采用实时荧光定量PCR法检测大曲中的3种高温放线菌

建立实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)方法对大曲中3种高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris、T.intermedius和T.daqus)进行特异性定量检测。根据T.vulgaris、T.intermedius、T.daqus全基因组中特异性单拷贝核心基因recA、mdH、gyrA为参考序列分别设计了一对可扩增278、233、291 bp片段的引物;经特异性、有效性、准确性实验显示,在常见的13种白酒酿造微生物中,引物TV、TI、TD分别可特异性检测T.vulgaris、T.intermedius、T.daqus,检测范围为2.82~8.82 lg copies/μL,加标回收率95%~105%。进一步对大曲发酵过程样品检测,结果显示,T.vulgaris含量在呈现波动趋势,在第5天达到最高,为(6.06±0.02)lg copies/g;T.intermedius含量呈现先上升后下降的趋势,在第7天达到最高,为(6.33±0.13)lg copies/g;T.daqus含量在0~12 d呈现波动趋势,在12~14 d下降,随后一直上升,发酵结束时含量最高,为(7.62±0.02)lg copies/g。该研究建立的RT-qPCR方法可对大曲发酵过程中3种高温放线菌进行特异性鉴定和快速定量,为进一步监测高温放线菌在白酒酿造过程中的功能提供了方法。

优化培养基组分提高猪链球菌2型NT15B菌株活菌数的研究

【目的】以猪链球菌2型NT15B菌株为研究对象,通过优化发酵培养基组分提高菌株活菌数,降低生产成本,为猪链球菌2型NT15B菌株的高密度培养及猪链球菌病疫苗的大规模生产和推广提供参考。【方法】试验以培养的猪链球菌2型NT15B菌株最高活菌数为筛选指标,通过单因素试验筛选菌株发酵培养基中碳源、氮源(有机氮源和无机氮源)、无机盐金属离子、磷酸缓冲液的最佳组分及浓度,并根据单因素筛选结果选择碳源浓度、有机氮源总浓度、有机氮源比例、磷酸盐缓冲液浓度4个因素各3个水平设计正交试验,并进一步进行多因素的筛选与验证。【结果】猪链球菌2型NT15B菌株发酵培养基最优条件为6.0 g/L蔗糖、1.0 g/L尿素、10 g/L酵母提取物YE7与20 g/L酵母蛋白胨Nucel 887混合氮源,1.0 g/L NaCl、9.58 g/L K_(2)HPO_(4)·3H_(2)O、1.09 g/L KH_(2)PO_(4)、1 mmol/L MgSO_(4)·7H_(2)O、0.3 g/L L-抗坏血酸。采用此最优组合,摇瓶培养猪链球菌2型NT15B活菌数最高达80.83×10^(8)CFU/mL,较优化前提高256.08%。【结论】优化后的培养基能有效提高猪链球菌2型NT15B菌株活菌数,降低了生产成本,为发酵罐水平的优化提供参考。

三种单萜对皿式培养樟芝三萜合成的影响

三萜是药食用真菌樟芝野生子实体中主要的活性成分之一,但是人工皿式培养的樟芝菌丝体中三萜含量较低。为了提高樟芝皿式培养三萜的产量,该研究在培养基中添加了3种单萜作为刺激因子。通过添加浓度的优化,得到了对生物量具有显著促进作用的添加方式是0.08 g/L的α-松油醇;对三萜产率具有显著促进作用的最佳添加方式为0.16 g/L的松油烯、0.08 g/L的α-松油醇以及0.12 g/L的4-萜烯醇,三萜产率分别较对照组提高了55.68%、50.39%和28.56%;且在添加0.16 g/L的松油烯时,有两种三萜(去氢硫色多孔菌酸和去氢齿孔菌酸)在樟芝菌丝体中的含量显著升高,分别较对照组提高了5.56倍和0.96倍,在添加0.08 g/L的α-松油醇时,去氢硫色多孔菌酸的含量显著升高,较对照组提高了3.20倍。该研究发现了3种可以促进樟芝皿式培养三萜生成的单萜,为樟芝皿式培养提供了新的思路。

