柴胡口服液抑制NF-κB-NLRP3通路缓解慢性热应激诱导的肉鸡肺脏炎性损伤

用酶联免疫法检测柴胡口服液作用下5 d和10 d热应激肉鸡血清中炎性因子的表达,用蛋白免疫印迹法检测肉鸡肺脏中炎症相关因子(NF-κB p65、NLRP3、IL-1β、IL-6和TNF-α)蛋白表达,并观察肺脏病理切片。发现慢性热应激5 d与10 d显著提高了肉鸡血清中促炎因子IL-1β和IL-6、TNF-α的含量,肉鸡出现肺泡结构损伤、充血等病理变化,而柴胡口服液能明显降低第5天血清中促炎因子IL-1β的含量,降低第10天血清中IL-6和TNF-α的水平,改善肺组织病理损伤,并能显著下调肺组织炎性因子NF-κB p65、NLRP3、IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平。说明慢性热应激可诱导肉鸡肺脏炎性损伤,柴胡口服液可通过下调NF-κB-NLRP3信号通路抑制炎性因子蛋白表达,从而缓解热应激诱导的肺损伤。

基于网络药理学探讨柴胡口服液调治家禽热应激的分子机理

为了探讨柴胡口服液在调治家禽热应激中的靶点与通路,试验通过TCMSP数据库检索柴胡中主要活性成分及其对应的靶点,根据ADME属性筛选中药活性成分;通过GeneCards、OMIM、TTD、DisGENET数据库获取热应激主要靶点;利用STRING11.0平台进行蛋白质相互作用分析,构建蛋白质互作网络;运用DAVID平台分析"药物-成分-靶点"及其参与的GO生物学过程与KEGG信号通路;采用Cytoscape 3.8.0软件构建"柴胡活性成分-热应激靶点-KEGG通路"网络图,并进行动物试验验证网络药理学预测得到的结果。结果表明:柴胡口服液调治家禽热应激的核心活性成分为槲皮素、山奈酚和异鼠李素等;其主要作用的核心靶点为RELA、IL-6、JUN、PTGS2、CHUK、NFKBIA、RAF1、HSP90AA1、CCND1和EGFR;柴胡口服液主要通过作用于MAPK、Toll样受体、Jak-STAT信号通路等炎性通路调节家禽热应激;热应激能激活MAPK信号通路中的ERK1/2、JNK和P38蛋白,而柴胡可极显著降低MAPK信号通路中上述蛋白质的表达(P<0.01)。说明热应激主要通过引起炎症反应而影响家禽的内环境平衡,而柴胡口服液可通过多靶点、多通路缓解热应激对家禽造成的影响。

板连败毒口服液解热作用及其机理研究

对板连败毒口服液(BBO)的解热作用及其可能的作用机制进行探索。48只清洁级新西兰大白兔随机分成6组(8只/组),分别为阴性对照组、阳性对照组、阳性药物组(布洛芬)、BBO低剂量组、BBO中剂量组、BBO高剂量组。阴性对照组家兔耳缘静脉注射生理盐水4mL/kg;其余各组家兔耳缘静脉注射330mL/L脱脂牛奶溶液4mL/kg建立发热模型。造模1h后,低、中、高剂量组分别灌胃给予BBO(0.6、1.2、2.5g/kg),连续3次,每次间隔1h;阳性药物组灌胃给予布洛芬水溶液(0.03g/kg)连续3次,阳性对照组与阴性对照组给予等体积灭菌生理盐水灌胃,连续3次,每次间隔1h。造模后每1h测定体温一次,连续监测5次,观察BBO对家兔发热的解热作用。监测完最后一次体温后麻醉家兔取下丘脑,ELISA检测下丘脑中与炎性发热相关因子,包括白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、环磷酸腺苷(cAMP)和前列腺素E2(PGE2)等,探讨BBO的解热机制。结果表明,BBO能够显著降低家兔体温;能够显著降低下丘脑中IL-1β、IL-6、cAMP、PGE2的含量。BBO的解热机制可能与抑制下丘脑IL-1β、IL-6、PGE2等内生致热源从而降低cAPM分泌有关。

