缝隙连接蛋白43经典与非经典作用在疾病治疗中的潜在价值

背景:缝隙连接蛋白43在维持组织代谢稳态平衡中发挥着重要作用,传统观点认为它参与了缝隙连接过程,为细胞与细胞之间建立直接的物质信号交换通道奠定结构基础。而近年来研究对于其独特的半通道作用提出了新的看法,并发现了其亚细胞定位、自身片段等对于细胞生理活动及病理过程的重要意义。目的:综述数据库中相关文献,系统性总结缝隙连接蛋白43分子特征及在多种细胞表达的研究进展,重点阐述通道依赖性与非通道依赖性缝隙连接蛋白43的生理与病理作用,并探讨其在疾病治疗中的潜在价值。方法:分别设置“gap junction,connexin 43(Cx43),hemichannel,channel-dependent Cx43,channel-independent Cx43,extracellular vesicles(EVs),mitochondria,GJA1-20k”为英文关键词,以“缝隙连接,缝隙连接蛋白43,半通道,通道依赖性Cx43,非通道依赖性Cx43,线粒体,细胞外囊泡,GJA1-20k”为中文关键词,分别在PubMed数据库及中国知网数据库进行文献检索,最终共入选81篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)缝隙连接蛋白43的经典作用即构成缝隙连接通道,通道依赖性缝隙连接蛋白43主要可通过直接构成缝隙连接通道参与组织器官的生理或病理过程,应充分关注其结构和功能的完整性,而黏附是缝隙连接的重要特性,与屏障障碍类疾病密切相关。(2)缝隙连接蛋白43的非经典作用即非缝隙连接通道依赖性作用,缝隙连接蛋白43六聚体目前被发现定位于质膜、线粒体内膜和细胞外囊泡表面等结构,参与炎性疾病的正向促炎机制、线粒体功能代谢和细胞外囊泡的靶向摄取等,选择性截短片段则参与全长连接蛋白43靶向转运至胞内各结构域过程,并且通过促使线粒体周围肌动蛋白聚合,调控线粒体稳态。(3)以上两种作用为开发靶向治疗药物及基于组织工程技术的治疗手段中种子细胞转化机制等问题的解决提供了新思路,但现存的一些原始研究常不能全面考虑不同形式缝隙连接蛋白43的相互作用,从而混杂地描述了其总体特征,使得研究结果产生偏差。(4)未来研究需要系统地构架不同形式存在的缝隙连接蛋白43的生理特性及在各疾病中的潜在机制,为缝隙连接蛋白43完整性机制探索及多疾病的诊断和治疗提供参考依据。

复合添加剂对氧化锆增韧氧化铝牙用陶瓷半透性的影响

背景：在对氧化锆增韧氧化铝牙用陶瓷的光学特性研究中,除去主成分结构组成的影响外,复合添加剂含量及其比例是重要的影响因素之一。目的：观察复合添加剂对氧化锆增韧氧化铝牙用陶瓷半透性的影响,筛选合适的添加剂含量。设计、时间及地点：对比观察、多角度评估,于2006-01/2007-05在兰州大学物理科学与技术学院完成。材料：ZrO2,粒径70~140nm,Y2O3含质量分数为0.054,四方相占80%,单斜相占20%,为淄博中舜集团产品;TiO2,SiO2,La2O3,MgO复合添加剂质量比为1∶3∶2∶1。方法：按质量比8：2称取Al2O3,ZrO2,分别加入质量分数为0,0.01,0.02,0.04,0.07,0.1,0.13的复合添加剂,加入醇-水液（5∶3）制成的浆液。采用离心渗透注浆成型法制备坯体,常压烧结,制备牙用氧化锆增韧氧化铝陶瓷样品。主要观察指标：用反射率仪测量样品的表面光反射率并计算CR值。扫描电镜观察样品的显微结构,X-射线衍射分析样品物相组成。结果：①相对密度与CR值：未掺添加剂样品的相对密度为91.72%,含质量分数为0.01,0.02添加剂样品相对密度分别为91.15%、92.75%。对于掺添加剂的样品,随添加剂含量的增加,相对密度呈下降趋势;含质量分数为0.01,0.02样品组CR值分别为0.868和0.881,与相对密度成反比例关系,差异有显著性意义（F=20.224,P〈0.05）。②显微结构：未掺添加剂的样品组,晶粒大小不一致,有较多气孔存在。掺添加剂样品组随着添加剂的增加,晶粒尺寸增大,气孔增加,并且晶界处玻璃相生成增多。③X-射线衍射：随着添加剂含量的增加,尖晶石（MgAl2O4）和硅酸镁（Mg2SiO4）的生成含量有增多趋势。结论：添加剂含质量分数为0.01的样品半透明度最高。过多的添加剂不仅使气孔生成增多,而且会造成新相析出,降低半透明性。

