骨肉瘤组织中MICA、MMP-9和NF-κB蛋白的表达及相关性

目的探讨骨肉瘤组织中MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC class Ⅰ chain-related A,MICA)、MMP-9和NF-κB的表达及相互间的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白表达和脱落机制提供组织学依据。方法应用免疫组织化学方法检测66例骨肉瘤、11例骨母细胞瘤,8例骨化性纤维瘤和6例正常骨组织中MICA蛋白的表达情况,并检测66例骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB蛋白的表达情况。结果(1)MICA蛋白在骨肉瘤组织、骨母细胞瘤、骨化性纤维瘤和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)、9%(1/11)、0(0/8)、0(0/6),骨肉瘤组织中MICA表达与骨母细胞瘤(P=0.01)、骨化性纤维瘤(P<0.01)和正常骨组织(P<0.05的差异有显著性。(2)骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB表达率分别为55%(36/66)和73%(48/66);NF-κB与MICA(r=0.373,P<0.01)和MMP-9(r=0.536,P<0.01)的表达呈正相关关系。结论MICA蛋白可作为骨肉瘤诊断的分子标志物;NF-κB可能参与MICA蛋白表达和脱落的分子机制,NF-κB可作为骨肉瘤免疫治疗的候选靶点。

组织切片FISH技术在预测非肌层浸润性膀胱癌复发和进展的作用

目的 :探讨组织切片荧光原位杂交(FISH)技术在预测非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)复发和进展的作用。方法:收集36例NMIBC,经随访18例出现术后复发和4例出现进展。应用FISH技术检测膀胱癌组织切片中的染色体数目,分析3、7、17号染色体和9p21位点数目与肿瘤复发和进展的相关性。结果:复发组膀胱癌组织的3、7、17号染色体杂交信号数和染色体多倍体百分率均高于无复发组(P<0.05)。复发组较多出现9p21位点单个或双信号缺失。9p21和(或)3号染色体异常率高于无复发组(P<0.05)。进展组和无进展组膀胱癌组织的染色体杂交信号数相似(P>0.05)。两组间的多倍体百分率差异亦无显著性(P>0.05)。结论 :3、7、17号染色体和9p21位点数目异常可作为预测NMIBC复发的指标,组织切片FISH技术可应用于NMIBC复发风险的评估。

食管癌细胞系CSEC的建立及其生物学特性

目的建立人食管癌细胞系为潮汕沿海地区食管癌研究提供实验模型。方法采用胶原酶消化法建立人食管癌细胞系CSEC。研究培养细胞的形态特点、生长特征、对Sc id小鼠的致瘤性、细胞遗传学特点及肿瘤相关标志物(AE 3、p53)的表达。结果细胞系CSEC在体外持续稳定生长超过13个月,已传至80代以上,群体倍增时间为39.6小时。CSEC细胞具有鳞状细胞的形态和结构特点,胞浆富含张力原纤维束,细胞间可见桥粒。Sc id小鼠移植瘤的组织学形态与患者的原发肿瘤一致。细胞系CSEC呈近四倍体核型,染色体结构改变常见而且复杂。肿瘤相关标志物(AE 3、p53)呈强阳性表达。结论人食管癌细胞系CSEC是一分化较高且生物学特性稳定的鳞状细胞癌细胞系,可为食管癌的发病机制和治疗研究提供有价值的实验模型。

浆膜腔积液细胞中Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2表达及其意义

目的 探讨浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p5 3、c erbB 2的表达及其意义。方法 应用细胞块免疫细胞化学方法,检测45例浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p5 3、c- erbB- 2的表达水平。结果 Calretinin、CEA、p5 3、c erbB 2在腺癌细胞中阳性表达率分别为4% (1/2 6)、5 4% (14 /2 6)、69% (18/2 6)和77% (2 0 /2 6) ,间皮细胞中分别为79 % (15 /19)、16% (3 /19)、5 % (1/19)和2 1% (4 /19)。该4种标志物在腺癌细胞中阳性表达率与在间皮细胞中阳性表达率比较均有非常显著性差异(P <0 .0 1)。结论 Calretinin、CEA、p5 3、c- erbB- 2抗体联合检测可辅助鉴别腺癌细胞和间皮细胞。

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达

【目的】检测骨肉瘤组织中MHCI类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息。【方法】应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法、Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织、6例石蜡包埋正常人骨组织、9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况。【结果】骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2、MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达。【结论】MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株。

