肿瘤患者的生育风险评估

晚婚晚育的趋势、癌症患者的低龄化、生存率和生存时间的改善让越来越多的患者和医务工作者关注如何在治疗癌症过程中保护患者的生育能力。从造成生育风险的因素、妊娠对癌症患者的影响及伦理学方面简要叙述肿瘤患者的生育风险评估方法。

肿瘤生殖学——一门崭新的交叉学科

肿瘤生殖学是肿瘤学与生殖医学交叉的一门新兴学科,其研究目的是实现延长患者生命和保存生育能力的平衡。随着医疗技术的进步,肿瘤患者的转归和预后已经得到了较大改善。年轻癌症患者在治疗过程中接受的放疗和化疗造成的生殖毒性是诱导其不孕的两个主要原因。在此基础上,如何保证年轻患者的生育力,如何对妊娠期间肿瘤患者进行治疗和生育保护,应引起肿瘤学、生殖医学、放射医学及基础医学等多学科的重视和协助研究,使肿瘤生殖学进一步发展与完善。

人体外受精失败的卵母细胞及发育异常的受精卵和胚胎染色体观察

本文对体外受精失败以及虽已受精,但无卵裂的人卵母细胞与卵裂不规则并有细胞质碎片的胚胎进行染色体研究。发现其中既有正常的二倍体胚胎,同时也发现了多种染色体异常,其中包括多核卵裂球、多倍体、单倍体、嵌合体、非整倍体等异常。

免疫珠试验检测抗精子抗体技术在体外受精-胚胎移植中的应用

对17对不明原因不育夫妇作了免疫珠试验以测定抗精子抗体,发现1例女性血清IgA抗精子抗体阳性;IgA免疫珠在活动精子头部的结合率达46％。该例先前作了IVF—ET治疗失败;回收的三个卵母细胞在自身血清制备的培养基中无一受精。故认为免疫珠试验测精子抗体技术可作为IVF—ET治疗前的一项常规检查,以排除不孕的免疫因素。

人类胚胎干细胞

干细胞（stem Cell）研究成果曾被Science评为1998年世界科技十大成果之首、2000年世界科技十大成果之一和六大热点发展领域之首。1998年人胚胎干细胞建系后，研究者开始真正重视干细胞产业，全球掀起以人胚胎干细胞为中心的干细胞研究和应用热潮，并带来广阔的产业化前景。

一种提高RAPD技术扩增效率的有效方法

RAPD技术是由Williams等于1990年首先创立的一种DNA分子标记技术。但是由于低的退火温度和短的引物序列等原因 ,常常使得RAPD技术的分辨率和可重复性低。本文介绍一种通过延长从退火到延伸的ramp时间 ,提高RAPD产物的分辨率和产量 ,由此提高RAPD技术的扩增效率的有效方法。

睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG1与Mtsarg1的分子克隆及Mtsarg1基因的表达谱分析

从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段 (GenBank登录号 :BE64 45 3 8)出发 ,利用生物信息学和实验技术 ,克隆了小鼠睾丸生精细胞凋亡相关新基因Mtsarg1及相应的人类新基因TSARG1,Gen Bank登录号分别为AF3 99971和AY0 3 2 92 5。小鼠Mtsarg1与人类TSARG1基因在氨基酸水平有 5 5 %的一致性和 61%相似性 ,与其他已知蛋白质无明显同源性。小鼠 10种组织的RT -PCR分析结果表明 ,Mtsarg1基因在睾丸中高表达 ,在附睾中呈微弱表达 ,在其他组织不表达 。

两种雌孕激素替代法内膜准备对多囊卵巢综合征冷冻胚胎移植临床效果的比较

目的比较非降调节雌孕激素替代法与降调节雌孕激素替代法作为子宫内膜准备方法对多囊卵巢综合征患者(PCOS)冻融胚胎移植(FET)的妊娠结局。方法在PCOS患者FET周期中,分别采用非降调节雌孕激素替代法(n=89)、降调节雌孕激素替代法(n=37)准备内膜,比较周期妊娠率、种植率、流产率、宫外孕发生率等指标。结果两组患者年龄分别为(29.53±3.39)岁和(29.24±2.85)岁(P>0.05);基础体质量指数分别为(23.07±3.51)和(22.20±2.96)(P>0.05);不孕年限分别为(3.14±1.89)年和(3.86±1.36)年(P>0.05);两组移植周期临床妊娠率为55.06%和72.9%(P<0.05);种植率分别为38.7%和53.6%(P<0.05);流产率分别为16.3%和14.8%(P>0.05);宫外孕率分别为4.1%和3.7%(P>0.05)。结论对于PCOS患者使用降调节雌孕激素替代法是一种合适的子宫内膜准备方案。

