多抗霉素对烟草靶斑病的防效及应用后其叶际微生物的变化规律

为了评价多抗霉素对烟草靶斑病的田间防效及药剂施用后不同时期叶际微生物的变化规律,通过田间小区施用多抗霉素,并于施药后不同时期调查田间烟草靶斑病发病情况计算病情指数,于不同时期取样并通过Illumina HiSeq高通量测序技术分析多抗霉素对健康与感病烟叶叶际微生物群落结构及多样性。结果表明,多抗霉素处理3、9 d的防效分别为89.80%、84.64%。施药后,感病组织亡革菌属的相对丰度显著降低,Symmetrospora的相对丰度呈提高趋势;健康与感病组织细菌中假单胞菌属、甲基杆菌属、鞘氨醇单胞菌属、金刚藻属的相对丰度均提高;施药后18 d,健康与感病组织叶际真菌和细菌多样性及丰富度均提高。叶际微生物网络关系互作图显示,施药后亡革菌属与链格孢属呈负相关,且与其他真菌属大多也呈负相关;细菌属之间互作关系大多呈正相关,部分细菌属之间呈负相关。综上,多抗霉素能快速且稳定地防治烟草靶斑病的发生,能有效降低烟草靶斑病病原菌的相对丰度,同时对叶际其余菌属存在影响,随着时间的延长,防效较为稳定,证明多抗霉素能广泛用于烟草靶斑病的防治。

辣椒脉斑驳病毒外壳蛋白多克隆抗体的制备和应用

【目的】辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)是茄科植物生产上危害最严重的病毒之一,也是口岸检疫的对象。本研究旨在制备特异性强的ChiVMV外壳蛋白的多克隆抗体并用于田间病株的检测。【方法】通过RT-PCR方法扩增ChiVMV贵州烟草分离物外壳蛋白基因的全长(861 bp)和部分片段(396 bp),分别重组至原核表达载体pET28a中,转化Escherichia coli BL21后进行诱导表达,表达产物层析分离和透析纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体,最后使用酶联免疫吸附法(ELISA)、Western blot等方法检测抗体效价和特异性。【结果】成功制备了ChiVMV外壳蛋白的两种多克隆抗体antiCP^(1-287aa)、antiCP^(1-132aa),抗体效价分别为1∶6400、1∶12800;两种抗体antiCP^(1-287aa)、antiCP^(1-132aa)均能通过Western blot方法检测到抗原;田间病株的间接ELISA检测显示,antiCP^(1-132aa)能特异性检测ChiVMV病株,未能检测到马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)病株,而antiCP^(1-287aa)无法区分这两种病株。【结论】多克隆抗体antiCP^(1-132aa)的特异性较强,可用于ChiVMV田间病株的检测,也为ChiVMV外壳蛋白的功能研究奠定基础。

