胁迫处理浓度的升高,种子萌发受抑制程度增强。除相对幼芽长以外,其他相对指标都和品种综合抗旱能力呈极显著正相关。通过隶属函数法结合抗旱分级标准筛选出泰花4号、徐花13号、泰0125、泰0005等4份抗旱品种,泰花5号、濮花28、中花16等3份中抗材料,表明该方法可以作为一种快速、简便的鉴定花生萌发期抗旱性的方法。

补肾健脑方对血管性痴呆大鼠乙酰胆碱和海马区ERK1和ERK2表达的影响

目的研究补肾健脑方对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习、记忆能力,皮质和海马乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)含量,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞表达的影响,并探讨其治疗VD的可能机制。方法选取83只大鼠,采用双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备VD动物模型。将造模组随机分为模型组、西药组及补肾健脑方高、中(各13只)、低(12只)剂量组。另选取13只大鼠作为假手术组。假手术组及模型组予蒸馏水灌胃(5mL/kg);西药组予盐酸多奈哌齐混悬液灌胃(0.52mg/kg);中药组予补肾健脑方组低(14g/kg)、中(28g/kg)、高(56g/kg)剂量灌胃;各组连续干预30天。采用Morris水迷宫实验测定大鼠逃避潜伏期及穿越平台数。比色法测定皮质、海马ACh含量,免疫组化法检测大鼠海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞表达数。结果用药组大鼠的平均逃避潜伏期总体呈逐渐下降趋势。与假手术组比较,模型组第3～5天逃避潜伏期延长,穿越平台数减少,皮质、海马ACh含量降低,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,西药组及补肾健脑方高剂量组第4天逃避潜伏期均缩短,各用药组第5天逃避潜伏期均缩短,穿越平台数及海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数增加,皮质ACh含量、海马ACh含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与补肾健脑方低剂量组比较,高剂量组第4、5天逃避潜伏期缩短,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,补肾健脑方低、中剂量组皮质、海马ACh含量降低(P<0.05)。结论补肾健脑方对VD模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与提高皮质和海马ACh含量,促进海马CA1区ERK1、ERK2阳性神经元表达有关。

肺癌及其转移患者微观血瘀证的临床研究

目的:阐明肺癌及其转移与微观血瘀证的关系。方法:检测77例原发性肺癌患者血液流变学的指标,其中肺癌组(未转移者)50例,转移组27例和健康人对照组20例,并按中医辨证标准予以分型。结果:肺癌患者的多项指标较正常人差异有显著性(P<0.01或P<0.05);肺癌转移患者的血浆黏度、纤维蛋白原较肺癌未转移患者差异有显著性(P<0.05)。结论:肺癌患者血液处于高凝状态,对肺癌转移起重要作用,并表明肺癌及其转移患者存在着微观血瘀证,为活血化瘀法治疗肿瘤及其转移提供了理论依据。

补肾健脑方对血管性痴呆大鼠皮质和海马脑血流量及乙酰胆碱含量的影响

目的研究补肾健脑方对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆、局部脑血流量、乙酰胆碱(ACh)含量及CA1区神经元形态学改变的影响,探讨其治疗VD的可能机制。方法双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备大鼠慢性脑缺血致VD动物模型,造模完成后,随机分为6组。分别用蒸馏水、多奈哌齐混悬液以及不同浓度补肾健脑方灌胃,30 d后水迷宫实验测定大鼠学习记忆能力,放射性测量脑血流量,比色法测定ACh含量,HE染色观察神经元形态学改变。结果与模型组相比,补肾健脑方能提高VD大鼠的学习记忆能力,改善皮质和海马脑血流量,提高ACh含量,与多奈哌齐组相比未见统计学差异。结论补肾健脑方改善VD大鼠的学习记忆能力的作用机制可能是通过增加皮质和海马的脑血流量,增加皮质和海马ACh含量而发挥作用的。

丹参酮对血瘀证乳腺癌P53基因、mdm2基因表达的影响

目的:观察丹参酮对血瘀证裸鼠乳腺癌相关基因表达的影响。方法:体外传代培养乳腺癌细胞株MDA-MB-231s,种植给血瘀证裸鼠,并采用丹参酮灌胃干预,以Elisa法测定裸鼠血清中的p53、mdm2的含量。结果:丹参酮组裸鼠血清中的p53、mdm2含量与对照组比较明显降低(P<0.05)。结论:血瘀证与肿瘤的突变型P53基因、mdm2基因存在着密切关系,丹参酮显著抑制突变型P53基因、mdm2基因的表达。

花生种质苗期抗旱性鉴定与评价

利用15%PEG6000对80份花生种质资源进行实验室苗期模拟干旱鉴定,以相对株高、相对植株鲜质量、干质量为指标对不同品种(系)抗旱性进行评价。结果表明,与清水对照相比,经胁迫处理10 d后植株生长受到了明显抑制。聚类分析表明,在欧氏距离D=15水平上可以细分为A、B、C、D共4个类群,其中B类群抗旱性较强,C类群表现为旱敏感。不同类型花生品种抗旱性比较中以审定品种抗旱性较优。筛选出的抗旱与旱敏感种质将用于进一步的基础研究与种质改良。