特发性无精症和严重少精症患者Y染色体微缺失的分子检测

目的 :研究特发性无精症和严重少精症患者与 Y染色体微缺失的关系 ,建立无精症和严重少精症患者 Y染色体微缺失的分子检测方法。方法 :应用 PCR技术对 1 0 0例无精症和严重少精症患者 (其中无精症 72例 ,严重少精症 2 8例 )进行 Y染色体 AZFa、AZFb、AZFc/DAZ、SRY的微缺失检测。结果 :1 2例患者 (1 2 % )有 AZFc的微缺失 (其中无精症 8例 ,占 1 1 .1 % ;严重少精症 4例 ,占 1 4.3% ) ,且其中 1例无精症患者为 AZFb、AZFc双重缺失 ;所有病例未发现有 AZFa的缺失 ;SRY基因 PCR扩增均为阳性。6 0例已有生育的正常男性均无 AZFa、AZFb、AZFc、SRY微缺失。结论 :Y染色体微缺失 ,特别是 AZFc/DAZ的缺失是引起无精和严重少精、造成男性不育的重要原因之一 ,在进行遗传咨询和行卵细胞质内注入精子术 (ICSI)时 ,有必要对不明原因的不育男性患者进行

1780例自然流产患者的细胞遗传学分析

目的:探讨染色体异常与不良妊娠史的关系,为生殖中心自然流产病例的遗传咨询和产前诊断提供指导。方法:培养淋巴细胞,常规收获制片,G显带处理,必要时加做C带分析,对1780例具有妊娠24周前自然流产史的患者进行染色体核型分析。结果:共发现染色体异常57例,异常率为3.20%。其中平衡易位23例,罗氏易位14例,复杂易位3例,其它17例。流产1次、2次与流产3次及以上者,其染色体异常率频率分别为1.7%,2.3%和5.8%。结论:在自然流产病例的染色体异常中,染色体易位是主要类型。染色体异常检出率随着自然流产次数的增加而有升高的趋势。流产3次以上群体中,染色体异常频率明显增加。

人类发育欠佳胚胎在卵裂期及囊胚期移植后的临床结局比较

目的比较分析人类体外受精后的发育欠佳胚胎,行卵裂期移植或囊胚培养后,哪一种策略更有利于改善患者的临床结局。方法患者入选标准:体外受精第3天(d3)所有胚胎均为发育欠佳胚胎(胚胎卵裂球数<6-细胞,或胚胎碎片为10%～20%)。将患者随机分为两组:卵裂期移植组(n=114)及囊胚培养组(n=106)。比较两组间的临床妊娠率、继续妊娠率及植入率。结果卵裂期移植组与囊胚培养组的移植周期临床妊娠率(38.6%vs 24.5%)、继续妊娠率(35.1%vs 24.5%)及植入率(24.5%vs 17.9%)差异均无统计学意义。由于囊胚培养组具有较高的周期取消率(53.8%),卵裂期移植组的取卵周期临床妊娠率显著高于囊胚培养组(38.6%vs 11.3%)。结论人类发育欠佳胚胎在卵裂期进行移植更加适合。

改良超长降调节方案改善不孕患者体外受精-胚胎移植的结局(英文)

目的:探讨改良超长降调节方案结合人绝经期促性腺激素( HMG)促排卵对特殊不孕患者行体外受精-胚胎移植的结局的影响。方法:回顾性分析我院2008年8月至12月共99例使用改良超长降调节方案治疗的特殊患者(含子宫内膜异位症42例,多囊卵巢综合征35例,一次降调不全22例) ,均在黄体中期肌肉注射促性腺激素释放激素激动剂( GnRHa) 1.5 mg,25 d后再次注射相同剂量GnRHa,末次注射后25 d开始使用国产HMG超排卵行体外受精。临床妊娠结果与同期治疗的122例使用长方案的同类患者分别进行对比。结果:( 1 )子宫内膜异位症患者使用超长方案42例,促性腺激素释放激素( gonadotropin, Gn)用量( 32.33 ±15.11 )支,用药时间( 10.57 ±1.88 ) d, hCG日孕酮水平(0.78±0.44 ) μg/L,临床妊娠率73.8%; ( 2 )多囊卵巢综合征患者使用超长方案35例, Gn用量(28.57±11.15)支,用药时间( 11.71 ±2.07 ) d, hCG日孕酮水平( 0.65 ±0.39 ) μg/L,临床妊娠率65.7%;(3)一次降调节不全的患者使用超长方案22例, Gn用量( 26. 22 ±12. 07 )支,用药时间(10.01±1.77) d,HCG日孕酮水平(0.71±0.50) μg/L,临床妊娠率72.7%。与同期使用长方案降调节的同类患者进行对比,临床妊娠率显著提高,费用明显降低。结论:对子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征病及一次降调不全行体外受精的不孕患者,采用GnRHa超长方案加HMG是一种节约费用且成功率高的超排卵方案。