益蝽成虫肠道微生物群落结构及其碳源代谢功能

【目的】肠道微生物对宿主昆虫的代谢、生长发育及免疫等功能发挥着重要作用。本研究旨在探究益蝽Picromerus lewisi成虫肠道微生物群落结构及其碳源代谢能力。【方法】利用体外培养分离纯化益蝽成虫肠道微生物并进行分子生物学鉴定,利用Illumina高通量测序技术进行细菌16S rDNA和真菌ITS基因测序,解析益蝽成虫肠道细菌和真菌群落结构和多样性;利用PICRUSt和FUNGuild对细菌和真菌及其基因功能进行预测;利用Biolog ECO技术解析益蝽成虫肠道细菌和真菌的碳源代谢功能。【结果】共分离益蝽成虫肠道可培养优势细菌肠球菌属Enterococcus菌株10株,优势细菌为粪肠球菌E.faecalis。高通量测序结果表明,在门水平上,益蝽成虫肠道优势细菌为变形菌门(Proteobacteria)(相对丰度58.51%)和厚壁菌门(Firmicutes)(相对丰度38.92%);主要优势真菌为子囊菌门(Ascomycota)(相对丰度56.53%),其次是担子菌门(Basidiomycota)(相对丰度11.34%)。在属水平上,肠球菌属Enterococcus(相对丰度25.05%)为主要优势细菌属,其次是乳球菌属Lactococcus(相对丰度12.23%)、沙雷氏菌属Serratia(相对丰度11.48%)和普罗威登斯菌属Providencia(相对丰度2.38%);优势真菌属主要为Biappendiculispora(相对丰度18.30%),其次是枝孢菌属Cladosporium(相对丰度11.83%)、Vishniacozyma(相对丰度5.17%)和鬼笔属Phallus(相对丰度3.62%)。益蝽成虫肠道细菌和真菌群落结构具有较高的物种丰富度和多样性,以及较强的碳源代谢能力,可高效代谢α-环式糊精、L-丝氨酸、腐胺和D-苹果酸等27种碳源。功能预测显示,益蝽成虫肠道细菌主要分布于新陈代谢类群、环境信息处理类群和遗传信息处理类群等,真菌主要分布于未定义类群、植物腐生菌、未定义腐生菌、内生菌-植物病原菌、真菌寄生菌-未定义腐生菌、叶子腐生菌和动物病原菌-内生菌-植物病原菌-木质腐生菌类。【结论】益蝽成虫肠道细菌和真菌种类多、多样性高,在属水平,优势细菌为肠球菌属、乳球菌属、沙雷氏菌属和普罗威登斯菌属,优势真菌为Biappendiculispora、枝孢菌属、Vishniacozyma和鬼笔属,具有较强的碳源代谢能力。

短时高温对普通大蓟马存活的影响及豇豆田防效初探

目前普通大蓟马的最主要防治措施仍然是化学防治,亟需开发绿色防控技术。本研究通过室内试验(不同温度及暴露时间处理)和田间试验(豇豆苗期和抽蔓期不同揭膜时间)初步探索短时高温对普通大蓟马存活率的影响及田间防治效果。室内试验结果表明,短时高温对普通大蓟马的存活率具有显著影响,且随着温度的升高和暴露时间的延长,影响愈发明显;42℃高温处理3 h,普通大蓟马成虫和若虫均全部死亡,而44℃处理1 h可使若虫全部死亡、处理0.5 h使成虫全部死亡。田间试验结果表明,豇豆苗期和抽蔓期在11:00—12:00揭膜,对普通大蓟马成虫的防效均可达到99%以上,处理后2 d内的防治效果仍能保持在70%及以上,但12:00以后揭膜偶发烧苗现象。

豇豆荚螟生物生态学特性与绿色防控研究进展

豇豆荚螟Maruca testulalis是世界性害虫,在亚热带地区发生严重。因其具有钻蛀危害特性,使其防治难度巨增。该虫寄主范围广泛,但以豆科作物为主,尤其是豇豆Vigna unguiculata。本文综述豇豆荚螟的形态特征、地理遗传分化、生物生态学特点、发生危害规律和综合防控进展,同时展望其绿色防控技术的研发与应用,为深入挖掘豇豆荚螟的制约因子并研发新型绿色防控技术奠定基础。

益蝽不同发育阶段的形态特征

本文采用体视镜对益蝽Picromerus lewisi各虫态的形态特征进行了观察。结果表明:益蝽卵粒为圆形或卵圆形,卵块呈长方形,卵壳表面具金属光泽,呈金黄色,假卵盖圆形,破卵器三角状,在假卵盖的外域成一环。1~2龄若虫暗红色,无翅芽;3龄若虫黑色,4龄若虫浅褐色;5龄若虫淡土黄色,翅芽黑褐色。成虫体黑褐色,前翅革片端半部及膜片基部淡黄色或黄白色;小盾片上部的粗刺顶端呈二分叉状;腹部气门淡黄褐色;足黑色,多细毛。雄虫腹部近三角形,雌虫腹部似卵圆形;雌成虫腹下第3~6节中央有4个黑斑,初呈小黑点,渐大至宝塔状大黑斑,雄成虫腹下第3~6节中央有4个黑斑,初呈小三角,渐大至摇铃状大黑斑。

