BacT/ALERT VIRTUO与BACTEC^(TM)FX血培养系统性能评价的方法改良

目的改进验证方案,体外模拟临床标本平行检测,评估不同血培养系统检测病原菌的差异。方法二十种不同病原菌采用两步/三步法稀释获得小于30 CFU/mL的菌悬液,平行接种1mL到不同类型培养瓶进行检测并记录。结果BacT/ALERT FA Plus培养瓶检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、新型隐球菌、马尔尼菲蓝状菌时报阳时间较短,BACTEC^(TM)FX血培养系统树脂需氧瓶检测肺炎链球菌、马尔尼菲篮状菌、树脂厌氧瓶检测产单核李斯特菌、脆弱拟杆菌报阳时间较短,检测其余十一种病原菌时两种培养系统报阳时间没有差异。结论两种血培养系统在检测不同种类病原菌时各有优势,BacT/ALERT VIRTUO血培养系统检测较低浓度马尔尼菲篮状菌时优势显著。

多重耐药鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素和预后分析

目的探讨多重耐药(MDR)鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素及其对患者预后的影响。方法采用病例对照的研究方法,回顾性收集昆明医科大学第一附属医院2013-2018年鲍曼不动杆菌血流感染患者142例(142株),以MDR鲍曼不动杆菌血流感染111例(111株)为观察组,非多重耐药(NMDR)鲍曼不动杆菌血流感染31例(31株)为对照组,进行血流感染的危险因素分析;按预后分为预后不良组81例和好转组61例,进行预后的危险因素分析。结果鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药率高,除替加环素外,MDR鲍曼不动杆菌组的耐药率均高于NMDR鲍曼不动杆菌组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MDR鲍曼不动杆菌组病死率高于NMDR鲍曼不动杆菌组(43.2%比3.2%),差异有统计学意义(P<0.05);MDR鲍曼不动杆菌组预后不良发生率高于NMDR组(69.4%比12.9%),差异有统计学意义(P<0.05);多因素分析结果显示呼吸衰竭、初始抗感染治疗不当是MDR鲍曼不动杆菌血流感染的独立危险因素。呼吸衰竭、使用导尿管、初始抗感染治疗不当、肺部感染是影响鲍曼不动杆菌血流感染预后的独立危险因素。结论MDR鲍曼不动杆菌血流感染所致的病死率较NMDR鲍曼不动杆菌病死率高。呼吸衰竭、初始抗感染治疗不当是MDR鲍曼不动杆菌血流感染的独立危险因素。呼吸衰竭、使用导尿管、初始抗感染治疗不当、肺部感染是影响鲍曼不动杆菌血流感染预后的独立危险因素。

成人金黄色葡萄球菌血流感染133例的危险因素及预后分析

目的探讨133例成人金黄色葡萄球菌血流感染的相关危险因素及对患者预后的影响。方法对2013年1月-2017年12月确诊为金黄色葡萄球菌血流感染133例患者进行回顾性调查分析。结果133例患者均系医院感染,其中36例检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),检出率为27.1%(36/133),97例检出甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),检出率为72.9%(97/133)。除对甲氧苄啶-磺胺甲唑外,MRSA组对常用抗菌药物的耐药率均高于MSSA组,未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。MRSA组年龄≥65岁,呼吸衰竭,住院急诊,入住ICU,手术,使用有创呼吸机、导尿管、中心静脉导管显著高于MSSA组(P均<0.05);MRSA组患者病死率高于MSSA组(25.0%比5.2%),差异有统计学意义(P<0.05);MRSA组预后不良发生率高于MSSA组(41.7%比24.7%)(P<0.05),差异有统计学意义;MRSA组总住院时间长于MSSA组(24d比16d),差异有统计学意义(P<0.05);多因素分析结果显示:年龄≥65岁、入住ICU是预后不良的独立危险因素。结论MRSA感染所致的病死率较MSSA高,MRSA血流感染增加患者住院时间,年龄≥65岁、入住ICU是预后不良的独立危险因素。

