阻断B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号对致敏小鼠免疫功能的影响

本研究旨在通过阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其免疫功能的变化,为应用于异基因骨髓移植的免疫耐受提供实验依据。将致敏的BALB/c小鼠分成4组:①CTLA4Ig+anti-CD154鼠源性同型对照抗体;②anti-CD154单克隆抗体+CTLA4Ig鼠源性同型对照抗体;③CTLA4Ig+anti-CD154单克隆抗体;④CTLA4Ig及anti-CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。正常BALB/c小鼠应用CTLA4Ig及antiCD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。给予每只小鼠CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体或相对应的同型对照抗体各500μg,于移植前7天尾静脉输注,每组小鼠各5只。移植当天处死各组小鼠,应用流式细胞仪检测脾细胞中CD19+CD69+B细胞数量、CD44high/CD62Lhigh及CD44high/CD62Llow/-T细胞数量。用流式细胞仪或ELISA法检测血清中抗体及细胞因子的变化。结果表明:小鼠致敏后CD19+CD69+B细胞数量与正常小鼠相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),阻断B7/CD28或/和CD40/CD154共刺激信号通路后可见抑制效应(P<0.01),两者同时阻断具有协同作用(P<0.01)。小鼠致敏后记忆性T细胞CD44high/CD62Lhigh及效应性T细胞CD44high/CD62Llow/-与正常相比亦明显增多(P<0.01)。阻断共刺激信号通路后可使其明显抑制,CTLA4 Ig和anti-CD154单克隆抗体联合应用具有协同效应(P<0.01)。各组小鼠细胞因子及IgG、IgM抗体均无明显差异(P>0.05),但血清中致敏抗体检测显示致敏后特异性抗体升高,阻断共刺激信号通路后其明显被抑制(P<0.01)。结论:阻断B7/CD28或CD40/CD154共刺激信号途径均能抑制致敏小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能;同时阻断有协同作用。

阻断共刺激信号途径对造血干细胞移植后致敏受者免疫耐受排斥的影响

本研究旨在应用CTLA4Ig及anti-CD154分别阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其对异基因造血干细胞(HSC)植入的影响,为临床应用异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗致敏受者免疫排斥提供实验基础。实验将BALB/c小鼠分为4组:①移植前7 d致敏组;②移植前7d致敏同时应用CTLA4Ig+anti-CD154组;③正常小鼠应用CTLA4Ig及anti-CD154的鼠源性对照抗体;④正常小鼠空白对照组。每组15只,于移植当天给小鼠8 Gy照射,然后将荧光标记的C57BL/6小鼠骨髓干细胞经尾静脉注射小鼠体内进行移植,于不同时间点取血或器官组织用流式细胞术检测荧光细胞归巢,同时记录生存状况,监测其造血重建水平。结果表明,与致敏鼠相比,CTLA4Ig+anti-CD154能促进异基因HSC在致敏受者体内植入,诱导免疫耐受,延长其生存期并在28 d内完成造血重建。结论:应用CTLA4Ig及anti-CD15能诱导致敏受者对异基因HSC的免疫耐受,促进其植入,并完成造血重建。

CD4^+ CD25^+调节性T细胞对致敏小鼠异基因造血干细胞移植影响

本研究旨在探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对异基因造血干细胞(HSC)在致敏小鼠植入的影响,为临床应用异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗致敏受者免疫排斥提供实验依据。BALB/c小鼠分为5组:致敏组、致敏及移植前7 d应用5×105Treg组、致敏及移植前13及7 d应用5×105Treg组、未致敏小鼠移植组(给予等体积的PBS对照)和正常小鼠空白对照组。每组动物15只。移植当天给予致死量8 Gy照射,然后将荧光标记的C57BL/6小鼠骨髓干细胞(BMSC)经尾静脉注入BALB/6小鼠内。在不同时间点取血或器官组织用流式细胞仪检测荧光细胞归巢情况,同时记录生存状况,监测造血重建水平。结果表明,移植后12及24 h,应用Treg组与致敏组相比,不同组织中荧光细胞归巢数量明显增多(P<0.05);致敏组和空白对照组小鼠均于照射后6-13 d死亡,而分别应用5×105Treg 1次及2次组小鼠中位生存期分别为15和16 d,与致敏组相比,差异均具有统计学意义(P<0.001);两Treg细胞组之间相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用Treg能诱导致敏受鼠对异基因HSC一定程度的免疫耐受,抑制免疫杀伤,延长其生存期,但未能完全诱导免疫耐受,最后致敏小鼠仍因HSC排斥而死亡。

