贵州省贞丰县疫苗衍生脊髓灰质炎病毒循环的病毒学分析

为及时发现和阻断疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(vaccine-derived polioviruses, VDPVs)循环、脊灰野病毒的输入和能够引起临床脊灰的其它脊灰疫苗相关病毒,做好贵州省无脊灰状态下脊灰病毒学监测工作,采用病毒分离、鉴定与核苷酸序列测定和分析方法,对贵州省贞丰县及周围10个县2003～2004年报告的急性弛缓性麻痹(AFP)病例及2004年接触者粪便标本的病毒学监测的结果进行了分析. 对收集到的105例AFP病例和47例密切接触者的278份便标本进行了病毒学监测,结果从66例中共分离到肠道病毒(EV)66株,阳性率为43.4%,其中脊灰病毒(PV)29例,分离率为19.1%,非脊灰肠道病毒(NPEV)37例,分离率为24.3%.29例PV经中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室鉴定,24例为疫苗相似株,5例为脊灰Ⅰ型VDPVs,这5例均为2004年从贞丰县所分离到.贞丰县及周围县EV阳性检出率(43.4%)高于2003～2004年全省水平(22.9%～24.6%),2004年PV分离率比2003年高达2.6倍,29株PV中单个Ⅰ型占34.5%,明显高于往年(2000～2002年全省平均4.1%).本研究提示,Ⅰ型VDPVs在贞丰县引起了循环(cVDPVs),通过口服脊灰疫苗强化免疫已经阻断cVDPVs的传播.人群中PV和NPEV带毒率明显增高,非VDPVs引起的临床符合脊灰病例不容忽视;应加强脊灰病毒学监测数据的分析和早期疫情预警工作.

贵州省2000～2004年AFP病例中GBS的流行病学特征分析

目的:了解贵州省15岁以下儿童GBS的流行病学特点。方法:对2000～2004年APF病例中GBS的发病情况进行描述流行病学分析。结果:①贵州省GBS年平均发病率较高。为1.03/10万。②流行病学特点存在三高现象,即高发地区、高发季节、高发人群,病例多集中于北部遵义市和西部毕节地区(占60.4%),呈丛集性发病现象;夏、秋季为高发季节(占71.2%);7岁以下儿童为高发年龄(占64.3%),其中2～3岁组发病最多,占25.3%。③GBS残留麻痹发生率较高(43.4%),病死率也较高(8.2%)。结论:应加强对GBS高危地区、高危人群的监测和研究,提高麻痹恢复率,减少病死率。

贵州省农村地区病毒性脑炎感染现状研究

目的了解贵州省农村地区病毒性脑炎的发病现状。方法收集2007年德江、榕江2个国家级乙脑监测县报告的75例急性病毒性脑炎病例的资料,其中71例进行乙脑病毒及其它10种病毒性脑炎病毒感染的血清学、病原学和/或分子生物学检测,31例配合随访调查。结果2个县的急性病毒性脑炎发病率为9.3/10万,死亡率为6.5%,后遗症发生率为45.2%。乙脑病毒感染率50.7%(36/71),肠道病毒等乙脑以外病毒性脑炎病毒感染率26.8%(19/71)。结论贵州省农村地区病毒性脑炎的发病形势较严峻;以乙脑病毒感染为主,应加强乙脑和非乙脑病毒性脑炎的监测、控制和研究。

贵州省流行性脑脊髓膜炎实验室监测结果分析

目的:了解引起贵州省流脑暴发和流行的主要菌群、菌群分布特征、菌株耐药特性,了解健康人群流脑免疫水平状况,为流脑防控提供科学依据。方法:对报告病例采集的脑脊液和/或血液标本、健康人群咽拭子标本和血清标本进行实验室检测和结果分析。结果:1) 2006年全省共报告疑似流脑病例243例,采集123例报告病例脑脊液和/或血液(清)标本共167份。共检测出流脑阳性病例42例,其中A群病例占90.5%。2) 采集健康人群咽拭子标本共726份,分离培养出A群脑膜炎奈瑟菌(Nm)2株,B群1株,健康人群中Nm的带菌率为0.41%。3) 采集健康人群血清标本共715份,流脑A群IgG抗体阳性率62.0%,流脑C群IgG抗体阳性率43.1%。4) Nm菌株药物敏感性检测结果为,流行菌株除对磺胺类和氧氟沙星类药物耐药和部分敏感外,对其余10种常用抗生素均100%敏感。结论:1) 目前引起贵州省流脑暴发和流行的主要菌群仍然为A群Nm;健康人群中Nm以A群为主;2) 健康人群流脑免疫水平不高,小年龄组(5岁以下)抗体水平偏低,尤其是流脑C群抗体水平较低。3) 应加强我省重点地区、重点人群流脑的预防控制、疫情监测和病原学监测工作。

