芥蓝新种质创制及其在育种上的应用

采用常规杂交方法,以芥蓝为母本,以甘蓝种的不同变种为父本进行杂交,从F2中选择优良单株,经回交和多代连续自交,最终创制出紫色性状(肉质茎、叶片、叶脉、花蕾)、蜡粉性状(无蜡粉肉质茎、无蜡粉叶片)、肉质茎形状(短纺锤形、柱形)、侧薹性状(早发、多发、颜色紫色或绿色)以及花瓣颜色(浅黄色)等不同类型的芥蓝新种质。应用这些材料成功选育出京紫1号、京紫2号、京紫3号、21M2芥蓝和22M4芥蓝等芥蓝新品种。研究结果为芥蓝种质资源创制提供了科学依据,为芥蓝新品种选育奠定了基础。

芥蓝游离小孢子培养技术优化及其在育种中的应用

以16个芥蓝品种(F1)为供体材料,比较分析了优化花蕾的消毒、小孢子的游离释放以及过滤等环节对芥蓝游离小孢子培养效果的影响。结果表明,16份参试芥蓝供体材料都具有胚胎发生能力,并全部获得了不同类型的再生植株,实现了较大规模、批量地获得芥蓝双单倍体(DH)。经田间综合评价筛选,应用DH系育成了不同熟性的芥蓝一代杂种20M4芥蓝、21M2芥蓝和22M11芥蓝。

大白菜莲座叶大叶夹角和多分蘖材料的创制及其应用

为加快小株型、适合高密度种植的大白菜品种和多分蘖的不结球白菜、菜薹品种选育,进而改良大白菜种植模式,提高大白菜产量和品质,以大白菜、菜心、红菜薹为材料,采用常规杂交方法进行三亲本杂交,以期创制新的种质材料;同时,以创制的大白菜21M-193为亲本和大白菜白阳杂交,构建6世代遗传群体,研究大白菜莲座叶叶夹角和分蘖的遗传和应用。结果表明:多亲本间杂交创制的大白菜材料21M-193具有大叶夹角和多分蘖的特性。经测量,21M-193平均叶夹角度数为82.7°,白阳平均叶夹角度数为30.5°,两者杂交F_(1)代平均叶夹角度数为40.7°,偏向于白阳,表现为小叶夹角表型。F2代单株叶夹角则呈现正态分布,小于10°和大于84°的极端个体很少,30°~50°的中间类型占绝大多数,其分离比例不符合孟德尔遗传规律,推测大白菜莲座叶叶夹角遗传是由多基因控制的数量性状。此外,调查发现21M-193分蘖数达到28个/株,白阳分蘖数为7个/株,其F_(1)代分蘖数为18个/株,居于中间,偏向于21M-193。研究结果不仅创制了大叶夹角和多分蘖的大白菜新种质,而且初步揭示了大白菜叶夹角和分蘖性状的遗传规律,还为这两个重要农艺性状的基因定位与分子辅助育种提供了宝贵的材料和数据支持,对推动大白菜品种改良及高产、优质栽培模式创新具有重要意义。

胶体金试纸法与化学发光免疫法检测全分子HCG分析

目的通过观察胶体金试纸法与化学发光免疫法在检测全分子人绒毛膜促性腺激素(HCG)的具体效果,比较二者的异同点,分析优缺点,为在不同情况下得到更有效的检测结果提供依据。方法以2011年1月至2011年12月收治的病人或孕妇188例通过抽血采样作为标本,分别采用胶体金试纸法和化学发光免疫法对标本进行测定,对比检测结果,分析二者有效性和异同。结果采用胶体金试纸法检测,188例标本中,无效2例,阴性62例,弱阳性23例,阳性40例,强阳性61例,其中经化学发光免疫法检测证实,62例阴性标本中有9例为假阴性;采用化学发光免疫法检测,其线性范围为0.02～800IU/L,有效检测出全部188例标本。胶体金试纸法更便捷、易操作,化学发光免疫法更精确、灵敏,特异强。结论胶体金试纸法不需仪器设备即可使用,已经取得广泛的临床应用,而化学发光免疫法在HCG检测上则更为灵活、准确,特别是在胶体金试纸法检测结果的基础上,采用化学发光免疫法一方面可以减少实验次数和试剂使用量,节约时间和成本,另一方面还可以获得高精确度的监测结果。

