甲苯胺蓝染色法在宫颈癌普查中的应用

宫颈癌的普查目前普遍采用的方法是巴氏染色法和苏木素染色法。本文介绍对宫颈刮片采用一种简单易行的甲苯胺蓝染色法,并将其染色结果与巴氏染色法和苏木素染色法进行对照,结论较满意。

一氧化氮合酶基因在先天性巨结肠中的表达

目的 研究神经型一氧化氮合酶 (n NOS)基因在先天性巨结肠 (HD)不同肠段的表达。方法 分别取 8例先天性巨结肠患者病变段和正常段平滑肌组织 ,经处理后提取总 RNA,应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)扩增目的基因和看家基因片段 ,观察病变段和正常段的 n NOS基因的表达 ,并与看家基因 (GAPDH)在病变段和正常段的表达作对比。结果 8例患者正常段 n NOS和 GAPDH均有明显的表达 ,病变段 GAPDH亦有明显的表达而 n NOS均无表达。结论 先天性巨结肠患者病变段抑制性神经递质一氧化氮 (NO)减少的原因可能是 n NOS的 m RNA的减少或缺如 。

先天性巨结肠症RET和EDNRB基因的突变

目的:了解中国人群先天性巨结肠症(HD)发病与RET基因,EDNRB基因突变的关系,及同一患者是否两个基因同时突变的状况. 方法:随机将HD患者分2组,即检测RET/EDNRB组(A 组)56例及EDNRB组(B组)40例,同时设二个相同数量对照组(C组).每人采集外周静脉血2-3 mL经盐析法提取DNA后,应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR- SSCP)方法,对RET基因20个外显子中的第6,13,15, 17外显子(E6,13,15,17)和EDNRB基因7个外显子中的第4,5,6外显子(E4,5,6)进行基因突变的检测,将突变样品进行自动测序分析. 结果:A组中2例散发性患者的E13,E17扩增片段在SSCP 分析时有泳动变位,并经DNA自动测序仪检测为基因多态,CTG→CTT,Leu769→Leu,散发性突变频率为4% (2/48);2例家族性患者的E15扩增片段在SSCP分析有泳动变位,DNA测序1例为错义突变Lys889→Thr,另1例为两个同义突变GTGAAGAGGAGCCA→GTTAAGAGGA GTCA分别在V906和$909密码子上,家族性突变频率为25%(2/8);1例散发性短段型患者EDNRB基因E5在SSCP 分析时有泳动变位未能测序;B组中1例散发性短段性患者EDNRB基因的E4在SSCP分析有泳动变位,经DNA测序证实在核苷酸位点831,密码277上G→A的置换, Leu277→Leu为同义突变,突变频率为2.7%(1/37),家族性3例患者未检测出突变.C组未检出RET,EDNRB基因的突变.家族性患者与散发性患者RET突变结果经统计学处理X2=4.95,P<0.05,OR=8,OR95CI=1.28-49.87. 结论:中国人群的先天性巨结肠症发生确实与RET和EDNRB 基因突变有关,家族性HD患者RET基因突变达25%,散发性HD患者主要以EDNRB基因突变为主,无1例患者有RET和EDNRB两个基因同时突变.同时显示有家族史比没有家族史发生HD的危险性大8倍,其可信限在95%.

先天性巨结肠的一种术中快速诊断方法

目的探讨先天性巨结肠的术中快速诊断方法。方法17例术前诊断为巨结肠的患儿,术中分别在狭窄段、移行段和扩张段取三份全层标本,以直肠肛门畸形患儿结肠造瘘术后关闭瘘口时的结肠标本为正常对照,利用一种快速AchE染色方法,将标本孵育时间分别确定为1、3、5、10、15、30min,同时进行冰冻切片HE染色并和正常组比较。结果快速AchE染色法标准孵育时间5min后出现深褐色的沉淀,我们可以识别出增生的胆碱能神经纤维,而正常组神经纤维不显色,如果结合冰冻切片HE染色观察神经节细胞使结果更准确。结论这种简单而可靠的快速AChE染色方法可以和冰冻切片HE染色联合应用在术中诊断HD和IND,并判断异常肠段的范围。

新菌抗癌Ⅰ号治疗肺癌的疗效观察

自1990年9月～1991年6月试用新菌抗癌Ⅰ号(NBAC)治疗肺癌,初步结果表明NBAC对肺癌有一定疗效,病人能较好耐受。 1 材料与方法 NBAC由卫生部武汉生物制品研究所提供。