板连败毒口服液的安全药理学研究

对板连败毒口服液进行安全药理学研究。通过小鼠戊巴比妥钠阈剂量(阈下剂量)催眠试验、小鼠一般状态及自主活动试验和小鼠的协调性试验,考察药物对神经系统的影响;用MC4000无创血压仪和EMKA小动物无创肺功能仪检测,记录不同时间段的收缩压、舒张压、平均动脉压、脉搏、呼吸频率、潮气量、呼吸节律等相关指标,分析药物对心血管系统、呼吸系统的影响。板连败毒口服液对小鼠戊巴比妥钠阈(阈下剂量)剂量催眠试验结果显示,睡眠持续时间和睡眠个数3个剂量组与对照组相比无显著差异;小鼠一般状态及自主活动试验和机能协调运动试验中,3个剂量组与对照组相比无显著差异。板连败毒口服液对大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、脉搏、呼吸频率、潮气量、呼吸节律等无显著影响。板连败毒口服液对动物的中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统均无显著影响,是一种临床上较为安全的药物。

火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应

为了探讨火炭母对鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的免疫保护作用及其潜在机制。本试验将48只雌性BALB/c小鼠随机分为6个组:空白对照组、模型组、阳性药物组和火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素[20 mg/(kg·bw)],火炭母高、中、低剂量组小鼠分别按16、8和4 g/(kg·bw)剂量灌胃火炭母,空白对照组和模型组小鼠给予等体积的灭菌生理盐水,共连续给药8 d。预防性给药2 d后,每只小鼠(空白对照组除外)灌胃0.2 mL半数致死量(LD 50)鼠伤寒沙门菌(5×10^(4) CFU/mL)致病。给药结束后,处死小鼠取空肠用于组织病理学检查和Western blot。结果显示,鼠伤寒沙门菌感染后,小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞增多、肠绒毛结构松散,火炭母各剂量组小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞明显减少,火炭母减轻了小鼠空肠组织损伤。Western blot结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠空肠中免疫因子β干扰素(IFN-β)蛋白表达显著上升(P<0.05),γ干扰素(IFN-γ)蛋白表达显著下降(P<0.05),干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达显著上调(P<0.05),炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达显著上升(P<0.05);与模型组相比,不同剂量火炭母可以不同程度降低炎症因子IL-6(P<0.05或P>0.05)、IL-1β(P<0.05)和NF-κB p65(P<0.05)蛋白表达,显著提高TLR4、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)蛋白的表达和TANK结合激酶1(TBK1)蛋白表达及其磷酸化水平(P<0.05),提高下游信号IRF3蛋白的表达(P<0.05)及其磷酸化水平(P<0.05或P>0.05),进而提高空肠中IFN-β(P<0.05或P>0.05)和IFN-γ(P<0.05)蛋白的表达。结果表明,火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应。