应用双向电泳技术初步建立人精子头部蛋白质图谱

目的 :利用人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳 (2 DE)技术建立正常人精子头部蛋白质图谱。 方法 :先用固相pH梯度 SDS电泳技术 (IPG DALT)对全精子和精子头部蛋白质抽提物进行蛋白质分离 ,然后用图像分析软件比较精子头部蛋白质图像与精子蛋白质图像的蛋白质斑点组成差异。其中 ,全精子蛋白质的抽提比较了硫脲 /尿素 /盐酸胍和Kit/盐酸胍两种抽提方法。 结果 :硫脲 /尿素 /盐酸胍法与Kit/盐酸胍法所得的全精子 2 DE图像蛋白质斑点分别为 80 2个和 797个 ,其中相同的有 4 92个 ,将两种方法获得的图像整合而得到的全精子蛋白质图像有1 1 0 7个蛋白质斑点 ;精子头部图像蛋白质斑点有 4 2 8个 ,经匹配 ,全部来源于全精子蛋白质图像。 结论 :综合采用两种蛋白质提取方法初步建立了精子头部蛋白质图谱。

重度卵巢过度刺激综合征并发胸腹腔积液治疗的回顾性分析

目的:探讨体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)后发生重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)并发胸腹腔积液的有效治疗方法。方法:回顾性分析132例因IVF-ET术后发生重度OHSS患者的临床资料。分析比较3种不同的治疗方法:低分子右旋糖苷联合白蛋白保守治疗(I组,25例)、6%中分子羟乙基淀粉(维容)保守治疗(Ⅱ组,67例)和早期积极抽吸腹水治疗(Ⅲ组,40例)对控制OHSS并发胸腹水的治疗效果。结果:3组治疗后均能有效改善OHSS症状和各项血液生化指标,但是Ⅲ组的住院天数[(7.4±4.5)d]显著少于I组和Ⅱ组[(21.4±9.2)d和(15.6±6.7)d],治疗费用Ⅲ组[(2656.2±1882.8)元]也显著低于I组和Ⅱ组[(11937.6±7989.8)元和(5182.7±2991.7)元]。结论:尽早采用腹部B超引导下经腹壁放液术必要时结合维容扩容治疗OHSS是一种费用低,效果好的方法。

精子库的设立及面临的伦理问题

据世界卫生组织统计，在育龄夫妇中不孕不育者所占比例为10％～15％，并仍有上升趋势。不孕不育症严重影响了人类的生殖健康，并对家庭及社会的稳定造成一定的危害。在不孕不育症中，男性因素所占比例高达40％，导致男性不育的因素很多，其中生精机能障碍是非常重要的因素。随着冷冻生物学及生殖医学的迅猛发展，人类精子库的建立为解决男性因素所致的不育及男性生殖保险提供了现实的技术支持。

应用RAPD技术对蜘蛛系统演化的初步研究

利用随机扩增多态ＤＮＡ 技术检测了３ 类不同蜘蛛的系统发生关系．用１２ 个随机引物对各实验蜘蛛的基因组ＤＮＡ 进行扩增，选择其中扩增谱带清晰的８ 个引物进行分析并计算不同类蜘蛛间的遗传距离．结果表明：所有８ 个引物获得的ＲＡＰＤ谱带均表现为不同程度的多态性；地穴型蜘蛛与结网型蜘蛛间的遗传距离及结网型与游猎型之间的遗传距离，均比地穴型与游猎型之间的遗传距离近，体现了蜘蛛由地穴→结网→游猎的系统演化进程．这一结论与根据古生物学、胚胎学、形态学及生态学等得出的结论一致，从而进一步从ＤＮＡ 分子水平上为蜘蛛系统演化提供了新的证据．