致敏小鼠调节性T细胞对其致敏水平及免疫功能的影响

【目的】探讨致敏小鼠调节性T细胞对其致敏水平及免疫功能的影响。【方法】免疫磁珠法从致敏小鼠脾细胞中分选出CD4+CD25+Treg细胞,流式细胞术检测分选后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3基因的表达。实验分组:正常对照组、致敏对照组和输注组,输注组以不同方式向致敏小鼠体内输注CD4+CD25+Treg(5×105/只·次),流式检测在处理后的第21天检测各组血清中与供者反应性抗体结合的供者脾脏细胞百分比、CD4+CD25+Treg、记忆性T细胞和效应性T细胞的比例。ELISA法检测各组小鼠血清中Th1类细胞因子(IFN-r、IL-2)和Th2类(IL-4、IL-10)细胞因子水平。【结果】分选出CD4+CD25+Treg细胞纯度平均达到87%,细胞活性大于97%,高表达Foxp3基因。致敏对照组的CD4+CD25+Treg细胞、记忆性T细胞、效应性T细胞和血清IFN-r水平较正常对照组升高,致敏对照组的血清IL-4、IL-10水平较正常对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);输注组CD4+CD25+Treg、记忆性T细胞比例、血清IL-4、IL-10水平较致敏对照组高;输注组效应性T细胞比例、血清IFN-r水平较致敏对照组低,且差异有统计学意义(P<0.05)。输注组小鼠血清中与供者反应性抗体结合的供者脾脏细胞百分比与致敏对照组的比较,差异无统计学意义(P>0.05)【结论】成功分选出致敏后的调节性T细胞,致敏促使免疫细胞免疫记忆,Th1细胞活化增强,Th2细胞活化受到抑制。向致敏动物体内输注CD4+CD25+Treg可降低细胞免疫,诱导Th1/Th2细胞因子向Th2偏移,但供者反应性抗体水平未降低。

全不相合与全相合骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入

【目的】探讨全不相合与全相合供者骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入情况。【方法】以异基因脾细胞输注致敏的BALB/c小鼠作为移植受者,致敏模型经8 Gy 60Co照射后分别经尾静脉移植1×107 C57BL/6或BALB/c供者的骨髓细胞。予CFSE标记供者骨髓细胞,并分别在移植后不同时间点(2、12及48 h),通过病理切片及组织细胞悬液动态示踪供者细胞在致敏受者各组织的分布。移植后记录各组的生存情况,每周监测造血重建与骨髓恢复情况。【结果】归巢实验表明C57BL/6骨髓细胞在致敏受者股骨的分布随时间推移先增加而后减少,在脾脏的分布随时间推移呈进行性减少。BALB/c骨髓细胞在致敏模型股骨及脾脏的分布均随时间推移而增加。接受C57BL/6骨髓细胞的致敏模型于移植第12～15天内全部死亡,血象及骨髓象呈进行性下降;而接受BALB/c骨髓细胞的能长期存活,血象及骨髓象能迅速恢复。【结论】全不相合的供者骨髓细胞在致敏模型中完全被排斥,而全相合供者的骨髓细胞能在致敏模型中能进行有效的归巢与植入。

处于生存极限的低出生体重儿该如何决策救治

我国极低及超低出生体重儿的出生比例已接近发达国家。但因为经济、文化、技术及社会保障制度等原因,相当多的患儿得不到合理救治。这与发达国家相比有很大差距。让医护人员做到合理评估和告知,适时放弃治疗,完善社会保障制度,加强社会舆论监督和教育,加快相关制度、法规的建立等措施有望改变这一现状。

