类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的表型及其侵蚀软骨的特性

目的：分离培养类风湿关节炎（RA）滑膜细胞、检测其表面标志及研究其对软骨的侵蚀特性。方法：取6例RA患者滑膜，分别采用组织块、胰蛋白酶消化及胶原酶、胰蛋白酶先后消化培养后，用相差显微镜观察细胞的形态、用流式细胞术（FCM）检测培养细胞表面标记CD3、CD19、CD14、CD68、CD44、CD55、CD90及细胞内脯氨酰-4-羟基化酶（Prolyl-4-hydroxylase）的表达并与传统的免疫组化染色法检测波形蛋白的表达相比较。并用SCID小鼠研究成纤维样滑膜细胞（FLS）对软骨的侵蚀作用。结果：（1）3种方法均分离出FLS，胶原酶与胰蛋白酶先后消化法分离细胞所需时间少、获得的细胞数多、纯度较高。（2）第2代细胞与第3代细胞的均质性分别达90％及98％以上。（3）在第3～6代的细胞比较稳定，增殖活跃；第7代以后增长缓慢，逐渐老化。（4）流式细胞术分析显示，原代细胞随着传代次数的增加逐渐纯化，第3～6代CD90^＋细胞〉98％，脯氨酰4-羟基化酶＋细胞〉98％；与免疫组化检测波形蛋白的表达相一致。（5）将第4～5代的细胞和软骨一起植入SCID小鼠，或单独注入SCID小鼠的膝关节，都可导致软骨的浸蚀性破坏。结论：以胶原酶与胰蛋白酶先后消化分离FLS，效果较好，CD90、脯氨酰4-羟基化酶可作为鉴定FLS的标志。用SCID小鼠可研究FLS对软骨的侵蚀特性。

慢性肾功能衰竭患者血液透析并发心律失常的防治

目的探讨慢性肾功能衰竭血液透析患者心律失常的预防及治疗措施。方法总结130例患者行血液透析1183次的临床资料,分析心律失常者的临床特点及其处置情况。结果发生心律失常246次,发生率为20.8%;其发生与基础病变、营养状况、炎症状态、电解质平衡及透析时间等有关,及时调整透析方案、合理应用抗心律失常药物能纠正心律失常、改善症状。结论随着慢性肾功能衰竭血液透析患者透析时间延长、年龄增长,在感染、营养不良、电解质紊乱时心律失常可能发生或加重,合理的透析方案、抗心律失常药物的合理应用及去除诱因可改善患者症状及心功能,从而改善预后。

风湿性关节炎患者T细胞表达CCR5和CXCR3的三色流式细胞分析

目的 在单细胞水平上，研究类风湿性关节炎（ＲＡ）患者滑液及外周血中Ｔ淋巴细胞上ＣＣＲ５及ＣＸＣＲ３的表达，并结合临床资料分析其在ＲＡ发病中的可能作用机制及临床应用。方法 分离１５例ＲＡ患者的滑液单个核细胞（ＳＦＭＣ）、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），及１５正常人ＰＢＭＣ（对照），以三色荧光素标记物进行流式细胞术分析Ｔ细胞上ＣＣＲ５及ＣＸＣＲ３的表达。结果 与ＰＢＭＣ相比较，ＲＡ患者ＳＦＭＣ中Ｔ细胞上ＣＣＲ５及ＣＸＣＲ３的表达显著增高（特别是ＣＣＲ５）；而ＣＸＣＲ３的表达个体差异较大；与正常人相比较，ＲＡ患者初发或活动期未治时，ＰＢＭＣ中ＣＣＲ５及ＣＸＣＲ３的表达明显增多。 ＣＣＲ５及ＣＸＣＲ３的表达率与患者的ＥＳＲ及ＣＲＰ相关。结论 ＣＣＲ５＋Ｔ细胞积聚在ＲＡ患者的病变关节内，且与ＲＡ的病情密切相关。

