芎麻汤药效部位对硝酸甘油诱导偏头痛大鼠三叉神经颈髓复合体内CGRP-CRLR/RAMP1信号通路的影响

目的用硝酸甘油型偏头痛大鼠模型,观察芎麻汤药效部位(乙酸乙酯及正丁醇提取部位)对偏头痛发作时三叉神经颈髓复合体(TCC)内降钙素基因相关肽-降钙素受体样受体-活性修饰蛋白受体1(CGRP-CRLR/RAMP1)信号通路的干预作用。方法 36只雄性SD大鼠随机分为6组(空白对照组,模型组,芎麻汤药效部位低、中、高剂量组,琥珀酸舒马普坦对照组),每组6只。皮下注射硝酸甘油(10mg/kg)复制偏头痛模型,给药后乙醚麻醉,其中18只(每组3只)心脏灌注后取全脑剥离TCC部位,采用免疫组化染色检测CGRP、CRLR、RAMP1阳性表达;余18只直接取全脑剥离TCC部位并平分两份,一份组织采用qPCR检测CGRP、CRLR、RAMP1mRNA表达,另一份组织采用Western blot检测CGRP、CRLR、RAMP1蛋白表达。结果与空白对照组比较,偏头痛大鼠TCC内CGRP、CRLR、RAMP1阳性细胞数、mRNA及蛋白表达均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05),模型复制成功;与模型组比较,芎麻汤药效部位能降低偏头痛大鼠TCC内CGRP、CRLR、RAMP1阳性细胞数,下调CGRP、CRLR、RAMP1mRNA和蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芎麻汤药效部位能降低偏头痛大鼠TCC内CGRP-CRLR/RAMP1信号通路的活性。

芎麻汤及其提取物对硝酸甘油型偏头痛模型行为学症状及血浆中5-HT、NO的影响

目的研究芎麻汤及其提取物(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇提取物)对硝酸甘油所致偏头痛大鼠行为学症状及血浆中5-HT、NO含量的影响,初步筛选芎麻汤的有效部位。方法将80只雌雄各半SD大鼠随机分为空白组(A组)、模型空白组(B组)、石油醚提取物组(C组)、二氯甲烷提取物组(D组)、乙酸乙酯提取物组(E组)、正丁醇提取物组(F组)、芎麻汤组(G组)、布洛芬组(H组),每组10只。除A组外,其他组采用皮下注射硝酸甘油(10mg/kg)复制偏头痛大鼠模型,给予芎麻汤及其提取物后,分别观察各组大鼠挠头次数,测定各组血浆中5-HT、NO含量。结果与空白组比较,模型组挠头次数显著性增加,血浆中5-HT、NO均显著性升高(P<0.01);与模空组比较,芎麻汤组、芎麻汤的正丁醇提取物组均可明显抑制模型大鼠挠头次数(P<0.05),显著性降低模型大鼠血浆中5-HT、NO含量(P<0.01)。结论芎麻汤及其正丁醇提取物具有治疗硝酸甘油所致大鼠偏头痛的作用。

芎麻汤及其提取物对利血平低5-HT型偏头痛模型小鼠的影响

目的探讨芎麻汤及其提取物对利血平所致低5-HT型偏头痛小鼠的作用机制,初步筛选芎麻汤的有效部位。方法采用皮下注射利血平(1 mg/kg)14 d复制偏头痛模型,观察芎麻汤及其提取物对利血平偏头痛小鼠体质量、凝血时间及血浆中5-HT、NO含量的影响。结果芎麻汤、芎麻汤正丁醇提取物组能增加偏头痛小鼠的体质量,调节5-HT的过度降低;芎麻汤、芎麻汤正丁醇提取物、芎麻汤乙酸乙酯提取物组能延长偏头痛小鼠的凝血时间,提高血浆中NO的含量,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论芎麻汤及其乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物具有治疗利血平所致小鼠偏头痛的作用。