基质金属蛋白酶-9对骨肉瘤细胞可溶性MICA蛋白形成的影响

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对骨肉瘤细胞可溶性MICA(s MICA)蛋白形成的影响,为骨肉瘤免疫治疗提供新靶点。方法:脂质体法转染MMP-9反义寡核苷酸到骨肉瘤细胞U2OS,应用RT-PCR、明胶酶谱法和ELISA检测转染寡核苷酸后U2OS细胞MMP-9 m RNA表达,以及培养上清液中MMP-9的酶活性和s MICA蛋白浓度变化。结果:U2OS细胞转染MMP-9反义寡核苷酸后,MMP-9 m RNA表达及酶活性受到抑制;培养上清液中s MICA蛋白浓度下降(P=0.011)。结论:MMP-9可能参与骨肉瘤细胞s MICA蛋白形成,MMP-9可作为骨肉瘤免疫治疗的侯选靶点。

硬化性肺细胞瘤11例病理特点及冷冻误诊分析

目的探讨硬化性肺细胞瘤(PSH)的临床病理特点,以提高对PSH术中冷冻诊断的准确性。方法收集11例PSH的临床资料,回顾性分析这些病例冷冻切片与石蜡切片的组织学特点。结果 PSH多见于中年女性,一般无临床症状。大体肿瘤边界较清。镜下观察到乳头状、实性、硬化性和血管瘤样结构及2种细胞。本组11例均行术中冷冻检查,5例诊断为PSH,3例诊断为良性肿瘤,3例未排除肺癌,需待石蜡切片确诊。7例冷冻切片见>3种组织结构,4例仅见2种组织结构,以1种组织结构(如实性结构或乳头状结构)为主。结论 PSH虽较为少见,但有必要纳入肺结节性病变冷冻检查的鉴别诊断范畴,此时肿瘤由2种细胞构成,肿瘤结构的多样性以及肿瘤与周围组织的明显界限是鉴别PSH与肺恶性肿瘤的重要标志。

脐尿管混合性腺神经内分泌癌1例报道

脐尿管癌是临床一种较为罕见的肿瘤,仅占膀胱癌〈1%。脐尿管癌绝大多数为腺癌,神经内分泌癌仅有少数个案报道。脐尿管混合性腺神经内分泌癌更为罕见,迄今为止,国外仅有2例报道[1,2],国内仅报道了1例神经内分泌癌伴少量腺癌成分[3]。本文报道1例脐尿管混合性腺神经内分泌癌,并复习国内外相关文献,对其临床和病理学特点加以总结,以加深对本病的认识。

脐尿管癌临床病理特点分析

目的探讨脐尿管癌的临床病理特点、诊断和预后。方法回顾性分析2003年6月至2015年5月梅州市人民医院病理诊断为脐尿管癌的11例患者的临床病理资料。结果 11例脐尿管癌患者中男性8例,女性3例,年龄20~65岁,平均45岁。肉眼血尿为主要症状10例(其中2例伴黏液尿),下腹部疼痛1例。肿瘤均位于膀胱顶壁或前壁。组织学类型包括黏液腺癌5例,腺神经内分泌癌1例,肠型腺癌4例,印戒细胞癌1例。4例镜下见脐尿管剩余结构。腺癌均表达CK20和CDX-2,部分病例不同程度表达CK7和34BE12。腺神经内分泌癌还表达CD56、P16和Cg A。Sheldon分期Ⅱ期2例,Ⅲa期9例。7例患者术后随访2~65个月,1例术后9个月死于腹腔广泛转移,1例术后23个月出现肺转移,余5例未见复发和转移。结论脐尿管癌是罕见肿瘤,发现时常分期较晚。病理诊断需结合肿瘤部位,免疫组化染色在脐尿管腺癌、膀胱腺癌和转移性结直肠腺癌的鉴别诊断作用有限,但有助于神经内分泌癌诊断。

MHCⅠ类链相关蛋白A和基质金属蛋白酶-9在骨肉瘤组织学和血清学中的关系

目的探讨MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC classⅠchain-related A,MICA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在骨肉瘤组织学和血清学中的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白脱落的分子机制提供组织学基础。方法应用免疫组织化学方法检测16例骨肉瘤中MICA和MMP-9蛋白的表达情况,同时采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测16例骨肉瘤患者血清中MICA和MMP-9的含量。结果16例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达率分别为42.5%(7/16)和56.3%(9/16),两者的表达无相关性(r=0.454,P>0.05);骨肉瘤患者血清中可溶性MICA(soluble MICA,sMICA)浓度高于健康人(P<0.05),与血清中MMP-9的浓度无相关性(r=-0.429,P>0.05),但与组织中MICA蛋白表达呈负相关(r= -0.502,P<0.05)。结论骨肉瘤患者血清中sMICA浓度升高,而血清中MMP-9含量对MICA浓度无明显影响;骨肉瘤患者可能存在NKG2D-MICA介导的免疫监视功能障碍,MICA蛋白的脱落可能是骨肉瘤逃避免疫监视的一个新机制。