贵州省2001～2006年流行性脑脊髓膜炎流行特征分析

[目的]分析贵州省2001～2006年流行性脑脊髓膜炎流行趋势,为制定流脑防控策略提供科学依据。[方法]对疫情信息监测管理系统的监测资料及个案调查资料采用描述流行病学方法进行分析。[结果]2001～2006年全省累计报告1398例流脑病例,年均发病率为0.62/10万;累计死亡92人,年均死亡率为0.41/10万;年均病死率为6.58%;遵义、毕节、铜仁和安顺流脑发病数占总病例数的66.17%;病例中以学生为主(63%),其次为散居儿童(21%);10岁以下病例占51.22%;高发季节为冬春季,发病高峰是2～4月。[结论]贵州省应以实时监测、现场快速反应、适时加强信息沟通为流脑防控的主要策略,在重点地区、重点人群通过采取加强疫情监测,开展流脑疫苗的预防接种以及健康教育和宣传动员等一系列综合措施,以降低流脑发病率和死亡率。

急性弛缓性麻痹病例中Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗病毒变异株基因特征分析

研究Ⅱ型脊髓灰质炎（脊灰）疫苗变异株的基因特征，为我国使用口服脊灰减毒活疫苗／脊灰灭活疫苗使用策略，维持无脊灰状态和全球最终消灭脊灰提供科学依据。根据型内鉴定的检测结果，从2000-2001年AFP病例分离到的Ⅱ型脊灰疫苗变异株中选取有聚集性的5株病毒进行全基因组序列测定（贵州省3株、山东省2株），并进行核苷酸、氨基酸同源性分析。贵州省3株病毒全基因组序列完全一致，但与SabinⅢ型病毒发生重组，重组区域在3A区（nt5343-5353）；与疫苗株相比，Ⅱ型区域变异10个碱基，其中VP1区变异4个，与SabinⅡ型株核苷酸同源性为99．56％，氨基酸同源性99．34％；Ⅲ型区域变异9个碱基。山东省2株病毒全基因序列共享16个突变位点，没有发生重组，与SabinⅡ型株相比，VP1区分别变异7个和4个碱基，核苷酸同源性分别为99．22％和99．56％，氨基酸同源性分别为99．0％和99．67％。上述5株病毒在重要的减毒位点nt481、nt2909均发生突变。此研究中5株病毒分属于两个不同的传播链，但是共享nt481、nt2909、nt2992三个突变位点，这3个突变位点不在重组区域内，他们的共同作用可能是影响病毒传播力的重要因素，但目前尚无证据证明脊灰疫苗病毒型间重组会增加病毒的毒力及传播力。

2013年贵州省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒的鉴定分析

目的研究2013年贵州省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(nonpolio enterovirus,NPEV)的基因型别,并对分离的柯萨奇病毒A4型(coxsackievirus,CVA4)进行基因特征分析。方法 2013年贵州省共报告15岁以下AFP病例235例,采用RD细胞和L20B细胞对235例AFP病例粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV进行VP1基因序列测定分型。通过MEGA7.0软件采用邻位相接法(neighbor joining method)构建遗传进化树进行基因特征分析,可靠性通过1 000bootstrap值评估。结果 235例AFP病例中共检测到24株NPEV(10.2%),有2株无法定型,另外22株共包括12个血清型,其中人类肠道病毒(human enterovirus,HEV)A组包括4个血清型6株,其中3株为CVA4,均属于C2基因亚型;HEV-B组包括7个血清型15株,1株为HEV-C组,未分离到HEV-D组病毒。结论 2013年贵州省AFP病例病原谱包括多种型别的NPEV,其中CVA4基因特征分析表明2013年贵州地区流行的CVA4毒株为C2基因亚型。

贵州省2001-2006年急性弛缓性麻痹病例监测系统运转情况分析

目的了解贵州省急性弛缓性麻痹病例监测系统的运转情况。方法用描述流行病学方法分析2001-2006年贵州省AFP病例监测系统数据库,数据采用Excel软件进行整理分析。结果2001-2006年贵州省AFP病例监测系统共报告病例1998例,年报告发病率均大于1/10万,其中,非AFP病例242例,AFP病例1756例,未发现脊灰野病毒病例,2003-2006年全省AFP病例双份合格便标本采集率连续4年低于80%,2001-2006年中国免疫规划信息系统报告贵州省OPV基础免疫应种儿童3125808例,实际接种30792169例,报告接种率98.51%。结论贵州省已连续12年未发现本土脊灰野病毒引起的麻痹病例,继续保持无脊灰状态。贵州省维持无脊灰状态的AFP病例监测与脊髓灰质炎疫苗免疫工作亟待加强,尤其应对位于贵州省西部的毕节、黔西南和六盘水地区给予重点关注。