浅谈初中语文教学中的情感教育

情感教学,是指教师从学生的情感入手,在教学过程中有意识地以积极的情感去感染学生,激励学生,并根据学生的不同情况尽量在多个层面上满足学生的情感需求,让学生在快乐的情绪下积极主动地学习,达到完成教学目标、增强教学效果的目的。

心可舒的临床应用

应用现代科学技术研制的新一代治疗冠心病的特效药──心可舒问世以来，已逐渐应用于临床，至目前为止，我们应用口服的心可舒片治疗冠心病54例，取得满意疗效。

巨结肠类缘性疾病肛管测压、直肠黏膜活检和钡灌肠检查的意义

目的 根据病理学的诊断依据 ,评价先天性巨结肠类缘性疾病 (HAD)中直肠肛管测压、直肠黏膜活检AchE组化染色和钡灌肠检查的特点 ,了解其在诊断上的意义。方法 1999～ 2 0 0 1年间 92例临床诊断为先天性巨结肠 (HD)或巨结肠类缘性疾病并施行手术的患儿 ,根据病理诊断排除HD和HAD共存病变病例 ,筛选出HD 4 0例 ,其中男 36例 ,女 4例 ,平均年龄 2 1个月 ;HAD 34例 ,其中男 2 1例 ,女 13例 ,平均年龄 6 3个月。研究二组的临床征候指标以及在经典的测压、组化以及钡灌肠三项检查上的差别。结果 二组病例相比 ,三项检查每项指标间都存在着极显著差异 (P <0 .0 1) :在HAD组患儿 ,85 %都存在有直肠肛管抑制反射 ,其反射波出现特征性的“W”、“U”波形 ;直肠黏膜AchE组化染色 79%为阴性 ;钡灌肠常不能发现明显的狭窄、移行段 ,但有明显的结肠扩张和2 4h钡滞留。结论 HD和HAD是都以便秘为主要表现的两种不同的疾病。

先天性巨结肠症及其同源病手术中组织化学快速诊断方法

目的探讨术中诊断先天性巨结肠症(HD)及其同源病的最佳方案。方法联合应用改进的乙酰胆碱酯酶(AChE)和乳酸脱氢酶(LDH)染色等组织化学方法对HD及其同源病手术中取得的新鲜组织进行快速诊断。结果58例患儿中共诊断HD 34例、肠神经发育不良症(IND)10例、HD合并IND 4例、神经节细胞减少症4例和神经节细胞未成熟症3例。每例经过几种方法检查的结果均与术后病理检查一致,而快速诊断总共所需时间不超过30 min。结论改进的AChE和LDH染色联合应用在HD的根治手术中,能快速地作出诊断并准确判断病变肠段的范围。

先天性巨结肠RET基因突变的研究

目的从分子水平探讨先天性巨结肠（ＨＤ）的发病机理，了解中国人群ＨＤ发病与酪氨酸激酶受体基因（ＲＥＴ基因）突变的关系。方法３０例ＨＤ患者（４例家族性和２６例散发性）和３０例对照者的外周静脉血经盐析法提取ＤＮＡ后，应用聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）分析方法，对ＲＥＴ基因第１５外显子（Ｅ１５）进行基因突变的检测，对阳性片段进行直接测序。结果２例家族性患者的Ｅ１５扩增片段在ＳＳＣＰ分析时发现有泳动变位。经ＤＮＡ自动测序证实１例为错义突变Ｌｙｓ８８９→Ｔｈｒ，另１例在Ｖ９０６和Ｓ９０９密码子分别存在两个同义突变（ＧＴＧＡＡＧＡＧＧＡＧＣＣＡ→ＧＴＴＡＡＧＡＧＧＡＧＴＣＡ）。结论ＲＥＴ基因突变与中国人群家族性ＨＤ的发生有密切关系。