染色体脆性位点与肿瘤

染色体脆性位点 (Fra)是基因组不稳定性的表现 ,以孟得尔方式遗传 ,肿瘤患者及家属Fra的表达率明显高于正常人。Fra与肿瘤细胞染色体断裂重排位点、癌基因位点、抑癌基因位点、病毒DNA整合位点高度一致 ,表明Fra可通过癌基因的扩增、抑癌基因的缺失、病毒DNA的整合参与肿瘤的发生发展 ,并与肿瘤的遗传易感性相关。

膀胱尿路上皮癌中MHC Ⅰ类链相关蛋白A的表达及临床意义

目的：探讨膀胱尿路上皮癌中MHCI类链相关蛋白A（MICA）的表达及临床意义。方法：用免疫组化检测75例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜中MICA蛋白表达，对MICA蛋自在膀胱黏膜、不同级别及分期的膀胱癌中的表达进行统计学分析。结果：MICA蛋白在膀胱癌的表达率（48．0％）高于正常膀胱黏膜（P〈0．05），其中在非浸润性尿路上皮癌的表达率为59．0％（P〈0．05），浸润性36．1％；高、低级别非浸润性癌MICA蛋白表达无统计学意义；MICA蛋白在Ta、T1和T2-4期膀胱癌的表达率分别为59．0％、41．2％和31．6％，MICA蛋白在浸润性膀胱癌（T1-4）的表达低于非浸润性膀胱癌（Ta）（P〈0．05）。结论：MICA蛋白表达上调可能与膀胱尿路上皮癌的发生有关。而MICA蛋白表达缺失可能与膀胱癌的浸润有关。MICA蛋白可作为膀胱癌免疫治疗的候选治疗靶点。

肿瘤出芽预测ⅠA2-ⅠB1期宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的意义

目的 探讨肿瘤出芽预测ⅠA2-ⅠB1期宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的意义。方法 收集108例FIGO(2009)ⅠA2-ⅠB1期宫颈鳞状细胞癌临床病理资料,HE切片下计数瘤芽数量,分析肿瘤出芽与临床病理特点的相关性。分析33例宫颈鳞癌HE切片与免疫组化Pan-CK染色切片中肿瘤出芽分级的一致性。结果 高级别瘤芽组比低级别组更易发生淋巴结转移(30/52 vs.23/56),但两组差异无统计学意义(P=0.084)。高级别瘤芽与低分化肿瘤显著相关(P=0.004),但与患者年龄、肿瘤浸润深度和脉管癌栓不相关。淋巴结转移与传统临床病理特点显著相关。HE染色和免疫组化Pan-CK染色切片肿瘤出芽分级一致率为81.8%(Kappa=0.629)。结论 瘤芽计数方法、高瘤芽阈值和肿瘤出芽预测早期宫颈鳞癌淋巴结转移的价值仍有待更多的研究。

表现为晚期宫颈癌的子宫黏膜下肌瘤表面并发鳞状细胞癌1例

带蒂的子宫黏膜下肌瘤偶见脱垂至宫颈管,发生蒂扭转、出血和坏死,可误诊为恶性肿瘤。子宫内膜鳞状细胞癌罕见,黏膜下肌瘤因受长期摩擦其表面子宫内膜可发生鳞状细胞癌。梅州市人民医院2019年4月收治1例极为罕见的表现为晚期宫颈癌的子宫黏膜下肌瘤伴发表面鳞状细胞癌患者,现回顾性分析其临床特点,以提高临床医师对类似疾病误诊的认识。

骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系

目的:探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A(MICA)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法:用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果:MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关(r=0.414,P<0.01)。结论:MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。

HSV-tk和H60基因重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的:构建携带自杀基因HSV-tk和免疫相关基因H60的逆转录病毒载体pIRES-H60、pIRES-TK和pTK-IRES-H60。方法:以质粒pUC19-H60为模板,用PCR方法扩增H60基因,并亚克隆至pMD18-T载体,构建中介载体pMD18-H60。双酶切质粒pMD18-H60和tgCMV/HyTK,获得H60和TK基因片段,再克隆至逆转录载体pIRES,构建重组载体pIRES-H60和pIRES-TK。然后把H60基因片段克隆至载体pIRES-TK,构建重组载体pTK-IRES-H60。转染重组载体至包装细胞PA317进行病毒包装,用病毒液感染NIH3T3细胞,检测病毒液的滴度。结果:测序结果显示PCR扩增的H60基因序列正确,重组载体经PCR和酶切鉴定得到相应的基因片段。经筛选得到稳定的产病毒细胞株PA317/pIRES-H60、PA317/pIRES-TK和PA317/pTK-IRES-H60,病毒滴度分别为8×104、1×105、7.1×104cfu/mL。结论:成功构建逆转录病毒载体pIRES-H60、pIRES-TK和pTK-IRES-H60,建立了稳定的病毒细胞株,所产生的假病毒颗粒具备一定的感染力。