牙体玻璃离子充填材料边缘微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜与金相显微镜比较研究

目的:在两种不同显微镜下定量观测人离体牙充填玻璃离子水门汀后边缘微渗漏的情况,并对两种方法进行比较。方法:选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填玻璃离子水门汀,37℃水浴条件下分别置于0.1%罗丹明B荧光染料或1%甲基蓝溶液浸染,激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜下分别测量染液渗入深度,定量评价微渗漏程度,对两种方法的检测结果进行比较。结果:两种方法均能检测到染液渗漏,在分别充填传统型玻璃离子水门汀和树脂改性玻璃离子水门汀的情况下,金相显微镜下测得的渗漏值分别为(33.18±5.59)μm和(32.30±3.76)μm,与激光扫描共聚焦显微镜下所得渗漏深度(22.57±2.59)μm及(21.93±1.51)μm相比,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜均可用于牙体充填材料边缘微渗漏的观测,但综合效果前者更优。

低温液相烧结纳米氧化锆增韧口腔全瓷材料的研究

目的探讨复合添加剂对烧结纳米氧化锆增韧氧化铝陶瓷烧结温度和显微结构的影响。方法将粉、液按一定比例混合,采用湿法球磨制备混合均匀的浆液,将浆液浇注在石膏模具中,置于离心机中高速离心成型。坯体干燥后,在1450℃下常压空气中烧结8h。试样打磨抛光后,测试其物理性能。扫描电镜下观察其显微结构。结果未加复合添加剂的对照组不能烧结;添加组的烧结体能够致密烧结。当复合添加剂为7%时,烧结体的三点抗弯曲强度为(433±19)MPa,断裂韧性达(7.50±0.56)MPa·m1/2。结论复合添加剂在烧结过程中产生液相,可降低烧结温度,诱导生成长柱状氧化铝晶型。

PGS/PLLA静电纺丝复合纳米纤维支架的性能研究

基于聚癸二酸丙三醇酯(PGS)优异的亲水性能,左旋聚乳酸(PLLA)良好的力学性能,以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂,将PGS与PLLA按质量比1∶3、1∶1、3∶1配制成25%的纺丝液,采用静电纺丝技术制备了不同比例的新型三维纳米支架。通过扫描电镜、傅里叶红外光谱仪(FT-IR)、X射线衍射仪、热重分析仪、Instron微力试验机、接触角测量仪对共纺膜片进行表征。结果表明共纺膜片分布均匀,交织成网状;共纺膜片中加入PLLA对PGS聚合物结构几乎没有影响;随着PGS含量增加,结晶度呈增强趋势;伴随PLLA质量增加,热稳定性也趋于稳定;加入PGS,PGS/PLLA共纺膜片获得较好的亲水性,支架力学性能也得到改善;PGS/PLLA三维支架和山羊颞下颌关节盘细胞共培养,结果表明关节盘细胞在不同比例支架上粘附、铺展均良好,且在PGS/PLLA(1/3)膜片上生长较好。

放射性生物微球技术在犬牙髓血流量测量中的应用

本研究采用放射性生物微球技术以99mTC标记赡蜍红细胞生物微球为示踪剂测量了犬正常牙髓组织的血流量。结果表明：切牙、尖牙、第一磨牙牙髓血流量的均值分别为0.66，0.54和0.60（m1／ming），三者间差异无显著性；牙髓血流量上颌稍高于下颌，这种差异只在切牙具有显著性意义。本研究证实99mTc标记的赡蜍红细胞生物微球可用于牙髓血流量的放射性微球技术测定。

三类常用牙体充填材料界面微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜观测

目的观察银汞合金、复合树脂和玻璃离子三类常用牙体充填材料在体外充填后的微渗漏情况,比较材料的边缘封闭性。方法选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填材料,37℃水浴条件下0.1%罗丹明B荧光染料浸泡,激光扫描共聚焦显微镜测量荧光剂渗入深度,定量评价微渗漏程度。结果三类材料与牙体界面均有不同程度的荧光染料渗入,渗漏程度由小到大依次为玻璃离子(23.63±3.06μm)、银汞合金(31.68±10.97μm)、复合树脂(32.86±11.67μm)。玻璃离子与复合树脂相比有显著差异,在亚组中,使用玻璃离子预处理与银汞直接充填有显著差异,自酸蚀与全酸蚀粘结树脂也有显著统计学意义。其余各组比较无显著差异。结论三类材料中玻璃离子与牙体界面的微渗漏最小;使用玻璃离子预处理后获得的边缘封闭性优于银汞直接充填;全酸蚀复合树脂与牙体的密合性较自酸蚀更佳。