芎麻汤药效部位对硝酸甘油型偏头痛大鼠血浆及三叉神经颈髓复合体中NF-κB的影响

目的研究芎麻汤药效部位对硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠血浆中核因子κB(NF-κB)含量及三叉神经颈髓复合体(TCC)内NF-κB阳性表达的影响,初步探讨芎麻汤药效部位的作用机制。方法 36只雄性SD大鼠随机分为6组,分别为空白对照组,模型空白组,芎麻汤药效部位低、中、高剂量组,琥珀酸舒马普坦片阳性对照组;采用皮下注射硝酸甘油(10mg·kg^(-1))复制偏头痛模型,给药后取颈外静脉血采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测血浆中NF-κB的含量,心脏灌注后取大鼠TCC部位采用免疫组织化学检测NF-κB的阳性表达。结果偏头痛模型大鼠外周血中NF-κB浓度显著升高,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),模型复制成功;芎麻汤药效部位能有效降低偏头痛大鼠TCC上NF-κB免疫阳性染色光密度值,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芎麻汤药效部位能下调硝酸甘油型偏头痛大鼠TCC内NF-κB表达,从而改善偏头痛发作时三叉神经血管系统激活后引起的神经源性炎症反应,达到缓解偏头痛症状。

芎麻汤不同提取物对硝酸甘油偏头痛模型大鼠血浆NO、CGRP、5-HT、ET含量的影响

目的研究芎麻汤不同提取物对硝酸甘油偏头痛模型大鼠血浆中一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)、五羟色胺(5-HT)、内皮素(ET)含量的影响。方法 110只雌雄各半的SD大鼠随机分为11组,分别为空白组、模型组、挥发油组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯加正丁醇提取物组、萃取后剩余水液组、水提醇沉组、水提液组、布洛芬组。采用大鼠皮下注射(10mg/kg)硝酸甘油致偏头痛模型,给药后测定各组大鼠血浆中NO、CGRP、5-HT、ET的含量。结果与模型组比较,水提液组、乙酸乙酯组、乙酸乙酯加正丁醇组大鼠血浆中NO、CGRP、5-HT、ET含量降低(P<0.05);与模型组比较,水提醇沉组CGRP、5-HT含量降低(P<0.05);与模型组比较,正丁醇组NO、CGRP、5-HT含量降低(P<0.05)。结论芎麻汤各提取物对偏头痛大鼠模型有一定的治疗作用。

花榈木提取物对慢性不可预知应激小鼠认知损害的影响

认知缺陷是抑郁症的核心症状之一,已成为抑郁症治疗面临的的一大挑战.花榈木为我国南方广泛分布的一种绿色乔木,具有抗抑郁作用.然而,花榈木对认知损害的作用尚未见报道.本研究旨在探讨花榈木提取物对慢性应激引起的认知障碍的影响,通过建立小鼠慢性不可预测轻度应激(CUMS)模型,评价花榈木改善认知功能的作用.认知行为采用新物识别和Morris水迷宫测试,免疫组织化学分析海马组织中GFAP和Aβ蛋白的水平,Western Blotting分析海马组织NLRP3、TNF-α和IL-1β蛋白表达.结果显示,花榈木提取物能明显增加小鼠的物体识别辨别指数,明显减少定位航行小鼠平台潜伏期,增加平台穿越次数.花榈木提取物能显著提高海马组织中5-HT、DA、NE的水平;同时提高应激小鼠海马CA1区GFAP水平,降低Aβ沉积,减少海马区NLRP3、TNF-α和IL-1β的表达.以上数据表明,花榈木提取物能明显改善CUMS小鼠学习记忆障碍,其作用机制与上调GAFP、减少Aβ沉积、缓解炎性有关.

芎麻汤治疗偏头痛的活性筛选部位抗炎及镇痛作用的研究

目的研究芎麻汤治疗偏头痛的活性筛选部位(乙酸乙酯、正丁醇提取物)对醋酸致小鼠毛细血管通透性及热板法小鼠镇痛作用的影响。方法将160只雌雄各半小鼠按雄、雌分为抗炎Ⅰ组、镇痛Ⅱ组。抗炎Ⅰ组按体质量分为6组(空白、模型空白、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、芎麻汤、布洛芬组),采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透亢进炎症模型,尾静脉注射伊文思蓝染料,观察芎麻汤活性部位对炎症渗出的影响;镇痛Ⅱ组按基础痛阈值分为5组(空白、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、芎麻汤、布洛芬组),采用智能热板仪致痛,观察其不同时间差时的镇痛作用。结果抗炎Ⅰ组:与模空组比较,正丁醇提取物组吸光度明显降低(P<0.05)。镇痛Ⅱ组:与基础痛阈值比较,乙酸乙酯提取物组于给药后90 min时痛阈值明显提高(P<0.05);与基础痛阈值及空白组比较,正丁醇提取物组于120 min时痛阈值均显著提高(P<0.01)。结论芎麻汤治疗偏头痛的活性筛选正丁醇部位具有抗炎、镇痛作用,乙酸乙酯部位具有镇痛作用。