吡柔比星联合维拉帕米膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效观察

目的:观察吡柔比星(THP)联合维拉帕米膀胱灌注预防膀胱尿路上皮癌术后复发的效果。方法:选取同期住院行TURBT或膀胱部分切除术的膀胱尿路上皮癌患者56例,随机分成两组,每组28例,分别给予THP联合维拉帕米、单用THP膀胱腔内灌注治疗,观察两组膀胱癌的复发率及副反应。结果:THP联合维拉帕米治疗后1年、1～3年、3～5年膀胱癌复发率及总复发率、膀胱刺激征的发生率均低于单用THP组(P<0.05)。其余副反应发生率差异无显著性。结论:THP与维拉帕米联合应用膀胱灌注预防膀胱癌术后复发比单用THP更有效,且副作用较小,费用合理,值得临床推广应用。

超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术临床分析

目的探讨超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术的疗效和安全性。方法分析超声引导下斜仰卧截石位经皮肾输尿管镜碎石取石治疗上尿路结石56例的临床资料,男38例,女18例,平均(44±16.7)(23～70)岁;输尿管上段结石10例,肾结石46例(包括单个肾盂结石26侧、多发结石16侧、铸形结石11侧)。结果全部成功获得经皮肾穿刺通道。手术时间60～190min,平均(98±40.1)min。输尿管上段结石10例单次清除率100%;肾结石单次结石清除率71.70%,结石总清除率为92.45%;平均出血量(125±44.5)mL,术中术后均无输血;无胸膜、腹腔脏器、结肠损伤。结论超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术中患者舒适、安全,可较好耐受手术,结石清除率较高,可同时处理各种异常情况,值得临床推广应用。

环境雌激素影响雄性胎鼠睾丸下降及睾丸引带肌动蛋白表达的实验研究

目的:探讨环境雌激素(EEs)对雄性胎鼠睾丸下降以及睾丸引带肌动蛋白表达的影响。方法:成熟雌性昆明小鼠140只随机分为14组,孕9～17d每天分别给予己烯雌酚、17α雌二醇和17β雌二醇[每种药物分别给予不同剂量25、50、100、200μg/(kg·d)],对照组、正常组分别给予等体积的二甲基亚砜、NS。孕17d处死母鼠后观察雄性胎鼠睾丸下降情况,应用透射电镜观察睾丸引带细胞超微结构,应用免疫组化检测睾丸引带组织中肌动蛋白的表达。结果:EEs可致睾丸发育较差,下降不全,与对照组比差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察发现正常组及对照组睾丸引带细胞内肌丝粗大,密体明显,胞浆中细胞器丰富;实验组睾丸引带细胞内肌丝明显细小,密体不明显,胞浆中细胞器较少,随EEs剂量增大此表现更明显。实验组肌动蛋白含量降低,EEs剂量越大,肌动蛋白含量越低(P<0.05),有显著的剂量效应关系。结论:孕期应用EEs可影响雄性胎鼠睾丸下降、睾丸引带细胞超微结构以及肌动蛋白的表达,这些改变可能是EEs导致多种生殖系统畸形的直接或间接原因。

IHC与FISH检测118例乳腺浸润性导管癌HER-2的对比分析

目的:比较IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的一致性。方法:分别用IHC和FISH对118例乳腺浸润性导管癌HER-2进行检测,比较两者检测结果的相关性。结果:118例浸润性乳腺导管癌标本,IHC检测结果为:14例为(-);20例为(1+),55例为(2+),29例为(3+)。FISH检测结果为:53例为>2.2,64例为<1.8,1例为1.8-2.2。IHC检测HER-2阳性的病例FISH检测中阳性符合率96.6%(28/29),IHC检测HER-2阴性的病例FISH检测均为阴性,符合率100%(34/34)。IHC检测HER-2(2+)的55例患者中有25例经FISH检测证实HER-2阳性,30例呈阴性。FISH检测共发现5例17号染色体多体,其发生率为4.24%。IHC检测到8例乳腺癌HER-2表达存在异质性,异质性在FISH检测中亦得到证实。结论:IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2具有高度一致性,免疫组化HER-2(2+)病例需行FISH检测。