广东省和海南省象耳豆根结线虫的鉴定

运用线虫比较形态学、结合同工酶、mtDNA-PCR、rDNA-IGS-PCR技术,对采自中国广东和海南2个省的根结线虫进行鉴定。在海南省定安的木豆(Cajanus cajan)、海南省海口的木豆和番石榴(Psidium guajava)、广东省番禺的辣椒(Capsicum annuum)和南瓜(Cucurbita moschata)及广东省遂溪的豇豆(Vigna sinensis)上发现象有耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)。这是首次在海南省外发现象耳豆根结线虫,同时还发现该线虫的2个新寄主,即木豆和南瓜。

旱稻孢囊线虫在广西的发生及其rDNA-ITS异质性分析

2011年,从广西龙胜梯田的水稻根系和稻田土壤中分离到一种孢囊线虫。该线虫形态特征与已报道的旱稻孢囊线虫（Heterodera elachista）相符,其rDNA-ITS序列与GenBank中旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列相似性为97.7%~99.3%。rDNA-ITS分子发育树表明该线虫与旱稻孢囊线虫以100%的置信度及较小的遗传距离形成一个单系,据此将该线虫鉴定为旱稻孢囊线虫。进一步对本研究获得的10条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS区序列及Tanha Maafi等报道的1条旱稻孢囊线虫rDNA-ITS序列（AF498391）的酶切位点进行分析,结果发现AluⅠ、AvaⅠ、MvaⅠ和RsaⅠ4个内切酶的酶切位点在11条序列中完全一致,而Bsh1236Ⅰ、BsuRⅠ和CfoⅠ3种酶的酶切位点存在变异,其中Bsh1236Ⅰ和BsuRⅠ有2种变异型,CfoⅠ则有3种变异型,表明旱稻孢囊线虫的rDNA-ITS序列存在DNA异质性。

高尔夫果岭草坪草上禾本科根结线虫的鉴定

2009年,广东省阳江和珠海的2个高尔夫球场果岭草坪出现大面积的斑块状枯死,调查发现这些果岭草的根部具有根结,同时从土壤当中分离到大量的根结线虫2龄幼虫。运用线虫比较形态学,结合同工酶及分子生物学技术对采自这2个高尔夫球场的根结线虫进行鉴定,确定该根结线虫为禾本科根结线虫(Meloidogyne graminis)。禾本科根结线虫病是美国高尔夫球场的一个重要草坪草病害,在我国则是首次发现。

中国2种伞滑刃属线虫记述(线虫门:寄生滑刃科)

运用线虫比较形态学和rDNA-ITS-RFLP及rDNA-ITS序列分析技术,对采自广东省的伞滑刃线虫进行鉴定。在广东番禺小叶榕(Ficus microcarpa)的栽培介质中和东莞木包装上分别发现了食菌伞滑刃线虫(Bursaphelenchus fungivorus)和豆伞滑刃线虫(B.doui),其中食菌伞滑刃线虫是中国的新记录种,豆伞滑刃线虫是中国大陆的新记录种。

淡紫拟青霉MD1几丁质酶活性测定

应用胶体几丁质平板透明圈法和DNS法测定了淡紫拟青霉MD1的几丁质酶活性,首次获得淡紫拟青霉在胶体几丁质平板上的透明圈,DNS法测定MD1几丁质酶活性结果表明,粗酶液无论是否有几丁质诱导,MD1菌株的几丁质酶活力均在第7 d最高,而且几丁质诱导的粗酶液酶活明显比同期未经几丁质诱导的粗酶液酶活高。

植物线虫分子鉴定研究进展

植物线虫可危害农作物和林木,对它们的准确鉴定是防治植物线虫病害的基础。由于植物线虫很小,而且在形态上种间常有覆盖,而种内有较大的变异,仅依据形态特征很难鉴定。分子鉴定技术给植物线虫的检测和鉴定提供了快速、精确、可靠的方法。文章综述了植物线虫分子的DNA提取、分子鉴定靶标序列的选择及分子鉴定方法等方面的研究进展及现状,以促进对植物线虫分子鉴定更深入的研究。

淡紫拟青霉γ-actin基因cDNA全长的克隆与序列分析

利用同源克隆的策略对淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)γ-actin基因进行克隆,获得了淡紫拟青霉γ-ac-tin基因cDNA全长。该基因cDNA的ORF长1128bp,编码375个氨基酸,具有actin基因的保守特征序列。由该基因推导的氨基酸序列与多个子囊菌的γ-actin蛋白序列相似性达98%以上。系统进化树显示其系统发育关系与传统的分类关系基本一致。