黄连素联合二甲双胍治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的疗效探讨

目的探讨黄连素联合二甲双胍治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的疗效。方法根据随机、双盲、对照分为两组:单用二甲双胍22例为对照组,黄连素联合二甲双胍22例为观察组,健康志愿者22例为健康对照组,随访时间16周,比较各组治疗前后的血糖、血脂及彩超脂肪肝情况。结果观察组患者治疗后,血糖(FBG)与糖化血红蛋白(HbA1c),总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG),显著低于对照组(P<0.05),脂肪肝彩超图像明显好转。而两组患者在不良反应方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄连素联合二甲双胍治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者具有满意的临床疗效和较高的安全性。

四磨汤口服液HPLC指纹图谱及其辛弗林、柚皮苷归属分析

目的:建立四磨汤口服液HPLC指纹图谱,明确辛弗林与柚皮苷在图谱中的归属。方法:采用HPLC法,建立四磨汤口服液自制样品在283 nm检测波长下的指纹图谱,以色谱峰保留时间为考察指标,应用辛弗林、柚皮苷对照品及枳壳中药对照药材,对四磨汤口服液HPLC图谱特征峰进行标定,从而获取辛弗林和柚皮苷的归属信息。结果:建立了四磨汤口服液自制样品HPLC特征指纹图谱,标示出8个共有峰,且5个是明显特征峰,各峰分离良好,其中2个明显特征峰的保留时间均与辛弗林、柚皮苷色谱吻合,也与枳壳色谱中的2个特征峰吻合。结论:该方法简便、重现性好,既有利于制定四磨汤口服液质量控制方法,也为深入四磨汤口服液药效物质基础研究和新药研发提供参考。

金苓痛风舒微丸抗炎镇痛作用的实验研究

目的探讨金苓痛风舒微丸的抗炎、镇痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验观察其抗炎作用;采用冰醋酸致痛小鼠扭体实验、小鼠尾根部加压致痛实验观察其镇痛作用。结果金苓痛风舒微丸可明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓的炎症肿胀(P<0.05);有效抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀程度(P<0.05);对醋酸致小鼠扭体反应有明显对抗作用(P<0.05);显著升高小鼠痛阈值。结论金苓痛风舒微丸具有显著的抗炎、镇痛作用。

理气疏肝胶囊对小鼠急性肝损伤动物模型及免疫功能的影响

目的研究理气疏肝胶囊对D-氨基半乳糖(D-Gal)所致小鼠急性肝损伤模型及小鼠免疫功能的影响。方法 D-氨基半乳糖(D-Gal)所致的小鼠急性肝损伤模型实验,碳粒廓清免疫功能实验,血清溶血素实验。结果理气疏肝胶囊高剂量能明显降低D-Gal所致的急性肝损伤小鼠血清AST、ALT活性,升高血清ALB活性;能提高免疫功能低下小鼠的碳粒廓清指数及诱生溶血素能力,具有一定的提高免疫作用。结论理气疏肝胶囊具有良好的保肝降酶作用,对小鼠免疫功能有明显的调节作用。

粉条儿菜总黄酮提取工艺优化及抗氧化、抗炎活性分析

为优化粉条儿菜总黄酮的提取工艺,并探究抗氧化、抗炎活性。本研究以总黄酮得率为指标,采用单因素实验考察乙醇浓度、料液比、提取时间对粉条儿菜总黄酮得率的影响,在此基础上利用Box-Behnke响应面法对提取条件进行优化;以DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基清除能力为指标评价粉条儿菜总黄酮的抗氧化活性;采用脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7建立炎症模型以评价粉条儿菜总黄酮抗炎活性。结果表明,粉条儿菜总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度40%、料液比1:125 g/mL、提取时间30 min,得到粉条儿菜总黄酮平均得率为1.34%;粉条儿菜总黄酮对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基的清除能力与其质量浓度呈正相关,IC50值分别为5.46、 21.69和56.01μg/mL;粉条儿菜总黄酮在12.5~100μg/mL范围内能明显抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的分泌,其IC50为6.95μg/mL。该提取工艺稳定、可靠,可用于粉条儿菜总黄酮的提取,且粉条儿菜总黄酮具有一定的抗氧化、抗炎活性。