肿瘤溶解综合征在儿童恶性肿瘤的诊治进展

肿瘤溶解综合征（Tumor lysis syndrome,TLS）,血液系统恶性病中早期较常见的严重并发症,也可发生于其他恶性肿瘤,尤其在儿科,病情变化快,发展迅速,若不能及时识别及正确诊治,可引起急性肾功能衰竭甚至死亡。本文结合国内外最新研究,就其诊断、治疗及预防进行概述。

丙泊酚联合芬太尼在血液病患儿有创操作中的镇静效果

目的:评估丙泊酚联合芬太尼在血液病患儿有创操作中的应用效果及安全性。方法:将206例血液病(包括白血病、淋巴瘤、实体瘤等)患儿随机分为观察组112例和对照组94例。观察组在有创操作时给予丙泊酚联合芬太尼镇静,对照组在有创操作时给予咪达唑仑镇静,比较两组患儿镇静效果、苏醒时间及不良反应发生率。结果:观察组患儿镇静后的肢体活动和苏醒时间均少于对照组(P均<0.01),两组患儿手术前后心率、呼吸、平均动脉压及不良反应发生情况比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:应用丙泊酚联合芬太尼镇静,能有效减轻血液病患儿有创操作时的不适,具有安全性高、作用迅速、风险可控等特点,适用于儿科临床。

微信平台联合PBL及CBL在儿科临床教学的应用

目的:分析微信平台联合PBL及CBL在儿科临床教学的应用价值。方法:选择2017年6月至2019年6月来我院实习的临床本科学生100名为研究对象,将其分为2组,每组50名。对照组接受PBL教学法,实验组接受微信平台联合PBL及CBL模式,分析结果。结果:和对照组相比,实验组学生综合评分明显更高,体现在实验组的理论成绩以及临床实操成绩分数更高,P<0.05。结论:在进行儿科临床实习之中,利用当前微信平台联合开展PBL以及CBL教学方法,比传统PBL教学法取得更为满意的教学成果。其能够有效提升学生们的学习成绩,加强了临床操作能力水平,并有助于培养医学生的学习兴趣,值得进一步推广应用。

儿童慢性咳嗽90例临床分析

目的探讨儿童慢性咳嗽的病因，为临床治疗提供依据。方法对90例慢性咳嗽患儿的病因进行分析。结果90例儿童慢性咳嗽中肺炎支原体感染36例（40．00％），咳嗽变异性哮喘32例（35．56％），上气道咳嗽综合征21例（23．33％），胃食管反流性咳嗽9例（10．00％），结核感染6例（6．67％），气道异物5例（5．56％），气管、支气管软化3例（3．33％）；其中单一病因致咳嗽者67例（74．44％），双重病因致咳嗽者23例（25．56％）。结论儿童慢性咳嗽以肺炎支原体感染、咳嗽变异性哮喘、上气道咳嗽综合征为主要原因。

推拿疗法在小儿缺铁性贫血护理中的应用效果及对血液指标的影响

目的:将推拿疗法用于小儿缺铁性贫血护理中,分析其应用效果及对血液指标的影响。方法:选取2017年4月~2018年5月收治的60例小儿缺铁性贫血患儿进行研究,以数字随机表法分成研究组(n=30)与参照组(n=30),参照组行常规治疗及护理,研究组在此基础上行推拿疗法,对两组干预结果进行观察。结果:两组干预前Hb、血清铁、铁蛋白水平相比,无显著性差异(P>0.05),研究组干预后上述指标均高于参照组(P<0.05);研究组总有效率为96.67%,高于参照组的80.00%(P<0.05);研究组不良反应率为6.67%,低于参照组的26.67%(P<0.05)。结论:推拿疗法在小儿缺铁性贫血护理中应用效果理想,可巩固临床治疗效果,改善患儿Hb、血清铁等指标水平,还可减少不良反应,减轻患儿痛苦,值得应用。