火炭母缓解鼠伤寒沙门菌致小鼠肝损伤的机制研究

【目的】探讨火炭母口服液对鼠伤寒沙门菌感染小鼠肝脏的保护作用及其机制。【方法】将48只雄性BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物组及火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素(20 mg/kg),火炭母高、中、低剂量组小鼠分别灌胃16、8和4 g/kg火炭母,空白对照组和模型组小鼠分别给予等体积的PBS,连续给药8 d。预防性给药2 d后,空白对照组小鼠灌胃0.2 mL PBS,其他组小鼠一次性灌胃0.2 mL 5×10^(4) CFU/mL鼠伤寒沙门菌溶液。给药结束后处死小鼠,解剖取肝脏,制作组织切片并经HE染色观察肝脏病理变化,平板培养基培养肝脏组织悬液检测小鼠肝脏载菌量,Western blotting检测α干扰素(IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达水平。【结果】肝脏病理观察结果显示,模型组小鼠肝脏有淤血,大量炎性细胞浸润,肝细胞明显肿胀、排列紊乱,胞质染色加深,肝细胞坏死和凋亡;经火炭母处理后,高剂量组小鼠肝脏组织中少量炎症细胞,淤血及肝细胞坏死和凋亡的情况得到改善,肝细胞染色深、轻微肿胀、排列紊乱,而中、低剂量组除肝细胞胞质染色深、轻微肿胀、排列紊乱外,其他病变不明显。与空白对照组相比,模型组小鼠肝脏中鼠伤寒沙门菌负荷显著增加(P<0.05),IRF3、P-IRF3、IFN-α、IFN-β和IFN-γ表达显著下降(P<0.05),TNF-α和IL-1β表达水平则显著上升(P<0.05);与模型组相比,火炭母各剂量组小鼠肝脏中鼠伤寒沙门菌负荷均显著降低(P<0.05),中剂量火炭母能明显增强TBK1蛋白的磷酸化和IRF3蛋白的表达及其磷酸化水平(P<0.05),增加IFN-α、IFN-β、IFN-γ的蛋白水平(P<0.05),且能显著降低TNF-α和IL-1β的分泌(P<0.05)。【结论】火炭母可能通过上调TBK1-IRF3途径诱导IFN产生,缓解鼠伤寒沙门菌感染致小鼠肝损伤,以8 g/kg给药剂量效果较好。

热应激麻鸡感染大肠杆菌后空肠TLR4-TBK1信号通路免疫因子变化研究

为了探索热应激麻鸡感染大肠杆菌后对空肠中TLR4-TBK1信号通路及相关免疫因子的影响,试验将24只雄性麻鸡随机均分为3组,即空白组、大肠杆菌组(E.coli组)和热应激+大肠杆菌组(HS+E.coli组)。HS+E.coli组麻鸡于41℃热应激12 h后恢复7 d,随后E.coli组和HS+E.coli组麻鸡均灌胃给予1×109 cfu/mL大肠杆菌O157:H71 mL,空白组麻鸡给予相同剂量的无菌生理盐水。于感染大肠杆菌后第4天处死麻鸡,取一段空肠进行病理组织学检查,并通过Western-blot法测定β干扰素(IFN-β)、γ干扰素(IFN-γ)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、热休克蛋白70(HSP70)、Toll样受体4(TLR4)和TANK结合激酶1(TBK1)等相关蛋白的表达情况。结果表明:E.coli组与空白组相比,大肠杆菌感染降低了空肠中绒毛高度并增加了隐窝深度,使空肠中IFN-β、IFN-γ、HMGB1、p-IRF3、TLR4蛋白水平极显著升高(P<0.01),IRF3(P<0.01)、HSP70(P<0.05)、TBK1(P<0.01)蛋白表达水平降低。而HS+E.coli组与E.coli组相比,热应激降低了空肠的隐窝深度,空肠中IFN-β(P<0.01)、IFN-γ(P<0.01)、p-IRF3(P<0.01)、TBK1(P<0.05)和TLR4(P<0.01)蛋白表达水平降低。说明热应激可以通过下调TLR4-TBK1信号通路相关免疫因子表达抑制大肠杆菌感染麻鸡空肠的免疫反应。

中医辨证治疗犬风寒感冒

临床上常见一类发热、咳嗽、喷嚏、精神不振、食少为主要症状的疾病,经检查排除了冠状病毒、犬瘟热等病毒性传染病,按照临床症状可以归为感冒。以中兽医学观点来看,首先应对疾病进行辨证分析,不同证候的治疗原则不同。中兽医根据感冒证候不同,将其分为风寒感冒和风热感冒,有些还携湿。风寒感冒是机体感受了自然界的寒性风邪而岀现的一类证候,主要与环境温度的急剧变化有关,寒冷季节较为多见[1]。

