糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠PERK-CHOP-Caspase-12通路的影响

目的观察糖络宁对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经内质网应激相关PERK-CHOP-Caspase-12通路的调节作用。方法选用8周龄雄性SD大鼠,除空白对照组外,采用高脂饲料致高血脂联合链脲佐菌素腹腔注射诱导高血糖致DPN大鼠模型。将高脂高糖大鼠随机分为模型对照组、阳性药(氧化三甲胺)对照组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组,连续给药12周。给药过程中,动态监测大鼠血糖、血脂,确保糖尿病造模成功。12周后采用免疫荧光法检测坐骨神经中葡萄糖调节蛋白(glucose regulatory protein 78k D,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)、蛋白激酶样内质网激酶(PKR-like ER kinase,PERK)、caspase-12和caspase-3的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组坐骨神经中GRP78、CHOP、PERK、Caspase-12和Caspase-3的表达均显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型对照组比较,糖络宁低剂量组和高剂量组GRP78表达显著升高(P<0.01),CHOP、PERK、Caspase-12和Caspase-3表达明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论糖络宁防治DPN的作用机制与调节坐骨神经中内质网应激相关的PERK-CHOP-Caspase-12通路相关蛋白表达而抑制细胞凋亡有关。

基于产量反应和农学效率的苹果养分专家系统构建及验证

【目的】构建基于产量反应与农学效率的苹果养分专家施肥系统,通过田间试验验证其可行性,为我国苹果科学施肥提供新方案。【方法】搜集整理2002—2017年272个苹果田间试验数据,计算产量反应、养分内在效率、农学效率等参数,采用QUEFTS模型评估苹果养分吸收特征,建立基于产量反应和农学效率的苹果养分专家施肥系统。2017—2019年,在山西运城、陕西洛川和长武共选择12个盛果期‘红富士’苹果园开展田间验证试验,即采用苹果养分专家推荐施肥(Nutrient Expert,NE)、农民习惯施肥(farmers’practice,FP)和当地农技部门测土配方推荐施肥(soil test,ST)3种施肥技术,研究苹果产量、氮肥利用效率及经济效益响应特征。【结果】苹果产量平均为33.91 t/hm^(2);苹果果实N、P、K含量分别为3.19、0.57、8.07 g/kg,枝条N、P、K含量分别为7.57、1.12、4.61 g/kg;叶片N、P、K含量分别为24.02、1.38、8.58 g/kg;地上部N、P、K养分吸收量分别为89.06、11.11、83.32 kg/hm^(2);N、P、K养分收获指数分别为0.19、0.27、0.48 kg/kg。QUEFTS模型表明,目标产量所需养分在达到潜在产量50%~60%前呈直线增长,吨果N、P、K养分吸收量分别为3.1、0.4、2.9 kg,N、P、K养分需求比例约为7.8∶1.0∶7.3。苹果氮、磷、钾肥增产量与农学效率呈极显著的二次曲线关系(P<0.01),相关系数分别高达0.804(n=270)、0.763(n=257)和0.794(n=264),关系式分别为AEN=−0.0054YRN 2+1.767YRN−0.056、AEP=−0.0053YRP 2+2.775YRP+0.538、AEK=−0.0036YRK 2+1.629YRK+1.653。田间验证试验结果表明,与FP相比,NE处理氮、磷和钾肥施用量分别降低41.9%、37.0%和43.6%,而苹果产量、氮素农学效率、氮素偏生产力以及经济效益则分别提高17.3%、81.7%、80.6%和21.9%;与ST处理相比,NE处理氮、磷和钾肥施用量分别减少20.8%、25.0%和29.7%,而苹果产量、氮素农学效率、氮素偏生产力以及经济效益则无显著差异。【结论】采用QUEFTS模型建立的基于产量反应与农学效率的苹果养分专家推荐施肥系统,能够实现优化苹果施肥、增加苹果产量、提高肥料利用率以及经济效益的多赢目标,作为新的苹果合理施肥技术是可行的。