小儿异基因造血干细胞移植术后并发溶血尿毒综合征1例并文献复习

目的报道1例重型地中海贫血(TM)患儿行非血缘供者造血干细胞移植(HSCT)术后并发溶血尿毒综合征(HUS)的临床特点、治疗及随访,提高对该并发症的认识。方法回顾性分析广州市妇女儿童医疗中心1例TM患儿HSCT后发生HUS的临床资料,复习国内外相关文献。结果重型TM患儿行非血缘供者外周干细胞移植术后7个月出现溶血性贫血,伴血小板减少,进而出现肾功能衰竭,予停用环孢素,应用糖皮质激素联合美罗华免疫抑制和连续性肾脏替代血液滤过等综合治疗,获得痊愈。结论应用糖皮质激素联合美罗华免疫抑制和连续性肾脏替代血液滤过等综合治疗,可以有效治疗HSCT术后并发HUS。

吲哚胺2,3二氧化酶在造血干细胞移植的研究进展

吲哚胺2,3二氧化酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)通过诱导色氨酸分解,调节树突状细胞(dendritic cells,DCs)及T细胞等途径实现造血干细胞移植(hematopoietic stemcell transplantation,HSCT)后诱导T细胞免疫耐受,防止移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的发生及提高移植物存活率。调控吲哚胺2,3二氧化酶已成为提高造血干细胞移植成功率的治疗靶点。

致敏受体排斥异基因供体骨髓细胞的实验研究

目的建立致敏动物模型，研究致敏对异基因骨髓细胞植入的影响及机制。方法将C57BL／6小鼠脾细胞经尾静脉注射到BALB／c小鼠体内建立致敏动物模型，应用二抗结合实验及补体依赖细胞毒性反应检测血清抗体。以非致敏或致敏BALB／c小鼠为受鼠，经照射预处理后予以1×10^7C57BL／6供鼠骨髓细胞。移植后于不同时间点（2、12和48h）分离受鼠外周血、脾脏及骨髓等细胞，检测供鼠细胞在致敏受鼠体内各组织的分布。移植后记录各组受鼠的生存情况，监测造血重建与骨髓恢复情况。体外分离非致敏或致敏受鼠的血清及脾细胞，与异基因骨髓细胞相孵育，通过免疫实验计算细胞毒性指数。结果二抗结合实验和补体依赖细胞毒性反应均证实致敏受鼠血清中含有高滴度的供鼠反应性抗体。骨髓移植归巢实验结果表明，与非致敏组相比，异基因骨髓细胞在致敏受鼠的外周血、脾脏及股骨的分布均明显减少。生存分析结果发现非致敏组小鼠于照射后能长期存活，而致敏组小鼠于照射后12～15d全部死亡。移植后第14天，非致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为（3240±300）×10^6/L和（396±27）×10^6／股骨，而致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为（320±80）×10^6/L和（6±2）×10^6／股骨，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。移植后第7天，供鼠细胞在非致敏组和致敏组骨髓所占的百分比分别为（48．07±4．70）％和（0．77±0．11）％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。体外通过补体依赖细胞毒性反应实验、细胞毒性淋巴细胞的杀伤作用和抗体依赖细胞介导细胞毒性作用实验表明，敛敏组受鼠的细胞毒性指数均明显高于非致敏组。结论成功建立脾细胞输注致敏的小鼠动物模型，致敏受体完全排斥异基因供体骨髓细胞，作用机制与免疫损伤途径有关。

深圳西部儿童常见病毒性肺炎的临床特征分析

目的探讨深圳西部儿童常见病毒性肺炎的临床特征。方法选取2018年1—12月在深圳市中西医结合医院儿科接受病毒性肺炎治疗的409例患儿作为研究对象,对所有患儿均进行病原体检测及常规临床指标检查,并详细记录其临床症状表现情况,比较并分析其检测结果。结果白细胞(WBC)指标正常患儿病毒感染发生率均高于WBC指标升高以及降低者,差异有统计学意义(P<0.05)。肌酸激酶同I酶MB(CKMB)升高患儿病毒感染发生率均高于血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)及谷丙转氨酶(ALT)指标升高患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。呼吸道合胞病毒感染患儿临床指标异常情况发生率显著高于其他病毒感染的患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。所有患儿中咳嗽的发生率均高于其他临床症状,差异有统计学意义(P<0.05);呼吸道合胞病毒患儿各项临床症状发生率均高于其他病毒类型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸道病毒感染是儿童肺炎发生的重要原因之一,同时A型、B型流感病毒及副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型呼吸道合胞病毒以及腺病毒肺炎患儿均具有其临床特征,从而为临床诊断及治疗提供有效的理论依据,避免抗生素滥用及乱用情况出现,利于患儿预后。

