缺血后处理对缺血／再灌注大鼠心肌基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的:探讨缺血后处理对缺血/再灌注大鼠心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响及其与心肌间质和心功能变化的关系。方法:24只SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(SC组)、缺血/再灌注组(I/R组)和缺血后处理组(IPTC组)。记录各组左室血流动力学变化,观察心肌胶原含量,测定血浆中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度改变。以Western blot测定MMP-2蛋白的活性,以RT-PCR法测定MMP-2 mRNA表达的变化。结果:IPTC组心肌MMP-2蛋白活性及MMP-2 mRNA表达明显降低,而心肌胶原含量、左室舒缩功能明显高于I/R组。同时,血浆SOD活力增强而MDA含量降低。结论:IPTC对I/R心肌的保护作用之一可能是通过减少自由基产生,抑制MMP-2的活性和表达,减轻了心肌间质的损伤而实现的。

NOTCH1信号通路介导白藜芦醇抗肝缺血/再灌注所致大鼠心脏损伤保护作用的机制研究

目的:观察Notchl信号通路在肝缺血/再灌注损伤时对心脏损伤的保护作用并探讨其相关的机制。方法:36只健康雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组(SC组)、肝缺血/再灌注组(HIR组)、白藜芦醇预处理组(Res处理组),每组12只。各组均与肝脏缺血40 min再灌注2 h(SC组旷置相等时间)后,记录左室血流动力学变化,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)浓度,取心肌组织测定SOD活力及MDA含量,Western blot检测心肌组织反应Notch通路活化标志的NICD表达,以RT-PCR法从转录水平检测Notch1和TNF-α的表达水平。结果:与SC比较,HIR组左室收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),血清CK、LDH活力,TNF-α和Ⅱ-6浓度明显升高(P<0.01),心肌MDA含量明显升高而SOD活力明显降低(P<0.01),且Notch1表达下降,TNF-α表达增加;与I/R组相比,Res处理组左室舒缩功能明显升高,血清CK、LDH活力及TNF-α、IL-6浓度明显降低,同时心肌SOD活力明显升高而MDA含量明显降低,Notch1表达上升TNF-α表达降低。结论:白藜芦醇对肝缺血/再灌注大鼠心脏具有保护作用,其机制可能与Notch1信号通路的激活进而调节炎症反应及氧化应激有关。

非创伤性预处理对大鼠缺血心肌保护效应机制的探讨

目的 :探讨非创伤性下肢缺血预处理对大鼠心肌保护效应的机制。方法 :用雄性SD大鼠 36只 ,分对照、缺血再灌注、经典缺血预处理及非创伤性下肢缺血预处理 4组。分别观察以下指标 :血浆一氧化氮 (NO)水平 ;心肌热休克蛋白 70 (HSP70 )mRNA表达 ;心肌 5’ -核苷酸酶 (5’ -NT)及过氧化氢酶 (CAT)活性。结果 :经典及非创伤性下肢缺血预处理后 ,血浆NO水平显著高于缺血再灌注组和对照组 (P <0 0 1) ,心肌HSP 70mRNA表达明显增强 ,心肌 5’ -NT、CAT活性升高 (P <0 0 5 ,vsI/R) ,而经典及非创伤性下肢缺血预处理两组间上述指标无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :非创伤性下肢缺血预处理保护心肌的机制可能与经典缺血预处理相似 ,均是通过提高心肌内源性保护物质NO、HSP70mRNA、CAT及 5’ -NT显示预处理效应。