Obtura Ⅱ热牙胶系统根管充填的微渗漏研究

目的:比较ObturaⅡ热牙胶系统在3种加热温度设定下充填根管后根尖封闭效果的差异,并与冷牙胶侧压充填技术的密封性进行比较。方法:28个离体单根管恒牙,根管预备后随机均分为4组:A组用传统的泠牙胶侧压充填法进行充填,B、C、D组用ObturaⅡ系统将牙胶分别加热至160℃、180℃、200℃进行充填。使用染料渗入法检测根尖微渗漏的发生情况。结果:ObturaⅡ热牙胶系统在160℃、180℃、200℃的温度设定下充填后的微渗漏与冷牙胶侧压法相比差异有统计学意义(P<0.05),但温度设定不同的热牙胶充填组间的微渗漏差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ObturaⅡ热牙胶系统加热温度设定在160℃、180℃、200℃进行充填时根尖封闭能力无显著差异,但其根管封闭能力明显优于冷牙胶侧压充填技术。

颞下颌关节盘的结构表征与组织工程研究

以关节盘变薄、透明样变和穿孔等不可逆性病变为特征的严重的颞下颌关节功能紊乱约占整个颞下颌关节疾病的5%～10%,常因疼痛和功能障碍严重影响患者的生活质量,是目前口腔医学界面临的疑难问题之一。近年来,组织工程技术的迅速发展提示,工程化颞下颌关节盘可能为治疗严重的颞下颌关节疾病提供一个新的途径。下面就颞下颌关节盘的结构与生物力学表征、关节盘组织工程细胞源、支架与接种技术以及生物和生物力学环境与前景等问题作一综述。

应力水平对猪颞下颌关节盘生物力学特性的影响

研究颞下颌关节盘对压缩载荷的反应性 ,了解关节盘的粘弹性和渗透性质 ,为分析关节盘的应力缓冲机制提供实验依据。采用围限压缩力学实验方法 ,对三种不同应力水平 (0 .0 7、0 .12、0 .30MPa)下 8个猪颞颌关节盘的蠕变效应进行研究。结果表明 :在 0 .0 7MPa应力水平 ,关节盘前、中、后带承受压缩载荷 2s时的压缩刚度分别为 4.48、3.93、6 .31MPa,盘后带压缩刚度最大 ;渗透系数K值分别为 0 .2 72× 10 12 、0 .30× 10 12 、0 .0 42× 10 12 m4 /NS ,后带值明显低于前带。在 0 .30MPa水平 ,前、中、后带刚度分别增至为 14.0 7、16 .6 8、14.0 0MPa,渗透系数分别减小为0 .0 17× 10 12 、0 .0 12× 10 12 、0 .0 0 5× 10 12 m4 /NS ,各带之间无明显差异。颞颌关节盘是具有粘弹性的生物二相体 ,有一定抗压强度和较低的渗透性 ,应力水平增加 ,整体压缩刚度增大而渗透系数减小。提示对压缩刚度和渗透性的调节可能是关节盘组织内部承受并缓冲应力的两种方式。

山羊颞下颌关节盘细胞的表面形貌和力学特性研究

目的采用JPK Nano Wizard 3型生物原子力显微镜(AFM)对两种类型的山羊颞下颌关节盘细胞(软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞)的表面形貌和生物力学特性进行研究,为颞下颌关节盘组织工程研究中种子细胞的选择提供依据。方法单层培养原代山羊颞下颌关节盘细胞,生理状态下用AFM接触模式扫描两种类型的关节盘细胞,获得形貌图。随机选取20个软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞,扫描获得细胞核区和细胞质区的力-位移曲线,通过JPK Data Processing软件分析两种细胞的杨氏模量和黏附力。结果 AFM下,三角形的软骨细胞样细胞的细胞核占据其大部分体积,细胞骨架结构呈树枝状排列,边缘伸出许多伪足;长梭形的成纤维细胞样细胞的细胞核明显高于细胞质区,骨架结构规则排列,边缘光滑,极少有伪足伸出;两种细胞的表面粗糙度没有明显差异。分析力-位移曲线得出:两种类型细胞的杨氏模量在细胞核区没有明显差异(P>0.05),在细胞质区略有差异(P=0.047);但两种细胞的黏附力没有明显差异(P>0.05)。结论两种类型的关节盘细胞在形貌上虽有较大的差别,但在生物力学特性上的差异并不明显。