化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的对比研究

目的探讨化学发光免疫法(CLIA)较放射免疫法(RIA)在检测血清甲胎蛋白(AFP)中的临床优势和效果。方法 120例样本血清均来源于门诊及住院的临床患者,采用GC-911-γ-放射免疫计数仪和LIAISON全自动化学发光仪检测血清AFP,分别进行回收实验、线性实验、对比实验、精密度实验。结果 CLIA呈较好的回收率和线性关系;对比实验直线回归方程,相关系数r=0.995,两种检测方法经比较无显著差异(P>0.05);分别对低、中、高值的精密实验,显示CLIA重复性较好。结论检测AFP,CLIA较RIA有相似的特异性及敏感性,且CLIA具有更好的准确性、精密度和安全性。

肝细胞肝癌肿瘤标志物研究进展

肝细胞肝癌是临床常见的恶性肿瘤,具有很高的病死率。临床上通过对肝细胞肝癌的血清肿瘤标志物进行检测,可以对肝细胞肝癌进行早期的诊断、对肝细胞肝癌的复发进行监测、对肝细胞肝癌的预后进行评估。笔者综合分析多位专家对肝细胞肝癌血清肿瘤标志物的研究观点,综述目肝细胞肝癌肿瘤标志物的研究进展。

甲状腺功能亢进患者血清胰岛素、C-肽的检测及意义

目的探讨甲状腺功能亢进(甲亢)患者糖代谢紊乱的机制。方法甲亢患者64例(糖耐量试验正常组、异常组各32例),用生化分析仪测定血清的血糖、胰岛素、C-肽的浓度,并以同期正常体检者40例做对照。结果空腹时3,组血糖、胰岛素浓度无明显差异I,GR组患者口服葡萄糖1 h、2 h、3 h后血糖、胰岛素浓度明显增高,较对照组及NGR组差异有统计学意义(P<0.05);空腹及口服葡萄糖1 h2、h3、h后I,GR组患者C-肽水平均显著升高,较对照组及NGR组差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲亢患者存在葡萄糖耐量减低,C-肽分泌增加并延迟,是诱发糖代谢紊乱的主要因素。

艾滋病患者在消化科就诊所进行的血液学检验异常分析

目的探讨艾滋病患者的血液分析特点。方法收集于2006年3月至2013年2月在本院消化科住院的20例AIDS患者的血液,与在这段时间住院的35例非AIDS/HIV感染者的血液,将两组血液进行统计学分析,比较两组数据在血液学中的差异。结果 AIDS患者血常规中的淋巴细胞比率、红细胞总数和血红蛋白相较于非AIDS/HIV感染者都有普遍的下降,并且该差异具有统计学意义(P<0.05);血生化检测中乳酸脱氢酶(LDH)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)都有不同程度的升高,该差异具有统计学意义(P<0.05),胆碱酯酶(CHE)、清蛋白(Alb)的含量及清蛋白/球蛋白比(A/G)都升高,该差异具有统计学意义(P<0.05),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的平均值相较于非AIDS/HIV感染者都有普遍的升高,但AST、TB、ALT的异常比率同对照组之间的差异没有统计学意义(P>0.05),血清游离T3(FT3)下降在甲状腺功能异常中最为常见,该差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 AIDS患者在消化科就诊时,通过对其进行血液学分析通会出现肝脏功能、贫血和内分泌功能紊乱,并且提示机会性感染的存在。

不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价

目的探讨不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的一致性。方法 90例采用电化学发光法(ECLIA)证实的乙型肝炎病毒(HBV)感染患者和45例体检健康者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、时间分辨免疫荧光法(TRFIA)和电化学发光法(ECLIA)3种方法对所有135例血清进行乙型肝炎标志物的检测。结果 ELISA、TRFIA和ECLIA3种方法对血清乙型肝炎标志物的检测结果具有高度一致性,并且3种方法比较,ECLIA法的敏感性最高。结论目前实验室中所使用的血清乙型肝炎标志物的检测方法具有较高的一致性,可以用于实验室之间的相互确认试验。

ELISA法检测HIV抗体的影响因素和控制措施

目的:探讨ELISA法检测HIV抗体的影响因素和控制措施,以提高实验检测结果的准确性。方法:按照中国疾病预防控制中心在2009年修订的《全国艾滋病检测技术规范》要求,从试剂的准备、标本因素及检测过程中操作等因素进行分析,并采取相应的控制措施。结果:试剂的正确选择和准备、标本的正确采集及处理、规范的实验操作可有效地预防出现假阳性及假阴性偏差。结论:对于ELISA法检测HIV抗体,需要选择灵敏度及特异性均较高的试剂,严格注意操作注意事项,可有效的提高结果的准确性。