补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠神经内分泌功能失调的作用

目的研究补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠神经内分泌功能失调的治疗作用及其作用机制。方法通过手术摘除雌性SD大鼠双侧卵巢复制更年期综合征模型。模型成功后,将其随机分为空白组,假手术组,模型组,戊酸雌二醇片组,坤泰胶囊组,补肾疗更浸膏低、中、高剂量组。末次给药24 h后,腹主动脉取血ELISA法测定血清雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素(GnR H)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、睾酮(T)水平;取下丘脑测定多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平;取双侧子宫称湿重计算脏器指数;于10%甲醛溶液中固定,观察其病理学改变。结果补肾疗更浸膏可有效升高模型大鼠血清E2(P<0.05,P<0.01)水平,降低GnR H(P<0.05,P<0.01)、LH(P<0.05,P<0.01)、FSH(P<0.05)、T(P<0.05,P<0.01)水平,有效降低下丘脑单胺类神经递质DA(P<0.05,P<0.01)、NE(P<0.05,P<0.01)、5-HT(P<0.05,P<0.01)、5-HIAA(P<0.05,P<0.01)水平,并可升高模型大鼠子宫系数(P<0.05),增加子宫内膜厚度(P<0.05)。结论补肾疗更浸膏可通过调节血液性激素与下丘脑单胺类神经递质水平,增强子宫功能,改善去势模型大鼠下丘脑-垂体-内分泌轴与植物神经功能的紊乱状态,从而有效稳定机体内环境,改善更年期神经内分泌系统功能,缓解更年期症状。

补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退的实验研究

目的 研究补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退作用及其作用机制。方法 选取12∽13月龄自然衰老小鼠60只,随机分为6组,每组10只,即老年空白组,戊酸雌二醇片组（0.00026 g·kg-1）,坤泰胶囊组（1.56g·kg-1）,补肾疗更浸膏低、中、高剂量组（6.5,13.0,26.0 g·kg-1）,另取3月龄小鼠作为青年对照组。末次给药24 h后,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清雌二醇（E2）、促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、孕酮（P）含量;取小鼠子宫、卵巢,称质量并计算脏器指数;10%甲醇固定,观察子宫、卵巢病理学改变;采用DNA末端原位标记法（TUNEL）测定小鼠卵巢颗粒细胞凋亡数。结果 补肾疗更浸膏可升高老年小鼠血清E2、P含量（P〈0.05,P〈0.01）,降低FSH、LH含量（P〈0.01）,提高老年子宫、卵巢系数（P〈0.05,P〈0.01）,增加子宫内膜厚度（P〈0.05,P〈0.01）,并可明显增加老年小鼠卵巢各级卵泡数（P〈0.05,P〈0.01）,降低卵巢颗粒细胞凋亡数（P〈0.01）,同时可不同程度改善老年小鼠病变子宫内膜组织结构。结论 补肾疗更浸膏能有效延缓老年雌性小鼠卵巢功能衰退进程,改善其生殖系统功能,其作用机制与调节血液性激素水平,改善病变子宫、卵巢超微结构,抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关。