蛋白激酶C对缺血预处理家兔心肌热休克蛋白70 mRNA的影响

目的 :探讨心肌缺血预处理 (IPC)过程中蛋白激酶 (PKC)对热休克蛋白 (HSP) 70mRNA表达的影响。方法 :在原位及离体家兔心脏缺血再灌注 (I/R)、缺血预处理模型上分别应用PKC抑制剂和激动剂 ,观察对心肌的作用和对心肌HSP70mRNA的表达的影响。结果 :缺血预处理和使用佛波酯 (PMA)使心肌HSP70mRNA的表达、左心功能明显高于I/R组 ,磷脂酶A2 (PLA2 )活性及心律失常发生率明显低于该组 ;而使用多粘菌素B(PMB)则阻断了缺血预处理对心脏的保护作用 ,同时HSP70mRNA表达也明显低于IPC及PMA组。结论 :PKC参与了缺血预处理过程中HSP70表达的调控。

非创伤缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用

目的：确定非创伤性缺血预处理对大鼠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）心肌损伤是否具有对抗作用，以扩展缺血预处理的实际应用。方法：采用非创伤性下肢缺血预处理及经典缺血预处理的动物模型，比较两种处理方法对Ｉ／Ｒ心肌损伤的效应。实验动物分４组：正常对照组（ＮＣ，ｎ＝８），开胸旷置５０ｍｉｎ；缺血／再灌注组（Ｉ／Ｒ，ｎ＝１２），结扎冠脉３０ｍｉｎ，再灌注２０、１８０ｍｉｎ；经典缺血预处理组（Ｃ－ＩＰＣ，ｎ＝１２），按经典Ｍｕｒｙ法复制；非创伤性下肢缺血预处理组（Ｎ－ＷＩＰＣ，ｎ＝１２），捆绑双下肢５ｍｉｎ，松开５ｍｉｎ，反复４次后，阻断冠脉３０ｍｉｎ，再灌２０、１８０ｍｉｎ。以左室功能，心肌梗塞范围，血清肌酸激酶（ＣＫ）及心肌组织丙二醛（ＭＤＡ）含量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性为观察指标。结果：与Ｉ／Ｒ组相比，Ｎ－ＷＩＰＣ组与Ｃ－ＩＰＣ组均显著缩小Ｉ／Ｒ后的心肌梗塞范围（Ｐ＜００１）；明显恢复Ｉ／Ｒ后的左室功能（Ｐ＜００５，００１）；减轻自由基对心肌的损害：血清ＣＫ，心肌ＭＤＡ含量显著降低（Ｐ＜００１）。Ｎ－ＷＩＰＣ组还使心肌ＳＯＤ活性增高（Ｐ＜００５）。结论：非创伤性下肢缺血预处理与经典缺血预处理可诱发同等强度的?

缺血后处理对缺血／再灌注大鼠心肌间质保护效应机制的探讨

目的:观察缺血后处理(IPTC)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)变化的影响,探讨IPTC保护I/R心脏间质的机制。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(SC组)、I/R组和IPTC组。记录各组左室血流动力学变化,观察心肌胶原含量,测定血浆中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)浓度。以Western blot法测定心肌组织中MMP-2和TIMP-2蛋白表达水平,以实时定量PCR(RT-PCR)法检测MMP-2和TIMP-2的表达水平。结果:与SC组相比,I/R组心肌胶原含量和左室舒缩功能明显降低,血浆CK、LDH活力和心肌MMP-2蛋白表达及mRNA水平明显升高,TIMP-2蛋白及mRNA水平明显降低;而IPTC组,大鼠心肌胶原含量和左室舒缩功能明显升高,血浆CK、LDH活力和心肌MMP-2蛋白表达及mRNA水平降低,TIMP-2蛋白及mRNA水平升高。结论:IPTC对再灌注损伤心肌间质有保护作用,其机制可能与抑制心肌中MMP-2表达,促进TIMP-2表达有关。