LIAISON全自动化学免疫发光仪检测尿微量清蛋白稀释规律探究

目的通过实验研究探讨Liaison全自动化学免疫发光仪在尿微量清蛋白的检测中的作用和稀释规律,为更深入的临床研究与确诊提供科学依据。方法选取北海市第二人民医院糖尿病肾病患者共60例,取22:00至次日06:00间的全部尿液,行尿清蛋白粗测,再进行稀释,采用Liaison全自动化学免疫发光仪检测,根据公式计算蛋白排泄率(UAER),与临床诊断结果比较。结果将粗测结果为不同程度尿清蛋白的60例标本按照稀释表规律进行稀释和检测计算,结果58例UAER结果值大于200μg/min,一次性完成检测,检出率96.67%;另2例UAER结果值在20～200μg/min之间。结论化学免疫检测具有可靠、快速、创新性等优势,根据稀释比例行Li-aison全自动化学免疫发光检测的检出率相对较高,推荐临床可采用该稀释比例来进行尿液检测。

两种方法检测HBeAb、HBcAb弱阴性标本分析

目的通过观察酶联免疫吸附试验法(ELISA)与时间分辨法(TRFIA)在检测乙型肝炎e抗体(HBeAb)和乙型肝炎核心抗体(HBcAb)的具体效果,比较二者的符合率,为得到更有效的检测结果提供方法学上的依据。方法以我院2011年1月至2011年12月收治的乙型肝炎感染患者856例,通过抽血采样作为标本,采用ELISA法对HBeAb和HBcAb的OD值及COV值相近的标本进行筛选分组,再通过TRFIA法对筛选出标本进行检测,计算两种方法下检测的符合率。结果采用ELISA法,对HBeAb进行检测,阳性组符合率为100%,弱阳性组符合率为97.6%,阴性组符合率为97.3%,弱阴性组符合率为85.2%;对HBcAb进行检测,阳性组符合率为100%,弱阳性组符合率为97.4%,阴性组符合率为97.2%,弱阴性组符合率为83.5%。两种方法对于HBeAb和HBcAb在阳性组、弱阳性组、阴性组的检测差异均不具有显著性,无统计学意义(P>0.05),对于HBeAb和HBcAb在弱阴性组的检测差异具有显著性,有统计学意义(P<0.05)。讨论ELISA法检测乙型肝炎抗体,应严格注意OD值与COV值相差不大的标本,尤其是弱阴性标本,如无法确定,应采用TRFIA法进行复查,以便保证检测结果的准确性。

湖北省长阳县十字花科蔬菜根肿病菌生理小种鉴定及抗源筛选

采用Williams鉴别系统对采集自湖北省长阳县的高山大白菜、甘蓝、萝卜根肿病菌进行生理小种鉴定,发现侵染湖北省长阳县高山十字花科蔬菜的根肿病菌致病力强,为4号生理小种。用此根肿病菌对44个大白菜品种和46个大白菜自交系进行苗期接种鉴定,筛选出4个抗病品种和14个抗病自交系。

新型紫色大白菜15NG28后代的鉴别及其转录组分析

为拓宽新的紫色材料资源,选育出属于中国的紫色大白菜品种,以新型紫色材料15NG28及其杂交F1、回交一代BC1F1、自交后代等为材料,研究其植物学性状、叶片的花青苷分布、基因组倍性和染色体数、基于转录组测序的差异表达基因等。结果表明,紫色材料15NG28与大白菜可以进行常规杂交,并获得F1种子,F1植株叶片颜色表现为紫色和绿色2类。在幼苗期和成株期,15NG28与紫色F1植株子叶和真叶的正反面、叶脉均表现为紫色,紫色F1叶柄正反面也表现为深紫色,但15NG28叶柄的正面为紫色,反面为绿色。同时,F1植株的基因组倍性和染色体数也不同,倍性表现为3n、4n和6n等,染色体数为24,28,36条等。其中16M-170-21叶片性状偏向于芥菜型,自交结实性好,自交后代植株表现出差异明显的性状,而16M-170-22叶片性状偏向于白菜型,在其BC1F1中31株全部表现为白菜性状,紫色与绿色植株的分离比例为14∶17,且14株紫色植株的自交结实性状好。紫色与绿色植株转录组测序结果表明,紫色植株的类黄酮、黄酮、黄酮醇和花青素合成途径的12个基因表达量均明显上调,其中2个结构基因无色花青素双加氧酶Bra013652(LDOX)和二氢黄酮醇还原酶Bra027457(DFR)表达量在紫色植株中最高,该结论不同于在紫色白菜中已报道的R2R3-MYB转录因子c3563g1i2。因此,初步认为15NG28及其后代可能为新的紫色大白菜资源,15NG28可能来源于芥菜。