糖痹康对DPN大鼠山梨醇通路的影响

目的探讨糖痹康对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠山梨醇通路的影响。方法按空腹血糖水平,从80只Wister大鼠中随机抽取20只作为空白对照组,其余60只大鼠采用一次性腹腔注射60 mg/kg STZ建立糖尿病模型,1周后测空腹血糖,血糖≥16.7 mmol/L者入选高血糖模型。高血糖造模8周后,以空腹血糖升高,坐骨神经神经传导速度降低,鼠尾热痛阈值升高,坐骨神经轴突萎缩和脱髓鞘作为DPN造模成功。将40只DPN大鼠随机分为模型对照组,弥可保组,糖痹康低、中、高剂量组,给予药物治疗4周后测定醛糖还原酶活力,Na+-K+ATP酶活力及山梨醇含量。结果与空白对照组比较,模型对照组、弥可保组及糖痹康低、中、高剂量组大鼠醛糖还原酶活力升高(P<0.01),坐骨神经中山梨醇含量增加(P<0.01),Na+-K+ATP酶活力降低(P<0.01);与模型对照组比较,弥可保组及糖痹康低、中、高剂量组大鼠醛糖还原酶活力降低(P<0.01),坐骨神经中山梨醇含量降低(P<0.01),Na+-K+ATP酶活力升高(P<0.01)。结论糖痹康能够降低醛糖还原酶活力,降低山梨醇含量及提高ATP酶活力,通过调节山梨醇代谢通路改善DPN,可能是糖痹康治疗DPN的作用机制之一。

针灸、刺络和耳穴压丸法综合治疗痔疮疗效观察

目的评价针灸、刺络和耳穴压丸综合治疗痔疮的临床疗效。方法将110例痔疮患者随机分为针灸、刺络和耳穴压丸法综合治疗组与药物组,每组各55例。综合治疗组先在委中穴点刺放血,或与委中处见怒张的血管刺破出血,再取董氏三其穴(其门、其正、其角),针刺时采用皮下针,从其门向其正至其角横刺(直刺无效),最后采用耳穴压丸法,取穴大肠、直肠、肛门、脾等穴,用王不留行种子贴于穴位处按压。药物组采用马应龙麝香痔疮膏、槐角丸、甲硝唑治疗。结果综合治疗组总有效率92.7%,药物组总有效率69.1%,两组总有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05),综合治疗组疗效优于对照组。结论针灸、刺络和耳穴压丸综合治疗痔疮有效,值得推广。

淫羊藿女贞子配伍对激素局部干预哮喘大鼠气道病理改变的影响

目的研究平补阴阳药淫羊藿女贞子对布地奈德局部干预哮喘大鼠支气管肺组织病理改变的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、哮喘模型组(M组)、激素干预组(GC组),淫羊藿女贞子组(YN组),淫羊藿女贞子合激素干预组(GC+YN组),每组8只。N组、M组给予等体积的生理盐水雾化及灌胃,GC组给予0.01%布地奈德雾化20 min,YN组给予淫羊藿女贞子煎剂3.5 g/kg灌胃,GC+YN组给予0.01%布地奈德雾化20 min+淫羊藿女贞子煎剂3.5 g/kg灌胃。观察各组大鼠支气管基底膜周径(Pbm),计算标准化气道总管壁厚度(Wat)及标准化平滑肌厚度(Wam)。测量上皮层厚度及胶原面积,计算标准化胶原面积。计数杯状细胞数量,并测量杯状细胞面积、上皮层面积,计算杯状细胞面积百分比。结果 GC组可显著降低Wat、Wam及杯状细胞计数(P<0.05);YN组仅能降低Wam值(P<0.01);GC+YN组不仅能显著Wat、Wam及杯状细胞计数,并能抑制胶原纤维增生,降低杯状细胞面积百分比(P<0.01)。结论淫羊藿女贞子合用布地奈德可抑制哮喘炎症及气道重塑的病理改变。

糖络宁对STZ诱导DPN大鼠氧化应激的影响

目的观察糖络宁对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠氧化应激的影响。方法SD大鼠60只,随机选取10只为正常对照组,其余50只大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ建立糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、α-硫辛酸组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组。药物干预12周后,检测大鼠血清中总抗氧化能力(T-AOC)及抗氧化酶如谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等的活力,同时测定氧化应激产物如丙二醛(MDA)含量、活性氧自由基(ROS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活力。结果与空白对照组比较,模型对照组T-AOC降低(P<0.01),抗氧化酶GSH-Px、SOD、CAT活力降低(P<0.01);氧化应激产物MDA、ROS含量升高(P<0.01),iNOS的活力升高(P<0.01)。与模型对照组比较,糖络宁低剂量组T-AOC升高(P<0.01),抗氧化酶GSH-Px、SOD、CAT活力升高(P<0.01);氧化应激产物MDA含量降低(P<0.01),ROS含量降低(P<0.05),iNOS的活力降低(P<0.01)。糖络宁高剂量组T-AOC的活力升高(P<0.05),CAT的活力升高(P<0.01);氧化应激产物MDA含量降低(P<0.01),ROS含量降低(P<0.05),iNOS的活力降低(P<0.01)。结论中药复方糖络宁可以明显提高具有抗氧化能力物质SOD、GPx、CAT含量和T-AOC的活力,清除对周围神经有害的氧化代谢产物及氧化应激活性物质MDA、ROS和iNOS的含量及活力,具有明显抗氧化应激能力,减轻氧化损伤,对糖尿病周围神经病变(DPN)有明显的保护作用。

糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经功能及内质网应激IRE1α-XBP-1-CHOP通路的影响

目的探讨糖络宁对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)大鼠内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ER stress)IRE1α-XBP-1-CHOP通路的影响。方法建立DPN大鼠模型,设置空白对照组(Control)、模型对照组(Model)、氧化三甲胺组(TMAO)、糖络宁低剂量组(LTLN)和糖络宁高剂量组(HTLN),分别灌胃给药12周。采用放射免疫试剂盒测定稳态胰岛素抵抗指数;采用透射电镜和劳克坚劳蓝染色观察坐骨神经结构;测定鼠尾热痛阈值、神经传导速度和蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5, PGP 9.5)蛋白的表达并检测周围神经功能;采用Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP 78)、X盒结合蛋白1(X-box binding protein1, XBP-1)、凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(CCAAT/enhancer binding protein Homologous protein, CHOP)、B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)和磷酸化真核翻译起始因子2α(phospho-ukaryotic translation initiation factor 2α, P-eIF 2α)的蛋白表达;通过免疫荧光组织化学法检测肌醇激酶1 (inositol requiring enzyme1α, IRE 1α)、生长停滞及 DNA损伤基因34 (growth-arrest and DNA damage-inducible gene 34, GADD 34)和内质网氧化蛋白(endoplasmic oxidoreductin-1-like, Ero1α)指标。结果与模型组比,糖络宁高、低剂量组能够有效改善坐骨神经的结构和功能,并能够影响内质网应激IRE1α-XBP-1-CHOP凋亡通路提高GRP 78、Bcl-2和P-eIF 2α的表达(P<0.05),降低P-IRE1α、XBP-1、CHOPGADD 34、Bax和Ero1α的表达(P<0.05)。结论糖络宁能够通过抑制ER stress中IRE1α-XBP-1-CHOP凋亡途径相关蛋白的表达,从而减轻ER stress诱导的细胞凋亡,改善坐骨神经的结构和功能从而防治DPN。

纯生物柴油掺PODE对船机燃烧及颗粒排放的影响

在一台船舶柴油机上对D100(纯柴油)、B100(纯生物柴油)和B90P10(纯生物柴油与PODE(聚甲氧基二甲醚)按9:1体积比掺混组成的混合燃料)3种燃料的燃烧过程和颗粒物排放进行了试验研究.结果表明,B100和B90P10的缸内最高压力相比D100依次升高,最高燃烧压力对应的曲轴转角依次提前;低负荷时,B100和B90P10的压力升高率峰值、放热率峰值及燃烧初期的燃烧温度与D100相比依次明显增加.B100可大幅降低船舶柴油机的碳烟,掺混PODE碳烟排放进一步降低;高负荷和低负荷时,B90P10的碳烟颗粒排放因子分别为11.80和17.77mg/(kW·h),与D100相比降幅分别达64.21%和76.34%.B100和B90P10的颗粒物排放总数量显著高于D100,且增加的颗粒以小粒径的核模态为主.

糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨糖络宁对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠Nrf2/ARE通路相关蛋白的影响。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和链脲佐菌素(STZ)组,STZ组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ,造模1周后,将空腹血糖浓度≥16.7 mmol/L的大鼠稳定1个月后,随机分为模型对照组、α-硫辛酸组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组,并给予相应药物12周。麻醉取大鼠坐骨神经,采用免疫组织化学方法检测大鼠坐骨神经Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、及谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱,脱髓鞘严重,坐骨神经中Keap1、Nrf2、HO-1和γ-GCS的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,糖络宁低、高剂量组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱和脱髓鞘现象得到改善,其中糖络宁低剂量组Keap1、Nrf2表达增加,糖络宁高剂量组HO-1、γ-GCS表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论糖络宁能够改善DPN大鼠坐骨神经的病理状态,上调Nrf2/ARE信号通路中Keap1、Nrf2、HO-1及γ-GCS的表达,增强机体抗氧化应激的能力。

