KCNQ2基因变异相关癫痫的研究进展

KCNQ2基因编码电压门控钾离子通道亚基Kv7.2,该通道在稳定神经元、调节神经元兴奋性中发挥重要作用。KCNQ2基因变异导致电压门控钾离子通道功能受损或功能异常,从而诱发癫痫发作。KCNQ2基因变异相关癫痫患儿的发病时间早,多发病于新生儿期或婴儿早期,且临床表现具有多样性。本文对KCNQ2基因变异相关癫痫的发病机制、临床表现、变异特点及临床治疗等研究进展进行综述,以便早期发现此类癫痫患儿,指导临床诊疗工作。

ADA2基因变异与腺苷脱氨酶2缺乏症的研究进展

腺苷脱氨酶2缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传的自身炎症性疾病,是由ADA2基因纯合或复合杂合变异导致腺苷脱氨酶2活性低下或缺乏而致病。该缺乏症主要临床表现为儿童期起病的全身性炎症、血管炎、体液免疫缺陷和血液学异常等,早期诊断困难,发病机制尚不完全清楚。全身性炎症表型患者治疗首选肿瘤坏死因子α受体拮抗剂,其次为沙利度胺。造血干细胞移植主要用于严重血液学表型患者或对肿瘤坏死因子α受体拮抗剂治疗无效患者。本文对腺苷脱氨酶2缺乏症的临床特征、人口学特征、基因型以及与临床表型相关性、可能的发病机制和诊疗策略进行阐述。

血小板生成素受体激动剂在慢性ITP诊疗中的研究进展

免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是常见的出血性疾病,临床表现为皮肤和黏膜的针尖样出血点。ITP的发病率为(1.6~3.9)/10万,其发病率在60岁以上老人和1~5岁儿童中达到高峰[1]。根据患者出血的持续时间,ITP分为急性ITP和慢性ITP,慢性ITP持续时间超过12个月。

四硫化四砷STI571和除莠霉素诱导K562细胞凋亡的研究(英文)

目的 目前慢性粒细胞性白血病 (CML)的化疗效果仍不理想 ,为寻找对CML敏感的药物 ,该研究探讨四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素对CML细胞株K5 6 2的作用。方法 通过MTS方法检测三种药物在不同浓度 (0 .0 1 ,0 .1 ,1 .0 ,2 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L)下对K5 6 2细胞活力的影响。采用瑞氏染色、荧光染色和琼脂糖凝胶电泳观察药物处理后细胞形态学的变化和细胞凋亡的发生。用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 3天 ,K5 6 2细胞活力明显下降 ,其吸光值分别为 0 .32± 0 .0 4 ,0 .4 9± 0 .0 1 ,0 .6 9± 0 .0 2 ,其中四硫化四砷和STI5 71对细胞的抑制作用强于除莠霉素 (P <0 .0 1 ) ,前两者间无明显差异 (P >0 .0 5 )。 1 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞的抑制作用呈时间依赖关系 (P <0 .0 1 )。小于 1 .0μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞活力无明显影响。四硫化四砷培养 2 4至 4 8小时后 ,K5 6 2细胞出现染色质浓缩、核碎片及凋亡小体等典型的凋亡形态学改变。用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 72小时后 ,K5 6 2细胞的凋亡率分别为 6 8.8%、5 6 .7%和 35 .5 % ,2 .0与 3.0 μmol/L的四硫化四砷诱导K5 6 2细胞凋?

