莱菔硫烷对人膀胱癌细胞生长的影响及机制研究

目的:研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对人膀胱癌细胞生长的影响及作用机制。方法:以人膀胱癌细胞系T24细胞为离体研究对象,通过AO/EB荧光染色观察SFN诱导T24细胞凋亡核形态改变;采用流式细胞仪检测SFN对T24细胞周期的影响;RT-PCR法和Westernblot法检验SFN在mRNA和蛋白水平上对TrxR表达的影响。结果:(1)10μmol/L和20μmol/LSFN作用T24细胞24h和48h后,荧光显微镜下可见细胞核碎裂和凋亡小体的出现。(2)流式细胞仪检测可见,SFN能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/LSFN作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰。(3)RT-PCR结果:10μmol/LSFN作用T24细胞4h,10h,24h,TrxRmRNA表达有所增加,20μmol莱菔硫烷作用10h,24h后,TrxRmRNA表达明显增加。(4)Westernblot分析表明,10μmol/LSFN作用T24细胞24h和20μmol/LSFN作用T24细胞8h和24h后,TrxR蛋白表达有明显增加。结论:SFN能抑制T24细胞的生长,诱导T24细胞凋亡并使其细胞周期阻滞于G0/G1期,其作用机制与诱导TrxR的转录和翻译水平有关。

十字花科蔬菜的癌症预防作用

十字花科蔬菜富含芥子油苷类植物化学物。人们日常食用的许多蔬菜(如白菜、菜花、卷心菜、甘蓝等)都属于十字花科。流行病学研究及实验研究发现十字花科蔬菜具有显著的抗癌作用,起主要作用的是其中以芥子油苷为前体存在的异硫氰酸盐。本文综述了近年来十字花科蔬菜中芥子油苷类植物化学物的抗癌作用研究进展。

莱菔硫烷对人膀胱癌细胞周期的影响及机制研究

背景与目的:探讨莱菔硫烷对人膀胱癌细胞(T24)细胞周期的影响及作用机制。材料与方法:采用噻唑蓝(MTT)法研究不同浓度的莱菔硫烷对T24细胞生长的抑制作用并测定其半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪检测莱菔硫烷对T24细胞周期的影响;采用westernblot研究莱菔硫烷对T24细胞中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂P16和P27的表达情况。结果:在较低剂量范围内(≤40μmol/L),随着作用剂量的增加,莱菔硫烷对T24细胞的生长的抑制作用也明显增强。10、20、40μmol/L莱菔硫烷的抑制率分别为(12.5±3.95)%,(25.0±2.50)%、(50.0±5.33)%;在较高剂量(60μmol/L^160μmol/L)时,这种抑制作用不再呈剂量依赖性;莱菔硫烷作用72h后的IC50值为(51.12±7.10)μmol/L;莱菔硫烷能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/L莱菔硫烷作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰;20μmol/L莱菔硫烷作用于T24细胞8、12、24h后能明显诱导P27蛋白的表达,作用早期(8h)时能诱导P16蛋白的表达。结论:莱菔硫烷能抑制T24细胞生长并使该细胞周期阻断在G0/G1期,其作用机制主要是通过诱导P27蛋白及早期诱导P16蛋白来实现的。

药物代谢酶维生素E琥珀酸酯抑制苯并(a)芘

目的 探讨药物代谢酶在维生素E琥珀酸酯 (VES)抑制苯并 (a)芘毒性中的作用。方法 建立B(a)P诱导的小鼠前胃癌模型 ,观察不同途径投予VES对前胃癌的抑制作用。再选择最佳途径观察两相药物代谢酶在此过程中的变化。采用免疫荧光光度法检测小鼠肝脏微粒体 (S - 9组分 )中Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶(Ethoxyresorufin 0 -deethylase,EROD)活性 ;应用试剂盒测定S - 9组分中Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽 -S -转移酶(GST)活性。结果 经口投予和腹腔注射VES均可明显降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌的发生。VES可显著降低肝脏Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶 (EROD)的活性 (39 1± 3 0 5 ) ,与阳性对照组 (5 7 9± 3 16 )比较 ,有显著性差异。结论 VES可降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌 ,作用机制可能是通过影响肝脏药物代谢酶的活性来实现。

Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯(RRR-α-tocopheryl succinate,α-TOS;vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡线粒体途径中的作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法测定VES对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50值);吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察细胞凋亡;Mito Tracker Red CMXRos染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)的改变;Western Blot法检测不同剂量VES对人胃癌SGC-7901细胞Bid、Bax、Bcl-2蛋白表达和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白表达与定位的影响。结果:VES对SGC-7901细胞的IC50值为101.45μg/ml;VES可引起SGC-7901细胞发生凋亡和线粒体膜电位下降;并引起Cyt C蛋白在细胞内重新定位、Bid蛋白剪切活化、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少。结论:VES可抑制SGC-7901细胞的生长,并通过线粒体途径诱导凋亡,其机制可能是通过剪切活化Bid蛋白、上调Bax/Bcl-2相对水平来实现的。