系统性红斑狼疮肾炎并发气管-食管瘘1例

患者女,40岁,以面部红斑、四肢皮疹发病7年,近期加重并反复发热、体温40℃,伴咳嗽、咳痰,有时刺激性呛咳入院。在外院求治2个月,用过多种抗生素如先锋霉素、头孢菌素、左氧氟沙星等均无效，病情渐重，尿少，精神极差，胸闷气短，不能平卧。

狼疮肾衰竭25例临床分析

目的：探讨狼疮肾衰竭的临床特点及防治措施。方法：回顾性分析本科2003年10月-2008年10月收治的212例次狼疮性肾炎患者的资料。结果：发生狼疮肾衰竭25例,发生率为11.8%;其中男5例,女20例,年龄18-52岁,平均31岁;从发病至肾衰竭发生的时间为4-126个月,平均46个月;有明确诱因18例：包括不规则使用激素或免疫抑制剂11例,肺部感染6例,药物诱发1例;另有7例原因不明;有合并症的15例,包括心肺功能不全6例,消化道出血3例,肝酶增高3例,狼疮脑病2例,狼疮性肝炎1例。经给予DNA免疫吸附、血浆置换、血液透析等血液净化;甲基强的松龙冲击治疗、环磷酰胺冲击或加用免疫球蛋白等综合治疗,25例均病情好转出院,15例脱离透析。结论：狼疮肾衰竭的发生多与狼疮活动、不正规治疗、感染等有关,常病情危重,合并症多,合并心肺功能不全多见。对狼疮肾衰竭,应根据病情及早使用血液净化,合理应用甲基强的松龙及环磷酰胺等冲击治疗,可明显提高抢救成功率,改善患者预后。

老年发病的成人Still病13例临床分析

目的探讨老年发病的成人Still病临床特点与治疗方法。方法回顾性分析13例老年成人Still病患者的临床资料。结果本组均有发热,伴有皮疹、关节疼痛等症状,合并症多;实验室检查示多器官功能损害明显;治疗困难,预后比非老年患者差。结论成人Still病是老年患者发热的较常见原因,肝、肺、关节等多器官损害明显,治疗中矛盾多,预后不良;治疗药物主要为非甾体抗炎药、糖皮质激素等,重症患者应联合应用免疫抑制剂。

系统性红斑狼疮肾炎并发食管-气管瘘1例

患者女，40岁，以面部红斑、四肢皮疹发病7年，加重并反复发热、体温40℃，伴咳嗽、咳痰．有时刺激性呛咳，在外院求治2个月，用过多种抗生素如先锋霉素、头孢菌素、左氧氟沙星等均无效，病情渐重，尿少，精神极差，胸闷气短，不能平卧。患者不敢进食，述体重2周内减轻10妇（患者正常时体重不足50kg）；入院体检发现，体温38℃，双肺可闻及湿啰音。明显胸腔积液，心包积液。外周血白细胞升高，胸部X线检查提示肺部感染；抗核抗体（ANA）阳性，尿蛋白阳性，抗ds—DNA抗体、抗Sm抗体阳性,血沉105mm／h，诊为系统性红斑狼疮（SLE），SLE肾炎，狼疮活动，甲泼尼龙冲击、抗生素治疗后，体温恢复正常，胸闷气短明显好转，但仍有刺激性呛咳．不敢进食．考虑食管-气管瘘，经碘油食管造影证实后行食管支架治疗使患者获治。

系统性血管炎合并高原红细胞增多症一例报告

系统性血管炎多见于中青年女性,男性患者相对较少,本文报告1例68岁男性系统性血管炎合并高原红细胞增多症患者的临床表现及诊治体会。病例报告患者男性,68岁,因反复四肢末端红肿、青紫、疼痛、坏疽3年,进行性加重伴体重下降2月余入院。患者3年前开始四肢末端红肿、青紫、疼痛反复发作,伴全身紫红色或暗红色皮疹、瘙痒,