菌核净对烟草靶斑病菌的抑制作用及对烟叶叶际微生物群落结构的影响

烟草靶斑病是烟叶生产上一种主要真菌性病害,为评价菌核净防控烟草靶斑病的潜力,并从微生态层面揭示菌核净施用后对烟叶叶际微生物群落结构的影响,本研究采用菌丝生长速率法,测定了菌核净对烟草靶斑病菌的抑制活性,并利用Illumina Hiseq高通量测序技术,分析了菌核净处理后不同持效期内,健康与感病组织中叶际真菌及细菌群落结构和多样性的变化规律。结果表明:菌核净对靶斑病菌菌丝生长有较强的抑制活性,其EC_(50)值为1.20μg/mL,在6.47μg/mL下即可完全抑制菌丝生长。40%菌核净可湿性粉剂按有效成分4200 g/hm^(2)剂量施用后0~18 d,健康与感病组织的叶际微生物群落结构间均存在显著性差异,其中叶际真菌优势菌属为亡革菌属、链格孢属和镰刀菌属,叶际细菌优势菌属为假单胞菌属、葡萄球菌属和鞘氨醇单胞菌属。施药后3 d,健康与感病组织中亡革菌属相对丰度分别下降12.41%和51.62%,链格孢属相对丰度分别上升0.54%和0.42%,假单胞菌属相对丰度分别下降13.48%和19.17%;施药后9 d,亡革菌属相对丰度分别上升1.38%和47.42%,链格孢属相对丰度分别下降0.36%和0.18%,假单胞菌属相对丰度分别下降2.73%和2.73%;施药后18 d,亡革菌属相对丰度分别下降26.74%和39.03%,链格孢属相对丰度分别上升26.02%和2.70%,假单胞菌属相对丰度分别上升6.56%和16.02%。田间施用40%菌核净可湿性粉剂,3 d内可显著抑制健康与发病烟叶组织叶际病原菌亡革菌属的相对丰度,但对感病组织的影响程度大于对健康组织;同时还会引起叶际细菌群落结构的改变,但对感病组织的影响小于对健康组织。研究结果从微观层面揭示了菌核净施用后健康与发病烟叶组织叶际微生物群落结构的差异,可为菌核净的科学应用提供参考。

草地贪夜蛾取食诱导下玉米酵母双杂交文库的构建及ZmRop1互作蛋白筛选

【目的】构建以草地贪夜蛾取食诱导后的玉米酵母cDNA文库以及编码植物Rac蛋白的诱饵载体,并从文库中筛选ZmRop1的互作蛋白,为进一步从分子层面解析ZmRop1在玉米中的信号传导机制和提高玉米对草地贪夜蛾的抗性提供支持。【方法】以草地贪夜蛾取食后的玉米品种郑单958不同组织为材料提取总RNA,利用SMART技术反转录合成ds cDNA,连接p GADT7载体后转化到酵母Y187中构建玉米酵母双杂交c DNA文库;以玉米c DNA为模板克隆ZmRop1,构建诱饵载体pGBKT7-ZmRop1,经酶切及测序鉴定后转化到酵母AH109中,并鉴定诱饵蛋白毒性及自激活活性。通过酵母双杂交以ZmRop1为诱饵从cDNA文库筛选其潜在互作蛋白。【结果】研究获得的玉米c DNA文库库容量为4.08×10^(6)CFU,文库滴度为1.3×108CFU,文库片段多样性良好,文库重组率91.7%;诱饵载体pGBKT7-ZmRop1成功转入AH109且经过鉴定证明无毒性、无自激活活性;从文库中初步筛选到22个与ZmRop1互作的蛋白,分析表明参与调控植物防御等多种生物学活动。【结论】构建的酵母双杂交cDNA文库符合建库要求;构建的ZmRop1诱饵载体无毒性和自激活活性;筛选到22个与ZmRop1互作的靶标蛋白,为进一步研究ZmRop1参与调控植物防御的信号分子作用机制及后续筛选玉米抗虫基因打下了理论基础。