PCT定量检测在细菌感染中的临床应用

目的探讨血浆降钙素原(procalcitonin,PCT)与不同类型细菌感染的关系及在预后判断中的价值。方法按照美国胸内科医师学会/危症监护医学学会(ACCP/SCCM)关于脓毒症的相关定义,将感染性疾病患者分为脓毒症和非脓毒症患者,采用免疫荧光定量检测法(ELFA)测定患者血浆PCT水平,比较脓毒症组与非脓毒症组之间的差异,不同类型细菌感染组之间的差异,以及存活组与死亡组之间的差异。结果以PCT>2ng/mL为脓毒症阳性的判定标准,脓毒症组与非脓毒症组血浆PCT阳性率差异有统计学意义(P<0.01);以PCT>0.1ng/mL为阳性标准,PCT阳性率为86%(109/127),而不同类型细菌感染组间PCT阳性率差异无统计学意义(P>0.05);PCT水平与患者预后密切相关,死亡组PCT水平明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.01);PCT对脓毒症的临床诊断灵敏度为70%(47/67),特异度为87%(52/60)。结论血浆PCT检测是鉴别细菌感染及脓毒症的一项重要指标,但不能用于判断是何种细菌感染;目前脓毒症是重症监护患者死亡的重要原因,应加强PCT的检测和细菌培养的相互补充和动态跟踪,提高临床对感染诊断和治疗的及时性、准确性;PCT在一定程度上能反映体内细菌感染程度,PCT检测对细菌感染的诊断及判断疾病的发展和预后具有重要意义。

降钙素原、超敏C-反应蛋白和淀粉样蛋白检测在细菌性感染诊断中的应用价值

目的探讨血浆降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)和淀粉样蛋白(SAA)检测在细菌性感染诊断中的应用价值与非细菌感染时,PCT检测的临床应用价值高于Hs-CRP和SAA.方法测定99例细菌性感染患者(细菌感染组)、96例非细菌感染性患者(非细菌感染组)与同期91例健康体检者(对照组)血中的PCT、Hs-CRP和SAA含量并进行分析.结果 (1)与非细菌感染组及对照组相比,细菌感染组的PCT差异均有统计学意义(P<0.01)、Hs-CRP均有统计学意义(P<0.01)和SAA均有统计学意义(P<0.01),检测结果的平均值均显著升高;(2)在诊断细菌感染时,PCT的灵敏度为87%,特异性为91%;hs-CRP的灵敏度为92%,特异性为52%;SAA的灵敏度为98%,特异性为15%;(3)在诊断细菌感染时,PCT、Hs-CRP和SAA ROC的曲线下面积分别为0.933、0.822和0.734.结论 PCT、Hs-CRP和SAA均可用于细菌感染诊断,但PCT检测的临床应用价值高于Hs-CRP和SAA检测.

多重耐药铜绿假单胞菌血流感染的危险因素和预后分析

医院多重耐药(MDR)铜绿假单胞菌血流感染的的风险因素及其对病人预后的影响。方法 本项目拟以2005-2020年间的43例绿脓杆菌血流感染(MDR)病人为研究对象,以90例同时期无多药耐药性(NMDR)病人为对照,开展血流感染的风险因子分析。按照预后被分成了两部分,按预后分为预后不良组46例和好转组87例作为对照,进行预后的危险因素分析。结果 133例患者中多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)检出率为32.3%(43/133),非多重耐药铜绿假单胞杆菌(NMDRPA)检出率为67.7%(90/133)。铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢他啶和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较高分别为42.1%、27.1%和25.6%,MDR组的耐药率均高于NMDR组,差异均有统计学意义(P<0.05);多因子分析发现,静脉留置、住院及初始使用抗生素不适当是引起多药耐药的主要原因。机械通气和 ICU收治对血流性铜绿假单胞菌感染的预后有一定的影响。结论 多药耐药铜绿假单胞菌多药耐药的发生与 ICU住院和初始抗生素治疗的不良关系。机械通气、入住ICU是影响铜绿假单胞菌血流感染预后的独立危险因素。