实验性牙髓炎模型的建立

目的 建立稳定的犬实验性急、慢性牙髓炎动物模型以便进一步探讨牙髓炎的病理、生理机制。方法 采用喷水钻磨穿髓法和不喷水钻磨穿髓法在犬牙上分别建立急、慢性实验性牙髓炎模型并行常规组织学观察。结果 穿髓 12h受检组呈急性牙髓炎改变 ,以不喷水钻磨侧尤为典型 ;穿髓 14d受检组呈慢性炎症改变 ,以喷水钻磨侧更为典型。结论 不喷水钻磨穿髓法可建立稳定的犬实验性急性牙髓炎模型 ,喷水钻磨穿髓法可建立稳定的犬实验性慢性牙髓炎模型。

光学技术在牙髓活力测试中的应用研究

随着牙髓活力测试新概念的建立,以牙髓的血流测试反映牙髓活力状态的研究日益兴盛,各种方法应运而生,其中以光学测试技术最为突出。本文着重介绍了4种较为常见的光学测试方法及其研究动态。

犬实验性牙髓炎的血流定量研究

目的 :为进一步认识牙髓炎的微循环变化机制而检测犬实验性急、慢性牙髓炎时的牙髓血流量 (PBF)。方法 :采用放射性生物微球技术 ,测量并计算犬牙髓组织的PBF值。结果 :①在急性牙髓炎期 ,切牙、尖牙和第一磨牙PBF均值分别为 1.15、1.0 9和 1.13(mL/min·g-1) ,三者间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,各牙位急性期的PBF值明显高于正常及慢性牙髓炎 (P <0 .0 1)。②在慢性牙髓炎期 ,切牙、尖牙和第一磨牙的PBF均值分别为 0 .5 4、0 .79和 0 .85 (mL/min·g-1) ,此时切牙的PBF值明显小于尖牙及第一磨牙 (P <0 .0 1) ,后两者间差别无显著性 (P >0 .0 5 ) ,同正常值比较尖牙与磨牙的PBF值较高 (P <0 .0 1) ,而切牙明显低于正常值(P <0 .0 5 )。结论 :牙髓在急、慢性炎症期血流量较正常时明显升高 ,急性期上升幅度显著大于慢性期 ,而慢性牙髓炎切牙的血流量却低于正常值 ,这可能与牙髓组织发生渐进性坏死及血流测量时机的选择有关。

牙用亚微米氧化锆增韧氧化铝陶瓷的摩擦磨损性能研究

考察了亚微米氧化锆增韧氧化铝陶瓷(Z2S)在人工唾液润滑下的摩擦磨损行为,并与目前口腔临床常用烤瓷材料V ita陶瓷和Dentsp ly陶瓷进行对比.结果表明:与S i3N4陶瓷配副时,Z2S的摩擦磨损性能优于V ita陶瓷和Dentsp ly陶瓷,其磨损率比V ita陶瓷和Dentsp ly陶瓷的磨损率低2个数量级,Z2S的主要磨损机制为轻微的磨粒磨损和塑性变形,并受ZrO2的摩擦诱导相变影响;与天然牙釉质配副时,Z2S不仅自身磨损低而且对天然牙釉质的磨损较小,天然牙釉质的磨损表面保持了较好的初始形态,其与天然牙釉质的配对性优于Dentsp ly陶瓷与天然牙釉质的配对性,是1种具有潜在应用前景的牙科修复材料.

重度磨耗患者髁道运动学初步评价

评价重度磨耗患者后方髁道运动学特征 ,探讨髁状突运动与牙合重建的关系。方法 :运用Pantronic髁状突运动描记系统和D5ADenar全调节式咬合架 ,对 15例中老年重度磨耗患者后方髁道决定因素对牙合运动的影响 ,以及对 5例已完成咬合重建的重度磨耗患者髁道运动学特征进行初步评价。结果 :15例重度磨耗患者平均髁间距离为 ( 60 .72± 4.40 )mm ,迅即侧移量 (ISS) 1.3 5mm (右 )和 1.2 4mm (左 ) ,渐进侧移量 (PSS)为14 .65°(右 )与 17.11°(左 ) ,前伸髁导斜度 (PRO)为 2 3 .45°(右 )与 2 6.85°(左 ) ,非工作侧髁道值 (ORB)为 2 6.5 0° ,前伸髁导斜度与非工作侧髁道之间极相关 ,存在较小的Fisher角。结论 :咬合重建主要影响侧移量和Pantronic重复运动指数 (PRI)的大小 ,反映出下颌侧方边缘运动限制所恢复的程度。但牙合重建对非工作侧髁道没有明显的影响 ,运动道的变化并不能预测治疗的效果。