肾缺血预处理保护缺血再灌注损伤心肌的机制

目的 :探讨心脏外脏器缺血预处理对心肌保护作用的机制。方法 :将动物分为缺血 /再灌注 (I/R)、经典缺血预处理 (CIPC)、肾缺血预处理 (KIPC)及超氧化物歧化酶 +肾缺血预处理 (SOD +KIPC) 4组。比较各组心肌内源性保护物质一氧化氮 (NO)含量、5’ -核苷酸酶 ( 5’ -NT)活性的变化。结果 :肾缺血预处理能明显改善左室功能 ,降低再灌性心律失常发生率及血浆磷脂酶A2 (PLA2 )活性 ,同时使心肌 5’ -NT活性、NO含量明显高于I/R组。而在肾缺血预处理前用超氧化物歧化酶处理则肾缺血预处理的心肌保护作用明显弱于KIPC组 ,与心肌 5’ -NT活性、NO含量下降相一致。结论 :肾缺血预处理对心肌的保护作用可能也与通过调动心肌内源性保护物质的释放有关 ,氧自由基在介导该类物质的释放中起了重要的作用。

载脂蛋白E在ABCA1和ABCG1介导的胆固醇流出中的作用

目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)在ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)介导的胆固醇流出中的作用及可能机制。方法:将RAW 264.7细胞随机分为3组:空白对照组:用单纯培养基培养;低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr-/-)组:用20 mg/L LDLr-/-小鼠脂蛋白处理细胞;ApoE基因敲除(ApoE-/-)组:用20 mg/L ApoE-/-小鼠脂蛋白处理细胞。采用透射电镜和酶法检测细胞内脂质含量,用液闪仪技术检测胆固醇流出变化,用免疫印迹技术和实时定量PCR技术检测ABCA1和ABCG1的表达水平。结果:与对照组相比,LDLr-/-小鼠脂蛋白处理后细胞内脂质含量并未明显改变,而ApoE-/-小鼠脂蛋白处理48 h后,细胞内胆固醇酯增加了60%;同时,与LDLr-/-小鼠脂蛋白处理组相比,用ApoE-/-小鼠脂蛋白处理后,巨噬细胞胆固醇流出至载脂蛋白A-I(ApoA-I)和高密度脂蛋白(HDL)的量均明显降低。与对照组相比,LDLr-/-小鼠脂蛋白和ApoE-/-小鼠脂蛋白处理显著增加ABCA1和ABCG1的蛋白和mRNA水平,但是ApoE-/-小鼠脂蛋白对ABCA1和ABCG1蛋白和mRNA水平的诱导程度明显低于LDLr-/-小鼠脂蛋白。结论:ApoE在介导巨噬细胞胆固醇流出中发挥重要作用,该作用与其调节ABCA1和ABCG1的表达水平有关。

当归对大鼠心肌梗死后早期左室重构的实验研究

目的:观察巨噬细胞、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)在大鼠心梗后早期左室重构过程中的变化及当归的治疗作用,探讨干预机制。方法:结扎SD大鼠冠脉前降支制备心梗模型,随机分为假手术组(sham组),心梗组(MI组)和心梗当归组(MI+Angelica组)。术后24h开始给药,MI+Angelica组腹腔注射当归2mL/(100g.d),sham组和MI组腹腔注射等量生理盐水。于术后1W、2W、4W记录左室血流动力学变化,测定血浆中MDA和SOD浓度改变,并检测非梗死区心肌胶原及巨噬细胞的变化(免疫组化法)。结果:①与sham组相比,MI组和MI+Angelica组非梗死区心肌巨噬细胞阳性表达率显著升高(P<0.01),以1W的阳性表达率为最高,但MI+Angelica组低于MI组(P<0.01);②与sham组相比,MI组和MI+Angelica组术后各时间点血浆中MDA浓度升高,SOD浓度降低(P<0.01),但MI+Angelica组MDA低于MI组,SOD高于MI组,4W时有统计学意义(P<0.05);③术后各时间点MI组心功能受损,于术后4W心肌胶原容积分数(CVF)及血管周围胶原面积(PVCA)明显升高(P<0.01);与MI组比较,术后4W MI+Angelica组心功能改善,CVF及PVCA降低(P<0.05)。结论:当归可能通过清除体内自由基、增强机体的抗氧化能力、抑制巨噬细胞在非梗死区的浸润和聚积,阻断促左室肥厚和反应性纤维化发生等环节,防治和逆转左室重构。

缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响，以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只，分３ 组，每组８ 只，即假手术对照（ＳＣ）组；缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化，多道记录仪测量心功能指标，透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ，心肌超微结构损伤严重，左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时，心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ，Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上，而且对心肌间质也有重要的保护作用。

缺血后处理对缺血再灌注大鼠心肌间质的保护作用

目的:探讨缺血后处理对缺血再灌注大鼠心肌间质的保护作用及与心功能的关系。方法:24只SD大鼠随机分为3组,假手术组(SC组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血后处理组(IPTC组)。观察各组心肌羟脯氨酸含量和胶原纤维含量,记录左室血流动力学变化、测定血浆中MDA和SOD浓度改变及观察心肌超微结构变化。结果:IPTC组心肌羟脯氨酸含量、胶原纤维含量、左室舒缩功能明显高于I/R组,心脏超微结构损伤明显减轻。同时,血浆SOD活力增强而MDA含量降低。结论:IPTC对I/R大鼠心肌间质有明显的保护作用,且与心功能的保护相关。其机制可能是通过清除体内自由基、增强机体的抗氧化能力、减少心肌胶原的降解,维持左室结构而起到改善心功能的作用。

牛磺酸对大鼠实验性呼吸窘迫综合征脂质过氧化的影响

用牛磺酸防治油酸引起的大鼠实验性呼吸窘迫综合征。观察牛磺酸对肺系数、血浆ＭＤＡ、肺组织ＭＤＡ、ＳＯＤ及病理学改变等的影响。结果表明：牛磺酸可使肺系数减少，血浆肺组织ＭＤＡ含量降低（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ活性受到保护，肺组织病变减轻。提示：牛磺酸减轻肺损伤的作用与抗脂质过氧化有关。

缺血后处理对缺血再灌注大鼠心肌MMP-2表达及NO含量的影响

目的:观察缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌MMP-2及一氧化氮的影响,探讨缺血后处理保护心肌间质的分子机制。方法:24只SD大鼠随机分为3组,假手术组(SC组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血后处理组(IPTC组)。记录各组左室血流动力学变化,观察心肌胶原含量,测定血浆一氧化氮(nitric oxide,NO)、肿瘤坏死因子-α(necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(intefliukine-6,IL-6)浓度改变。以RT-PCR法测定心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果:与对照组相比,I/R组血浆TNF-α、IL-6明显升高,NO降低,心肌MMP-2表达明显增多,而心肌胶原含量降低、左室舒缩功能明显受损。IPTC组在血浆TNF-α和IL-6浓度明显降低,NO明显升高的同时,心肌MMP-2表达明显降低,而心肌胶原含量、左室舒缩功能明显高于I/R组。结论:IPTC对心肌的保护作用之一可能是通过NO增多,减少炎性介质的释放,抑制MMP-2的表达,减轻心肌间质的损伤而实现的。

非创伤性下肢缺血预处理琥珀酸脱氢酶电镜细胞化学的变化

目的：通过琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ） 电镜细胞化学的变化，探讨非创伤性下肢缺血预处理的心肌保护效应。方法：实验采用体重２５０ ±３０ｇ ，雄性ＳＤ 大鼠２４ 只，分４ 组，每组６ 只，即正常对照组（ Ⅰ组） ；缺血再灌注组（ Ⅱ组） ；经典缺血预处理组（ Ⅲ组） ；非创伤性下肢缺血预处理组（ Ⅳ组） 。按Ｎｉｔｒｏ － ＢＴ 法显色制作ＳＤＨ 光镜标本，按小川的亚铁氰化铜法制作电镜标本。光镜观察ＳＤＨ 活性参照Ｎｉｌｅｓ 法分为４级。结果：Ⅰ组ＳＤＨ 活性和心肌结构相对正常；Ⅱ组ＳＤＨ 活性降低明显，线粒体损伤严重；Ⅳ组近于Ⅰ组；Ⅲ组界于Ⅰ组、Ⅳ组之间。结论：非创伤性下肢缺血预处理具有与经典缺血预处理相类似的抗心肌缺血再灌注损伤的效应。