酚酸-透明质酸钠接枝物的制备及体外抗氧化研究

目的以透明质酸钠(sodium hyaluronate,HA)为研究对象,利用酚酸对其修饰改性以期获得抗氧化活性更好甚至新活性的分子结构。方法采用自由基介导的接枝方法制备5种不同的酚酸-透明质酸钠接枝物,选出接枝度最高的接枝物进行合成条件优化。通过红外光谱(infrared spectroscopy,IR)、紫外光谱(ultraviolet spectrum,UV)、核磁共振氢谱(^(1)H NMR spectroscopy,^(1)H NMR)、场发射扫描电镜(field emission scanning electron microscopy,FESEM)、热重分析法(thermogravimetry analysis,TGA)对接枝物进行表征,通过测定接枝物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS^(+)·)及超氧阴离子自由基(O^(2-)·)清除能力反应出接枝物的体外抗氧化能力。结果在相同条件下,5种酚酸-透明质酸钠接枝物种中接枝度最高的是阿魏酸-透明质酸钠接枝物(ferulic acid-sodium hyaluronate FA-HA),对FA-HA合成条件行进优化,得到最高的接枝度为(16.59±0.31)mg/g。通过IR、UV、^(1)H NMR、FESEM、TGA验证了接枝物的形成,推测可能形成了酯键。分子质量检测结果表明,通过本方法得到的接枝物的分子质量有小幅下降但分子分布均一性提高,平均分子质量为31.5 ku。FESEM结果显示,接枝物呈现紧密相连的片状结构,表面相对光滑。热重分析(TGA)结果表明,接枝物的热稳定性降低。体外抗氧化实验结果表明,在0.25~10 g/L浓度范围内,FA-HA对DPPH·、ABTS^(+)·和O^(2-)·的最大清除率分别为(83.76±4.86)%、(76.95±5.06)%和(83.08±2.51)%,高于原HA及FA。结论自由基接枝法成功将FA与HA接枝在一起,且接枝后的FA-HA具有更好的体外抗氧化活性,为酚酸-HA接枝物的深入研究和开发应用提供了理论依据。

乳酸菌发酵乳蛋白水解物对RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用

利用乳酸菌发酵乳蛋白水解物(milk protein hydrolysates,MPH)有助于提高乳酸菌水解蛋白的能力,促进功能成分的产生与挖掘。基于不同乳酸菌发酵MPH上清液的体外自由基清除能力和铁离子还原力综合评价,筛选获得一株抗氧化活性较强的鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)ST(LST)。LST发酵MPH所得上清液产物(FPS)中,游离氨基酸总量比MPH提高了66.98%,分子质量低于180 Da组分增加8.66%。在H_(2)O_(2)诱导的RAW 264.7细胞氧化损伤模型中,FPS能显著提高细胞存活率,上调核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和谷胱甘肽过氧化酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)等抗氧化基因的转录水平。由此表明,鼠李糖乳酪杆菌LST发酵MPH可以有效缓解细胞氧化损伤,具有进一步应用于抗氧化食品开发的潜力。

冰川环境耐冷菌的冷适蛋白酶分离纯化及酶学性质

采用离交和凝胶层析对“中国冰川1号”耐冷菌BacilluscereusSYPA23所产的蛋白酶进行分离纯化,并进行酶学性质研究.与中温酶相比,该蛋白酶具有较高的低温催化活力,其最适催化温度为42℃,适宜pH为7.0～8.5,SDSPAGE测定的分子量(Mr)为34.2×103.金属离子Mn2+、Ca2+对该酶有激活作用,Cu2+、Hg2+、Pb2+、Co2+对其活性有一定抑制作用.该酶属金属蛋白酶,其活性受EDTA强烈抑制,不受PMSF抑制.该蛋白酶具有低温酶典型的热不稳定性,0℃下半衰期24h,但Ca2+和一些低分子醇类物质能提高其稳定性.动力学数据分析表明,该蛋白酶在低温下对底物亲和能力高,在较宽温度范围内(25～45℃)均保持着较高的催化效能.

