miR-155-5p通过调控心肌细胞焦亡对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响及机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-155-5p对心肌缺血-再灌注损伤(IRI)大鼠心肌细胞焦亡的影响及机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术(sham)组、IRI组、agomir-NC组、miR-155-5p agomir组、antagomir-NC组和miR-155-5p antagomir组,每组10只。采用超声心动图仪测定大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平,心肌组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;苏木素-伊红染色观察大鼠心肌组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠心肌组织miR-155-5p和沉默信息调节因子1(SIRT1)信使RNA(mRNA)表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-155-5p与SIRT1的靶向关系;蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织SIRT1、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Cleaved Caspase-1)和GSDMD蛋白表达水平。结果与sham组比较,IRI组大鼠LVEDD和LVESD升高,LVEF和LVFS降低,血清CK-MB、LDH和cTnT水平升高,心肌组织IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高,心肌组织结构破坏严重,心肌纤维排列紊乱,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高,SIRT1蛋白相对表达量降低(均为P<0.05/5)。与IRI组比较,miR-155-5p agomir组大鼠LVEDD和LVESD升高,LVEF和LVFS降低,血清CK-MB、LDH和cTnT水平升高,心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高,心肌组织病变程度加重,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高,SIRT1蛋白相对表达量降低;miR-155-5pantagomir组大鼠LVEDD和LVESD降低,LVEF和LVFS升高,血清CK-MB、LDH和cTnT水平降低,心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平降低,心肌组织病变程度减轻,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量下降,SIRT1蛋白相对表达量升高(均为P<0.05/5)。miR-155-5p与SIRT1在大鼠心肌组织中的表达水平呈负相关,且SIRT1是miR-155-5p的靶基因。结论miR-155-5p可能通过靶向下调SIRT1促进NLRP3介导的心肌细胞焦亡参与调节大鼠心肌IRI。

参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫调节作用研究

目的:探讨参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征(CFS)脾肾阳虚证模型大鼠的影响以及免疫调节作用。方法:将50只无特定病原体(SPF)级健康雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,参杞强精颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组,采用游泳力竭实验造成大鼠体力疲劳,慢性束缚应激造成大鼠心理疲劳,同时给予番泻叶煎煮液灌胃造成脾肾阳虚证候,构建CFS脾肾阳虚证大鼠模型,造模成功后分别按照各组剂量灌胃,连续给药21 d后,测定各组大鼠的胸腺和脾脏指数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)浓度以及细胞因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞法检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布情况。结果:行为学结果显示,模型大鼠的体质量增长缓慢,精神萎靡,摄食水量减少,活动减少,便质稀软,力竭游泳时间减少,悬尾静止时间增加。药物干预后,与模型组比较,各给药组大鼠精神状态、体质量、摄食水量均显著改善,力竭游泳时间增加、悬尾静止时间减少(P<0.01或P<0.05);参杞强精颗粒各剂量组能显著提升大鼠胸腺和脾脏指数,提高IgG、Ig M、IgA浓度和IL-2、IL-6、IFN-γ的含量,显著提高脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,也能提高CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率和CD4+/CD8+T比值,降低CD8+T淋巴细胞百分率,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:参杞强精颗粒能显著改善慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫功能,缓解疲劳症状,且具有很好的免疫调节作用。

参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤的作用

目的探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H_(2)O_(2)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用。方法以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500µmol/L H_(2)O_(2)诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒(0.4、0.8和1.6mg/mL)干预处理24h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性;同时检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(TAOC)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达。结果参杞强精颗粒在浓度为0.05~2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量(P<0.05)。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量(P<0.05)。结论参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关。

瑞舒伐他汀临床应用及不良反应的研究进展

瑞舒伐他汀是一种选择性HMG-CoA还原酶抑制剂,属于第三代他汀类药物,能有效调节血脂水平,改善血管内皮功能,具有稳定斑块、抗氧化、抗炎等非调脂作用。因其选择性高、肝脏负担小、不良反应少等优点,广泛应用于高脂血症、高胆固醇血症及动脉硬化症等相关疾病的治疗中。然而,随着瑞舒伐他汀的广泛使用,其肝毒性、肌毒性等不良反应也引起了人们的关注。因此,该文就瑞舒伐他汀的药理作用、临床应用及不良反应进行综述,旨在为瑞舒伐他汀临床合理应用提供参考依据。