2013-2015年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药监测

目的分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床分布及耐药性,指导临床合理用药,为医院感染监测和控制提供参考依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2013-2015年临床分离的金黄色葡萄球菌,通过VITEK-2系统筛选MRSA,采用WHONE5.6微生物软件进行耐药分析。结果共收集到金黄色葡萄球菌1 036株,其中MRSA检出率为31.7%,科室分布主要是干疗科(23%)、EICU(13%)、门诊(11%),标本来源主要为痰液标本(49.7%)和分泌物标本(15.2%)。药敏结果显示,MRSA对青霉素、苯唑西林的耐药率为100.0%,喹诺酮类耐药率>50%,万古霉素和替考拉宁耐药率为0.0%。结论呼吸道是MRSA最常见的感染部位,多见于老年患者和危重患者,且对常用的抗菌药物耐药率较高,临床应优化治疗方案,同时积极采取措施控制MRSA的流行。

2012年至2014年中国云南地区血流感染革兰阴性杆菌的构成及耐药性

目的了解中国云南地区血流感染革兰阴性杆菌的构成及耐药性.方法收集2012年1月至2014年12月卫生部全国细菌耐药监测网云南地区28家医院血流感染的革兰阴性杆菌,各医院按统一的方法进行细菌培养、分离、鉴定和药敏试验.统计分析采用WHONET软件进行.结果共分离非重复的革兰阴性杆菌9 042株,其中肠杆菌科占82.4%,非发酵菌占17.6%。肠杆菌科以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主;非发酵菌以鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌为主.大肠埃希氏菌49.29%、肺炎克雷伯菌13.17%、鲍曼不动杆菌4.04%和铜绿假单胞菌3.85%;肠杆菌科细菌对一代头孢菌素类敏感率低于60%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率均近100%,阿米卡星的敏感率大于85%,哌拉西林/他唑巴坦的敏感率大于70%,头孢吡肟的敏感率大于70%.肺炎克雷伯菌对亚胺培南和阿米卡星的敏感率呈下降趋势.非发酵菌对常用抗菌药敏感率明显低于肠杆菌科细菌.铜绿假单胞菌的敏感率为妥布霉素85%、环丙沙星71.7%、阿米卡星82.9%、哌拉西林/他唑巴坦75.3%、哌拉西林59.6%.鲍曼不动杆菌耐药情况更为严重,对三代、四代头孢菌素敏感率小于30%,对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、喹诺酮类和碳青霉烯类的敏感率均小于40%.结论血流感染革兰阴性杆菌中大肠埃希菌分离率最高大.非发酵菌对常用抗菌药物耐药率明显高于肠杆菌科,耐药现状严峻.

昆明医科大学第一附属医院铜绿假单胞菌感染的临床分布及耐药性分析

目的了解昆明医科大学第一附属医院近3 a铜绿假单胞菌(PAE)感染的临床分布及耐药性的变化,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供依据.方法对2010年至2012年昆明医科大学第一附属医院临床分离的铜绿假单胞菌按照统一方案,采用统一材料进行药物敏感试验.采用MIC法、KB法和判定标准(CLSI2012年版),进行耐药性监测,使用WHONET 5.5软件,进行统计分析铜绿假单胞菌的病区分布情况与耐药率及变化趋势,使用SPSS软件进行统计分析.结果 2010年、2011年、2012年分离出铜绿假单胞菌,分别为208株、260株和278株,3 a中共分离出746株铜绿假单胞菌,主要分离自痰液(79.8%),其次为咽拭子(7.6%)和尿液(6.2%);科室分布以ICU为主(32.4%),其次为干疗科(27.7%)、呼吸内科(12.2%)和神经外科(6.8%);3 a来铜绿假单胞菌总体耐药率除亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和氨曲南外,其余均呈下降趋势,亚胺培南3 a耐药率分别为65.2%,74.2%和69.5%;头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为48.0%,48.7%和55.8%,氨曲南耐药率分别为72.2%,78.2%和72.4%;阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦对铜绿假单胞菌有较高的敏感性.结论铜绿假单胞菌是医院感染的重要感染源,ICU仍是监控重点;铜绿假单胞菌耐药情况比较严重;临床医生应根据药物敏感试验和本医院药监测情况合理选择抗菌药物,控制耐药菌株的流行及医院感染.