中国冰川1号产适冷蛋白酶耐冷菌的分离鉴定及产酶条件

从中国冰川 1号样品分离获得一株产适冷蛋白酶耐冷菌株SYP- A2 - 3,鉴定为蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus)。该菌生长温度范围为 0～ 38℃ ,最适生长温度 2 5℃ ,而最适产酶温度为 15℃。所产蛋白酶为中性金属蛋白酶 ,最适催化温度为 4 2℃ ,低温催化活力较高 ,适宜作用pH为 7. 0～ 8 .5 ,SDS PAGE测定的分子量为 34 2kD。SYP A2 3产酶条件的研究结果显示酪蛋白是较好的氮源 ,葡萄糖、淀粉是较好的碳源 ,产酶最佳pH为 6. 5～ 7. 0 ,在优化的条件下 ,15℃摇瓶产酶达到 380 0U mL ,5L发酵罐通气培养产酶达 4 80 0U mL。

花椒资源与开发利用现状调查

本文介绍了我国重点产区的花椒资源与开发利用现状

白芨多糖胶对花椒精油乳液稳定性研究

以花椒精油为乳化对象,采用Tween60(T)、Span20(S)、单甘酯(D)和白芨多糖胶(B)为乳化剂或乳化助剂,对单组份及双组份配比的乳化效果进行评价,结合乳液微滴的相差显微观测,初步确定了花椒精油的乳化剂配方。由Span60和白芨多糖胶合理配伍,可获得具有良好稳定性的O/W型乳化体系。白芨多糖胶是天然亲水性高分子,能有效增强司盘、吐温对花椒精油的乳化效果,并赋予产品较好的表观稠度和厚重感。

下颌骨髁状突骨折179例临床分析

目的探讨髁状突骨折的临床特点和治疗方法。方法分析对比1990—2010年179例髁状突骨折患者致伤原因、治疗方法及疗效等临床资料。结果交通事故致伤92例(占51.4%),髁状突颈部骨折76例(占42.3%)。123例患者经保守治疗,56例患者经不同进路的内固定手术治疗。在治疗方法的选择上,青少年组保守治疗比率较成年患者高(P<0.01),不同骨折部位治疗方法有差异(P<0.01),其中髁状突头部骨折保守治疗率最高(92.06%),合并其他部位骨折手术治疗比率较不合并其他部位骨折高(P<0.01)。治疗后大多获得良好的咬合关系,双侧髁状突骨折初期张口受限率显著增高(P<0.01),通过功能锻炼1年后张口度均恢复达3.0 cm以上。结论交通事故是首要的致伤原因,颈部为髁状突骨折最好发部位。青少年主要采取保守治疗,合并其他部位骨折多选择手术治疗,手术治疗对骨折端移位角度大于30°,下颌升支垂直高度降低超过5 mm,保守治疗后张口受限小于2 cm的患者很重要。

水飞蓟素提取工艺的改进和探讨

对水飞蓟种皮中的水飞蓟素提取方法进行初步研究。实验采用乙酸乙酯超声波辅助浸提,水飞蓟素提取率可达到7.0%以上,且缩短提取时间(<10 h),在甲醇体系下3次重结晶,水飞蓟宾纯度可达到97.0%,原料收率为7.07 mg/g。研究认为,水飞蓟种子皮壳分离对提高产品质量和资源利用价值有显著意义。

茶树鲜花饮料澄清技术研究

茶树鲜花与茶叶具有相似的营养成分,榨汁后经调配可开发成适口性好、风味独特的鲜花饮料。对茶树鲜花饮料的壳聚糖絮凝、酶法澄清、超滤澄清效果进行了比较,结果表明,采用10万分子截留量的超滤膜处理获得能够较好的澄清效果,且对茶多酚造成的操作损失较小。

基于灰度直方图对白芨多糖胶复合乳化剂配方筛选和稳定性评价

以白芨多糖胶为乳化稳定剂,Tween60(T)、Span20(S)、单甘酯(D)为乳化剂,研究白芨胶在O/W型花椒精油乳化体系中的配伍性能。实验采用乳液相差显微数字化图片进行灰度分析,通过直方图的标准偏差,对乳液粒子分散特性进行评价。在此基础上,结合稳定性实验,提出直方图的标准偏差SD可以作为判非依据,可提高配方筛选效率。