改革教学方法 培养创新能力

文章从改革教学方法入手 ,分析研究并提出了培养学生创新意识、创新精神及创新能力的基本途径和方法。

非创伤性下肢缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌脂质过氧化的保护作用

采用非创伤性下肢缺血预处理（Ｎ－ＷＩＰＣ）动物模型，研究了Ｎ－ＷＩＰＣ对大鼠心肌缺血再灌注损伤及脂质过氧化的保护效应。结果显示，Ｎ－ＷＩＰＣ可明显减少心肌组织内肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）的漏出，提高心肌组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性，降低脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量。表明非创伤性下肢缺血预处理具有抗心肌缺血再灌注损伤及脂质过氧化的作用，其机制可能是通过提高内源性心肌保护物质的水平而起作用。

Dobutamine预处理对离体大鼠缺血/再灌注心肌的保护作用

为观察ｄｏｂｕｔａｍｉｎｅ（ＤＢ）预处理是否对缺血／再灌注心肌具有保护作用，２０只大白鼠随机分为两组：Ⅰ组全心缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ；Ⅱ组在３０ｍｉｎ缺血前用１０－６Ｍ·ＬＤＢ灌注５ｍｉｎ，随后用正常Ｋ－Ｈ液冲洗１０ｍｉｎ。结果显示：ＤＢ预处理组再灌注期间心率及冠脉回流量增加；再灌性心律失常发生率显著降低；心肌匀浆ＭＤＡ降低ＳＯＤ活性升高；心肌质膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ活性增高。表明：短时间ＤＢ预处理可以防止缺血／再灌注对心肌的损害。

药物预处理对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

为观察药物预处理对缺血再灌注所致心肌损伤是否有保护作用，离体大鼠心脏在30min全心缺血和30min再灌注前用10（-7）M／L去甲肾上腺素和1mg／L苯肾上腺素灌注5min，随后用正常K—H液冲洗10min。结果发现，去甲肾上腺素和苯肾上腺素预处理可以1）显著降低再灌注性心律失常发生率；2）增加再灌注期间的心率和冠脉回流量；3）减少心肌细胞内CK和LDH的漏出以及抑制心肌MDA含量的升高。结果表明，去甲肾上腺素和苯肾上腺素预处理对缺血——再灌注损伤心肌有保护作用。其机制可能和它们与α—肾上腺素能受体结合，激活PKC环节有关。

PI3K/Akt信号通路在白藜芦醇抗大鼠缺血/再灌注性心律失常中的作用及机制

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在白藜芦醇抗缺血/再灌注性心律失常中的作用及机制。方法:48只健康雄性SD大鼠,取心电图正常者随机分为4组(n=10):假手术(SC组)组、缺血/再灌注(I/R组)组、白藜芦醇处理(Res处理组)组、PI3K抑制剂LY294002(LY294002组)组。建立大鼠在体心肌缺血/再灌注模型,观察各组心律失常的发生情况及左室血流动力学变化,Western blot法测定心肌组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、缝隙连接蛋白43(Cx43)蛋白表达水平,以RT-PCR法从转录水平检测Cx43的表达水平。结果:与I/R组相比,Res处理组心律失常的发生率(心律失常评分)明显降低、左室舒缩功能明显升高,同时心肌Akt、Cx43蛋白表达及Cx43m RNA水平也明显升高;使用PI3K抑制剂LY294002后,心肌Akt、Cx43蛋白表达及Cx43m RNA水平下降的同时心律失常的发生率明显升高、左室舒缩功能明显降低。结论:白藜芦醇的抗再灌注性心律失常作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,改变Cx43活性及分布实现的。