2449例体检人群的胆固醇和甘油三脂结果分析

本文对2004年8月在本院2449例体检人群的胆固醇和甘油三脂结果进行了统计分析，现将结果报道如下。

ISO15189在临床微生物学检验技术教学管理中的应用

目的探讨ISO15189质量管理体系在临床微生物学检验技术专业进修医生教学管理中的应用,以提高检验医学专业的教学质量,培养高素质、复合型检验医学专业人才,不断持续改进检验医学教学质量。方法参照国内外医学实验室广泛认可的ISO15189质量管理体系培训和管理进修医生。首先,通过鼓励教师间经验交流、参加讲课比赛,提高教学质量;鼓励教师参加相关学术会议,并参与检验新项目的开展与科研项目的申报,强化师资队伍建设。其次,完善进修医生管理制度,优化进修医生档案管理细则,定期组织培训学习,进行问题式教学和立体化教学,完善导师带教制,规范结业鉴定。结果本科室培养的进修医生工作能力均较强,临床微生物学专业教学质量得到明显提高。结论应用ISO15189质量管理体系的进修医生能够掌握ISO15189的各要素,可以发现并解决临床工作中常见的专业问题,同时具备一定的科研能力。

产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌整合子和插入序列共同区1检测及分型

目的研究临床分离产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌中整合子和插入序列共同区1(ISCR1)移动元件的分布和携带耐药基因盒情况,以及菌株的同源性。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动药敏鉴定仪进行菌种鉴定和药敏试验;PCR及测序法检测Ⅰ~Ⅲ类整合酶基因和ISCR1元件保守区,以及可变区携带的耐药基因盒;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分型研究。结果检测菌株中77.8%(14/18)菌株Ⅰ类整合子保守区阳性,27.8%(5/18)菌株ISCR1元件保守区阳性,未检测到Ⅱ、Ⅲ类整合子;72.2%(13/18)菌株Ⅰ类整合子可变区阳性,未检测到ISCR1元件的可变区;整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因盒(aad A1、aad A5、aac(6')-Ib-cr)和编码对磺胺类抗菌药物耐药的基因盒(dfr A、dfr A15、dfr A17),可变区基因盒未检测到NDM-1耐药基因;PFGE分型将18株菌分成17种型。结论产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌克隆播散趋势不明显,Ⅰ类整合子广泛存在于此类菌中,ISCR1元件携带率较低,并且这两类移动元件与我院NDM-1基因的传播无关。

296例成人大肠埃希菌血流感染的危险因素及预后分析

目的探讨成人产超广谱β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌血流感染的危险因素及对患者预后的影响。方法采用病例对照的研究方法,回顾性收集2017年1月—2019年8月大肠埃希菌血流感染患者296例,其中产ESBL大肠埃希菌血流感染患者191例为观察组,以同期非产ESBL大肠埃希菌血流感染患者105例为对照组,进行血流感染的危险因素分析。按预后分为预后不良组53例和好转组243例,进行预后的危险因素分析。结果296例患者检出的296株大肠埃希菌中产ESBL检出率为64.5%。所有菌株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、哌拉西林、四环素、氨苄西林-舒巴坦、头孢噻肟、头孢曲松和头孢哌酮的耐药率均大于60%;除碳青霉烯类、阿米卡星、甲氧苄啶-磺胺甲■唑和四环素外,产ESBL菌的耐药率均高于非产ESBL菌,差异均有统计学意义(P<0.05)。产ESBL菌感染组患者预后不良率高于非产ESBL菌感染组(21.5%比11.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示留置导尿管是产ESBL大肠埃希菌血流感染的独立危险因素。感染性休克、入住ICU、低血红蛋白血症、低白蛋白血症是影响大肠埃希菌血流感染预后的独立危险因素。结论留置导尿管是产ESBL大肠埃希菌血液感染的独立危险因素。感染性休克、入住ICU、低血红蛋白血症和低白蛋白血症是影响大肠埃希菌血流感染预后的独立危险因素,应引起重视以改善预后。