1054周期不明原因不育患者的治疗效果分析

目的:比较不明原因不育症两种不同治疗方法的效率。方法:回顾性分析1999.01-2002.12于本所进行排卵监测指导同房和宫腔内夫精人工授精(IUI)治疗的298例原因不明不育患者,共1054周期的治疗结果。结果:各组平均优势卵泡数和临床妊娠率分别为:自然周期排卵监测指导同房组1.04个,3.23%(4/124);药物诱导排卵监测指导同房组为3.36个,5.79%(13/228);自然周期IUI组为1.07个,5.90%(16/271);药物诱导排卵后进行IUI组为3.42个,10.90%(47/431)。结论:药物诱导排卵后行IUI可克服部分原因不明不育症的潜在细微缺陷;给予小剂量诱排药物可以提高原因不明不育患者治疗后的妊娠率。

体外受精助孕并发异位妊娠92例分析

目的:探讨体外受精助孕中异位妊娠的发生率与影响因素。方法:对接受体外受精(invitro fertilization and embryo transfer,IVF)、单精子卵胞浆内注射(intracytopla smicsperm injection,ICSI)、冻融胚胎移植(frozen-thawing embryo transfer,FET)助孕后发生异位妊娠病例的助孕指征、助孕方式、异位妊娠类型等进行回顾总结。结果:6007人次接受助孕治疗者,临床妊娠2322人次(38.7%),94人次为异位妊娠,发生率4.05%。其中输卵管妊娠92人次,发生率3.96%,占总异位妊娠病例的97.87%(92/94),其他部位2人次(腹腔妊娠和子宫角妊娠各1人次),发生率为0.86‰,占异位妊娠比例为2.32%。宫内宫外合并妊娠20人次,发生率为0.86%(20/2322),占异位妊娠病例的21.28%(20/94)。86例患者助孕指征为输卵管因素和/或盆腔粘连,占91.49%,其中24人有异位妊娠史(25.53%)。3种助孕方式(IVF-ET,ICSI和FET)比较,其总妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。3组间异位妊娠发生率比较,IVF-ET组显著高于ICSI和FET组(均P<0.05);FET组亦显著高于ICSI组(P<0.05)。结论:体外受精助孕异位妊娠发生率较自然受孕人群高,有输卵管病变史是发生异位妊娠的主要原因。

小鼠生精相关基因SRG4的cDNA克隆及在小鼠各发育阶段的表达

从大鼠精子尾部基因Spag4出发 ,在dbEST数据库中同源搜寻与大鼠Spag4基因编码氨基酸同源性较高的表达序列标签 (ExpressedSequenceTag ,EST) ,找到两个在小鼠精母细胞中表达的ESTs ,BG10 1130和BG10 0 990。通过电子杂交得到 115 5bp的片段 ,包含了小鼠假想基因AK0 0 6 2 2 5的全部序列 ,定位于 2H1 H2 ,其开放阅读框为 87～ 1133bp ,并被RT PCR所证实 ,将该基因命名为小鼠生精相关基因 4 (SpermatogenesisRelatedGene 4 ,SRG4 ,GenBank登录号为AY30 70 77)。SRG4基因推定编码 348个氨基酸 ,有一个coiled coil区 ,可能是一个跨膜蛋白。该基因与人类同源基因TSARG4同源性为 74 % (2 77/374 ) ,与大鼠Spag4同源性为 4 5 % (10 3/22 4 )。多组织RT PCR和Northernblot结果显示 ,SRG4在睾丸中特异性表达。RT PCR结果发现 ,小鼠出生后 2周内 ,SRG4表达量极低 ;3周开始时SRG4大量表达 ,到 4～ 5周时表达量最高。该结果提示 。

胚胎植入前遗传学检测技术的临床应用和发展前景

植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)是辅助生殖与遗传学诊断技术相结合的一种胚胎检测技术,指对植入前的胚胎进行染色体或者特定基因检测,使得面临较高遗传风险妊娠的夫妇在选择遗传学正常的胚胎植入子宫后,可以降低自然流产的风险或者避免遗传性出生缺陷。相比于传统的产前诊断技术,PGT技术可以避免因发现胎儿遗传异常后不得不面临的选择性流产的身心痛苦,越来越成为人们首先考虑的生殖干预方式。