MTA在牙体牙髓病治疗中的应用研究

1993年Lee等首次报道了一种用于牙髓病治疗的新材料——矿物三氧化物凝聚体（mineral trioxide aggregate,MTA）,因其具有良好的组织相容性、持久的封闭性及诱导组织再生等能力而备受关注。MTA由多种亲水氧化矿物质混合形成,主要成分为硅酸三钙、硅酸二钙、铝酸三钙及铝酸四钙等,MTA使用时以其粉剂和蒸馏水按一定比例调和,

纳米氧化锆的含量对纳米氧化锆增韧氧化铝陶瓷力学性能和显微结构的影响

目的探讨纳米氧化锆的含量对纳米氧化锆增韧氧化铝陶瓷力学性能和显微结构的影响。方法将纳米氧化锆、氧化铝、复合添加剂等粉料与一定比例的醇—水混合后,球磨制备浆液,采用离心渗透注浆法成坯,在1450℃下烧结8h。烧结体打磨抛光后,测试其物理性能和力学性能。通过扫描电镜观察烧结体表面和断面的微观结构。结果不同实验组的三点抗弯曲强度、维氏硬度的差异均有统计学意义(P<0.01);20%氧化锆组的断裂韧性与另外两组差异有统计学意义(P<0.05),10%氧化锆组和30%氧化锆组间的断裂韧性差异没有统计学意义(P<0.05)。当纳米氧化锆含量为20%时,其力学性能显著高于10%及30%组,三点抗弯曲强度为(433±19)MPa,断裂韧性达(7.50±0.56)MPa·m1/2。显微结构观察到内晶—晶界复合型结构、晶间及穿晶断裂。结论内晶—晶界复合型结构具有强烈的增韧效果,可提高陶瓷的强度和韧性。纳米氧化锆含量为20%时,具有较好的增韧效果,适合口腔修复材料。

盐酸米诺环素牙周条治疗牙周炎的临床研究

目的 :评价牙周局部应用盐酸米诺环素牙周条辅助治疗牙周炎的临床效果。方法 :选择成人慢性牙周炎患者 42例 ,左右侧对应牙 ,牙周袋深度≥ 4mm ,且探诊出血的牙位点 2 5 2个 ,采用随机单盲对照法 ,分为实验组和对照组 ,基础治疗后实验组牙周袋内放药 ,每周 1次 ,共 3次 ,对照组不放药。于基线、治疗后第 6周、第 12周时 ,观察菌斑指数 (PLI)、牙周袋深度 (PD)、探诊后出血 (BOP)等指标。结果 :治疗后第 6周和第 12周时 ,两组各观察指标比基线时有明显的改善 (P <0 .0 1)。两次复查时 ,实验组改善均优于对照组 ,两组相比具有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :局部应用盐酸米诺环素牙周条治疗牙周炎 ,能够有效地改善临床症状 ,获得较好的临床效果。

山羊骨髓间充质干细胞向纤维软骨分化的形态学改变

背景:前期初步研究发现,碱性成纤维细胞生长因子可诱导骨髓间充质干细胞向颞下颌关节盘细胞方向分化,且碱性成纤维细胞生长因子10μg/L诱导组合成胶原量明显高于5μg/L诱导组。目的:观察经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子诱导后的骨髓间充质干细胞的超微结构变化。方法:原代分离培养山羊骨髓间充质干细胞,选P3,P4细胞,用5,10μg/L碱性成纤维细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞,以未加碱性成纤维细胞生长因子培养的骨髓间充质干细胞做对照。倒置相差显微镜观察细胞生长状况,用第7,14,21天的细胞爬片行蕃红O、天狼猩红和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,并观察第21天细胞的超微结构。结果与结论:经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子诱导后,骨髓间充质干细胞可向颞下颌关节盘成纤维细胞样细胞形态分化,10μg/L组细胞更像关节盘成纤维细胞样细胞。提示骨髓间充质干细胞有向颞下颌关节盘细胞方向分化的形态学基础。