基于网络药理学-分子对接技术研究柴胡治疗卒中后抑郁的药效物质基础及作用机制

目的:通过网络药理学和分子对接技术,探讨柴胡治疗卒中后抑郁(Post-stroke Depression,PSD)的潜在活性成分和可能的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和蛋白质序列数据库(Uniprot)筛选出柴胡主要活性成分及其靶点基因,并将目标蛋白名称标准化,通过GeneCards、OMIM数据库获取PSD靶点基因;对两者靶点取交集后采用STRING数据库构建柴胡治疗PSD的潜在靶点的蛋白质-蛋白质相互作用网络图;利用Cytoscape-v3.9.1软件进行核心靶点筛选;利用DAVID数据库对潜在靶点进行基因本体(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。最后,利用PyMol软件和AutoDockTools-1.5.7软件对柴胡主要活性成分与核心靶点使用分子对接技术绘制相应的分子对接图。结果:共筛选得到柴胡活性成分17个,去重后对应靶点175个,疾病靶点852个,经Venny数据库预测到疾病-药物交集靶点45个。GO功能富集分析结果显示共获得323个GO功能注释,KEGG通路富集分析结果显示获得106条信号通路。分子对接结果显示,牵牛花色素与糖原合成酶激酶3β(Glycogen Synthase Kinase 3 Beta,GSK3B),异鼠李素与雌激素受体1(Estrogen Receptor 1,ESR1)、GSK3B,山柰酚与半胱氨酸蛋白酶(Caspase 3,CASP3),槲皮素与白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、基质金属蛋白酶9(MatrixmetalloProteinase 9,MMP9)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3,IGFBP3)、CASP9均结合稳定。结论:柴胡活性成分牵牛花色素、异鼠李素、山柰酚、槲皮素,可能通过脂质与动脉粥样硬化、流体剪切应力与动脉粥样硬化、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)等信号通路作用于GSK3B、ESR1、CASP3、IL-10、MMP9、IGFBP3、CASP9等核心靶点,发挥治疗PSD的疗效,初步预测了柴胡对PSD的作用机制。

芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠脑组织中5-HT、CGRP的影响

目的:研究芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法:将50只雄性自发性高血压(SHR)大鼠按血压随机分为模型对照组、正天丸阳性对照组(1.6 g/kg)和芎麻汤提取物低、中、高剂量组(4.5、9.0、18.0 g/kg,以生药量计),每组10只;并另取10只正常大鼠作为正常对照组。给药组大鼠分别灌胃相应药物,每天1次,连续28 d;正常对照组和模型对照组大鼠灌胃等体积生理盐水。末次给药后,除正常对照组外,其余各组大鼠均采用电刺激三叉神经节(10 min)法复制肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型,并于造模后再维持给药1次。30 min后,观察大鼠一般行为学及舌质情况,测定大鼠血压,采用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织中5-HT、CGRP含量,并采用Western blot法测定大鼠脑组织中CGRP蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现眼结膜颜色加深变红、过度理毛、甩头等行为学变化,大部分大鼠舌质紫暗,并且其收缩压和脑组织中CGRP含量及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),脑组织中5-HT含量显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,各给药组大鼠的上述行为学变化及舌质变化均明显改善;正天丸阳性对照组和芎麻汤提取物高剂量组大鼠收缩压、脑组织中CGRP含量及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);正天丸阳性对照组和芎麻汤提取物中、高剂量组大鼠脑组织中5-HT含量显著升高(P<0.05)。结论:芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠有明显的保护作用,其机制可能与降低脑组织中CGRP含量、升高脑组织中5-HT含量有关。

芎麻汤有效部位防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制

目的探究芎麻汤有效部位防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制。方法70只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组(盐酸氟桂利嗪胶囊0.9 mg/kg)及芎麻汤有效部位低、高剂量组(乙酸乙酯提取物0.87、3.46 g/kg,正丁醇提取物1.80、7.20 g/kg)。除正常组外,其余各组大鼠灌胃附子汤(2 g/kg),每天1次,连续4周,复制肝阳上亢证模型;造模第15天,各给药组同时灌胃相应药物,每天1次,连续2周;造模第29天,电刺激大鼠三叉神经节复制肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型后,按前述方法再维持给药1次。观察大鼠宏观体征及行为表现;取大鼠三叉神经颈髓复合体(TCC),分别采用免疫组织化学法、RT-qPCR法、Western blot法检测瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、降钙素受体样受体(CRLR)、活性修饰蛋白受体1(RAMP1)的阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量。结果模型组大鼠出现肝阳上亢兼瘀血型偏头痛相关的宏观体征及行为表现。末次给药30 min后,芎麻汤有效部位各组大鼠以上情况均明显改善。与正常组相比,模型组大鼠TCC内TRPV1、CGRP、CRLR、RAMP1阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,芎麻汤有效部位各组大鼠TCC内上述指标大部分显著降低(P<0.05)。结论芎麻汤防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制可能与抑制TCC内TRPV1-CGRP/CGRP受体信号通路的活性有关。