氟吡呋喃酮对蒙氏桨角蚜小蜂生物学及温室种群动态的影响

氟吡呋喃酮和蒙氏桨角蚜小蜂Eretmocerus mundus均是控制烟粉虱Bemisia tabaci的有效作用因子,明确氟吡呋喃酮对蒙氏桨角蚜小蜂的作用对协调应用化学农药和生防天敌绿色防控烟粉虱有重要意义。本研究首先在室内测定了氟吡呋喃酮对蒙氏桨角蚜小蜂的亚致死浓度(LC_(15))和致死中浓度(LC_(50)),并研究了氟吡呋喃酮亚致死剂量对蒙氏桨角蚜小蜂的寿命、寄生率、发育历期和羽化率等生物学指标的影响,进一步在温室内研究了氟吡呋喃酮推荐浓度对蒙氏桨角蚜小蜂种群动态的影响。结果表明,氟吡呋喃酮对蒙氏桨角蚜小蜂亚致死浓度(LC_(15))和致死中浓度(LC_(50))分别为4.397 mg ai/L和35.1 mg ai/L,与对照相比,在两种浓度处理下蒙氏桨角蚜小蜂的寿命分别缩短39.3%和59%,发育历期分别延长5.9%和39.3%,寄生率分别减少22.5%和23.5%,羽化率分别减少4.43%和8.36%。温室试验表明,随用药时间的延长,蒙氏桨角蚜小蜂数量降低。药后3~15 d蒙氏桨角蚜小蜂种群数量减少21.7%~62.9%,显著低于对照,但用药18 d后种群下降趋势逐渐平缓,与对照处理相比差异不显著。该研究结果为协调应用氟吡呋喃酮和桨角蚜小蜂绿色防控烟粉虱提供了依据。

臭氧水对韭蛆防治效果及韭菜种籽发芽生长的影响

【目的】确定在韭蛆——韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga防治过程中科学合理地使用臭氧（O3）水的方法,并使其发挥最大用途。【方法】在露地韭菜田块分别浇灌10,15,20和30 mg/L的O3水,在平地覆膜韭菜和小拱棚韭菜中分别浇灌5,10和15 mg/L的O3水,同时在室内用10~15mg/L O3水处理不同虫态的韭菜迟眼蕈蚊（成虫、幼虫和蛹）和韭菜植株,2和10 mg/L O3水浸泡韭菜种籽。然后,测定了O3水对韭蛆防治效果,并评价了O3水对韭菜种籽发芽和生长等的影响。【结果】覆膜条件下,浇灌浓度为10~15 mg/L的O3水,对韭蛆的防治效果非常显著,甚至高达100%;而露地浇灌O3水对韭蛆无明显的防治效果;各种栽培模式下浇灌O3水并没有加重韭蛆对韭菜的直接危害。室内条件下,O3水导致成虫、幼虫和蛹的体形变畸或致死,甚至虫体表面明显被腐蚀;O3水可促进韭菜前期生长,增加株高,但不利于修剪后的须根重新萌发。O3水浸泡韭菜种籽后即时用水清洗,将不影响种籽正常发芽;若只浸泡不清洗,将严重抑制种籽发芽。【结论】采用O3水防治韭蛆的方法值得推荐,但在封闭条件下效果最佳。

环境胁迫下昆虫的耐寒适应机制研究进展

昆虫是变温动物,为了安全越冬,昆虫通常改变自身结构和物质构成以适应低温的到来,这一适应机制与体内特殊的生理生化物质紧密相关,如海藻糖、葡萄糖、甘油、山梨醇、脂肪酸和氨基酸等小分子抗冻保护剂。这些抗冻保护剂具有稳定细胞膜结构和保护蛋白质功能的作用。虽然昆虫耐寒性的研究不断深入,但目前我们仍然很难确定影响耐寒的关键因素是什么?为什么有些昆虫在低于-20℃环境下还能存活?为了弄清这一科学问题,科学家们利用转录组、基因组、蛋白质组和代谢组等各种组学剖析低温胁迫后昆虫生理反应的分子机制。本文旨在综述前人对昆虫耐寒性的研究,为将来其他昆虫或动植物的耐寒性研究提供参考依据。同时,也为新型生物农药的开发和天敌昆虫的人工助增提供广阔思路。