贵州省农村地区健康人群风疹抗体水平调查

风疹是由风疹病毒引起的一种常见急性传染病,以发热、全身皮疹为特征,人类普遍易感,常见于4～10岁儿童,一般感染后临床症状较轻,并发症少,但如果妊娠早期感染风疹病毒,则容易引起流产,死胎或婴儿出生后出现以多器官严重损伤为主要表现的先天性风疹综合征（congenital rubella syn-drome,CRS）,给患儿及其家庭和社会造成沉重的负担，因此CRS是风疹病毒引起的最严重的危害。

2012年贵州省风疹病毒分离株的基因特征分析

目的对2012年贵州省流行的风疹病毒进行鉴定，确定其基因型，并进行基因特征分析。方法采集2012年贵州省风疹爆发和散发疑似病例咽拭子标本，使用Vero／SLAM细胞进行病毒分离。经RT-PCR方法鉴定为阳性的风疹病毒分离株，使用RT—PCR方法扩增风疹病毒E1基因944个核苷酸片段，并对扩增产物进行序列测定和分析，与wHO13个基因型的32个参考风疹病毒株的序列基于1E基因的739个核苷酸片段构建基因亲缘性关系树。结果贵州省首次成功分离到5株风疹病毒株，基因亲缘性关系树显示，该5株风疹病毒分离株均属1E基因型。5株风疹病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为99．8％～100．0％和100．0％；与WHO1E基因型参考株中国株（T14-CH-02）核苷酸和氨基酸同源性分别为98．7％～98．9％和100．0％；与WHO1E基因型参考株马来西亚株（M1-MAL-01）核苷酸和氨基酸同源性分别为97．5％～97．6％和99．5％。结论2012年贵州省分离的风疹病毒是1E基因型，与目前我国其他省份流行的风疹病毒基因型-致。本研究为贵州省积累了风疹病毒分子流行病学基线数据。

贵州省麻疹野病毒分离株分子流行特征

目的:了解贵州省2008-2011年麻疹病毒(Measles Virus,MeV)分子流行病学特征,为控制和消除麻疹提供实验室依据。方法:将2008-2011年采集麻疹疑似病例的咽拭子或尿液共56份接种于Vero/SLAM(Signaling Lymphocyte Activation Molecule)细胞,培养获得8株阳性分离物,提取其病毒RNA,用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)对麻疹病毒N基因羧基末端676个核苷酸片段进行扩增,对扩增产物进行序列测定和分析。结果:分离的8株MeV均为H1基因型中的H1a基因亚型,麻疹病毒分离株之间的核苷酸相似性为97.8%～100%,氨基酸相似性为96.0%～100%,与WHO H1基因型参考株Hunan.China93-7的核苷酸和氨基酸差异分别在2.0%～2.7%和2.0%～5.3%。结论:H1a基因亚型是贵州省近年来麻疹流行的优势基因型,未发现其他基因型。

加味茵陈蒿汤防治母儿ABO血型不合溶血病的疗效观察

目的观察加味茵陈蒿汤防治母儿ABO血型不合溶血病临床效果,探讨其防治机制,为中药辨证运用防治孕产期相关疾病提供依据。方法按1:2随机将社区孕妇保健门诊筛选出来的可能发生母儿ABO血型不合溶血病的高危孕妇分为对照组及服药组,再对服药组进行辨证方药加味茵陈蒿汤中药干预,最后分析比较所有观察对象孕期IgG抗体效价变化情况、孕期合并症出现情况和婴儿出生发生溶血症情况。结果孕妇抗A或抗B IgG抗体效价下降为正常值的比率服药组(82.0%)明显高于对照组(46.9%)。孕期合并症如妊娠时限异常、胎儿宫内发育迟缓及胎儿窘迫等发生率服药组(8.0%)明显低于对照组的(34.7%)。婴儿溶血症及黄疸的发生率服药组(6.0%)明显低于对照组(18.4%);服药组自然分娩率(64.0%)亦高于对照组(51.0%)。结论服用中药组孕妇抗A或抗BIgG抗体效价维持在低水平,孕期合并症和婴儿溶血症的发生率明显降低,自然分娩几率上升。通过孕期抗A或抗BIgG抗体监测及中药干预治疗,可有效地防治ABO不合溶血病的发生,大大提高了孕产期保健质量,值得推广运用。

贵州省2004年疾病监测区人群早死病因分析

[目的]探讨贵州省疾病监测区人群主要死因,为制定疾病预防和控制对策提供依据。[方法]分析2004年死亡监测资料,计算潜在期望寿命损失年数EYPLL。[结果]人群EYPLLx为1377.42d,导致EYPLL损失最严重的前3位死因依次为伤害、心血管疾病、肿瘤;农村高于城市,男性高于女性。25岁以前,伤害是首位死因;25岁以后心血管疾病是首位死因。[结论]伤害、心血管疾病、肿瘤应是今后贵州省预防和控制的重点;针对不同地区,不同年龄的人群,预防控制措施的重点应各不相同。