HBV对IFN-α受体表达及IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对干扰素α(IFN-α)受体表达的影响,以及对IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响。方法以HepG2.2.15细胞、HepG2细胞及LO2细胞为细胞模型,采用流式细胞术、Western-blot检测IFN-αR1和IFN-αR2受体的表达;采用Western-blot动态分析IFN-α2b刺激肝细胞核蛋白STAT1的活化;流式细胞术检测IFN-α2b刺激肝细胞MHC-Ⅰ的水平。结果流式细胞术、Western-blot法检测结果显示,HepG2和LO2细胞中IFN-αR1和IFN-αR2受体及蛋白表达均显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,HepG2、LO2细胞中核蛋白p-STAT1的表达显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,MHC-Ⅰ水平在HepG2、LO2细胞中的表达较HepG2.2.15细胞更高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV的持续存在可降低IFN-αR1和IFN-αR2表达,并降低IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性,推测其可能是导致HBV对IFN-α产生耐药的部分机制。

葫芦茶苷对四氯化碳致肝纤维化模型小鼠的保护作用及机制研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化模型小鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法:将昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(阳性对照,0.2 mg/kg)和葫芦茶苷低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg),每组10只。除正常组小鼠腹腔注射橄榄油外,其余各组小鼠均腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液(5 m L/kg)以复制肝纤维化模型,每周2次,连续8周。自第3周起,各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均灌胃等体积2%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次,连续6周。采用酶联免疫吸附测定法检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、白细胞介素6(IL-6)的含量;采用分光光度法、逆转录-聚合酶链反应法、Western blotting法分别检测其肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2 mRNA以及基质金属酶2(MMP-2)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 m RNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达水平均显著升高,SOD、GSH-Px含量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达水平均显著降低,SOD、GSH-Px含量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对肝纤维化模型小鼠具有肝保护和肝纤维化抑制的作用,其机制可能与抑制脂质过氧化和胶原蛋白合成,下调Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达等有关。

葫芦茶苷对肝损伤大鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响及保肝作用研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg·kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药14 d,正常组与模型组每天灌服等体积的生理盐水,末次灌胃给药1 h后,除空白对照组外,皮下注射CCl4原液建立急性肝损伤大鼠模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-氨基酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL);检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)的含量,并检测肝组织Caspase-3,Caspase-8活性。结果:与模型组比较,葫芦茶苷能降低血清ALT,AST,LDH,γ-GT活性及TBA和TBIL含量(P<0.05或P<0.01),升高血清CHE含量;降低肝微粒体NO含量和MDA含量,增加肝组织SOD,GSH-PX活性和GSH含量,并降低肝组织Caspase-3,Caspase-8的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对四氯化碳致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用以及下调Caspase-3和Caspase-8的活性有关。

万古霉素血药浓度的影响因素分析

目的分析影响万古霉素血药浓度的因素。方法对2013年1月—2016年4月的150个万古霉素血药浓度监测的患者进行回顾性分析,探讨影响血药浓度的危险因素。结果万古霉素血药浓度与年龄、肾功能、肝功能和用法用量是否合理和外周水肿存在显著相关性;而性别、营养状况、白蛋白和基础疾病并不会对其造成明显的影响。结论使用万古霉素应根据患者肾功能拟定给药剂量,老年、肾功能减退、肝功能不全的患者及存在外周水肿的患者使用万古霉素宜常规监测血药浓度;中青年患者且肌酐清除率为110m L/min以上时,可以考虑适当增加给药剂量。