四硫化四砷诱导K562细胞凋亡的机制研究

为了探讨四硫化四砷(As4S4)诱导慢性粒细胞性白血病(CML)细胞株K562凋亡及机制,用台盼蓝染色和MTS方法观察四硫化四砷对K562细胞生长抑制的影响,用瑞氏染色检测药物处理后的细胞形态学变化和细胞凋亡发生,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期改变,实时定量逆转录聚合酶链反应(realtimequantitativePCR)检测BCRABL、Bcl2、BclXL、Bad和Bax等mRNA的表达,Westernblot方法检测BCRABL、Akt和pAkt蛋白的表达。结果表明:四硫化四砷能明显抑制K562细胞活力,在0.5μmol/L浓度下培养24小时,细胞生长明显受抑制且有剂量和时间依赖关系。小于0.1μmol/L的四硫化四砷对K562细胞活力无明显影响。K562细胞经与四硫化四砷培养24至48小时后,出现典型的凋亡改变。与四硫化四砷培养12小时后,1.0μmol/L条件下,K562细胞凋亡率上升,大于2.0μmol/L浓度的四硫化四砷能明显诱导细胞凋亡,四硫化四砷能使K562细胞周期阻滞于G2/M期。四硫化四砷能使K562细胞BclXL的mRNA表达下调,但对Bcl2、Bad、Bax和BCRABL等的mRNA表达无影响。四硫化四砷能使K562细胞的pAkt蛋白表达下调,而BCRABL蛋白表达无变化。结论:四硫化四砷能有效地通过诱导凋亡抑制K562细胞生长,其机制可能与抑制凋亡途径因子BclX和pAkt等表达有关。

高效液相色谱测定红细胞内硫鸟嘌呤核苷酸的探讨

目的：建立一种简便，可靠，适于一般实验室操作的检测红细胞内硫鸟嘌呤核苷酸的HPLC。方法：通过高效液相色谱仪来测定红细胞内硫鸟嘌呤核苷酸浓度。结果：高效液相色谱仪测定硫鸟嘌呤核苷酸的低限为30pmol/8×10^8RBCs，水解的时间以1h为宜，萃取有机相的pH值以12为佳，用于螯合的酸苯汞以1．3mmol/L为好，患儿的TGNs浓度在7－14天达到稳态浓度，范围为230－520pmol/8×10^8RBCs，结论：以高效液相色谱仪测定硫鸟嘌呤核苷酸可为今后6－MP化疗的个体化提供可靠的参考数据。

基因治疗应用于肿瘤的研究进展

基因治疗在基因异常性疾病的治疗中潜在作用很大 ,尤其是在肿瘤治疗中。目前 ,基因替代、基因剔除、肿瘤疫苗和反义核苷酸等方法正得到广泛的研究。虽然受到载体转染效率的影响 ,体内外研究的发展仍使许多基因治疗药物进入了I期临床试验 ,甚至是Ⅱ期和Ⅲ期临床试验 ,其中又以反义核酸类药物居多 ,并有部分基因治疗药物已经进入临床应用。

左旋门冬酰胺酶治疗儿童白血病的研究进展

左旋门冬酰胺酶(L-Asp)是急性淋巴细胞白血病(ALL)联合化疗的一线药物之一,疗效显著,但其应用过程中也存在许多急需解决的问题。本文着重对最近几年国外学者对L-Asp在儿童ALL患者中药代动力学、临床疗效和毒副作用防治的研究现状作一简要综述。

ALK^+非霍奇金淋巴瘤的研究进展

NPM—ALK融合基因的发现使非霍奇金淋巴瘤在分子生物学上有了一类明确的亚型。NPM—ALK融合基因来源于t(2;5),NPM基因位于5q35,而ALK基因位于2p23,两个基因的突变位点几乎不变。通过特异的抗体和PCR等方法可以鉴别出该亚型。近年来,研究发现了不同的ALK融合基因,而在其它疾病中也发现存在该融合基因。NPM—ALK融合基因的确切生物学功能及其作用废物尚未完全明确,通过对其机制的研究,将为该亚型的非霍奇金淋巴瘤的靶向治疗开辟新的途径。