1008例便秘患儿直肠黏膜乙酰胆碱酯酶检测结果分析

目的 了解直肠黏膜乙酰胆碱酯酶检测在便秘病因诊断中的价值及其临床意义。方法 回顾性分析 10 0 8例便秘患儿直肠黏膜AchE检测结果 ,并与其他临床资料相比对。结果 194例先天性巨结肠症有 185例AchE阳性 ,而 6 1例同源病中仅 37例阳性 ,二者间差异有显著性意义。但不同年龄组的先天性巨结肠症假阴性的发生率无明显差异。在保守治疗成功的 5 6 6例中 ,AchE阴性与弱阳性分别占 6 7.8%与 19.2 % ,强阳性仅占 3%。 39例复发病例中AchE阳性 2 8例。 7例先天性肛门直肠畸形术后并发便秘患者AchE阳性 4例。

先天性胆管扩张症K-ras基因突变分析

目的 了解先天性胆管扩张症(CBD)K-ras基因突变情况。方法 30例先天性胆管扩张症囊肿组织标本均来自我科自1995年1月～2002年9月间手术后切除的囊肿组织标本。标本经甲醛固定,石蜡包埋。正常对照组DNA来自10例健康儿童的血液。采用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)银染法检测K-ras基因121、13和61密码子的突变情况,并对阳性片段进行DNA测序。结果 30例CBD囊肿组织标本中,有4例突变,发生率为13.3％。DNA测序发现K-ras基因点突变发生在第12位密码子,形式为甘氨酸(GGT)→天冬氨酸(GAT),第13、61位密码子均未发现点突变。结论 K-ras基因突变可能是先天性胆管扩张症癌变发生过程中的一个早期信号,故早期手术切除囊肿是必须的。

大鼠肝小肠联合移植模型的建立

本文报告一种采用封闭群大鼠进行的肝小肠联合移植模型。术中供体肝与小肠整块游离和灌注，分开切取。供肝原位、供肠异位移植于受体大鼠。主要血管用Kamada袖套法吻合。正式实验21次，3天以上存活率为43％。结果表明：减少手术时间和简化操作技术是提高成功率的关键因素和基本原则。

环孢素与激素在大鼠小肠移植中的联合应用

报道了应用环孢素Ａ、环孢素Ａ＋强的松及不用免疫抑制剂条件下小肠移植的大鼠存活、排斥反应情况。结果提示应用环孢素Ａ的受体较对照组大鼠存活时间明显延长；环孢素Ａ与强的松联合应用较单用环孢素Ａ的最长存活时间、平均存活时间明显延长。

PCR-SSCP法检测先天性巨结肠酪氨酸激酶受体基因突变

目的探讨酪氨酸激酶受体基因（RET基因）突变与中国人群先天性巨结肠（Hirschsprung’sdisease，HD）发病的关系。方法应用银染聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR－SSCP）分析方法对4例家族性和26例散发性HD患者的基因组DNA针对RET基因第15外显子（E15）进行基因突变的筛查。结果2例家族性患者的E15扩增片段在行SSCP分析时发现有泳动变位。结论RET基因突变对家族性HD患者的发病具有重要作用。银染PCR－SSCP分析方法是检测RET基因突变的快速、简便、有效的方法。

大鼠异位小肠移植酶组织化学的监测

观察大鼠异位小肠移植后应用环孢素Ａ（ＣｓＡ）及不用药条件下移植肠的乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）、单胺氧化酶（ＭＡＯ）、腺甙三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）的活性变化。实验结果提示，未用药组术后排斥反应呈进行性发展，上述酶的活性相应呈进行性下降；应用ＣｓＡ治疗者没有发生排斥反应时，ＡｃｈＥ及ＡＴＰａｓｅ能维持接近于正常水平，当发生排斥时，在病理检查出现改变前３天ＡｃｈＥ及ＡＴＰａｓｅ已有明显下降，可见ＡｃｈＥ及ＡＴＰａｓｅ的活性的改变可作为监测排斥反应的指标，ＡＴＰａｓｅ还可作为反映、预测移植肠的活力和预后的指标。

大鼠肝小肠联合移植中肝对小肠保护作用的研究

目的:研究肝小肠联合移植中肝保护小肠的作用。方法:用封闭群大鼠建立肝小肠联合移植模型。实验分组:肝小肠联合移植组9例(SD→SD)。单独小肠移植组21例,其中 SD→SD13例,SD→Wistar8例。术后不用免疫抑制药自然生存,濒死或术后14天时处死作病检。结果:术后14天供肠排斥率在单独小肠移植组为100%,肝小肠联合移植组为55.6%(P<0.01)。结论:封闭群大鼠肝小肠联合移植中肝对小肠保护作用,使供肠避免或推迟被排斥。