水中亚硝酸盐含量测定

[目的]为探明亚硝酸盐浓度、显色剂的量及测定时间三者间的关系。[方法]观测不同亚硝酸钠浓度、不同显色剂的量以及不同测定时间之间的吸光度值变化动态,并采用Excel和DPS软件对数据进行分析。[结果]结果表明,在等量显色剂条件下,随着亚硝酸钠浓度的不同,它们之间的吸光度值变化呈偏峰态趋势。[结论]该研究为测定大量水样节省了时间,同时也提高了单位时间内的工作效率。

内参基因在昆虫qRT-PCR中的研究进展

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)具有灵敏度高、特异性强等优点,是昆虫目标基因表达和转录分析最常用的技术手段之一。然而,为了消除样本在RNA产量、质量及逆转录效率上存在的差异,在进行qRT-PCR分析目标基因表达量时必须选择合适的"管家基因"作为内参基因。近年来,大量研究表明不同昆虫和不同试验条件选择的内参基因也不尽相同。因此,选择合适的内参基因是正确判断qRT-PCR结果分析的关键。从内参基因的选择、昆虫内参基因的研究和内参基因稳定性评价等几个方面进行综述,以期为研究者在将来的昆虫试验中选择合适的内参基因提供理论参考依据。

“日晒高温覆膜法”在韭蛆防治中的应用

“日晒高温覆膜法”防控韭蛆的技术由中国农业科学院蔬菜花卉研究所张友军研究员团队研发，针对韭蛆不耐高温的特点，在地面铺上透明保温的无滴膜，让阳光直射到膜上，提高膜下土壤温度，当韭蛆幼虫所在的土壤温度超过40℃，且持续3小时以上，则可将其彻底杀死。操作步骤及技术要点如下。①割除韭菜。若韭菜生长稀松，直观很容易看到韭菜的根部和土壤，则可以不割韭菜，直接在地面支起30cm高的棚架，再在棚架上覆膜。

温度胁迫对棉蚜存活及其总蛋白含量的影响

为了探明温度胁迫对不同体色型棉蚜存活状况的影响及其与体内总蛋白含量的关系,对室内饲养的两种体色型棉蚜进行变温（10,15,25和30℃）应激处理,研究温度胁迫对棉蚜存活及其总蛋白含量的影响。结果表明,黄色型和绿色型棉蚜仅在处理时间为1 d时可见死亡现象,在10℃1 d和30℃1 d时存活率最低,分别为83.33%和51.11%。将活蚜放入各自的对照温度下恢复15 h后,同一胁迫温度下,随着应激时间的延长,棉蚜的存活率开始呈下降趋势,以后慢慢上升,两种体色型棉蚜分别在15℃1 d和10℃1 d时存活率最高,达到98.72%和97.48%;且高温有利于黄色型棉蚜生存,低温有利于绿色型棉蚜生存。同一胁迫温度下,随着处理时间的延长,棉蚜体内总蛋白含量呈上升趋势,黄色型和绿色型棉蚜分别在10℃30 min和30℃30 min时最大,达到109.99和108.46μg/mg,超过此时间,棉蚜体内总蛋白含量开始下降,但始终高于各自的对照。棉蚜总蛋白含量随不同时间和温度的变化呈偏峰态趋势,其最佳总蛋白含量的时间和温度区域分别为30-60 min和28-32℃及7-12℃。

保护地豚草昆虫群落结构及动态研究

采用大类群分类法对保护地豚草(Ambrosia artemisiifolia)与非豚草样地中昆虫的群落结构及动态进行了研究,结果表明,在大棚中共采集昆虫17科,属8个目,其蚁科占绝对优势(占昆虫总量的66.35%),其次是蚜科(16.28%)。豚草地昆虫群落<半豚草地昆虫群落<非豚草地昆虫群落;因昆虫的种群差异,在不同样地的数量存在明显差异;随着季节的推移,昆虫群落先增后减,8月份达到最高峰。