温度和氮源对耐冷蜡状芽孢杆菌产冷适蛋白酶的影响

对影响耐冷蜡状芽孢杆菌SYP-A2-3合成冷适蛋白酶的主要因素进行了研究,主要包括培养温度对产酶水平和产酶周期的的影响、不同相对分子质量分布的酪蛋白水解物对菌体细胞诱导产酶的差异以及菌体芽孢形成过程与产酶过程的关系等.结果表明通过采取前高后低的变温培养策略可以使菌体在发酵初期快速增殖,从而提高冷适蛋白酶的产量,粗料氮源预水解可增加相对分子质量较低的氮源水平,能提高前期的菌体产量.研究认为,在产酶期间应保持低分子量氮源的低速释放,使诱导作用得到持续加强并减缓代谢阻遏作用,避免芽孢的快速形成,实现产酶期的延长.

半乳甘露寡糖的膜法精制工艺研究

对半乳甘露寡糖的水解液进行超滤(截留相对分子质量3000Da)和纳滤(截留相对分子质量300Da)处理,获得的精制滤液中,GMOS平均聚合度为2.13。HPLC分析表明,GMOS中的单糖组分占13.6%,二糖组分占52.0%,三糖以上的组分占34.4%。试验表明,联合应用超滤和纳滤,能够较好地对GMOS进行精制、脱盐和浓缩,是一种高效、经济的GMOS精制过程。

不同手术方法修复单侧完全性唇裂的临床分析

目的:研究不同手术方法修复单侧完全性唇裂的优缺点与手术要点。方法 :应用Tennison法、Millard法和梯度旋转下降法手术治疗单侧完全性唇例185例。结果:69例Tennison法中出现患侧唇高过长15例,运动自然性不理想39例,复裂2例;88例Millard法中出现患侧唇高过短12例,运动自然性欠佳28例,复裂1例;28例梯度旋转下降法中运动自然性最理想,但出现患侧唇宽度过窄2例。结论:Tennison法对裂隙较宽患者不适宜,运动自然性不理想,术中须防止患侧唇高过长;Millard法运动自然性欠佳,术中须防止患侧唇高过短;梯度旋转下降法运动自然性最理想,术中定点应兼顾上唇宽度,是一种修复单侧完全性唇裂的好方法。

絮凝-膜法制备皂荚皂苷工艺研究

对皂荚种皮皂苷进行水法提取,采用阳离子瓜尔胶对提取液进行絮凝,再通过超滤、纳滤进行分离,制备获得的皂苷纯度为87.3%。研究认为,提取液中的皂苷与多糖、蛋白等杂质结合紧密,而阳离子瓜儿胶对杂质具有良好的选择性,因而絮凝处理是保证膜法分离过程的关键,其二者联用显示出良好的应用前景。

欧洲表演艺术数字图书馆对我国文化遗产数字资源保存的启示

文化遗产具有重要价值,发达国家普遍开展文化遗产数字资源建设以对本国的文化遗产进行长期保存与增值利用,其建设经验对我国文化遗产数字资源保存具有借鉴意义。本文以欧洲表演艺术数字图书馆为对象进行案例分析。其特点包括:扁平化的组织结构与高效灵活的管理模式,动态的信息资源建设与开发模式,开放的建设理念,多样化的资源检索与浏览途径,以及特色化的元数据标准。基于以上分析总结出其对我国文化遗产数字资源保存的启示。

辛香料资源高效利用与产业化进展

本文介绍了“辛香料资源高效利用与产业化研究”课题的研究内容和研究进展。

生物质的综合利用技术在燃料乙醇产业中的应用

概述了燃料乙醇生产的生物质及其特点,重点阐述了小麦、玉米等原料生产乙醇的综合开发技术,并对甘蔗和木薯为原料生产燃料乙醇进行了经济性评价。