瓜子金提取物对D-半乳糖痴呆小鼠的作用及机制研究

目的研究瓜子金提取物对D-半乳糖痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用,初步探讨瓜子金提取物的作用机制。方法雄性ICR小鼠50只,按体重随机分为正常对照组,模型对照组,盐酸多奈哌齐片组(3.0 mg·kg-1),瓜子金提取物低、高(25、100 mg·kg-1)剂量组。除正常对照组外,其余小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(200 mg·kg-1),每天1次,连续6周(42 d),正常对照组皮下注射等容积生理盐水。各组分别灌胃给予相应药液,连续给药6周,末次给药后进行水迷宫和新物体识别行为学实验,实验结束时取小鼠海马组织采用ELISA法检测海马组织脑源生长因子(BDNF)、人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)的含量。结果与正常对照组比较,模型对照组定位航行D1-3潜伏期、D2-3总路程明显增加,D2-3速度、经过平台次数明显减少(P<0.05,P<0.01);小鼠辨别指数明显降低(P<0.05);小鼠BDNF含量显著降低,BACE1含量显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,瓜子金提取物低剂量(25 mg·kg-1)能明显减少定位航行D3潜伏期(P<0.05)。瓜子金提取物高剂量(100 mg·kg-1)可明显减少定位航行D2-3潜伏期、D3总路程,明显增加D2速度、经过平台次数(P<0.05);能明显升高小鼠新物体识别辨别指数(P<0.05);能明显升高小鼠海马组织BDNF含量,降低BACE1含量(P<0.05)。结论瓜子金提取物对D-半乳糖痴呆模型小鼠学习记忆能力具有明显的改善作用,其机制可能与BDNF、BACE1等水平变化有关。

肝阳上亢兼瘀血型偏头痛病证结合大鼠模型建立的研究

目的初步构建肝阳上亢兼瘀血型偏头痛病证结合大鼠模型,并以正天丸反证该病证结合模型建立的稳定性。方法雄性自发性高血压(SHR)大鼠20只,按血压随机分为电刺激模型组,电刺激正天丸反证药物组,每组10只;另取雄性SD大鼠10只作为正常对照组。电刺激正天丸反证药物组大鼠灌胃正天丸(1.6 g·kg^(-1)),每天1次,连续4周(28 d);正常对照组、电刺激模型组大鼠灌胃配药用0.9%NaCl溶液。末次给药后,除正常对照组外,余2组大鼠均采用电刺激三叉神经节法(10 min)建立肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型,并于模型复制后再维持给药1次。末次给药后观察大鼠宏观表征和行为学,并测定大鼠血压;结束后取大鼠脑组织采用Elisa法检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量,采用Western blot法检测脑组织中CGRP蛋白表达,用以评价肝阳上亢兼瘀血型偏头痛病证结合大鼠模型成立与否。结果与正常对照组相比,电刺激模型组大鼠出现双眼结膜颜色加深变红,易激惹,频繁打斗,提尾时尖叫、惊跳甚至咬人,舌质紫暗等宏观表征变化,及节律性抖动头部、过度理毛、甩头、扭头等行为学变化;大鼠收缩压显著升高(P<0.01);大鼠脑组织5-HT含量显著降低,CGRP含量显著升高(P<0.01);大鼠脑组织CGRP蛋白表达明显升高(P<0.05)。与电刺激模型组相比,反证药物正天丸可明显改善大鼠上述宏观表征和行为学变化;明显降低大鼠收缩压(P<0.05);明显升高大鼠脑组织5-HT含量,降低CGRP含量(P<0.05);明显降低脑组织CGRP蛋白表达(P<0.05)。结论电刺激SHR大鼠三叉神经节,可建立肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠病证结合模型。

白芍络石方提高MAP2表达保护脑梗死后痉挛性瘫痪大鼠受损神经元

目的观察白芍络石方对脑梗死后痉孪性瘫痪(Post-stroke spasticity,PSS)梗死灶周围脑组织微管相关蛋白2(Microtubule-associated protein2,MAP2)表达的影响。方法采用栓线法建立脑梗死后癌孪性濟痪模型,予以白芍络石方进行干预,尼氏染色观察神经元尼氏小体,免疫组化观察不同时间点MAP2水平。结果白芍络石方可以减缓梗死灶周围神经元尼氏小体的下降程度,提高脑梗死灶周围各时间点MAP2的水平。结论白芍络石方保护PSS梗死灶周围脑组织神经元与上调MAP2表达相关。