鸡与其他实验动物体表面积等效换算系数的测算

测算鸡与其他实验动物等效剂量换算系数,为完善鸡常用基础实验数据提供依据。用Photoshopcc 2015测算鸡皮表面积,基于体质量与体表面积,求出鸡在Meeh-Rubner氏公式中的K值,计算出鸡与其他实验动物之间药物剂量换算的系数。鸡在Meeh-Rubner氏公式中的K值为9.24±1.03,mg/kg^mg/m^2转移因子为10.00±1.36,单位体重上表面积的相对比值为0.30±0.044。研究结果可为鸡在生物医学及畜牧养殖方面的健康合理用药提供重要信息。

多指标综合评分结合正交试验法优选大鼠对乙酰氨基酚肝损伤模型

采用正交试验方法优选大鼠对乙酰氨基酚(APAP)染毒致肝损伤模型最佳制作条件。选择对肝功能指标有影响的3个因素:染毒剂量、中毒途径和采血时间,设置3个水平,采用L_(9)(3^(4))正交表安排试验,以肝生化指标综合评分作为参考依据,优选大鼠肝损伤模型的最佳条件。结果显示,APAP以800 mg/(kg·bw)经腹腔注射雄性大鼠,28 h后可以得到最优化肝损伤模型。本方法可为肝损伤新药研发和机理研究提供可靠的模型。

火炭母经口急性毒性和长期毒性研究

为了探究火炭母临床用药的安全性,试验进行火炭母对小鼠的急性毒性和大鼠的长期毒性研究。在急性毒性预试验中,SPF级KM小鼠最高攻毒剂量达到6000 mg/kg时所有小鼠未死亡,故正式试验SPF级KM小鼠每个重复10只(雌雄各半),一次性灌胃给药,重复2次,给药后4 h内仔细观察受试小鼠的临床表现,连续观察7 d。长期毒性研究中,将80只SPF级SD大鼠随机分为火炭母高剂量组(40 g/kg)、中剂量组(20 g/kg)、低剂量组(10 g/kg)和空白对照组,每组20只(雌雄各半)。高、中、低剂量组连续饲喂药化饲料30 d,空白对照组饲喂基础日粮30 d。攻毒结束后每组随机取10只大鼠(雌雄各半),后腔静脉采血用于血常规、血清生化指标检测;按照动物福利安乐死后进行大体剖检变化观察,采集主要脏器测量脏器系数,对高剂量组和空白对照组的主要脏器进行组织病理学检查。每组剩余的10只大鼠用于恢复试验,攻毒组大鼠药化饲料换成基础日粮,继续饲养15 d后检测以上项目。结果表明:急性毒性研究中,火炭母半数致死剂量(LD_(50))大于5000 mg/kg,属于实际无毒级别。长期毒性研究中,低剂量组雄性大鼠血小板压积(PCT)和血小板总数(PLT)均显著低于高剂量组(P<0.05),中、低剂量组雌鼠总胆固醇(CHO)浓度显著低于高剂量组(P<0.05),高、中、低剂量组雌鼠γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性显著低于空白对照组(P<0.05),中剂量组雌鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性显著高于空白对照组和高剂量组(P<0.05);低剂量组雄鼠的肝脏系数显著低于空白对照组(P<0.05)。以上具有显著差异的血常规、血清生化指标的数值均在文献报道的正常参考值范围内且没有剂量依赖性,各剂量组脏器无药物引起的中毒性病理变化。说明火炭母实际无毒,具有良好的临床应用安全性。

犬口腔微生物研究进展

近年来,宠物犬的口腔健康已引起了宠物主人越来越多的关注。口腔健康不仅影响犬的美观以及进食,而且影响全身健康。与肠道相似,犬口腔中寄居着一个数量庞大、种类繁多的微生物群落。各种微生物群落在口腔不同部位保持动态平衡,构成了复杂的口腔微生态系统,口腔微生物群落的平衡或失调状况与犬的口腔健康和疾病密切相关。本文从犬口腔微生物组成、影响口腔微生物组成的因素以及犬口腔微生物与口腔疾病的关系等方面进行综述,旨在促进对犬口腔微生物之间以及微生物与口腔环境之间复杂而紧密关系的理解,并为犬口腔疾病诊断和防治提供重要理论基础。