高校基层党组织在教学研究中的作用与意义——以长江大学农学院党组织为例

高校教工支部是党在高校的基层组织,是党在高校基层组织中的战斗堡垒,是党的全部工作和战斗力的基础。本文以开展教工支部立项活动培养学生科研兴趣所取得的成绩为例,佐证了新时期高校基层党支部构建新的工作模式——开展支部立项活动的目的与意义,使党的基层组织在成为贯彻"三个代表"重要思想和深入学习实践科学发展观的组织者、推动者和实践者上取得了新进展。

如何用社会主义核心价值观引领事业单位文化建设

文化建设的根本目的是提高人的精神生活,为进一步构建和谐社会起到举足轻重的作物。当今中国提出的文化建设不是一般意义上的文化建设,而是在特定历史条件下的文化建设。事业单位,是指国家以社会公益为目的,由国家机关举办或者其他组织利用国有资产举办的,从事教育、科技、文化、卫生等活动的社会服务组织。因此,事业单位的文化建设必需围绕当代的"社会主义核心价值观"展开。本文拟对社会主义核心价值观引领事业单位文化建设的必要性及存在的主要问题和具体路径进行初步探讨。

臭氧水对韭蛆的防治效果及对韭菜生长的影响

【目的】为科学合理地浇灌臭氧(O_3)水防治韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga幼虫(俗称韭蛆),明确最佳浇灌时期和使用条件。【方法】在平地覆膜环境中浇灌不同浓度(5, 10, 20和30 mg/L)O_3水,调查对韭蛆的防治效果;在平地覆膜环境中不同日光强度、3种不同灌溉环境[平地覆膜、小拱棚和小拱棚+草垫]、2种不同灌溉环境[平地覆膜、小拱棚]的不同浇灌频率等条件下分别浇灌30 mg/L O_3水,调查对韭蛆的防治效果;调查平地覆膜环境中浇灌30 mg/L O_3水对韭菜产量和根系生长的影响;分析日光强度对不同灌溉环境中土壤温度及浇灌O_3水对韭蛆的防治效果的影响。【结果】平地覆膜条件下,O_3水防治韭蛆的最佳浓度为20～30 mg/L。在平地覆膜条件下浇灌30 mg/L O_3水处理中,对韭蛆的防治效果与浇灌当天的日光强度呈正相关;当日光强度超过60 000 lx时,第1天韭蛆的死亡率高达100%;日光强度低于10 000 lx时,对韭蛆无显著的防治效果;日光强度处于中间水平时,前期对韭蛆的防治效果较差,而后期防治效果逐渐增强。土壤升温效果与日光强度呈正相关,也与灌溉环境显著相关,不同灌溉环境下土壤5 cm深处的温度为:平地覆膜>小拱棚>小拱棚+草垫。小拱棚内浇灌O_3水对韭蛆的防治效果显著高于平地覆膜组和小拱棚+草垫组。采取连续多次浇灌O_3水有利于提高O_3水对韭蛆的防治效果,而且小拱棚内韭蛆的防治效果更显著。浇灌O_3水时,进水口离田埂末端的距离不能超过40 m。平地覆膜环境中浇灌30 mg/L O_3水后,韭菜的株高、重量和须根数量显著高于对照组(浇灌清水);韭菜植株分蘖数与对照组差异不显著。【结论】若能科学合理地浇灌O_3水,既能达到防治韭蛆的理想效果,又能促进韭菜生长。

以当今社会现象谈论高等教育

阐述了当今社会现象与教育成败的重大关系,并且以高等教育为例,分析了高等教育在管理体制与教学育人上存在的不足,不利于培养学生的学习兴趣和科研素养,同时也不利于学生领悟做人道理。结合以上不足之处,从高等教育培养人才的角度提出了相应的解决办法。