36例新型隐球菌性脑膜炎的临床分析

目的探讨36例新型隐球菌性脑膜炎的临床特征,以提高对该病的认识。方法分析36例新型隐球菌感染患者的临床资料。结果新型隐球菌感染的患者临床表现均有不同程度的头痛、颅内压增高表现,葡萄糖降低尤为显著,IgG、IgM、IgA及微量总蛋白升高明显。治疗后脑脊液和血清标本中隐球菌荚膜多糖抗原滴度下降明显。新型隐球菌对两性霉素B(100%)、氟康唑(94.4%)和5-氟胞嘧啶(94.4%)抗真菌药敏感性较高。结论对颅内压增高、脑膜刺激征阳性的患者反复多次进行脑脊液培养、墨汁染色和隐球菌荚膜多糖抗原检测,有助于新型隐球菌性脑膜炎的早期诊断和早期治疗;隐球菌荚膜多糖抗原滴度随着患者病情的好转而下降。两性霉素B联合氟康唑或5-氟胞嘧啶治疗新型隐球菌性脑膜炎仍然安全有效;早期控制感染和降低颅内压是治疗的关键。

2012至2015年昆明医科大学第一附属医院流感嗜血杆菌耐药性监测

目的了解昆明医科大学第一附属医院临床分离的流感嗜血杆菌对常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理使用抗生素提供依据.方法收集2012年1月至2015年12月184株临床分离的流感嗜血杆菌,采用纸片扩散法(K-B法)进行抗菌药物敏感性试验,Nitrocefin纸片检测定β-内酰胺酶,用WHONET5.6软件对流感嗜血杆菌耐药率进行统计分析.结果 184株临床分离的流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率最高,达46.7%,其次对氯霉素、氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为23.2%、13%.该菌对阿奇霉素、环丙沙星、美洛培南、头孢呋辛、头孢噻肟的耐药率均在10%以下.儿童分离株对氨苄西林的耐药率(56.9%)高于成人分离株(42.1%);除环丙沙星、美洛培南和氯霉素外,儿童株对其他测试抗菌药物的耐药率均较成人株高.产β-内酰胺酶株总检出率为52.8%,其中儿童分离株产酶检出率为64.3%高于成人分离株产酶检出率47.6%.共检出氨苄西林耐药而β-内酰胺酶阴性菌株1株,占0.5%.结论流感嗜血杆菌主要分离自住院患者呼吸道分泌物标本.虽然该菌对头孢菌素类、大环内酯类、酶抑制剂复方制剂、喹诺酮类、碳青霉烯酶类抗菌药物保持良好的抗菌活性,但是产β内酰胺酶仍是流感嗜血杆菌的重要耐药机制,表现为氨苄西林耐药率较高,因此不建议作为流感嗜血杆菌感染的经验性治疗.

