目的探讨敲低核不均一核糖核蛋白H(hnRNP H)对子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞紫杉醇化疗敏感性的影响。方法利用hnRNP H siRNA转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,敲低目的基因表达,通过实时PCR和Western印迹检测(对照组、阴性对照组、siRNA组)hnR...目的探讨敲低核不均一核糖核蛋白H(hnRNP H)对子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞紫杉醇化疗敏感性的影响。方法利用hnRNP H siRNA转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,敲低目的基因表达,通过实时PCR和Western印迹检测(对照组、阴性对照组、siRNA组)hnRNP H mRNA、蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测紫杉醇对Ishikawa细胞存活率的影响,流式细胞仪检测对照组、紫杉醇组、siRNA组及紫杉醇+siRNA组各组细胞凋亡率的变化,Western印迹检测对照组、紫杉醇组、siRNA组及紫杉醇+siRNA组各组细胞凋亡蛋白(Caspase 3/9 Bcl-2、Bax)的表达变化。结果 Real-time PCR和Western印迹检测证实hnRNP H siRNA可有效降低hnRNP H在mRNA及蛋白水平表达。紫杉醇对细胞存活率的影响呈时间及剂量依赖性,流式细胞仪检测:对照组凋亡率3.07%,应用紫杉醇组凋亡率29.16%、沉默hnRNP H组凋亡率34.72%、应用紫杉醇+沉默hnRNP H组凋亡率45.03%;Western印迹检测凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bax在紫杉醇+siRNA组表达显著升高,与对照组、紫杉醇组、siRNA组相比有统计学差异(P<0.05),Bcl-2在紫杉醇+siRNA组表达显著下调,与对照组、紫杉醇组、siRNA组相比较差异显著(P<0.05)。结论应用siRNA沉默子宫内膜癌Ishikawa细胞中hnRNP H的表达,使Ishikawa对紫杉醇化疗敏感性明显增加,促使肿瘤细胞凋亡。HnRNP H可作为子宫内膜癌基因治疗新靶点。展开更多