一种计算机软件在植物线虫测量上的应用

本文首次报道了应用Image - pro4.0软件对植物线虫进行测量。对同一标本分别用显微镜目测和Image- pro4.0软件测量 ,再用SAS数据处理软件对测量得出的两组数据进行统计分析 ,两组数据差异不显著 ,证明了该软件可以应用在植物线虫测量上。同时也讨论分析了应用Image - pro4.0软件测量植物线虫的优点。

放线菌对4种病原真菌的拮抗作用初探

从广州市郊和云南陆良 3 9个点采集土样 ,经室内分离获得放线菌株 73株 ,用 4种病原真菌 (玉米大斑病菌太和菌株、玉米大斑病菌良田菌株、茶树云纹叶枯病菌、茄子褐纹病菌 )进行拮抗试验 ,结果筛选出具有明显抑菌作用的放线菌株 1 8株 。

根结线虫种群的线粒体DNA分析

在同工酶和形态学鉴定的基础上, 利用引物#C2F3和#1108对42个根结线虫种群线粒体DNA(mtDNA)中的COII和LrRNA间区域进行特异性PCR扩增, 35个种群的扩增产物约为1. 7kb,其中29个是南方根结线虫, 6个是爪哇根结线虫; 3个花生根结线虫种群的扩增产物约为1. 1kb; 1个种群的扩增产物约为0. 7kb,为根结线虫属在中国的新记录种; 3个北方根结线虫种群的扩增产物约为0. 5kb。用单条2龄幼虫提取物作模板得到的结果与大量提取DNA作模板的结果相同。为了区分产生相同大小片段的南方根结线虫和爪哇根结线虫,用限制性内切酶HinfⅠ对扩增产物进行酶切,结果表明:所有供试的南方根结线虫都可以被HinfⅠ酶切,且产生约1. 3和0. 4kb的2个限制性片段;但供试的爪哇根结线虫种群不能被酶切。由此表明,利用mtDNA PCR及酶切实验可以作为快速而准确地鉴定常见根结线虫的方法。

美洲大蠊(Periplaneta americana L.)抗菌肽杀菌作用初步观察

报道了美洲大蠊(PeriplanetaamericanaL.)抗菌肽对大肠杆菌(EscherichiacoliK88)的作用过程.电镜观察表明,美洲大蠊抗菌肽首先使细菌的外层及细胞质膜损伤,形成开口,导致内容物外泄而死亡,最后菌体崩解成碎片.

番茄品种Mi基因对根结线虫抗性的检测

采用酶切扩增多态性序列（Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS）方法对国内市场上的26个番茄So-lanum lycopersicum品种进行Mi基因检测.结果表明,特璐丝、红丽、TRS-401、仙客1号和仙客5号5个品种含有纯合体Mi基因,其余品种均不含Mi基因.进一步用南方根结线虫Meloidogyne incognita和象耳豆根结线虫M.enter-olobii对这26个品种进行接种试验,计算根结率和根结指数.结果发现,南方根结线虫和象耳豆根结线虫侵染不含Mi基因的21个番茄品种的根结率为100%,根结指数为100;而含Mi基因的5个番茄品种对南方根结线虫的根结率为1%~5%,根结指数为0~4,而对象耳豆根结线虫的根结率为26.7%~45.6%,根结指数为56~64.表明含Mi基因的番茄高抗南方根结线虫,但对象耳豆根结线虫感病或比较感病.

爪哇根结线虫-β1,4-内切葡聚糖酶基因cDNA全长克隆和序列分析

以爪哇根结线虫为材料,根据同源序列法分别进行3′末端和5′末端的RACE,获得-β1,4-内切葡聚糖酶基因cDNA全长。此cDNA全长序列为1 675 bp,包括1 521 bp的完整ORF,编码一含506 aa的多肽。该基因命名为M j-eng3-,其推导蛋白的编码氨基酸与南方根结线虫的-β1,4-内切葡聚糖酶基因M I-ENG-1、M I-ENG-3和M I-ENG-4的同源性为95.3%、95.8%和85.3%,与另外5个植物寄生线虫β-1,4-内切葡聚糖酶基因推导蛋白PP-ENG-1、GR-ENG-1、GT-ENG-1、HG-ENG-1、HS-ENG-1编码氨基酸的同源性分别为51.2%、43.7%、43.7%、46.8%和45.3%。

