正交试验法优化决明子的炮制工艺

目的建立决明子总蒽醌(含游离蒽醌)的含量测定方法并采用正交试验法优化决明子的炮制工艺。方法采用差示分光光度法建立决明子总蒽醌(含游离蒽醌)的含量测定方法;以游离蒽醌含量与总蒽醌含量比值为综合评价指标,考察《中华人民共和国药典》2020年版收载的清炒、砂炒、蛤粉炒对决明子游离蒽醌和总蒽醌的含量及综合评价指标的影响。结果决明子总蒽醌(含游离蒽醌)的含量测定线性方程为△A=0.0501c-0.0015,r=0.9999,方法学验证符合要求;最佳的炒制方法为蛤粉炒,蛤粉炒工艺为武火、炒制时间为3min。结论差示分光光度法可用于决明子总蒽醌(含游离蒽醌)的含量测定,蛤粉炒过程受热均匀,决明子无煳化、焦化现象,工艺稳定,可用于决明子的炮制。

决明子总蒽醌提取物抗氟尿嘧啶致小鼠肝损伤的谱效关系

目的研究决明子总蒽醌提取物抗氟尿嘧啶(5-Fu)致小鼠肝损伤的谱效关系,明确其药效成分群。方法通过腹腔注射5-Fu建立小鼠肝损伤模型,以联苯双酯为阳性对照,检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及肝组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)的活性,考察决明子总蒽醌提取物(0.4、0.8和1.6 g/kg)抗5-Fu致小鼠肝损伤的作用。建立10批决明子总蒽醌提取物HPLC指纹图谱。基于灰色关联度法研究决明子总蒽醌提取物抗5-Fu致小鼠肝损伤的谱效关系并筛选其药效成分群。结果与正常组比较,模型组各项指标差异均有统计学意义(P<0.05),提示造模成功。与模型组比较,决明子总蒽醌提取物各剂量组小鼠血清中ALT、AST活性显著降低(P<0.05);SOD、T-AOC活性显著升高(P<0.05);MPO水平显著降低(P<0.05)。决明子总蒽醌提取物HPLC指纹图谱中31个成分与抗5-Fu致小鼠肝损伤的药效指标具有较好的关联性,但关联度不同。位于关联度前15位且已知的成分分别为橙黄决明素(第6号峰)、大黄酸(第11号峰)、大黄素(第22号峰)、大黄酚(第29号峰)及大黄素甲醚(第30号峰)。结论决明子总蒽醌提取物各成分相互协调发挥抗5-Fu致小鼠肝损伤的保护作用,其中橙黄决明素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚是决明子总蒽醌提取物抗5-Fu致小鼠肝损伤的药效成分群。

决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用及其谱效关系研究

目的研究决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用及其谱效关系。方法将决明子分散片按高、中、低(生药量:9.26、4.63、1.54 g·kg^(-1))3个剂量给大鼠灌胃给药,连续给药7 d,末次给药10 h后,用四氯化碳橄榄油溶液(四氯化碳-橄榄油=1∶1,2 mL·kg^(-1))造模,24 h后,取出肝脏,观察外观,制作病理切片,测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)的含量。建立决明子分散片的HPLC指纹图谱,采用灰关联度法研究决明子分散片对大鼠急性肝损伤保护作用的谱效关系。结果决明子分散片能明显减轻大鼠肝脏病变,并且显著降低大鼠血清AST和ALT的含量。10批决明子分散片有63个共有峰。随着给药剂量由1.54 g·kg^(-1)增加到9.26 g·kg^(-1),决明子分散片各共有峰与AST的关联度逐渐增加,但与ALT的关联度先增加后降低。不同给药剂量关联度随共有峰的变化趋势基本一致,但29号峰(橙黄决明素)与AST的关联度先增加后降低,与ALT的关联度逐渐降低。高、中、低3个剂量的关联序不一致,AST的关联序分别为(前15个色谱峰):54>32>40>29>42>37>56>62>33>60(大黄酚)>24>27>52>36(大黄酸)>63(大黄素甲醚);29>32>40>54>42>37>56>62>33>60>24>52>27>36>63;29>54>32>40>42>37>56>62>33>60>24>27>52>36>63。ALT的关联序分别为(前15个色谱峰):32>42>40>37>54>56>62>29>33>60>24>52>27>36>63;29>54>32>40>42>37>56>62>33>60>24>27>52>36>63;29>32>54>40>42>37>56>62>33>60>24>52>27>36>63。结论决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用来自与给药剂量有关的多种活性成分之间的协同或拮抗作用。随着给药剂量的不同,发挥作用的化学成分的关联顺序并不相同,但3个剂量组发挥药效的主要成分较为一致,该成分群的存在为决明子分散片的深入研究奠定了基础。