基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9与类风湿性关节炎关节破坏的关系

目的:观察血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9与类风湿性关节炎患者(Rheumatoid arthritis,RA)关节破坏的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法测定90例未经治疗的早期RA患者及20例健康人血清中MMP-2、MMP-9,并分析其与RA患者X线表现积分(ΔLarsen)及健康评分(ΔHAQ)、CRP的关系。结果:血清MMP-2、MMP-9水平与C反应蛋白(CRP)、ΔLarsen、ΔHAQ显著相关,其相关系数及P值分别为r=0·40和0·46,P<0·01;r=0·28和0·31,P<0·05;r=0·30和0·34,P<0·01。18例最初CRP正常的患者,MMP-2及MMP-9水平与观察12个月后出现关节侵蚀改变相关(r=0·59和0·48,P<0·05)。回归分析发现,最初无骨侵蚀改变的患者,Larsen积分显示的骨侵蚀进展与MMP-2含量密切相关(r=0·32,P<0·01)。结论:血清MMP-2、MMP-9水平与RA患者的病情活动及早期关节的骨侵蚀显著相关,可以作为无骨破坏的早期RA患者出现骨侵蚀的有益预测指标。

CD147与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MMPs合成的关系

目的观察类风湿性关节炎(rheum atoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞(fibrob last-like synoviocytes,FLS)与高表达CD147的单核细胞株(THP-1)共培养后,基质金属蛋白酶(m atrix m etalloprote inases,MMPs)合成的变化。方法从手术切除的RA患者滑膜组织中,分离FLS,经流式细胞术测定CD14,CD68及免疫组化测定波形纤维蛋白(vim en-tin)证实后,传代培养。将FLS与高表达CD147的THP-1共培养,观察THP-1细胞对FLSMMPs合成的影响。用明胶酶谱法测FLS MMP-2,MMP-9含量。同时观察CD147拮抗肽(AP9)对MMPs表达的影响。结果高表达CD147,低表达MMP-2、MMP-9的THP-1细胞与CD147表达水平低的RA FLS混合培养后,FLS合成MMP-2、MMP-9水平显著升高,随着THP-1细胞数的增加,MMP-2、MMP-9的合成量也增加。THP-1对FLS合成MMP-2、MMP-9的刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制。结论高表达CD147的THP-1细胞对共培养的RA FLS合成MMP-2、MMP-9有刺激作用,这种刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制,提示THP-1表面的CD147对FLS合成MMPs有促进作用。

流式细胞术检测淋巴细胞增殖方法的建立

目的 :建立一种用流式细胞仪同时测定T淋巴细胞增殖与细胞因子分泌的方法。方法 :用非特异性刺激剂PMA、PHA刺激 1 0例正常人外周血单个核细胞 ,体外培养 2、4、6、8、1 0h ,流式细胞术在单细胞水平检测T淋巴细胞的功能性激活、表面活化标志性抗原 (CD69)的表达、DNA合成 (BrdU掺入法 )及胞内细胞因子 (IL 4、IFN γ)分泌。选择合适的刺激剂、调整细胞浓度、优化实验方法 ,确定最佳实验条件。结果 :BrdU掺入法测定T淋巴细胞增殖 ,最佳的反应细胞浓度为 1× 1 0 6ml-1 ,比较不同刺激剂和体外培养时间 :PMA(2 0ng ml)刺激后 8hT细胞中CD69+、BrdU+双阳性细胞比例最高 (82 3 %± 7 2 % ) ,IFN γ+、IL 4+细胞百分率分别为 2 5 2 %± 3 7%和 3 4%± 1 6 % ,均显著高于未刺激组 (P <0 0 1 )。结论 :应用流式细胞术进行单个核细胞的增殖分析可以同时检测细胞表面活化抗原的表达、DNA合成及胞内细胞因子的分泌。此方法能够分析不同亚群细胞对于不同刺激原的反应和激活表型。敏感性高、重复性好 。