绿花椰菜片剂中莱菔硫烷含量测定及对急性酒精性肝损伤的保护作用

采用高效液相色谱法测定绿花椰菜水提物中莱菔硫烷的含量;以C57BL/6小鼠建立急性酒精性肝损伤模型,用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测莱菔硫烷对小鼠肝脏病理学的影响;采用半自动生化分析仪测定莱菔硫烷对肝脏丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,以探讨绿花椰菜中的活性成分莱菔硫烷对急性酒精性肝损伤的保护作用.结果表明:绿花椰菜水提物中莱菔硫烷的含量为1.26mg/片;莱菔硫烷各剂量组均可明显降低酒精所致的肝质量增加,肝/体比值较酒精模型组明显下降(P<0.01);莱菔硫烷各剂量组均能减轻酒精对肝脏的病理学损伤,其中,高剂量莱菔硫烷组(80mg/kg)的作用尤为明显;莱菔硫烷能明显抑制酒精对肝脏ALT、AST和ALP等特征性酶的诱导作用,其中40和80mg/kg中、高剂量莱菔硫烷的保护作用更明显.说明莱菔硫烷能保护酒精对肝脏的损伤.

北五味子提取物缓解体力疲劳作用的实验研究

目的:探讨北五味子提取物对小鼠体力疲劳的缓解作用。方法:160只清洁级雄性ICR小鼠,随机分为4组,分别灌胃给予蒸馏水(对照组)、不同剂量北五味子提取物(10mL/kg、3.3 mL/kg、1.67mL/kg),每日1次,连续30天,进行负重游泳实验,测定血乳酸、血清尿素及肝糖原含量。结果:与对照组比较,北五味子提取物各剂量组均能显著延长小鼠负重游泳时间,增加肝糖原含量,降低运动后血清尿素水平,高剂量组对小鼠运动后血乳酸升高有明显的抑制作用。结论:北五味子提取物具有缓解小鼠体力疲劳的作用。

莱菔硫烷对C57BL/6小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究莱菔硫烷对酒精诱发的肝脏功能异常的保护作用。方法:雄性C57BL/6小鼠按体质量随机分为5组(n=12):阴性对照组、酒精模型组、SFN处理组(SFN的剂量分别为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg),先给处理组动物经口灌胃不同剂量的SFN共10 d(1次/d),在末次灌胃SFN后,立即给予酒精模型组和SFN处理组动物酒精(5 g/kg),每12 h 1次,共3次,末次给予酒精4h后结束整个实验,常规HE染色观察肝脏病理变化,采用半自动生化分析仪检测血清、肝匀浆中相关指标的表达水平。结果:病理学和血清学指标表明,成功建立了小鼠急性酒精性肝损伤模型,莱菔硫烷能明显减轻酒精对肝脏的病理学损伤,高剂量莱菔硫烷保护组的作用明显,莱菔硫烷能保护酒精对AST、ALT、ALP 3种代谢酶功能的损伤,莱菔硫烷能提高肝匀浆抗氧化酶SOD和GSH-Px活性,降低脂质过氧化物MDA的水平。结论:莱菔硫烷能保护酒精对肝脏功能的损伤,其主要作用机制与SFN提高了酒精代谢的关键酶SOD和GSH-Px活性密切相关。

通天草提取物对阿尔茨海默病大鼠脑氧化性损伤的保护作用

目的:探讨通天草提取物对阿尔茨海默病大鼠脑氧化性损伤的保护作用。方法:以Aβ诱导大鼠老年痴呆为研究模型,探讨了通天草两种提取物成分(醇提物和水提物)对老年痴呆大鼠的治疗和改善作用。结果与结论:两种提取物成分均能在不同程度上改善老年痴呆模型大鼠的学习记忆功能,该作用与其增强总超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时抑制谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX及脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成密切相关。

筛选具有抑制引起腹泻致病菌黏附功能的益生菌

筛选能够抑制引起腹泻致病菌黏附的益生菌,并且对其适应肠道环境:耐酸、耐胆盐和黏附性能进行评价。从中国西部地区传统发酵食品以及人类粪便样品中分离的14株益生菌作为筛选菌株。对这14株益生菌进行抑制致病菌黏附的筛选,最终筛选出7株使致病菌黏附数量降低到1.5×104CFU/m L的益生菌进行耐受肠道环境能力评价。实验结果显示这7株益生菌在p H2的条件下处理90min后存活的益生菌依然能够达到107CFU/m L左右,在0.3%的胆盐环境中处理2h后菌数降低到原来的百分之一,单层细胞上黏附的益生菌数J5、G15和F0533能够达到106CFU/m L,显示出了较强的黏附能力。经过综合分析筛选出F0533、IN4125、G15、J5和M7益生菌,经16S r DNA基因技术鉴定分别为Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus paracasei、Lactobacillus casei和Lactobacillus paracasei。