基层中医外感病诊治情况的问卷调查研究

为调查基层医生行医习惯及其对外感病就诊患者分布情况的认知和治疗行为,通过网络问卷调查的方式,在2020年2-3月进行问卷调查。用于分析的问卷共300份,发现基层医生门诊中外感病患者占比较高;基层医生能够使用多种中医辨证方法;治疗外感病擅长使用的中药有柴胡、桂枝、麻黄等;擅长使用方剂有桂枝汤、小柴胡汤、麻黄汤、葛根汤、小青龙汤等;常用中成药有小柴胡颗粒、连花清瘟胶囊、风寒感冒颗粒等;在使用中药、中成药的基础上还经常合用针灸、西医治疗、拔罐等治疗手段。认为经方医学是基层中医的核心辨证模型和主要诊疗手段,主张通过运用现代技术和手段推进经方研究。

糖络宁对DPN大鼠和雪旺细胞内质网应激PERK通路的影响

目的：观察糖络宁对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠和雪旺细胞内质网应激RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶（PERK）通路相关蛋白和mRNA表达的影响。方法：60只SD雄性大鼠,除空白组外,其余各组大鼠采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ,35 mg·kg^-1）复制DPN大鼠模型,随机分为模型组,氧化三甲胺组,糖络宁低、高剂量组,连续给药12周。采用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠坐骨神经病理学改变,免疫荧光染色法检测大鼠坐骨神经中p-PERK,磷酸化的真核翻译起始因子2a（p-eIF2a）和转录活化因子4（ATF4）蛋白的表达;建立高糖诱导的雪旺细胞模型,分为25 mmol·L^-1葡萄糖组（control）,150 mmol·L^-1葡萄糖组（model）,150 mmol·L^-1葡萄糖＋0.1%,1%和10%糖络宁组,分别干预24,48 h。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测细胞中PERK,核转录因子E2相关因子2（Nrf2）,血红素加氧酶-1（HO-1）,B淋巴细胞瘤-2相关的X蛋白（Bax）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA表达水平。结果：坐骨神经病理学改变：空白组大鼠坐骨神经有髓神经纤维的髓鞘结构完整致密,形态规则,排列整齐。模型组出现严重脱髓鞘现象,结构松散,形态不规则,排列紊乱。糖络宁组有轻微脱髓鞘现象,结构近似完整,形态近似规则。经积分吸光度统计,与空白组相比,模型组明显降低（P〈0.01）;雪旺细胞PERK,Nrf2,HO-1,Caspase-3和Bax mRNA表达水平,与空白组比较,同时相的模型组中PERK,Bax和Caspase-3 mRNA的表达明显升高（P〈0.05,P〈0.01）,与模型组比较,同时相的糖络宁3个含药血清剂量组中以上3个指标表达明显降低（P〈0.05,P〈0.01）,而Nrf2和HO-1 mRNA的表达明显升高（P〈0.05,P〈0.01）;坐骨神经中p-PERK,p-eIF2a和ATF4蛋白表达,与空白组比较,模型组蛋白表达量显著增加（P〈0.01）;与模型组比较,糖络宁组蛋白表达量显著减少（P〈0.01）。结论：糖络宁能够减轻坐骨神经组织的病理损伤,其防治DPN的作用机制可能与调节内质网应激时PERK相关途径包括抑制PERK/eIF2a途径同时促进PERK/Nrf2途径有关。

淫羊藿-女贞子抗维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用机制探讨

目的:研究淫羊藿女贞子水煎剂及其有效成分提取物防治维甲酸(RA)致大鼠骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组,即正常组、模型组、淫羊藿-女贞子水煎剂组、淫羊藿-女贞子提取物低、中、高剂量组,RA(70 mg·kg-1)ig造模,造模的同时给药,给药组分别给予淫羊藿-女贞子水煎剂(9.5 g·kg-1)及药对有效成分提取物低、中、高3个剂量(50,100,200 mg·kg-1)ig治疗2周,免疫组化法检测骨组织中凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),p53的蛋白表达;实时RT-q PCR法检测骨组织中转化生长因子-β1(TGF-β1),果蝇MAD类似基因2(Smad2),Smad3,Smad7 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠骨组织Bcl-2蛋白表达明显降低,而p53蛋白表达显著升高,骨组织TGF-β1及Smad2,Smad3 mRNA相对表达量均明显下降,Smad7 mRNA相对表达量明显升高,均具有统计学差异(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组可不同程度上调Bcl-2以及TGF-β1,Smad2,Smad3的表达水平,下调p53,Smad7的表达水平,均具有明显统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论:淫羊藿-女贞子抗OP的作用机制可能与其维持凋亡与抗凋亡间的平衡,抑制骨组织细胞凋亡以及调控TGF-β/Smads通路信号转导有关。