转录因子PAX5在儿童急性白血病细胞中的表达

为了观察了解儿童急性白血病细胞中转录因子PAX5的表达特性,采用实时定量RT-PCR方法测定了6个血液肿瘤细胞株以及6例正常儿童、58例初发和4例复发急性白血病儿童(其中包括39例B-ALL,10例T-ALL和13例AML)骨髓细胞中PAX5和CD19mRNA的表达水平。结果表明:在Namalwa(B细胞系)细胞株中,PAX5和CD19mRNA相对表达量分别为2.35%和2.52%;而在T-和髓系细胞株中几乎不表达。在临床样本中B-ALL组比T-ALL组和AML组的PAX5mRNA表达高(P=0.029和P=0.013)。T-ALL组和AML组的PAX5mRNA表达水平均低于正常对照组,而T-ALL组与AML组之间的表达差异无显著意义。在B-ALL患儿中,PAX5mRNA表达的个体差异很大。此外还发现,初发治疗前组和复发组的B-ALL患儿PAX5mRNA表达高于化疗完全缓解组(P=0.011和P=0.006)。由于在CD19基因的启动子上有B细胞特异性激活蛋白的结合位点,研究发现在B-ALL中PAX5表达水平与同样用实时定量RT-PCR检测的CD19表达水平之间存在明显的相关性。结论:运用实时定量RT-PCR方法能快速准确地在B-ALL的临床标本中检测和定量PAX5基因的表达。研究中发现部分B-ALL中PAX5mRNA表达明显升高,因此它可将其作为进一步研究B-ALL发病机理的另一个切入点。

儿童1、2期神经母细胞瘤临床研究

目的：分析1、2期神经母细胞瘤（NB）的临床特征、诊疗方案及远期疗效，为进一步改进治疗方案提供循证依据。方法回顾性分析1998年6月至2010年12月初诊并接受治疗的神经母细胞瘤1、2期患儿的临床资料。结果 NB患儿237例，1期24例，2期25例，1、2期患儿占所有NB患儿的20.7%（49/237）。诊断时的中位年龄25个月（2周~9岁），男29例，女20例。31例（63.6%）患儿因体检或影像学检查意外发现肿块。原发部位以后纵隔和腹部多见，分别为21例（42.9%）、22例（44.9%）。病理类型为预后良好者40例（81.6％）。尿香草苦杏仁酸（VMA）正常者32例（91.4％）。进行检测的患儿血LDH升高均不到正常值5倍。N-MYC扩增1例。10例患儿进入低危组治疗，仅行手术治疗。39例患儿进入中危组治疗，进行了手术及化疗综合治疗。所有49例患儿治疗结束时均获得非常好的部分缓解（VGPR），中位随访时间为60个月（22~148个月），未满5年失访者9例，中位随访时间为3个月（1-32个月）。全组2年、3年、5年无事件生存率（EFS）及生存率（OS）均为100%。结论1、2期神经母细胞瘤预后良好，应进一步减少化疗强度和时间。

AML-XH-99-M_3方案治疗33例儿童急性早幼粒细胞白血病临床总结

目的评价AML-XH-99-M3方案治疗儿童急性早幼粒细胞白血病(M3)疗效。方法33例M3患儿接受AML-XH-99-M3方案治疗,应用Kaplan-Meier方法进行生存分析,评估患儿的无事生存期(EFS)、无疾病生存期(DFS)及总生存期(OS),所有数据采用SPSS13.0软件统计。结果33例患儿30例(90.9%)一个疗程达完全缓解(CR),余3例二个疗程CR,总CR率为100%,复发6例(18.2%),平均复发时间为29(16～38)个月,死亡2例(6.1%),7年EFS和DFS均为(73.4±9.4)%,总OS为(91.2±6.0)%,维持治疗中间歇加用全反式维甲酸(ATRA)和无ATRA两组EFS差异有统计学意义,分别为(88.9±10.5)%和(62.5±13.6)%(P<0.05)。结论AML-XH-99-M3方案治疗儿童M3获得了很好的CR率,具有较高的EFS、DFS和OS,维持治疗中加用ATRA可明显降低复发率、提高EFS。

高效液相色谱法测定人血红细胞内硫鸟嘌呤核苷酸浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血红细胞内硫鸟嘌呤核苷酸浓度的方法。方法:色谱柱为HypersilODS,流动相为甲醇-水(10∶90),检测波长为342nm;硫鸟嘌呤核苷酸经加热水解生成6-硫鸟嘌呤(6-TG),6-TG经提取至0.1mol/L盐酸中进样分析,以外标法定量。结果:6-TG浓度线性范围为30～1200pmol/8×108RBCs,水解时间以1h为宜,提取时pH值以11～12为宜,提取液中醋酸苯汞的量为1.3mmol/L。结论:在优化条件下,本方法测定硫鸟嘌呤核苷酸快速、准确、灵敏度高。