中国伞滑刃线虫1新种记述(线虫门:滑刃科)

报道了在马尾松枯死木质部中发现的伞滑刃线虫属1新种——东莞伞滑刃线虫。线虫标本采自广东省东莞市。两性虫体均细长.a值64-134;尾部短.c值,18-102;雌虫无阴门罩,阴门体后位。V值达86-92;雌雄虫尾部圆锥形具锐尖的末端;雄虫尾端直,有短的端抱片,交接刺具尖的喙突。

广东马尾松木中线虫种类的调查与鉴定

从广东乳源、封开、广州市郊采到276个马尾松松材线虫病死木样本,共分离鉴定出13种线虫:畸刺伞滑刃线虫(Bursaphelenchus teratospicularis),松材线虫(B.xylophilus)、拟松材线虫(B.mucronatus)、变异伞滑刃线虫(B.aberra-ns)、小角伞滑刃线虫(B.corneolus)、利昂伞滑刃线虫(B.leoni)、湖南伞滑刃线虫(B.hunanensis)、红松滑刃线虫(Aphelenchoides resinosi)、滑刃属线虫(Aphelenchoides sp.)、斯坦纳长尾线虫(Seinura steineri)、小茎线虫(Ditylenchus parvusZell)、剑尾齿杆双胃线虫(Odorhabdiplogaster xiphocaudatus)和寄生小杆属线虫(Parasitorhabditis sp.)。其中畸刺伞滑刃线虫为中国新记录种,畸刺伞滑刃线虫、斯坦纳长尾线虫和小茎线虫为马尾松上的新记录种。

寄生线虫真菌黑葡萄穗霉的分离与鉴定

利用水琼脂平板撒土——腐生线虫诱导法从根结线虫危害的作物根际土壤分离到一株线虫寄生真菌。PDA平板上形态观察显示,菌落黑色凸起,气生菌丝较多,分生孢子梗伞状,产孢结构为瓶状小梗,分生孢子椭圆或近圆形,未成熟孢子光滑,深棕色到黑色,成熟时黑色有棘。经分子鉴定,该菌为黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)。该菌在水琼脂平板上可生长,菌丝稀疏,可侵染并寄生腐生线虫Panagrellus redivius.

华南地区17个农作物病原真菌菌株间拮抗作用的初步研究

通过PDA平板对峙试验研究了华南地区 17种农作物病原真菌菌株之间的共生关系和拮抗关系 ,结果表明菌丝对峙生长可分为 5种类型。稻小黑菌核病菌株与大部分供试菌株有明显的拮抗作用 ,稻黑粒病新月弯孢霉菌株与大部分供试菌株不能共生 ,花生冠腐病菌株的菌丝能覆盖大部分供试菌株的菌落 ,茶云纹叶枯病菌株。

植物寄生线虫发育基因的研究进展

植物寄生线虫是危害农作物的重要病原物之一。笔者对植物寄生线虫的发育基因研究状况进行了评述。目前,关于植物寄生线虫发育基因及其调控机理研究不多,主要集中于发育相关基因的克隆,RNAi方法和原位杂交技术在线虫发育基因分析中得到成功应用。利用模式动物秀丽小杆线虫发育基因的信息和方法研究植物寄生线虫发育基因将是人们研究的热点之一。

根结线虫食道腺细胞表达的基因及其应用潜力

根结线虫是国际公认的最为重要的植物病原线虫,研究其食道腺细胞表达的基因是了解其寄生性和致病性的基础。近年来国际上已从根结线虫食道腺细胞分离基因22个,其基因产物主要包括β-1,4内切葡聚糖酶、果胶酸裂解酶、分支酸变位酶、钙网蛋白、类毒液过敏蛋白等。本文对上述工作的研究进展作简要评述,并对今后的应用潜力进行了讨论。

广州地区草坪线虫初步调查鉴定

为了解广州地区草坪线虫种类的分布情况,从广州市12个不同地点的运动型、观赏型、游憩型草坪和草圃采集草根样品,经贝曼漏斗法分离线虫,用TAF固定液杀死,依甘油慢法制作玻片,采用deMan公式测量计算,按T Goodey和J B Goodey的分类系统进行鉴定,初步鉴定出线虫23种,其中6种为中国地理新记录。这些线虫种类中植物寄生线虫8种、植物病原线虫3种、食肉线虫5种、食菌线虫9种、食腐线虫6种,表明广州地区草坪线虫种类资源丰富,生物习性多样。