深圳西部儿童常见病毒性肺炎的流行病学研究

目的探讨深圳西部儿童常见病毒性肺炎的流行病学特征。方法选取2018年1—12月在深圳市中西医结合医院儿科接受病毒性肺炎治疗的409例患儿作为研究对象,通过对所有患儿进行样本采集及病原体检测,分析其病毒感染情况以及不同年龄段、不同季节病原体的分布情况。结果409例患儿中,呼吸道合胞病毒占比最高(55.7%),其次为副流感病毒Ⅲ型(16.8%)、腺病毒(11.9%),副流感病毒Ⅱ型占比最低(0.9%)。在婴幼儿期呼吸道合胞病毒分布情况均高于其他病毒种类,差异有统计学意义(P<0.05);学龄前患儿中腺病毒分布率均高于其他病毒种类,差异有统计学意义(P<0.05);学龄期患儿腺病毒及B型流感病毒分布情况均高于其他病毒种类,差异有统计学意义(P<0.05);所有患儿中春季发病127例占31.1%;夏季发病122例占29.8%;秋季发病81例占19.8%,冬季发病79例占19.3%。在春、夏、秋季呼吸道合胞病毒占比均高于其他病毒种类,差异有统计学意义(P<0.05);冬季呼吸道合胞病毒及腺病毒占比均高于其他病毒种类,差异有统计学意义(P<0.05)。结论病毒性肺炎在各个季节均有发生,其中春、夏季节发病率相对较高,且患儿年龄越低其发病率越高,临床医师可依据患儿发病年龄及季节分布情况对其采取应对型防治措施,促使深圳西部地区儿童病毒性肺炎的诊治率得到显著提升,节约医疗资源。

新生儿睾丸附睾炎合并阴囊脓肿1例报告

患儿,男,18 d,因反复发热半月余,阴囊肿胀6 d入院。患儿为第1胎第1产,足月顺产出生,出生体重2 270 g,出生时阿氏评分1、5、10 min均10分。出生时羊水清但过少,脐带绕颈1周。出生后第3天出现口吐泡沫、发热,当地医院诊断为＂新生儿肺炎、足月小样儿、新生儿高胆红素血症＂,予头孢他啶抗感染、光疗等治疗,病情好转出院。4 d后出现发热,体温38℃左右,

主流呼气末二氧化碳动态监测在机械通气早产儿呼吸窘迫综合征中的临床应用

目的探讨呼气末二氧化碳监测在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)临床中的应用。方法对23例气管插管机械通气的NRDS早产儿进行持续主流呼气末二氧化碳(PetCO2)监测,并同时配对检测112例次动脉血气分析,比较呼气末二氧化碳分压与动脉二氧化碳分压(PaCO2)的关系。结果112例次NRDS早产儿动脉血气分析PaCO2平均为(38.2±5.6)mmHg,对应的Pet-CO2平均为(32.4±4.9)mmHg,两者有显著相关性,相关系数r为0.68,P<0.01;肺部病变较轻者(Ⅱ级NRDS)比肺部病变较严重者(Ⅲ级、Ⅳ级NRDS)PetCO2更能准确地反应PaCO2的状况。结论无创性主流呼气末二氧化碳监测适用于气管插管机械通气的NRDS的早产儿,能较准确地反映PaCO2的水平,但对重型NRDS有局限性。

中医外治法在小儿肺炎喘嗽的临床应用

儿童支气管肺炎中医属于“肺炎喘嗽”范畴,其病因为多为风邪由皮毛或口鼻而入,犯于肺,使肺气失宣,卫阳郁遏,故初起表现发热、恶寒、咳嗽等。由于中药的特殊气味,小儿存在服药困难的特点。中医外治法其具有痛苦小,安全性好,简易方便及无明显副作用的特点易于为患儿所接受。本文现将近年来中医外治法在小儿肺炎喘嗽的应用研究进展进行综述。