贵州省流脑监测县健康人脑膜炎奈瑟菌抗体监测结果分析

流行性脑脊髓膜炎（流脑）是由脑膜炎奈瑟菌（Nm）引起的急性呼吸道传染病，发病年龄以〈15岁的儿童为主。流行菌株以A群为主，C群次之。为了解贵州省健康人群Nm抗体水平，2007年10月在毕节、遵义、紫云等县（市，下称县）采集8个年龄组765份血清标本，进行A群和C群的Nm抗体测定，现将检测结果报告如下。

贵州省2004年急性传染病暴发疫情分析

目的分析贵州省2004急性传染病暴发疫情的流行病学特征,找出流行规律,为防治决策提供科学依据。方法将贵州省2004年发生的341起急性传染病暴发资料进行综合分析。结果(1)学校内暴发疫情最多,罹患对象为学生。(2)传染病暴发病种以呼吸道、肠道传染病较多。结论应该把加强学校的卫生管理作为有效控制疫情的主要措施。

2008年贵州省麻疹疫苗后续强化免疫血清学效果监测

目的了解贵州省2008年麻疹疫苗后续强化免疫活动血清学效果,为控制麻疹提供科学依据。方法分别于强化免疫前后1月在12个县(市)采集8月龄～6岁健康儿童血清标本,采用酶联免疫吸附试验检测麻疹IgG抗体。结果强化免疫前共检测550名儿童血标本,麻疹抗体阳性率89.27%,几何平均滴度为1:1059.60;强化免疫后共检测549名儿童血标本,麻疹抗体阳性率97.81%,几何平均滴度为1:2399.56。强化免疫前后儿童麻疹抗体水平差异有显著的统计学意义(t=10.81,P<0.001)。结论此次麻疹疫苗后续强化免疫效果明显;全省儿童麻疹抗体水平显著提高。

贵州省2006-2010年脊髓灰质炎实验室监测与评价

目的分析贵州省脊髓灰质炎(脊灰)实验室监测数据,评估运转情况,为贵州省继续维持无脊灰状态提供实验室数据。方法采用病毒分离、鉴定与核苷酸序列分析的方法,对贵州省2006-2010年报告的急性弛缓性麻痹(AFP)病例、接触者及其他人群粪便标本进行病毒学检测和结果分析。结果 2006-2010年贵州省脊灰实验室共收到2 204份AFP病例粪便标本,332份AFP病例接触者粪便标本,310份其他人群粪便标本。从AFP病例中分离到非脊灰其他肠道病毒(NPEV)209株,脊灰病毒(PV)54株;从AFP病例接触者中分离到NPEV33株,PV6株;其他人群中分离到NPEV27株,PV9株。所有PV阳性分离物均送到国家脊灰实验室进行型内鉴定,全部为疫苗相关株。贵州省脊灰实验室每次均通过WHO和国家脊灰实验室的能力验证和现场认证评估。结论 2006-2010年贵州省脊灰实验室监测系统运转正常,未发现脊灰野病毒(WPV)或疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)。贵州省继续保持无脊灰状态。

聚合酶链反应在流行性脑脊髓膜炎检测中的应用

目的应用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术对脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides)进行检测。方法应用脑膜炎奈瑟菌的的特异性DNA引物片断,对传统经典方法确诊的流脑病例阳性标本进行检测。结果 13例阳性流脑标本采用PCR方法检测与传统经典方法检测的结果一致;并且操作简便、快速、准确率高。结论为流脑的早期、快速诊断提供了一种技术手段。

2010-2015年黔南布依族苗族自治州流行性乙型脑炎实验室监测结果分析

目的了解黔南布依族苗族自治州乙脑监测情况,为乙脑防控提供依据。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测2010-2015年黔南州疑似乙脑病例标本,并对乙脑实验室监测资料进行分析。结果 2010-2015年黔南州共报告疑似乙脑病例154例,采集标本131例,采集率为85.1%;血清/脑脊液采集率为45.8%,恢复期血清采集率为33.6%。疑似病例均为﹤15岁儿童。乙脑Ig M抗体阳性50例,阳性率为38.2%,阳性病例都集中在2~6岁、6~10岁两个年龄段,男性阳性率40.4%（36/89）,女性阳性率33.3%（14/42）。发病后4~10天采集标本82例,采集率为62.6%,阳性42例,阳性率为51.2%。省级乙脑实验室对黔南州实验室开展盲样考核和标本复核工作,符合率为100%和93.9%。结论乙脑疑似病例发病后4~10天采集的标本阳性检出率高,为最佳的标本采集时间。