木棉花总黄酮对CCl_4致肝纤维大鼠ColⅠ表达的影响

目的研究木棉花总黄酮(TFG)对CCl4致肝纤维大鼠Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法采用50%CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组(模型组),秋水仙碱阳性对照组(阳性组),木棉花总黄酮高、中、低剂量组,另外设空白组,空白组和模型组给予等剂量的生理盐水,每日灌胃给药1次,连续4周。末次给药24 h后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中ColⅠmRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织ColⅠ蛋白质的表达,运用实时荧光定量PCR方法对肝组织ColⅠmRNA表达进行相对定量。结果 RT-PCR和实时荧光定量PCR结果均表明TFG能显著下调ColⅠmRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。免疫组化结果显示,TFG能显著降低肝组织ColⅠ蛋白质的表达(P<0.05,P<0.01),且表现一定的剂量依赖性。结论 TFG对CCl4诱导的肝纤维大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其下调ColⅠmRNA及蛋白表达有关。

葫芦茶乙醇提取物对肝损伤小鼠的保护作用

目的研究葫芦茶乙醇提取物(TTOE)对四氯化碳(CCl4)诱导肝损伤小鼠的保护作用。方法将昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、联苯双酯滴丸组和葫芦茶乙醇提取物小、中、大剂量组,除正常对照组外。其他各组建立化学性肝损伤模型,观察肝脏指数,脾脏指数和胸腺指数,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)活性,血清清蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC),检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并测定还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)及肝微粒体细胞色素P450(Cyt P450)含量。结果与模型对照组比较,葫芦茶乙醇提取物各剂量组肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数降低,其中葫芦茶乙醇提取物大剂量组分别为57.13±0.71,32.44±0.24,27.78±0.16,与对照组比较均差异有统计学意义(P<0.01);葫芦茶乙醇提取物各剂量组血清ALT、AST、LDH和ALP活性均显著降低,其中葫芦茶乙醇提取物大剂量组分别为65.59±8.23,141.38±15.52,2 462.4±253.6,172.51±20.64,与对照组比较均差异有统计学意义(P<0.01);葫芦茶乙醇提取物各剂量组血清Alb含量及T-AOC水平升高肝微粒体NO含量和MDA含量降低,肝组织SOD、GSH-PX活性、GSH含量及Cyt P450含量增加(P<0.05或P<0.01)。结论 TTOE对CCl4所致肝损伤小鼠具有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、降低肝微粒体NO含量和抑制脂质过氧化作用有关。

葫芦茶苷体内抗鸭乙型肝炎病毒及保肝作用研究

目的考察葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的体内抑制作用及其保肝作用。方法以广西麻鸭为实验动物,建立感染鸭乙肝病毒的鸭乙肝动物模型,随机分为模型组、拉米夫定阳性对照组和葫芦茶苷低、中、高剂量组,每组10只,每日灌胃给药1次,连续给药14天,模型组每天灌服等体积的生理盐水。采用ELISA法检测鸭血清乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和鸭血清乙型肝炎E抗原(DHBeAg)的含量。采用实时荧光定量PCR法检测鸭血清鸭乙肝病毒DNA的含量。并检测鸭血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的变化,检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。苏木精-伊红染色法(HE)观察鸭肝组织病理学变化。结果与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组能显著降低血清DHBsAg和DHBeAg的滴度以及DHBV DNA的含量(P<0.05或P<0.01)。而且能降低鸭血清ALT、AST活性和MDA含量,增加肝组织SOD、GSH-PX活性和GSH含量。病理学检查结果提示葫芦茶苷能显著减轻肝细胞损伤程度。结论葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒具有体内抑制作用,对DHBV引起肝损伤具有保护作用。

葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质的影响及机制研究

目的研究葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质分泌的影响,并探讨其可能机制。方法以大鼠肝星状细胞(HSC-T6)为体外细胞模型,采用CCK-8法检测葫芦茶苷对HSC-T6增殖的抑制作用,ELISA法测定细胞上清液中Hyp、HA和TIMP-1的含量,FQ-PCR检测Col I、TGF-β1、α-SMA、PDGF-BB mRNA的表达,Western blot法检测细胞内TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达。结果葫芦茶苷对HSC-T6细胞的增殖有较强的抑制作用。与空白组比较,葫芦茶苷各剂量组能降低细胞上清液中Hyp、HA和TIMP-1的含量,下调细胞内Col I、TGF-β1、α-SMA、PDGF-BB mRNA的表达,而且能降低细胞内TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达。结论葫芦茶苷体外具有抗肝纤维化作用,其机制可能是抑制HSC-T6细胞的增殖,下调TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达,从而减少肝细胞外基质的合成和沉积。