高原地区不同移居时间正常成人血液流变学测定及分析

血液流变学是一门新的科学。目前在许多疾病的诊断、治疗及预防方面有着极为重要的作用,临床应用广泛。尤其对高原疾病的发生发展过程及预防治疗方面的研究更为重要。高原地区不同移居时间正常成人血液流变学方面有什么不同,尚未见有报道。本文对高原地区不同移居时间225名正常成人进行了血液流变学测定,现报告如下。

基质金属蛋白酶2,9与类风湿性关节炎病情活动及关节破坏相关

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者血清基质金属蛋白酶MMP - 2 ,MMP - 9与病情活动及早期关节破坏的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法测定98例病史少于12个月未经治疗的早期RA患者及2 0例健康人血清中MMP - 2、MMP - 9,并分析其与RA患者X线表现积分(△Larsen)及健康评分(△HAQ)、CRP的关系。结果:血清MMP - 2、MMP - 9水平与C反应蛋白(CRP)、△Larsen、△HAQ显著相关,相关系数及P值分别为r=0 .4 2 ,0 .4 9,P <0 .0 1;r=0 .2 3,0 .32 ,P <0 .0 5 ;r =0 .32 ,0 .30 ,P<0 .0 1。MMP - 2、MMP - 9与关节侵蚀改变的出现相关(r=0 .6 5和0 .5 2 ,P <0 .0 5 )。Larsen积分显示骨侵蚀进展与MMP - 2水平关系更密切(r=0 .30 ,P <0 .0 1)。结论:血清MMP - 2、MMP - 9水平与RA患者病情活动及早期关节骨侵蚀显著相关,可以作为早期患者出现骨侵蚀的有益预测指标。

慢性心衰患者年龄与端粒及心肌胶原的相关性研究

目的 探讨衰老与慢性心衰心肌纤维化的相关性及其可能机制。方法 将100例心脏病患者分为非心衰（心功能Ⅰ级）组50例,心衰（心功能Ⅱ~Ⅳ级）组50例。采用RT-PCR法检测外周血白细胞中端粒长度,应用ELISA方法检测血清中PⅠCP、PⅢNP的浓度,并行相关性分析。结果 （1）心衰组血清PⅠCP、PⅢNP含量较非心衰组均明显增高（P〈0.05）;血清中PⅠCP、PⅢNP含量与心功能分级均呈显著正相关（P〈0.05）。（2）心衰组端粒长度较非心衰组明显缩短（P〈0.01）;端粒长度与心功能分级呈显著负相关（P〈0.05）。（3）心衰组及非心衰组血清中PⅠCP、PⅢNP含量均与年龄呈显著正相关（P〈0.05）;（4）两组端粒长度均与年龄呈显著负相关（P〈0.05）。（5）心衰组端粒长度与血清PⅠCP、PⅢNP浓度均呈显著负相关（P〈0.01）。结论 血清PⅠCP、PⅢNP浓度及端粒的长度与心功能密切相关,增龄（衰老）是心肌胶原增加及端粒缩短的独立危险因素,在慢性心衰心肌纤维化的发生、发展中起重要作用。

格尔木地区112例高原多血质患者血液流变学测定分析

高原多血质是高原地区常见病,多发病,严重威协着高原地区人群的健康。为了进一步了解高原多血质在血液流变学方面的变化,本文对格尔木地区112例高原多血质患者血液流变学进行了测定,现报告如下: 资料及方法 本组112例,男110例,女2例,年龄17～62岁,平均31岁。职业分布:干部25例,工人52例,战士35例。汉族102例,回族10例。所有患者均为移居者,移居时间5～37年,平均29.5年。格尔木地区海拔2801米,为干旱沙漠地带。大气中氧分压仅为海平面的70％。

光伏并网逆变器输出能量最大化的设计方法

针对太阳能电池工作原理的特殊性,提出了一种多电平光伏并网逆变器输出能量最大化的设计方法,在以单位功率因数输出高质量电流波形的同时,保证了太阳能电池电势能的不间断输出。同时给出一种有效的正弦脉宽调制(SPWM)方案,通过改变基本逆变单元的连接方式,实现六电平输出。仿真和实验结果验证了该设计的可行性和有效性。