AML_1-ETO阳性的儿童急性髓系白血病疗效分析

目的探讨儿童急性髓系白血病m2型伴AML1-ETO阳性患儿的疗效及预后相关因素。方法2003年1月至2008年12月收住AML1-ETO阳性儿童m233例,并对患儿进行总结分析、随访。了解患儿临床特征,免疫分型,染色体核型治疗及疗效,生存情况及影响治疗的因素。结果33例AML1-ETO阳性儿童第一疗程诱导缓解率为63.5%,中位随访时间32个月,目前仍处于CR状态25例占75.5%,5例患儿骨髓复发,复发率为15.1%,高白细胞数,多脏器受累,免疫表型CD5+6以及第一疗程诱导治疗未达缓解者预后不良,并伴有较低的生存率。结论儿童急性髓系白血病M2伴有AML1-ETO阳性患儿预后是好的。强烈化疗高剂量阿糖胞苷能帮助提高疗效。提高生存率。高白细胞计数,累及多脏器以及CD56标记阳性和初次诱导治疗的缓解不佳,影响总的生存率。

儿童低中危神经母细胞瘤70例诊断和治疗分析

目的总结分析低、中危神经母细胞瘤(NB)患儿采用NB-99方案治疗的长期疗效及影响其预后的因素。方法回顾性分析1999年1月至2008年10月初诊并接受NB-99方案治疗的70例低、中危NB患儿的临床资料。结果 70例NB患儿中,低危组14例,中危组56例;获得完全缓解(CR)或非常好的部分缓解(VGPR)共67例(95.7%),部分缓解(PR)3例(4.3%)。10例复发,1例发生第二肿瘤,无化疗相关不良反应及化疗相关感染死亡病例。5年总生存率85.9%,无事件生存率81.0%。肿瘤骨髓转移、发病时年龄、分期、乳酸脱氢酶水平对预后有显著影响(P<0.05)。结论完善遗传和分子生物学检测并改进治疗前的危险分层,对进一步改进治疗方案十分重要。

儿童恶性血液病并发急性阑尾炎的处理及结果

目的探讨和总结小儿恶性血液病并发急性阑尾炎的治疗及手术时机。方法回顾分析19例小儿恶性血液病并发急性阑尾炎的临床资料,骨髓抑制、血像的特征、病情危急程度,选择治疗方法。结果19例并发阑尾炎患儿紧急手术切除7例;12例保守治疗,经积极抗生素,全身支持疗法,体温逐渐正常,腹痛缓解,腹部体症消失,B超检查恢复正常。结论小儿恶性血液病由于化疗,骨髓抑制并发阑尾炎是一个非常严重的并发症,处理不及时会造成严重后果,而手术时机的选择又非常关键,我们认为只有在紧急状况下(明显腹痛刺激症、肠梗阻等)可选择急诊手术。对那些恶性血液病伴阑尾多次发作或有包块形成者,待原发病稳定后也需作手术治疗,对于符合保守治疗条件者,一旦诊断明确,必须马上积极治疗,消除病灶。

上海市闵行区乡镇工业职业卫生服务现状调查

目的：了解乡镇企业卫生服务需求，加强劳动卫生管理。方法：对上海市乡镇工业职业卫生服务对策试点地区──闵行区的纪王、七宝两镇的乡镇企业职业卫生服务进行了调查和评价。并按国际上“小工业”企业的概念，把乡镇企业按职工人数分成小于50、50～100及＞100人三类，进行分层比较。结果：企业的规模越小，其建立健康监护档案、劳动卫生档案、卫生室及配备净化设备等方面的比例越低。两镇的三资企业其职业卫生服务方面有时还低于一般的乡镇企业，而且存在统计学上的显著差异。结论：对三资企业必须加强劳动卫生的法制化管理，督促其改善职业卫生服务现状。