葫芦茶水提物镇咳祛痰平喘作用的实验研究

目的:研究葫芦茶水提取物镇咳、祛痰、平喘的药效学作用。方法:分别以昆明种小鼠、Wistar大鼠和豚鼠为实验动物,采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法观察葫芦茶水提物的镇咳作用,采用小鼠酚红祛痰法和大鼠毛细管祛痰法观察其祛痰效果,采用豚鼠组胺引喘法观察其平喘作用。结果:与模型组比较,葫芦茶水提物高、中剂量组对浓氨水致小鼠咳嗽反应的咳嗽潜伏期显著延长,2 min内咳嗽次数显著减少(P<0.05),而葫芦茶水提物低剂量组效果不明显(P>0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组对枸橼酸致豚鼠咳嗽反应的咳嗽潜伏期显著延长,5 min内咳嗽次数显著减少(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组小鼠的气管段酚红排泄量显著增加(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组大鼠的排痰量显著增加(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组可延长组胺致豚鼠哮喘潜伏期(P<0.05)。结论:葫芦茶水提物具有镇咳、祛痰、平喘的作用。

苗族乡土社会彩礼纠纷解决机制的调查——以贵州雷山西江苗寨为例

西江苗寨彩礼纠纷少由男女平等观、内部讲理制度、熟人社会的影响、房族内部调解、少子继承制等8个方面的原因促就,形成苗族乡土社会的自我解决机制,从房族兄弟的调解以增强苗族家族凝聚力、细化村委会功能以及发挥法院的司法终局性三个角度提出多元化纠纷解决机制的措施和意义。

永定县2001年与1981年中小学生生长发育情况比较

近50a来,国外许多研究表明,儿童少年发育水平长期变化趋势以近20a的发展更为良好[1].为探讨永定县儿童青少年身体形态指标生长发育趋势,更好地指导和改进学校卫生工作,促进学生健康成长,笔者于2001年对永定县中小学生进行了身体形态指标的调查和分析,并与1981年同类资料进行比较,现将结果报道如下.

对建筑钢结构设计及安装的探讨

钢结构建筑在国外已有110多年的历史,钢筋混凝土结构在超建筑中由于自重大,柱子所占的建筑面积比率越来越大,在建筑中采用钢筋混凝土结构受到质疑;同时高强度钢材应运而生,在建筑中采用部分钢结构或全钢结构的理论研究与设计建造可说是同步前进。

简析洗煤厂皮带输送机走廊结构设计

随着煤炭工业的发展,洗煤厂让煤炭的利用更为有效,故新建洗煤厂项目越来越多。本文对洗煤厂中皮带输送机走廊的结构设计加以分析总结。

福建省永定县地方性氟中毒病区改水降氟效果观察

福建省永定县地处闽西山区，先后于1983和1987年的调查发现了5个地方性饮水型氟中毒（地氟病）病区，这些病区分散，病区人口少。病情较轻．饮水氟为1.3—2．7mg／L。1988年开始，在各级政府和病区群众努力下对5个病区先后进行改水降氟。达到国家基本控制地方性氟中毒标准．并于2005年6月通过福建省基本控制地方性氟中毒验收。

口风琴进课堂，教学好帮手

本人经过多年对小乐器进课堂的实践与探索，认为将口风琴用于课堂教学，特别适用于农村小学教学。它对于激发学生兴趣，培养创编，提高识谱、唱歌等能力有很好的作用，而且还解决了学校资金短缺、场地有限等问题。一、捕捉兴趣点，开启音乐之门口风琴作为课堂乐器能很大程度地引发孩子们的好奇心，迎合他们的学习需要，激发他们的学习兴趣。