ISO15189质量体系在检验医学实习教学管理中的应用

为培养高素质、复合型医学检验专业人才，参照国内外医学实验室广泛认可的ISO15189质量体系进行实习管理。首先，通过鼓励教师间经验交流、参加讲课比赛，提高教学质量；鼓励教师参加相关学术会议，并参与检验新项目的开展与科研项目的申请，强化师资队伍建设。其次，完善实习生管理制度，优化实习生档案管理细则，定期组织培训学习，完善导师带教制，规范实习鉴定。实践证明，毕业生工作能力均较强，能够掌握ISO15189的质量管理要素，可以解决临床工作中常见的专业问题；同时具备一定的科研思维。

16S rRNA序列测定结肠腺瘤性息肉与肠道菌群的相关性分析

目的探讨作为结肠癌癌前病变的结肠腺瘤性息肉(CAP)中肠道菌群的改变特征。方法随机收集2017年11月至2018年4月在昆明医科大学第一附属医院进行结肠镜检查的结肠腺瘤性息肉患者(CAP组)30例和无腺瘤息肉的健康个体(HC组)30名。通过内镜下电凝电切治疗,收集CAP患者的腺瘤组织和健康志愿者(HC)的肠黏膜组织,提取基因组DNA,对细菌16S rRNA基因V3~V4区进行扩增,通过Illumina MiSeq平台进行序列测定,实验结果使用秩和检验(Wilcoxon检验)进行比较法分析。结果CAP患者的腺瘤组织中肠道菌群α多样性高于健康肠黏膜组织(Chao指数、Ace指数P<0.01)。门水平分析中,CAP组中拟杆菌门(FC=0.38)的丰度显著降低(P<0.01);属水平分析中,拟杆菌属(FC=0.32)、埃希菌属(FC=0.57)、瘤胃球菌属(FC=0.42)、Blautia(FC=0.27)、Dorea(FC=0.57)在CAP组中丰度降低(P<0.05);假单胞菌属(FC=2.43)、乳球菌(FC=2.84)、土芽孢杆菌属(FC=2.07)和不动杆菌属(FC=2.36)丰度升高(P<0.05)。结论与HC肠黏膜组织相比,CAP患者腺瘤组织中菌群的丰度和多样性存在显著的差异,表明腺瘤性息肉患者黏膜中菌群存在失衡现象。这种肠道微环境的失衡,对研究结肠腺瘤性息肉的发生和发展具有重要意义。

非产肠毒素型脆弱拟杆菌通过下调NF-κB通路抑制TNF-α诱导的结肠上皮细胞炎症反应

目的探讨非产肠毒素型脆弱拟杆菌(NTBF)抑制TNF-α诱导的人正常结肠上皮细胞hcoEPIC炎症反应的机制,为结肠炎的预防和治疗探索新的益生菌疗法。方法建立NTBF与hcoEPIC细胞共培养体系,分别检测NTBF的黏附和侵袭能力;NTBF与hcoEPIC细胞共培养4 h后加入TNF-α诱导细胞炎症,24 h后CCK-8试验和AnnexinⅤ-FITC/PI法检测细胞存活率及凋亡情况;Western blot和RT-qPCR检测不同处理组中hcoEPIC细胞内NF-κB信号通路关键蛋白质的变化;ELISA法检测该通路下游细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10的表达;体内动物实验评估NTBF干预对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠的影响。结果NTBF能够黏附于hcoEPIC细胞,对细胞无毒害作用。与对照组相比,NTBF单独处理并不影响hcoEPIC细胞增殖(P>0.05),但显著降低由TNF-α诱导的细胞损伤和凋亡(P<0.05);与TNF-α单独处理组相比,NTBF+TNF-α组中磷酸化NF-κB p65和磷酸化IκBα蛋白表达水平与NF-κB和IκBαmRNA水平显著降低(P<0.05);细胞上清液中IL-1β和TNF-α减少,IL-10增加(P<0.05)。动物实验表明NTBF能有效缓解DSS诱导的溃疡性结肠炎模型小鼠症状,主要表现为抑制结肠炎小鼠体重减轻、降低疾病活动指数评分、改善结肠缩短、减轻结肠病理损伤。结论NTBF可能通过下调NF-κB通路抑制TNF-α诱导的结肠上皮细胞炎症反应。