维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡的作用

以人胃腺癌ＳＧＣ－７９０１细胞为实验模型，观察了维生素Ｅ琥珀酸酯（ＶＥＳ）对其生长的抑制作用，并且采用电镜、流式细胞术和末端脱氧核苷酸标记检测了ＶＥＳ诱导ＳＧＣ－７９０１细胞凋亡情况。结果表明，２０μｇ／ｍｌＶＥＳ处理ＳＧＣ－７９０１细胞４天，细胞生长抑制率达１００％，本研究结果还显示ＶＥＳ可诱导ＳＧＣ－７９０１细胞经历凋亡，同样在２０μｇ／ｍｌ剂量下处理细胞２天，可引起８９．９６％的细胞凋亡。

γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用

为了探讨γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,采用MTT、分裂指数、集落形成、形态学观察法测定细胞活力,Hoechst 33258荧光染色法和DNA ladder法检测检测细胞凋亡。结果表明:γ-生育三烯酚能够显著抑制HT-29细胞的增殖(P<0.05),且存在剂量-效应关系,其48 h半数抑制浓度(IC 50)为35.45μmol/L;形态学观察和DNA ladder结果显示受试物能够诱导HT-29细胞凋亡。γ-生育三烯酚对人结肠癌HT-29细胞具有生长抑制作用,此作用可能与其凋亡诱导效应有关。

生物碱类植物化学物治疗和预防阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是最常见的老年痴呆型神经退行性疾病,目前尚无特效药。研究与开发防治阿尔茨海默病的有效植物化学物是当今医药学研究领域的重要课题之一。通过对近年来有代表性的文献进行分析归纳,总结了加兰他敏、毒扁豆碱、石杉碱、长春花属以及烟碱等生物碱类植物化学物治疗和预防阿尔茨海默病的研究进展。

莱菔硫烷对HCY致内皮细胞炎症损伤的治疗作用

目的:探讨莱菔硫烷(SFN)对同型半胱氨酸(HCY)诱导的人脐静脉细胞融合细胞EA.hy.926损伤的治疗作用。方法:将EA.hy.926细胞用10mmol/L的HCY诱导4h,再用0μmol/L～20μmol/L的SFN处理12h。采用噻唑蓝(MTT)法测吸光度,并计算粘附率;采用蛋白印记法(Western blotting)检测NF-κB的蛋白表达。结果:不同浓度的SFN均可抑制损伤后的EA.hy.926细胞的粘附和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达量,并呈现剂量依赖关系。结论:SFN对HCY导致的EA.hy.926细胞炎症损伤有抑制作用,可能存在治疗作用。

酱油掺假检测技术的研究进展

酱油掺假使杂现象已成为影响酱油行业健康发展的制约因素之一。鉴伪技术的发展对酱油质量与安全控制至关重要。分析了掺假使杂酱油引起食品不安全的原因,综述了国内外关于掺假酱油鉴伪技术的研究进展,分析其优势和不足,提出加强生物检测的建议,为该领域的研究工作进一步开展提供参考。

莱菔硫烷对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及机制研究

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对膀胱癌细胞侵袭性及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响和作用机制。方法:常规培养膀胱癌细胞株T24后,采用Transwell侵袭小室法观察SFN对T24细胞体外侵袭能力的影响;采用Western blot法检测SFN作用T24细胞后EMT标志蛋白的表达变化。结果:10μmol/L SFN作用24h后的T24细胞穿透能力显著下降,明显诱导EMT标志蛋白E-cadherin的表达增高并下调vimentin的表达(P<0.05)。结论:SFN能降低膀胱癌细胞的侵袭能力,其作用机制与抑制膀胱癌细胞EMT过程有关。

莱菔子素对人肝细胞Ⅱ相代谢酶的作用研究

目的:探讨莱菔子素(sulforaphene)对人肝细胞系HHL-5细胞Ⅱ相代谢酶的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定莱菔子素对HHL-5细胞的毒性作用;蛋白印记法(western blotting)检测莱菔子素对Ⅱ相代谢酶蛋白表达的影响。结果:5μmol/L莱菔子素处理HHL-5细胞24h促进细胞增殖,10～100μmol/L表现生长抑制作用;莱菔子素能明显诱导血红素加氧酶(HO-1)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)蛋白的表达并呈剂量依赖关系。结论:莱菔子素可诱导肝细胞Ⅱ相代谢酶HO-1和TrxR的表达,具有潜在的化学致癌物解毒功能。