控制白菜叶片紫色的pur基因初步定位

为了定位控制白菜叶片紫色的pur基因,选用大白菜自交系09-680和紫色小白菜09N-742进行杂交构建了一个由307个单株组成的F2群体,采用群体分离分析法(Bulked segregant analysis,BSA)构建紫色和绿色池,对分布在白菜基因组10个连锁群上的125个InDel标记和100个SSR标记进行多态筛选,其中位于A3连锁群末端的2个In-Del标记BrID10999和BrID10399与紫色性状表现连锁。连锁分析发现,2个标记与pur基因的遗传距离分别为7.3,5.7 cM,位于pur基因的同侧。在此基础上,根据这些标记所在区域的BAC序列设计了23对SSR引物,其中来源于KBrH005P10的SSR标记BVRCP10-6位于pur基因的另一侧,距离pur基因仅1.9 cM。这些标记可有效用于白菜紫色性状的分子标记辅助育种,也为进一步精细定位和克隆pur基因奠定了基础。

早熟青麻叶大白菜新品种京翠60号的选育

京翠60号为早熟青麻叶大白菜一代杂种,是利用游离小孢子培养结合人工接种抗病性鉴定技术育成的新品种。成熟期60～65d(天),株型较直立,株高58cm,开展度65cm,叶形长倒卵形,叶色深绿,叶面多皱,绿帮;叶球长筒形,拧抱,叶球颜色绿,叶球内叶颜色浅黄;叶球高40cm,叶球直径13cm,叶球质量2.0～2.4kg,品质优,高抗病毒病,抗霜霉病和黑腐病。平均每667m2净菜产量4500kg左右,适合北京、河北、内蒙古、辽宁、吉林、云南、贵州、广西等地区种植,目前累计推广面积达1000hm2。

菜薹(菜心)亲本材料的创制及新品种18A1菜心的选育

为了拓宽菜薹(菜心)种质资源,筛选优良亲本材料,进而选育菜心雄性不育系杂交种,本试验利用菜心与大白菜亚种间杂交、菜心与芥菜种间杂交及自然突变体筛选等3种途径,创制和鉴定优良的菜心育种材料,并广泛转育菜心CMS96细胞质不育系和配制CMS96细胞质不育系组合。结果表明,菜心与大白菜杂交、菜心与芥菜杂交及自然突变体筛选等方法是创制菜心种质资源的有效途径。利用亚种间杂交,获得菜心CMS96细胞质不育系、菜心瓣化型萝卜胞质Ogu CMS,叶片深紫色菜心,叶片塌地菜心;利用种间杂交,获得圆叶锯齿菜心,叶色翠绿菜心和叶片浅紫色菜心;基于自然突变,筛选到橘红色花菜心,乳白色花菜心和隐性核雄性不育系突变体。同时,以菜心细胞质不育系CMS96.农家菜心8与新西兰50天自交系杂交,成功选育出菜心新品种18A1菜心,中熟,叶色深绿,菜薹油绿,臺质脆嫩,口感好,适合广州等南方地区秋冬季和菜场基地种植。

春大白菜新品种京春黄2号的选育

京春黄2号是由两个自交不亲和系0142和07229配制而成的春大白菜一代杂种。定植后60d(天)收获。耐抽薹性强,抗霜霉病,高抗芜菁花叶病毒(Tu MV)和黑腐病。叶球合抱,球高28.1cm,球横径16.2cm,球内叶黄色,单球质量2.5kg,一般每667m2净菜产量7000kg左右。适宜北京、河北、甘肃、云南、湖北等地种植。

白菜类蔬菜杂交一代种子生产的新问题

近几年在大白菜、普通白菜（小油菜）商品种子生产中出现了一些新问题，如落地种子、植物生长调节剂残留、农药对蜜蜂的伤害等等，如何解决？

基于SSR分子标记的芥蓝遗传多样性分析

芥蓝的研究多集中在分类、常规种资源遗传多样性等方面。随着芥蓝杂交种的问世,杂交种的优势越来越突出,市场效果明显,因此,对芥蓝自交系的遗传多样性等研究尤为重要。选取分布在甘蓝9条染色体上的55对SSR引物,从中筛选出多态性好、分布均匀的15条SSR引物对98份芥蓝自交系进行分析,共得到65个多态性带型。采用UPGMA方法构建了一张聚类图,在相似系数为0.71时,将98份芥蓝自交系初步分为1,2,3,4,5组。研究结果为芥蓝育种中的亲本选配、杂交种鉴定和资源保护等提供了依据。在试配芥蓝新组合时,应选择遗传距离较远的自交系作为重点材料,后代的杂种优势会更显著。